2004年 · 第42卷第09期

目的 观察不同剂量氢化可的松(HC)对大肠杆菌致早期休克大鼠肺损伤和炎症反应的影响，并探讨其原因。 方法 间隔5 h分2次注射灭活大肠杆菌，先腹腔注射650亿/kg(6.50×1010 cfu/kg)，后静脉注射2000亿/kg(2.00×1011cfu/kg)建立早期休克Wistar大鼠肺损伤模型。40只模型鼠随机分为5组：正常对照组、肺损伤组、大剂量HC组(150 mg/kg)、中剂量HC组(20 mg/kg)、小剂量HC组(6 mg/kg)，每组8只。给药后2 h收集标本，观察肺组织病理形态和肺损伤生物学标志(肺湿干比、肺泡灌洗液蛋白水平和肺泡通透指数)，并采用免疫组化方法观察肺内细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、糖皮质激素受体(GR)的表达。 结果 肺损伤生物学标志、光镜肺组织病理评分及肺内ICAM-1表达等指标，肺损伤组均显著高于正常对照组(P<0.05)。使用HC干预后，各剂量组较肺损伤组明显降低(P<0.05)，以小剂量组下降最明显(P<0.05)。中剂量组上述指标虽较大剂量组降低，但两组间差异无显著意义(P>0.05)；肺内GR表达，肺损伤组显著低于正常对照组(P<0.05)，使用HC干预后，各剂量组肺内GR表达均较肺损伤组升高，但仅小剂量组差异达显著性(P<0.05)。大、中剂量组间差异无显著性意义(P>0.05)。指标间相关性分析提示，GR与ICAM-1表达存在明显直线负相关关系(r＝0.55, P<0.0001)。 结论 不同剂量HC干预早期休克大鼠急性肺损伤效果比较显示，在控制炎症反应、肺损伤生物学标志和组织病理改变等方面，均以小剂量HC最佳，未发现剂量依赖效应。不同剂量HC干预效果差异的原因可能与GR表达水平有关。

目的 制备新生大鼠肺损伤模型，探讨PECAM-1(血小板内皮细胞粘附因子)和t-PA(组织型纤溶酶原激活因子), PAI-1(纤溶酶原激活物抑制因子)mRNA在新生大鼠肺损伤中的作用。 方法 腹腔注射LPS致新生大鼠肺损伤，观察不同时间点肺组织大体，光镜和电镜的病理改变，应用免疫组化和RT-PCR的方法分别检测肺组织PECAM-1蛋白及mRNA和t-PA, PAI-1 mRNA的表达改变。 结果 病理改变证实了新生大鼠肺出血的发生，注射LPS后，PECAM-1蛋白及mRNA表达逐渐下降，8 h和16 h分别达最低值(分别为95.1±9.76，0.861±0.016)，与正常对照组(分别为129.5±6.15，1.192±0.035)相比，差异有显著意义(P<0.01)。LPS作用后，t-PA, PAI-1 mRNA在肺组织的表达呈逐渐上升趋势，t-PA mRNA表达高峰为给药后2 h(1.195±0.036)，与对照组(0.781±0.017)比较，差异显著意义(P<0.01)。PAI-1 mRNA表达高峰为给药后2~8 h(分别为1.178±0.069，1.153±0.036，1.176±0.044)，与对照组(0.681±0.019)比较，差异显著意义(P<0.01)。 结论 LPS作用于新生大鼠后，肺组织PECAM-I蛋白及mRNA表达显著降低，保护性机制破坏；t-PA和PAI-1 mRNA表达增加，随着大鼠病情加重，平衡状态遭到破坏，局部肺组织处于高凝状态，从而促进了肺出血的发生。

