2005年 · 第43卷第11期

目前,由于供肝来源的严重短缺,活体供肝肝移植(living donor liver transplantation, LDLT)已逐渐成为一个可以接受的替代方法.资料显示,自1991年以来,等待供肝准备行肝移植的患者数量增加了10倍,而同期施行的肝移植手术仅增加0.5倍[1]。

目的 探讨外科住院患者营养状况与手术后并发症发生率及死亡率的关系.方法采用多项营养评价指标测定4012例普外科非急诊住院患者营养状况,分析患者营养状况与死亡率、并发症关系.结果各项营养指标检测的营养不良发生率分别是:体重指数21.3%,三头肌皮褶厚度50.6%,上臂围20.5%,上臂肌围21.2%,主观全面评价法38.0%,微型营养评价法20.8%,ALB 24.2%,PA 35.4%,TLC 55.8%.＞60岁组老年患者、消化道疾病患者及恶性肿瘤患者营养不良发生率分别高于≤60岁、消化道外疾病及良性疾病患者,差异具有统计学意义(P<0.05).营养不良患者的并发症发生率及死亡率均明显高于营养状况良好者(P<0.01),而且住院时间明显延长(P<0.05).结论营养不良患者的手术后死亡率、并发症发生率和住院时间均高于营养状况良好者。

目的 探讨氨基酸溶液和重组人生长激素(rhGH)对肝硬化大鼠生长激素(GH)-胰岛素样生长因子1(IGF-1)轴的影响.方法肝硬化大鼠随机分为术前组、肝部分切除后1 d组、术后肠外营养用复方氨基酸注射液(Novamin)5 d组、用10%复方氨基酸注射液(Hepa) 5 d组、用rhGH+Hepa 5 d组,各组均为6只大鼠,对照组为正常大鼠.分别测大鼠肝功能、血糖及血清GH、IGF-1、胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)水平,用逆转录聚合酶链反应检测肝白蛋白(ALB) mRNA、IGF-1 mRNA、IGFBP-3 mRNA的表达,肝组织行Ki67免疫组化染色.结果用Hepa的肠外营养组5 d后与用Novamin组比较,GH水平明显降低,肝ALB mRNA、IGF-1 mRNA、IGFBP-3 mRNA表达水平明显升高,肝Ki67指数无差别;而rhGH+Hepa组肠外营养5 d后比Hepa组血糖、GH、IGF-1、IGFBP-3水平明显升高,肝ALB mRNA、IGF-1 mRNA表达水平及肝Ki67指数也明显升高. 结论氨基酸溶液和重组人生长激素均可影响肝硬化大鼠生长激素-胰岛素样生长因子1轴,检测血清IGF-1、IGFBP-3水平有助于营养素的选择和评估。

目的 研究国际抗癌联盟(UICC)和美国癌症联合会(AJCC)对胃癌TNM分期系统中准确分期的最少检出淋巴结数目.方法回顾性收集436例行胃癌根治术的患者淋巴结数目、生存率等临床和病理资料,通过卡方检验和q检验方法对其进行分析.结果在pN0病例中,送检淋巴结1～4个,5～9个的病例,比10～14个和15个以上的5年生存率低且差异具有统计学意义(P<0.05).10～14个检出淋巴结的病例与15个以上的5年生存率差别无统计学意义.在pN1,pN2患者,送检1～4个,5～9个和10～14个淋巴结者与15个以上者的生存率差别具有统计学意义(P<0.05).Ⅱ期中检出10～19个淋巴结的患者,其5年生存率明显低于20～29个及30个以上的患者,在Ⅲ期中,检出5～9,10～19,20～29个淋巴结者生存率显著低于30个以上的生存率(P<0.05).结论淋巴结检出数目在胃癌pN分期中显著影响预后.pN0的最少检出数目应由原来的15个减至10个.而有淋巴结转移的病例至少应送检15个以上淋巴结.Ⅱ期病例最好检出20个淋巴结,而Ⅲ、Ⅳ期最好检出30个以上淋巴结。

目的 探讨结直肠癌神经内分泌分化与结直肠癌预后的关系.方法对73例结直肠低分化腺癌的临床和随访资料进行回顾性分析,并应用免疫组化的方法检测嗜铬素A、突触素在肿瘤及转移淋巴结和远处转移组织的表达.结果 73例结直肠低分化腺癌患者中有13例表现为神经内分泌分化(17.8%),且这组患者的1年生存率明显低于同时期的结直肠低分化腺癌组(P<0.05).其转移淋巴结以及远处转移组织中以神经内分泌克隆为主.结论结直肠癌神经内分泌克隆是影响其淋巴结及远处组织转移的重要因素,它可能会成为判断结直肠癌预后的新的的指标及治疗靶点。

