2004年 · 第24卷第02期

长期以来,医学界对一些消化道症状,如恶心、呕吐、吞咽困难、早饱、烧心、便秘、腹泻、慢性腹痛等症状,在按惯例排除炎症、肿瘤、感染及其他结构异常等原因后,往往冠之以"功能性消化道疾病"的诊断,予以对症治疗.进入20世纪80年代,研究人员提出肠神经系统(enteric nervous system,ENS)的概念,它不受大脑、脊髓直接控制,是可进行自我调节、自我控制的功能系统.经过长期研究后,临床医生开始对内脏的神经调节有了较完整的认识,并开始对这些疾病在中枢、消化道本身及脑-肠轴上的改变进行深入研究,形成了神经胃肠病学.现就国内外有关神经胃肠病学的研究现状作一介绍。

1999年海南会议提出并经全国消化大会确认的"我国对幽门螺杆菌若干问题的共识意见"于2000年发表至今已3年余.3年多来,对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,简称H.pylori或简写为HP或Hp)的一些重要问题又有了新的认识,2000年欧洲Maastricht-2共识报告具有重要的指导意义,2002年第三届全国Hp会议上广泛听取了大家对"共识"的意见,又经2003年安徽桐城中华医学会全国Hp共识会议(简称桐城会议)审核修订,现提出新的Hp共识意见,以便在推广应用中充实和完善。

目的 研究阻断泛素-蛋白酶体通路对胃癌细胞增殖的抑制作用及其机制.方法将泛素-蛋白酶体通路特异性阻断剂MG-132加入胃癌细胞株SGC-7901,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞抑制效应,流式细胞仪(FCM)检测细胞周期及凋亡,DNA片段分析进一步证实凋亡的存在,TRAPPCR-ELISA法检测端粒酶活性,免疫细胞化学检测p27kip1的表达.结果MG-132对SGC-7901细胞有显著抑制作用;FCM显示对照组胃癌细胞G0/G1期比例为(46.3±4.1)%,MG-132作用后为(72.1±5.0)%,较对照组增加(P＜0.01),并有明显的亚二倍体凋亡峰;细胞DNA抽提电泳后发现特征性凋亡梯状条带,TRAP PCR-ELISA法检测示MG-132作用胃癌细胞24、48、72、96 h时A值分别为0.197±0.007、0.081±0.005、0.074±0.004、0.063±0.002,对照组A值分别为1.801±0.048、1.887±0.072、2.047±0.085、2.131±0.076;端粒酶活性显著受抑制(P＜0.01);p27kip1在胃癌细胞中为胞质表达,经MG-132作用后,胞质、胞核均有表达.结论MG-132能显著抑制胃癌细胞株SGC-7901的增殖、诱导其凋亡,其机制是增强p27kip1表达,使细胞产生G1期阻滞,并抑制端粒酶活性。

目的 分析DNA甲基化酶1(DNMT1)基因的真核表达质粒对人结肠癌细胞肿瘤相关基因的表达影响.方法分别构建并转染含有人正义和反义DNMT1的真核表达质粒入结肠癌SW1116细胞,PCR和限制性内切酶证实转染结果,以Western印迹法分析各组细胞DNMT1蛋白的表达情况.定量PCR检测hMLH1、hMSH2及c-myc、p16INK4A基因的表达.结果经G418筛选得到稳定转染DNMT1基因的结肠癌细胞系,且分别在该转染有正义和反义质粒的细胞系中,DNMT1蛋白表达上调和下调.同时发现转染正义DNMT1的细胞中hMLH1、hMSH2及c-myc的表达降低,而转染反义DNMT1的细胞中hMSH2的表达明显增强.各组细胞p16INK4A基因的表达差异不明显.结论DNMT1基因调控人结肠癌细胞中肿瘤相关基因的表达。