目的 了解可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)、降钙素原(PCT)在新生儿败血症诊断中的价值。 方法 通过检测50例败血症的新生儿及35例健康新生儿血sICAM-1、PCT、CRP浓度及WBC计数，比较各炎症指标对诊断败血症的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和准确性、约登指数，评价它们对诊断该病的价值。 结果 (1)以sICAM-1≥300 ng/ml、CRP≥8 mg/l、PCT≥2 ng/ml为阳性标准，三指标对诊断败血症的灵敏度分别为85%、87.5%、86%，P>0.05，差异无显著意义，但均高于WBC计数(仅30%, P<0.05)，其中PCT的特异度94.3%、阳性预测值95.6%、阴性预测值82.5%、准确性89.4%、约登指数80.3%；(2)sICAM-1浓度在治疗前后差异无显著意义，P>0.05；CRP浓度在两组差异有显著意义，P<0.05; PCT在恢复期全部转阴；(3)sICAM-1与CRP呈正相关，r＝0.339，P<0.01；PCT与sICAM-1、CRP浓度的等级相关系数分别为0.569、0.482(P<0.01)。 结论 sICAM-1≥300 ng/ml对于诊断新生儿败血症是一个具有较高灵敏度(85%)、中度特异度(54.3%)的指标；所有检测指标中PCT特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确性、约登指数最高。

目的 观察氢化可的松(6 mg/kg)对内毒素致急性肺损伤(ALI)大鼠多形核白细胞(PMN)释放氧自由基(OFR)及肺部病理改变的影响，探讨激素在ALI中发挥作用的可能机制。 方法 复制大鼠ALI模型，随机分为空白组、内毒素组(LPS组)、氢化可的松组(HC组)，空白组于注药后6 h、LPS组和HC组分别于注药后2、4、6 h抽血检测OFR释放，同时比较各组间肺组织病理改变。 结果 (1)LPS组大鼠肺病理符合ALI表现。(2)OFR释放3组比较有差异显著意义(P<0.01)，LPS组较空白组明显增强(P<0.05)，并在观察时间内(2~6 h)不断升高。HC组在各时点较LPS组均明显降低(P<0.05)，在4 h抑制作用最明显，达98.2%。(3)肺病理半定量评分，3组间差异有显著意义(P<0.01)。与空白组相比，LPS组与HC组评分均显著升高(P<0.05)。而与LPS组相比，HC组病理评分显著降低(P<0.05)。 结论 在LPS诱导ALI大鼠模型中，OFR大量释放在ALI发病中起了重要作用，6 mg/kgHC可使肺损伤改善，同时对OFR释放可产生明显、持续的抑制，提示HC对ALI起保护作用，机制可能是通过抑制PMN释放OFR而实现。

目的 探讨新生儿败血症的快速诊断方法。 方法 (1)以16SrRNA基因为靶序列，设计引物及寡核苷酸探针；将探针固定在特制的玻片上制作成基因芯片；(2)对临床疑为细菌感染的285例新生儿抽取静脉血分别做血培养和细菌16SrRNA基因检测：于血标本及脑脊液中抽提DNA后采用聚合酶链反应(PCR)扩增，将扩增产物加样在基因芯片上杂交后进行激光扫描及读片。 结果 (1) PCR检测阳性率5.96%(17/285)明显高于血培养的2.81%(8/285)，差异有显著意义(P<0.01)。若以确诊败血症作为对照，PCR的诊断敏感性为100%，特异性为96.75%，正确诊断指数为0.968。(2)对17份PCR阳性标本进一步做基因芯片杂交，结果通用探针均阳性，其中G＋探针阳性12份、G-探针阳性5份；8份PCR和血培养均阳性的标本，基因芯片杂交探针阳性菌株与血培养细菌阳性结果完全一致。 结论 基因芯片杂交技术检测临床标本中16SrRNA基因能快速诊断新生儿败血症，除较血培养等方法有更好的敏感性和特异性外，还能快速明确系何种病原菌感染，因此有较大的推广及应用价值。

目的 探讨PCR结合寡核苷酸阵列杂交快速诊断常见新生儿感染病原细菌方法。 方法 通过对40多种常见病原菌的16SrDNA序列比较分析，在中间找到一段两端高度保守中间相对变异的序列。依据其保守序列设计一对通用引物，用于扩增细菌16SrDNA目的基因。同时依据相对变异区域的序列设计常见的8种病原细菌的探针，阵列于带正电的尼龙膜上，与通用引物的PCR产物杂交，在一个反应体系中1次可检测出标本中可能存在的常见致病菌。 结果 设计的通用引物能有效扩增出常见的细菌目的序列。实验结果表明寡核苷酸阵列均能特异地与其检测细菌的通用引物PCR产物杂交，而不与其它所试细菌通用引物PCR产物杂交，说明探针具有很强的特异性。进一步采用寡核苷酸阵列对临床分离的菌株进行鉴定，以细菌自动鉴定仪做对比，结果表明寡核苷酸阵列能检出常见的8种病原菌。 结论 PCR结合寡核苷酸阵列杂交是快速诊断常见新生儿感染病原菌有效方法。