目的 检测直肠癌术前放疗前后原癌基因Kirsten大鼠肉瘤病毒转化基因(K-ras基因)突变率的变化,从细胞遗传学方面深入研究放射治疗对直肠癌的作用.方法 pTNM Ⅱ期和Ⅲ期直肠癌病人40例.病人术前行40 Gy放疗,放疗前和术中分别取癌组织、距边缘2、4和6 cm正常黏膜采用聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)法检测K-ras基因第12密码子突变.结果癌组织中K-ras基因突变率显著高于癌周正常黏膜,同时距癌边缘2 cm黏膜的K-ras基因突变率显著高于距癌边缘4、6 cm黏膜的.放疗后癌组织和距癌边缘2 cm黏膜的K-ras基因突变率与放疗前相比显著降低.结论距肿瘤2 cm之内的黏膜有较高的K-ras基因突变率,向恶性转化的可能较大,放疗后癌组织和癌旁黏膜K-ras基因突变率显著降低,因此,放疗可能抑制癌旁黏膜恶变的早期事件,这可能是放疗能增加手术切除率和保肛率的原因。

手术时在体腔或切口内遗留纱垫、纱布、缝针、器械等是医疗工作中的事故,后果往往很严重,不仅增加病人的痛苦,还会造成危害,甚至影响生命.我们外科医生应当充分认识这种事故的严重性,从中吸取沉痛的经验教训,尽最大努力消灭这种事故。

目的 观察在体外诱导人骨髓基质干细胞向肝细胞分化过程中白蛋白的表达特征.方法从手术切除弃置的人肋骨骨髓中分离基质细胞, 在含有肝细胞生长因子(HGF)、淋巴细胞抑制因子(LIF)、纤维母细胞生长因子(FGF)等条件培养基中培养细胞.应用免疫荧光方法在共聚焦显微镜下观察肝细胞特异性白蛋白染色;同时,于诱导培养后多时间点测定培养细胞产生的白蛋白水平.结果人骨髓来源的基质干细胞在条件培养基中经诱导后,分化为成熟附壁细胞;细胞胞浆内肝细胞特异性标志物白蛋白呈阳性染色;已分化细胞合成并分泌白蛋白,其表达水平随细胞分化显示时间依赖性变化特征.结论人骨髓基质干细胞经诱导培养后可向成熟肝细胞分化并具有合成和分泌白蛋白功能,可以作为临床肝细胞移植及生物人工肝等治疗终末期肝病的重要肝细胞来源。

目的 探讨成年大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)在体外是否可定向诱导分化为肝细胞及其方法.方法采用梯度离心法,分离纯化SD大鼠的MSCs,流式细胞仪检测和碱性磷酸酶染色鉴定细胞类型.根据培养基中肝细胞生长因子(HGF)浓度不同,将MSCs分为4组进行诱导分化:A组0 ng/ml, B组10 ng/ml,C组20 ng/ml,D组40 ng/ml.倒置显微镜连续观察细胞分化过程的形态学变化.于培养的1,3,7,14,21,28 d,分别以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和细胞免疫组化检测各组细胞甲胎蛋白(AFP)、细胞角蛋白18(CK18)和白蛋白的基因和蛋白表达.结果分离纯化的SD大鼠MSCs的表面标志为CD29+,CD44+,CD34-,CD45-和CD90+,细胞的碱性磷酸酶染色阴性,细胞纯度达98%以上.C组与D组的MSCs,于培养第7天出现AFP基因表达,第14天表达增强,第28天表达减弱;第14天始出现白蛋白、CK18基因表达,而后持续.B组和A组在培养过程中,未出现AFP、CK18和白蛋白的表达.C组与D组MSCs的AFP细胞免疫组化染色培养第7天即出现阳性,第14天白蛋白和CK18免疫组化染色阳性.A组和B组的MSCs的AFP、白蛋白和CK18的免疫组化染色均阴性.结论成年大鼠MSCs在较高浓度的HGF的诱导下,可分化为肝细胞。

目的 观察奥曲肽(OCT)抑制肝癌生长的效果,对其抑瘤作用的机制进行深入的探讨.方法以裸鼠肝癌原位种植瘤模型,观察OCT对种植瘤生长的影响,以免疫组化观察OCT对种植瘤内生长抑素受体2(SSTR2)、肝细胞生长因子受体(cMet)、转化生长因子β1(TGFβ1)、磷酸化Smad2、Smad4和Smad7蛋白的表达,以半定量逆转录聚合酶链反应观察SSTR2和Smad4 mRNA的表达.结果 OCT明显抑制裸鼠人肝癌种植瘤的生长[(0.17±0.14)g vs. (0.53±0.06)g],抑瘤率达到67.9%;治疗组种植瘤内SSTR2和Smad4 mRNA和蛋白的表达均显著高于对照组;cMet的蛋白表达显著下降;TGFβ1、磷酸化Smad2和Smad7的蛋白表达两组差异无统计学意义;此外,肿瘤内磷酸化Smad2的表达显著低于正常肝脏.结论 OCT能显著抑制裸鼠肝癌原位种植瘤的生长,其机制可能与上调SSTR2表达、下调cMet表达以及促进TGFβ抑制信号的传导,恢复TGFβ/Smads系统的抑瘤功能有关.此外,磷酸化Smad2表达的降低可能是Bel7402肝癌细胞的重要特征之一。