目的 探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)基因在诱导肝癌细胞凋亡时是否存在旁观者效应,以及旁观者效应的可能机制.方法构建表达TRAIL基因的双腺病毒载体系统Ad/GT-TRAIL+Ad/PGK-GVl6,通过293包装细胞产生的病毒上清液将TRAIL基因转入肝癌细胞SMMC7721细胞中,RT-PCR检测TRAIL基因的表达,以MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率;不同比例混合培养SMMC7721/TRAIL和SMMC7721细胞,检测混合细胞生长抑制率来评价TRAIL基因的旁观者效应,并以滤去细胞成分的转染细胞培养液培养未转染细胞,观测可溶性因子在TRAIl基因旁观者效应中的作用.结果TRAIL基因对SMMC7721细胞的生长抑制率与PBS、LacZ基因和Bax基因比较,差异有显著性(P＜0 05);SMMC7721细胞的凋亡率,TRAIL基因与PBS、LacZ基因和Bax基因比较,差异有显著性(P＜0.05);混合细胞的生长抑制率,以SMMC7721/TRAIL占0%时为0,占5%时为15.9%,占25%时为67.0%,占50%时为80.2%,占100%时为87.7%;以PBS对SMMC772l的生长抑制率为0,则滤去细胞成分的转染细胞培养液对SMMC7721的生长抑制率为4%,两者差异无显著性.结论双腺病毒载体系统介导的TRAIL基因对肝癌细胞有明显的抑制生长和促凋亡作用,并存在旁观者效应,可溶性因子在TRAIL的旁观者效应中不起作用。

目的 将胃肠道癌胚抗原(CEA)特异性单链抗体基因与人T细胞CD3ζ胞内区、跨膜区基因克隆入真核表达载体,表达相应的融合分子,以期制备消化道肿瘤靶向性杀伤T细胞.方法应用PCR法扩增抗CEA特异性单链抗体(scFv)基因;用RT-PCR法从正常人外周血T细胞扩增出CD3ζ胞内区、跨膜区基因;将单链抗体插入CD3ζ基因序列的上游,构建重组真核表达载体scFv-CD3ζ-pcDNA3.0并测序.结果抗CEA scFv cDNA片段为810 bp,与已知的序列相符;CD3ζ胞内区、跨膜区的cD-NA片段为438 bp,与基因库公布的序列一致.重组的表达载体经酶切琼脂糖电泳及测序加以证实.结论成功制备了具有抗肿瘤相关抗原CEA靶向性及CD3ζ胞内区、跨膜区信号转导功能的重组分子,为制备消化道肿瘤靶向性嵌合锚定T细胞奠定了实验基础。

目的 评价腺管开口分型对诊断早期大肠癌及癌前病变的临床实用价值.方法 2000年11月～2002年8月结肠镜检查4176例次,采用内镜下黏膜染色技术,部分病变结合放大内镜及实体显微镜观察腺管开口分型(pit分型)并与病理诊断对照,pit分型采用工藤分型.结果752例患者发现大肠隆起、扁平等不同病变共955个,共检出早期大肠癌14例,进展期癌209例,Ⅱa、Ⅱb、Ⅱc、Ⅱa+Ⅱc病变76个.侧向发育型肿瘤(LST型)病变43个,直径16～110 mm,其中Ⅱ型2个,ⅢL18个,Ⅳ19个,Ⅴ A型1个,Ⅴ N型3个.非肿瘤性息肉以Ⅰ、Ⅱ型腺管开口为主,占85.4%(303/355);而腺瘤性息肉则以Ⅲ、Ⅳ型腺管开口为主,占86 0%(504/586);进展期癌均表现为黏膜腺管开口破坏无结构,为ⅤN型;14例早期癌中有8例腺管开口为Ⅴ型,其中Ⅴ A型2个,ⅤN型6个.结论大肠腺管开口分型对于判断肿瘤性、非肿瘤性病变以及早期大肠癌并指导及时的内镜治疗或手术切除具有重要意义及临床实用价值。