目的 探讨直肠肛管测压检查在新生儿先天性巨结肠(HD)早期诊断中的应用价值。 方法 对42例经手术病理或直肠粘膜活检确诊的新生儿HD患儿的术前直肠肛管压力监测结果进行评价分析，并与X线钡灌肠进行比较。 结果 直肠肛管测压18例未出现直肠肛管抑制反射(RAIR)，12例RAIR反射异常，确诊HD30例，诊断符合率71.43%。X线钡灌肠确诊HD 5例，可疑HD14例，诊断符合率45.24%。直肠肛管测压阳性而钡灌肠阴性者16例，钡灌肠阳性而直肠肛管测压阴性者5例。检查结果的不同部分进行统计学处理χm2＝4.76，P <0.05，差异有显著意义。 结论 直肠肛管压力监测在新生儿HD诊断中优于X线钡灌肠。该检查方法简单、安全、有效、无创伤性，可作为新生儿期怀疑HD患儿的首选检查，但必须结合其他检查手段才能作出确切诊断。

目的 研究甲氧基聚乙二醇(mPEG)修饰移植物对小鼠H-2半相合骨髓移植(BMT)的影响。 方法 以雄性BALB/c小鼠为供鼠；雌性CB6 F1代小鼠为受鼠，随机分为修饰移植、单纯移植和照射对照三组，每组各为20只小鼠。三组鼠在致死量60Co γ射线全身照射后，分别由尾静脉注入经mPEG修饰或未修饰的供鼠骨髓细胞和脾细胞，观察各组存活率、急性移植物抗宿主病(aGVHD)的表现、造血恢复情况及存活小鼠的染色体核型。 结果 修饰移植组30天存活率为75%，较单纯移植组(40%)增高(χ2＝5.01，P＝0.025)，而照射对照组2周死亡率为100%。修饰移植组血象恢复快于单纯移植组(P<0.05)。取死亡小鼠的爪垫皮肤、肝及小肠肠管作病理组织学检查，修饰组aGVHD病理表现减轻，Thomas病理分级轻于单纯移植组。移植后75天对存活的受鼠进行染色体C带显色法检测嵌合体，证实为完全供者型植入。 结论 mPEG修饰移植物可明显减轻aGVHD，提高小鼠半相合骨髓移植的存活率。

目的 探讨P选择素(P-selectin, PS)、E选择素(E-selectin, ES)在小儿川崎病血管损伤中的作用机制，寻找其与冠状动脉(简称冠脉)损伤之间直接关系的依据。 方法 应用酶联免疫吸附实验(ELISA)双抗体夹心法、放免法检测36例川崎病(KD)患儿、20例发热疾病患儿、30例健康对照组儿童的PS、ES、血栓素(TXB2)、6酮前列腺素F1α(6-KPGF1α)，并将KD患儿分为急性期、亚急性期、恢复期；有冠脉损伤(CAL)组与无冠脉损伤(NCAL)组，根据初始应用静脉丙种球蛋白(IVIG)48小时是否热退分为IVIG有效组与IVIG无效组。 结果 KD患儿组的PS、ES急性期[ (211±28、186±14)ng/ml ]、亚急性期[(238±27、151±13)ng/ml]和恢复期[(198±21、100±9) ng/ml]均高于健康对照组[(102±36、72±10)ng/ml]，差异有显著性(P<0.01)；治疗后PS仍维持较高水平，但IVIG有效组PS、ES下降与急性期相比差异有显著性(P<0.01)；CAL组PS、ES[(281±78、210±52)ng/ml]水平明显高于NCAL组[(217±15、108±10)ng/ml，P<0.01 ]，IVIG有效组PS、ES水平治疗后2周比治疗后1周降低，差异有显著性(P<0.01)，IVIG无效组PS水平治疗后2周仍高于治疗后1周，但差异无显著性(P>0.05)；治疗后1周IVIG无效组与IVIG有效组PS水平未降低，差异无显著性(P>0.05)；治疗后2周IVIG无效组PS、ES水平仍显著高于IVIG有效组(P<0.01)，差异有显著性，PS的高峰期在亚急性期。KD患儿急性期TXB2水平显著升高，与健康对照组相比差异有显著性(P<0.01)，亚急性期与正常组、CAL与NCAL组间差异无显著性(P>0.05)，治疗后TXB2水平迅速降低；6-KPGF1α急性期、亚急性期、恢复期水平显著低于健康对照组(P<0.01)；治疗后2周仍未达正常水平，CAL与NCAL组间差异无显著性(P>0.05)；发热疾病组急性期PS、ES水平与健康对照组相比差异无显著性(P>0.05)；KD组患儿ES与CRP水平差异有极显著性(r＝0.79 ，P<0.01)，发热疾病组ES与CRP水平差异无显著性，KD组患儿PS与血小板计数(PLT)水平差异有极显著性(r＝0.75 ，P<0.01)，发热疾病组PS与PTL差异无显著性。 结论 PS、ES水平在KD患儿组急性期和亚急性期升高可能在川崎病患儿血管损伤的病理生理发生机制中起重要作用，PS、ES具有预示KD患儿CAL潜在的可能性。