目的 探讨外周血γδT细胞在胰腺癌裸鼠种植瘤体内过继免疫治疗中的作用.方法用胰腺癌细胞株Cap-1注入BALB/c裸鼠皮下建立胰腺癌裸鼠种植瘤模型.裸鼠随机分为3组,每组10只.A组为γδT细胞治疗,B组为αβT细胞治疗,C组给以无血清RPMI 1640作为对照.从胰腺癌患者外周血中提取淋巴细胞,体外特异性扩增γδT细胞后注入裸鼠腹腔内,观察种植瘤裸鼠生存时间、肿瘤体积和肿瘤病灶坏死程度.结果 A组成瘤率9/10,B、C组均为8/10(P>0.05).当肿瘤生长到16、37和52 d时, A组与B、C组肿瘤体积差别具有统计学意义(P值分别为0.019和0.022).120 d时C组8只种植瘤裸鼠全部死亡,B组有5只死亡,A组有3只死亡,3组之间死亡率差异具有统计学意义(P＝0.023);Kruskal-Wallis检验生存时间存在统计学差异(P＝0.036).γδT细胞治疗组中有4只肿瘤病灶出现坏死脱落,B和C组中各有1只肿瘤出现坏死;肿瘤生长到1个月后,B组和C组中裸鼠发生头部、眼眶、尾部、会阴部和对侧腹股沟区转移,A组仅1例发生对侧腹股沟部转移;A组中有1例裸鼠种植瘤脱落消失,而B组和C组均无肿瘤脱落、坏死消失发生.结论外周血γδT细胞对胰腺癌裸鼠种植瘤具有显著的抑瘤作用.

目的 探讨血管内皮细胞生长因子165(VEGF165)基因转染血管内皮祖细胞(EPCs)移植促进游离移植的脂肪组织的血管新生,提高移植脂肪组织存活率.方法体外分离、培养人脐血中EPCs,利用脂质体介导VEGF165基因体外转染EPCs,然后与来自人体的脂肪组织混合移植于裸鼠背部,裸鼠随机分为3组:VEGF165基因转染组、EPCs组及M199培养基对照组.结果脐血中分离培养的EPCs表达CD34、血管内皮细胞生长因子受体及CD133;VEGF165基因转染EPCs体外及体内检测均有VEGF165蛋白的表达.VEGF165基因转染组、EPCs组中,EPCs整合到缺血部位新生血管中,与对照组的脂肪组织存活率分别为(96.2±8.6)%、(75.3±6.8)%和(40.2±2.5)%(P<0.05),VEGF165基因转染组与EPCs组脂肪组织周边区毛细血管密度有显著差异(P<0.05),均高于对照组(P<0.05).术后3个月时3组脂肪组织周边区的EPCs密度分别为(196±16)个/mm2、(95±11)个/mm2、0个/mm2(P<0.05).结论脐血中的EPCs体外培养后移植体内可促进游离移植的脂肪组织的血管新生,提高存活率,而转染VEGF165基因的EPCs具有更强的促血管新生的作用。

目的 探讨胚胎期表皮细胞形态发生与间质-表皮细胞转化(MET)及其调节因子之间的关系.方法对早期胚胎标本分别采用间质细胞标记物波形蛋白(Vim)和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、胚胎表皮特异性蛋白细胞角蛋白(CK)8和18、表皮干细胞特异性蛋白CK19和相关调节因素转化生长因子β1(TGFβ1)及其受体(TGFβRⅠ)标记物进行免疫组化、免疫荧光染色和组织形态学观察.结果在人胚胎胎龄(EGA)6～8周期间,外胚层Vim+和α-SMA-细胞向CK8和18+和CK19+表皮干细胞转变,并检测到中等强度(++)TGFβRⅠ信号,但TGFβ1信号十分微弱(±);至EGA 10周以后这些细胞呈现表皮细胞的组织形态学特征.结论 EGA 6～8周是人胚胎表皮细胞经由MET发生的重要时期,TGFβRⅠ信号通路可能参与了MET调节过程,但其配体TGFβ1起源及其作用机制有待进一步研究。