目的 明确选择性环氧合酶(COX)-2抑制剂-塞来昔布对2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的大鼠结肠炎的作用,并初步探讨其作用机制.方法将大鼠分为四组:第1组和第2组为造模组,第3组和第4组为对照组.用0.25 mlTNBS乙醇溶液(TNBS浓度25 mg/ml,乙醇浓度50%)灌肠,诱导大鼠慢性实验性结肠炎模型.造模组大鼠于造模前3 h开始,分别给予塞来昔布(1.25 mg/kg,第1组)和蒸馏水(第2组),每天2次,共7 d.第3组大鼠为正常对照组.第4组大鼠以塞来昔布(1.25mg/kg)灌胃,每天2次,共7 d.于第7天实验结束时处死所有存活动物,观察结肠黏膜的损伤程度,同时用放射免疫分析法测定结肠黏膜前列腺素E2(PGE2)水平.结果造模组大鼠结肠损伤积分分别为11.15±3.30(第1组)和8 50±2.82(第2组),均显著高于正常对照组0.62±0.09(P值均＜0.01).第1组的结肠损伤积分显著高于第2组(P＜0.05).第3组和第4组的积分差异无显著性.造模组大鼠结肠黏膜PGE2浓度分别为(12.00±4.33)pg/μg(第1组)和(17.20±9.62)pg/μg(第2组),均显著高于正常对照组的(6.02±3.39)pg/μg,(P值均＜0.05).第1组的PGE2浓度显著低于第2组(P＜0.05).第3组和第4组的结肠黏膜PGE2浓度差异无显著性.结论选择性COX-2抑制剂-塞来昔布使大鼠慢性实验性结肠炎损伤加重;其机制初步观察与COX-2抑制剂对COX-2途径产生的PG抑制有关,但是否有其他原因有待进一步研究。

目的 探讨非溃疡性消化不良患者十二指肠胃反流(DGR)与胃黏膜炎症改变之间的关系.方法对56例有腹痛、腹胀等症状的非溃疡性消化不良患者行胃镜检查及组织活检,并用便携式胆红素监测仪行24 h胃内胆红素监测,以反流总时间百分率(%)作为评价胆汁反流严重度的主要观察指标,分析其与胃黏膜病变之间的关系.结果高反流组及低反流组(各28例)的Hp阳性率为46%(13/28例)和50%(14/28例,P＞0.05).内镜下各种病变的检出率分别为:胃窦黏膜充血100%比71%(P＜0.05)、出血点/斑18%比11%(P＞0.05)、糜烂39%比21%(P＞0.05)、血管透见14%比14%(P＞0.05)、黏液湖或黏膜胆汁染色46%比18%(P＜0.05).Hp阳性与Hp阴性组慢性炎症的严重度积分[(1.77±0 80)比(1 07±0.75),P＜0.05]及活动性积分[(1.48±0.85)比(0.86±0.64),P＜0 05]差异有显著性.在Hp阳性组,胆汁反流严重度与肠化严重度相关(r=0.548,P＜0.05).在Hp阴性组,胆汁反流严重度与慢性炎症(r=0.486,P＜0 05)、萎缩(r=0.476,P＜0.05)及肠化(r=0.623,P＜0.01)等组织病理学改变的严重度相关.结论非溃疡性消化不良患者不论是否存在Hp感染,过多的胆汁反流均与胃窦黏膜炎症损害有关;未发现胆汁反流胃黏膜特征性组织病理改变。

目的 分析比较不同遗传性非息肉病性结直肠癌(HNPCC)临床诊断标准和指导纲要所筛选家系的临床病理特征.方法58个家系[符合Amsterdam标准(AC)家系24个、日本标准(JC)家系15个、Bethesda指导纲要(BG)患者19例]收入本项临床病理研究.结果24个符合AC的家系共有恶性肿瘤患者116例,含结直肠癌患者90例.15个符合JC的家系共有恶性肿瘤患者54例,含结直肠癌患者33例.两组家系表现相似的临床特征,发生第1例结直肠癌的平均年龄分别为46.1岁和51.4岁,右半结肠癌分别占55.4%和44.8%,同时或异时结直肠癌发生率分别为25.6%和18.2%.两组共有肠外肿瘤患者55例,以胃癌最多(12例),子宫内膜癌次之(8例).两组39个家系中34例临床病理资料完整的结直肠癌与散发性结直肠癌比较显示,外生性生长较多、低分化癌比例高、克罗恩病样淋巴反应常见,并以Dukes分期A/B为主(P＜0.05).家系先证者中18例术后随访存活时间超过5年,最长达28年.结论用AC和JC可将临床表现有别于散发性结直肠癌的亚群--HNPCC筛选出来.这部分患者临床病理特点与散发性者明显不同.肠外肿瘤以胃癌、子宫内膜癌为常见.HNPCC患者预后较好。