目的 探讨血红蛋白H(HbH)病患儿的基因型在预测该病临床表现中的价值以及影响该病进程的因素。 方法 采用已建立的技术和方法检测43例珠海市户籍HbH病患儿的基因型，测定其所有的血液学指标并详细记录其临床资料，分析其基因型与临床表现的关系。 结果 43例HbH病患儿中，检出6种α-地中海贫血基因并相互组合产生5种HbH病基因型，其中-α3.7/--SEA(26例，60%)、-α4.2/--SEA(8例，19%)和αCSα/--SEA(5例，12%)是该地区人群中3种主要的HbH病分子缺陷类型。与-α3.7/--SEA相比，非缺失型(αTα/--SEA)HbH病患儿的红细胞计数(RBC)、血红蛋白(Hb)、红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)和血红蛋白A2(HbA2)值偏低(P<0.05、0.01、0.01和0.01)，而红细胞平均体积(MCV)和HbH水平则偏高(P<0.01)，且有较严重的临床表现。而与-α4.2/--SEA组相比，αTα/--SEA无论在血液学指标上，还是临床表现上的差异均不及与-α3.7/--SEA组比较为显著。并发现HbH水平与红细胞计数呈负相关(r＝-0.39，P<0.001)。 结论 HbH病患儿的临床表现主要与α-珠蛋白的基因型有关，αTα/--SEA型HbH病患儿有更严重的临床和血液学表现，-α4.2/--SEA次之，-α3.7/--SEA居末。但临床表现的严重性又不能简单归咎于α-珠蛋白缺乏的程度。HbH水平是决定HbH病病情轻重的重要因素。

目的 探讨头孢地尼对小儿呼吸道常见致病菌的体外抗菌活性。 方法 E-test法测定头孢地尼对肺炎链球菌等7种细菌共380株的最低抑菌浓度(MIC)，并与头孢克洛作对比研究。 结果 青霉素敏感肺炎链球菌(PSSP)对头孢地尼和头孢克洛均敏感，青霉素耐药肺炎链球菌(PRSP)均耐药，青霉素中介肺炎链球菌(PISP)对头孢地尼敏感率72.0%，头孢克洛为58.0%。不产β内酰胺酶的流感嗜血杆菌(HI)对两者均敏感，但对产β内酰胺酶HI，头孢地尼敏感率85.0%、头孢克洛70.0%，MIC90值头孢地尼(1.5 mg/L)明显低于头孢克洛( 256.0 mg/L)。卡他莫拉菌(MC)、A组链球菌(GAS)和甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(MSSA)，以及不产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌(E.coli)、肺炎克雷伯菌(K.pn)，对头孢地尼抗菌活性均优于头孢克洛。对产ESBLs的菌株，两者均无抗菌活性。 结论 头孢地尼对PSSP、PISP、HI、GAS、MC、MSSA以及ESBLs(-)K.pn和E.coli均有强大的体外抗菌活性。