目的 观察脓毒症主要相关细胞因子肿瘤坏死因子α(TNFα)和干扰素γ(IFNγ)对巨噬细胞表面主要模式识别受体(PRRs)表达的影响.方法分离培养小鼠肺泡巨噬细胞,用TNFα、IFNγ(终浓度均为20 ng/ml )分别刺激细胞3 h、6 h、12 h,通过逆转录聚合酶链反应和免疫组织化学检测细胞内PRRs,包括白细胞分化抗原14(CD14)、Toll样受体4(TLR4)、清道夫受体(SR)、细菌脂蛋白受体TLR2和细菌DNA受体TLR9 mRNA表达及其蛋白表达.结果 TNFα和IFNγ表现为不同程度地上调与炎细胞激活作用有关的PRRs(CD14、TLR2、TLR9)(P<0.05),下调与炎细胞防御作用有关的SR(P<0.05),而对TLR4基因及蛋白表达无显著刺激作用(P>0.05).结论效应细胞释放的促炎因子TNFα、IFNγ能从基因转录和蛋白水平上对细胞表面PRRs产生明显的反馈调控作用,对于促进失控性炎症反应的发生具有一定病理生理意义。

目的 探讨重度及特重度烧伤后早期血清胃泌素、β内啡肽及血浆胃动素浓度的动态变化并分析其意义.方法以重及特重度烧伤住院患者32例为对象,分时段采血, 放免检测血清胃泌素、β内啡肽和血浆胃动素浓度.结果重度及特重度烧伤后早期胃泌素明显降低,伤后8 h一直在最低水平,但在9～24 h段有一个高峰,后微下降至一相对稳定水平;胃动素在伤后2 h为最高值,后在休克期内一直为低值,在伤后8 h为最低,进入回吸期稳定上升,但仍低于正常; β内啡肽在伤后早期即升高,伤后8 h最高.烧伤面积越大,胃泌素、胃动素降低越明显,β内啡肽升高越显著;但在超过70%面积时即没有相对应关系.结论重度及特重度烧伤后早期血清胃泌素、β内啡肽及血浆胃动素浓度的动态变化有一定规律性,疼痛应激, 休克对其有明显影响。

目的 研究数字化虚拟肝脏三维重建及虚拟肝脏手术的切割.方法采用数字化虚拟中国人女性一号(Virtual Chinese Human Female No.1 VCH-F1)数据集中所有包含肝脏的连续图像, 首先对组织切片图像进行配准后从中分割提取出肝实质、肝静脉、胆管、胆囊等组织的图像信息,然后应用可视化工具包(Visualization Toolkit, VTK )三维重建,建立肝脏表面及内部结构的三维形态模型,并开发一个基于PC 机和Windows 平台的肝脏三维可视化演示系统.结果在肝脏三维可视化演示系统中,肝脏实体立体感强,可以通过设定肝脏及其管道系统的透明度,以及对模型的放大、缩小和上下左右不同方向的旋转,来观察肝脏及管道结构的立体形态.并可以按任意角度对虚拟的肝脏进行切割和观察切割面结构.结论利用VCH-F1数据集中肝脏图像,在VTK基础上开发的基于PC 机和Windows 平台的肝脏三维可视化演示系统基本达到了比较满意的程度,为今后数字化虚拟肝脏及虚拟各种肝脏手术的研究做了积极探索。

目前,肝癌是肝移植的适应证之一.根治性肝部分切除的5年生存率仍然在30%左右徘徊,而肝癌肝移植的5年生存率已达到50%左右.虽然肝癌患者肝移植术后早期效果良好,但肿瘤复发和转移导致的远期低存活率严重制约了肝癌肝移植的开展.现就国内外肝癌肝移植术后肝癌复发的原因和防治措施作一综述。

由中华医学会外科学分会器官移植学组主办、第四军医大学西京医院承办的第二届全国器官移植学术会议于2004年10月14日至17日在西安举行.会议收到学术论文200余篇,到会代表400余人.本次会议的主题是"总结经验,规范操作,建立网络,提高肾外大器官移植的中长期疗效".在两天的会议上,近40位国内外知名专家作了精彩演讲和发言,会议围绕与器官移植学有关的手术学、病理学、影像诊断学、麻醉学、护理学及实验动物学、分子生物学等诸多基础理论研究及临床研究进行了广泛交流。

曾宪九教授是我国杰出的外科学家,本刊第六届编委会总编辑,1985年5月30日因病去世.在曾宪九教授逝世20周年的时候,我们特别刊登裘法祖院士专门撰写的一篇纪念文章,同时在"史海撷萃"栏目中刊登曾宪九教授早年发表在本刊的一篇评论,以表示对曾宪九教授的由衷敬意和深切怀念。