目的 研究肠易激综合征(IBS)患者的肠嗜铬(EC)细胞及其合成和储存5-羟色胺(5-HT)的功能变化.方法按罗马Ⅱ标准诊断的50例IBS患者,依其分型标准区分为腹泻型及便秘型.取IBS患者肠镜活检标本行Envision法免疫组化染色.部分活检标本电镜下观察EC细胞形态及功能.免疫组化染色及电镜观察均设正常对照组.结果腹泻型、便秘型IBS与对照组比较,分泌5-HT的EC细胞数量明显增多,分别为15.90±5.09,14.73±2.73和7.27±2.50,差异有显著性(P＜0.01).免疫组化染色显示IBS组EC细胞内合成的5-HT增加,电镜显示肠道EC细胞功能活跃.结论IBS患者肠黏膜EC细胞功能活跃,提示其大量合成并分泌的5-HT可能在IBS的发病中起重要作用。

目的 建立肝脏特异性自身抗体的ELISA检测方法,辅助自身免疫性肝炎的诊断.方法利用亲和层析法从人肝脏组织中直接纯化去唾液酸糖蛋白受体(ASGPR),经免疫学鉴定后以此纯化抗原包被微孔板,酶联免疫固相吸附试验检测去ASGPR的自身抗体(抗-ASGPR).结果本研究从10 g肝组织纯化ASGPR,总量为1.6 mg.经SDS-PAGE和Dot-ELISA验证,纯化ASGPR纯度高、具有抗原活性.ASGPR预吸附可阻断血清抗体与ASGPR间的免疫反应,类风湿因子、梅毒阳性血清不干扰本ELISA法的抗原抗体反应.33例自身免疫性肝炎(AIH)患者中检出抗-ASGPR 24例,阳性率为72.7%.在临床上高度怀疑AIH的10例患者中,抗-ASGPR阳性者有7例.原发性胆汁性肝硬化、病毒性肝炎、肝炎后肝硬化、肝癌、胆囊炎患者中阳性检出率分别为21.4%(9/42)、16.8%(16/95)、16.1%(10/62)、10.7%(3/28)、14.3%(1/7).药物性肝炎、酒精性肝炎、系统性红斑狼疮和类风湿性关节炎患者中未检测到抗-ASGPR.200名健康体检者阳性率为4.6%.抗-ASGPR检测对AIH诊断的特异性为89.6%.结论本研究所建立的抗-ASGPR ELISA检测方法可靠、特异性好.抗-ASGPR检测有助于AIH的诊断,尤其是对那些抗核抗体、平滑肌抗体、肝肾微粒体-1型抗体等自身抗体均阴性、临床高度怀疑AIH病例的诊断可能更为有用。

组织细胞在受到包括烧伤在内的各种外界因素的刺激后会发生一系列非特异性防御反应.应激反应中可产生对细胞起保护作用的应激蛋白,主要是热休克蛋白(heat shockprotein,HSPs),它能快速、短暂调整应激过程中的细胞机能,保护细胞免受损伤,并有助于细胞恢复正常的结构和机能.烧伤作为一种对机体组织的强烈刺激因素,不仅造成局部热损伤,同时伴随着严重的应激反应,并带来许多内脏并发症,其中烧伤后急性胃黏膜损伤是临床上较为常见的急重症,一直是医学界关注的热点。

病例摘要 患者男,69岁,因停止"排便、排气20 d,呕吐、腹痛17 d"入院.20d前无明显诱因停止排便、排气,3 d后出现恶心呕吐,呕吐物为棕褐色液体,每日10余次,总量50～100 ml,有酸腐味.脐周阵发性绞痛,不放射,与体位无关.2周前外院查血白细胞为22.8 × l09/L、中性粒细胞0.88;呕吐物潜血(-);空腹血糖16 8～18.7 mmol/L;血淀粉酶和肝功能正常;胸部片正常;腹部平片示部分结肠内积气.