目的 研究EB病毒(EBV)感染儿童传染性单核细胞增多症(IM)急性期B淋巴细胞及其活化状况，以及与临床的关系。 方法 用流式细胞术测定22例IM急性期、恢复期外周血单个核细胞膜CD19、CD23＋/CD19＋表达，配对比较并与21例相同年龄健康儿童组成的对照组比较。同时记录患儿的发热时间。 结果 (1)IM急性期CD19[(5.63±2.91)%，(387±178)/mm3]CD19＋/CD23＋[(2.45±1.87)%，(160±99)/mm3]恢复期CD19[(12.49±5.70)%，(428±156)/mm3]CD19＋/CD23＋[(5.05±2.79)%，(172±78)/mm3]，均较对照组CD19[(16.20±2.80)%，(545±150)/mm3]CD19＋/CD23＋[(7.08±2.78)%，(249±136)/mm3]低(P<0.01或0.05)。病程越早，下降越明显。(2)IM急性期与恢复期的CD19、CD23＋/CD19＋表达均成正相关(P<0.01)；急性期和恢复期CD19与CD23＋/CD19＋表达均成正相关(P<0.01)。(3)发热时间与CD23、CD23＋/CD19＋表达成负相关(P<0.01)。 结论 (1)在IM急性期，B淋巴细胞及其活化受到明显抑制，随着病情恢复而减轻；累及越显著、恢复越慢，同时症状越重。(2)CD19、CD23＋/CD19＋表达水平对于儿童IM的诊断及严重程度的预测有一定的价值。

目的 探讨非言语型学习障碍(NLD)儿童选择注意功能相关的大脑额叶注意调控、工作记忆、注意维持等神经心理功能特点。 方法 采用听觉辨别实验(ADT)、威斯康星卡片分类测验(WCST)及中国修订版韦氏学龄儿童智力量表(C-WISC)对14例NLD儿童和23名正常儿童进行测试，并对C-WISC各类分测验成绩进行了因子分析。 结果 NLD组儿童ADT测试中的正确反应率明显低于对照组(P<0.01)，错误反应数多于对照组(P<0.01)；在WCST测试中其2次的分类完成数(CA)和持续性错误次数(PE)成绩均显著低于对照组(P<0.05)；因子分析表明，与视觉空间功能相关的知觉组织因子和与注意维持功能相关的不分心因子明显低于对照组(P<0.01，P<0.05)。 结论 NLD儿童存在额叶为主的注意调控功能和工作记忆障碍，推测以右侧额叶功能障碍为著。

目的 探讨菌群失调对小鼠免疫和造血功能的影响。 方法 BALB/C小鼠60只，分为实验组和对照组，每组各30只，实验组每天卡那霉素50 mg插管灌胃，对照组每天蒸馏水灌胃，连续10 d，所有小鼠均于灌胃后10 d处死，取盲肠内容物，做肠道正常菌群定量分析，同时进行免疫和造血功能指标的测定。 结果 (1)实验组小鼠肠道内肠杆菌、肠球菌、双歧杆菌和乳杆菌数量明显低于对照组(P<0.01)。(2)实验组小鼠溶血空斑数、巨噬细胞吞噬率、酯酶染色阳性的T淋巴细胞数量及血清白细胞介素2(IL-2)含量均较对照组少(P<0.01)；脾脏重量较对照组轻(P<0.01)。(3)实验组血清白细胞介素3(IL-3)、粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)含量、外周血白细胞总数和中性粒细胞比例，较对照组低(P<0.01)。(4)肠道双歧杆菌数量与溶血空斑数、巨噬细胞吞噬率、酯酶染色阳性的T淋巴细胞数、IL-2含量呈正相关(P<0.01)；与血清中IL-3、GM-CSF含量呈正相关(P<0.01)。IL-2与IL-3、GM-CSF呈正相关(P<0.01)。 结论 肠道菌群失调可以降低机体体液免疫、细胞免疫以及非特异性免疫功能，可以降低机体造血功能；菌群失调、免疫功能下降、造血功能减低，三者之间相互影响、相互促进、相互制约，故应重视微生态平衡减少菌群失调对机体产生的不良影响。