胆囊结石是一种世界范围的常见病、多发病,其形成过程受到多种因素的影响,其中胆固醇结石的形成机制中可能包含有慢性炎症过程.塞来昔布(celecoxib)是新近研制的一种高选择性环氧合酶(COX)-2抑制剂,对胃肠道有较高的安全性.我们采用兔胆固醇结石模型[1],比较免疫球蛋白(Ig)、黏蛋白等与炎症有一定关系的成核因子含量的改变,探讨特异性COX-2抑制剂塞来昔布在胆固醇结石形成中的作用。

近年来研究发现,胃泌素(GAS)和五肽GAS能保护大鼠胃黏膜,促进胃黏膜损伤的愈合[1],但其作用机制尚不清楚.前列腺素(PGs)在维持胃肠黏膜的完整性和黏膜损伤后的修复中发挥重要作用,环氧合酶(COX)是合成PGs的限速酶,已知COX至少有两种亚型,即COX-1和COX-2.本研究应用Western blot和免疫组化检测大鼠胃黏膜COX-1和COX-2表达,进一步评价GAS对无水乙醇所致胃黏膜损伤的保护作用,旨在探讨GAS的胃黏膜保护与COX-2表达的关系。

肿瘤细胞与血小板和内皮细胞之间的相互作用是一个复杂的过程,这一过程对恶性肿瘤转移起重要的促进作用.近年来新发展出一些具有较高特异性或敏感性的反映血小板活化及内皮细胞损害的标志物,如11-去氢-血栓烷B2(DH-TXB2)、凝血酶敏感蛋白(TSP)和血栓调节蛋白(TM)等.我们采用这些新的敏感指标结合其他指标检测了50例大肠癌患者,探讨其体内血小板活化及内皮细胞功能状态的变化,现报道如下。

近年来的分子生物学研究表明,绝大多数肿瘤细胞均有端粒酶活性表达,阳性率在80.1%～95.6%[1].随着肿瘤发病率的上升,腹腔转移癌的患者也在增加.临床上常采用腹腔化疗法以抑制癌细胞的快速增长,并减少化疗的全身性不良反应。

流行病学研究已表明,环境因素是结直肠癌发生过程中的危险因素,然而并非所有暴露在相同环境中的人都患结直肠癌,提示遗传易感性在其中起重要作用.N-乙酰基转移酶2(NAT2)是药物代谢酶系重要的Ⅱ相酶,参与内外源性物质在体内的代谢和解毒,其活性改变与结直肠癌易感性可能相关。

有关肝纤维化过程中纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)的作用,以及转化生长因子-β1(TGF-β1)和PAI-1的相关性,目前国内少见报道.我们通过检测慢性乙型肝炎患者肝组织中TGF-β1及PAI-1蛋白的表达情况及血清中活性TGF-β1水平及血浆PAI-1活性,探讨TGF-β1、PAI-1在人肝纤维化中的作用及相互关系。

法莫替丁(商品名:信法丁)是第三代H2受体拮抗剂,用于消化性溃疡、反流性食管炎等酸相关性疾病的治疗,也可预防和治疗应激反应引起的上消化道出血.为评价法莫替丁针剂对预防和治疗应激性溃疡的疗效,由浙江省四家医院对其进行了临床观察,现报道如下。

氩离子凝固术(argon beam coagulation,ABC)是内镜下治疗消化道疾病的新方法,1999年国内首次用于治疗成熟型疣状胃炎[1],针对治疗后患者出现不同程度的治疗部位疼痛及创面形成等情况,通常采用制酸剂和胃黏膜保护剂促进术后疼痛的缓解和创面的愈合.本研究拟对新型质子泵抑制剂雷贝拉唑对患者的疼痛缓解程度、创面黏膜愈合情况进行评价。

十二指肠溃疡和胃癌均是临床常见的上消化道疾病,但十二指肠溃疡伴发胃癌的病例报道则较为少见.我们回顾性分析61 372例胃镜检查中发现的37例十二指肠溃疡伴发胃癌患者,并就其临床、内镜、病理特点和可能的病因、发病机制进行了初步的探讨。

特发性便秘是一种原因不明的慢性功能性便秘[1],目前认为与年龄、生活习惯、精神心理、代谢因素、精神病变、解剖结构等都有关系.有一类特发性便秘,表现为钡剂灌肠X线检查显示盘曲冗长的结肠,而不伴有其他梗阻或畸形,临床上称之为原发性结肠冗长.关于结肠冗长,文献上没有详尽的描述和定义.袁景伦等[2]认为,升结肠、横结肠、降结肠及乙状结肠各段如超过正常长度的35%～40%即可称为结肠冗长;横结肠活动范围超过髂嵴,乙状结肠活动范围到达右上腹部,也可认为是结肠冗长.目前对于结肠冗长一般采取手术治疗,切除多余肠管,均能取得良好的疗效[3]。

患者男,37岁,间歇性吞咽困难20余年,近年来加重,只能进半流质.食管钡餐检查示弓上食管隔膜约2.5 mm,钡剂通过受限,仅从一侧膜孔通过.胃镜下距门齿23 cm处见隔膜呈漏斗状掩盖食管腔,靠前壁侧见一直径约0.5 cm近椭圆形膜孔,隔膜表面两条肌纤维束交错呈"V"字型.活检钳插进膜孔可拨动隔膜使膜孔稍增大.遂行微波凝切,设定功率100mA,导线探头插至膜孔内侧缘,向后壁方向用力,拨起隔膜游离缘进行反复一字形凝切,见隔膜裂口增大接近食管后壁后终止治疗,术后无出血、胸痛等。

例1男,34岁.因间歇性乏力、纳差、腹胀、尿黄3年,发热、干咳1周入院.入院时体检:体温38.3℃,精神萎靡,巩膜及皮肤深度黄染,未见肝掌及蜘蛛痣,心、肺、腹部(-),实验室检查:血清丙氨酸转氨酶(ALT)61 U/L,总胆红素(TBIL)454.86 μmol/L,直接胆红素(DBIL)439.09μmol/L,白蛋白(ALB)23.57 g/L,凝血酶原时间(PT)30 s,凝血酶原活动度(Pta)27%,总胆固醇(CHO)1.76 mmol/L,血清铁蛋白2141μg/L,HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性,HBV-DNA 1.94×106/ml,甲、丙、丁、戊、庚型肝炎病毒标志物均阴性;血白细胞4.4× 109/L,中性粒细胞0.66,血红蛋白100g/L,血小板178×109/L。

患者男,46岁.因食欲不振、腹胀、腹痛、稀便多年入院.自述22年前在广东服兵役期间曾有多名战友因食鱼、虾感染肝吸虫.体检:体温37.5℃,脉搏88次/min,血压17/12kPa(1kPa=7.5 mm Hg),肝脏轻度肿大,肝区压痛明显.实验室检查:白细胞计数24×109/L,中性粒细胞0.65,淋巴细胞0 28,嗜酸粒细胞0.07,HAV-IgM(-)、HBsAg(-),丙氨酸转氨酶42.5 U/L,总胆红素14.3 μmol/L.B超检查:肝脏肿大,肝内光点密集不均匀,肝内小胆管轻度扩张,管壁粗厚,回声增强,扩张的胆管内有斑点、斑块或线形回声;胆囊壁增厚、粗糙,囊内亦见小条形或斑块形回声。

患者女,51岁,因频繁呕吐20余天,四肢麻木、无力2 d入院.患者于20余天前,逐渐出现食欲减退,食后即吐,以后呕吐频繁,不进食也频繁呕吐,消瘦,失眠多梦,近2 d出现四肢麻木,周身乏力.经对症治疗均无好转,且进行性加重.体检:体温36.7℃,脉搏120次/min,血压120/800 mm Hg(1mm Hg=0.133kPa);意识清,精神萎靡,消瘦,体重43 kg,贫血貌,巩膜黄染,皮肤黏膜呈柠檬色;心肺(-);腹平软,肝脾不大;双眼向上、内、外运动均受限,四肢肌力Ⅳ级,肌张力减弱,双侧指鼻及跟膝胫试验欠准,双侧腱反射减弱,双侧Babinski征(-)。