2004年 · 第42卷第06期

目的 开展遗传性代谢病高危儿童筛查检测。 方法 临床疑诊遗传性代谢病儿童104例，男77例，女27例，年龄(4.8±4.2)岁。手指采血，滴于专用采血滤纸上。干血滤纸片与含已知量的氨基酸、酰基肉碱同位素内标一起，经甲醇萃取，盐酸正丁醇衍生后，用串联质谱仪分析血片中氨基酸谱和酰基肉碱谱及其浓度。 结果 在104例标本中，检出阳性标本10例(9.6%)，其中酪氨酸血症1例，同型胱氨酸血症1例，高鸟氨酸血症1例，甲基丙二酸血症2例，丙酸血症1例，3-羟基3-甲基戊二酸裂解酶缺乏症1例，中链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症2例，酰基肉碱转移酶Ⅱ缺乏症1例。 结论 串联质谱技术可检测30余种遗传性代谢病，包括氨基酸代谢紊乱、有机酸代谢紊乱和脂肪酸代谢紊乱性疾病，高危遗传性代谢病患儿的筛查有重要价值。

目的 研究肥胖伴黑棘皮病儿童胰岛素分泌功能的改变，探讨其临床意义。 方法 对35例肥胖伴黑色棘皮病患儿、38例单纯肥胖患儿及39例正常儿童进行胰岛β细胞功能指标的测定。 结果 肥胖伴黑色棘皮病组空腹胰岛素、C肽、胰岛素原、真胰岛素、胰岛素原与胰岛素、C肽比值、胰岛素抵抗指数和胰岛β细胞分泌指数（中位数及范围）分别为18.5（5.0~60.5）pmol/L、3.9（1.3~14.0）ug/L、28.84（9.9~64.2）pmol/L、32.96（6.2~66.0）pmol/L、1.2（0.4~8.9）、6.9（2.5~36.6）、5.0（0.8~14.1）和303.3（52.2~1163.8），均显著高于单纯肥胖组和正常组（P<0.001）。 结论 肥胖伴黑色棘皮病已经存在严重的胰岛β细胞分泌亢进和胰岛素抵抗，是儿童患2型糖尿病的高危信号。

目的 探讨儿童抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)相关性小血管炎的临床表现、血清ANCA和肾脏病理检查特征以及其治疗转归情况。 方法 采用间接免疫荧光定性检查血清ANCA，以酶联免疫吸附分析(ELISA)定量测定患儿血清抗蛋白酶3(PR3)和抗髓过氧化物酶(MPO)抗体活性，并同时进行肾穿刺病理检查，对5例ANCA相关性小血管炎(ASV)患儿的临床表现、血清ANCA与肾活检结果及治疗转归情况进行分析。 结果 (1) 5例ASV患儿占同期肾脏疾病住院患儿的0.25%，发病年龄在8~12岁之间，平均10岁6个月，均为女孩。(2) 5例ASV患儿血清胞浆型ANCA阴性，抗PR3定量都在正常范围内，环核型ANCA均阳性，抗MPO 98~242 kEU/L，平均154.5 kEU/L(正常<12.7 kEU/L)。(3) 5例患儿均为ANCA相关性小血管炎中的显微镜下多动脉炎，肾脏病理改变均为广泛新月体形成，并有毛细血管袢纤维素样坏死，免疫荧光检查有不同程度的C3沉积，除1例IgA和IgM沉积较强外，免疫球蛋白沉积均较弱。电镜下显示沉积部位主要在内皮下，1例在GBM内也有沉积。(4) 5例患儿中有3例在确诊后1年内死亡，2例经甲泼尼龙和环磷酰胺冲击后，肾功能恢复至正常，分别随访1年和5年，留有血尿和少量蛋白尿。 结论 儿童ASV女孩占绝大多数，以环核型ANCA为主，较成人更易出现肾功能衰竭，预后也更为严峻，血清ANCA定性定量检查与肾活检是诊断儿童ASV的关键。

目的 了解儿童伴有新月体形成的原发性IgA肾病的临床与病理特点。 方法 对29例伴新月体形成的原发性IgA肾病患儿的临床及病理资料进行分析，并依受新月体累及的肾小球比例分组比较，≥50%(A组)，9例；<50%(B组)，20例。 结果 (1)临床方面：29例均有血尿＋蛋白尿，尿蛋白≥1 g/24 h者22例(76%)和肉眼血尿86%，水肿、高血压、肾功能异常者均不及半数。A组以肾病综合征和急进性肾炎为主，持续性肉眼血尿、大量蛋白尿、高血压、肾功能衰竭均较B组明显(P<0.05)。B组无症状性血尿＋蛋白尿者65% 。(2)病理方面：新月体形成累及肾小球5%~85%, A组为52%~85%(其中新月体型IgA肾病10%)，B组5%~40%，以细胞性为主。均有系膜增生和小管-间质病变，球囊粘连易见。两组比较：A组系膜增生严重、小球硬化和小管灶状萎缩明显(P<0.05)，B组球囊粘连多见(P<0.05)。(3)免疫荧光：均有IgA＋IgM＋C3沉积，合并IgG沉积者18例(62%)，其中5例(17%)为"满堂亮"(A组占4例)。未见一例单纯IgA沉积。 结论 伴有新月体形成的原发性IgA肾病临床均有血尿合并蛋白尿，以持续性肉眼血尿和大量蛋白尿为主；以弥漫性系膜增生为主要病理改变，易见球囊粘连和小管-间质病变；沉积物以IgA＋IgM型或IgA＋IgM＋IgG型多见，部分呈"满堂亮"；较一般型IgA肾病临床、病理明显加重。

目的 研究奥美拉唑、克拉霉素、羟氨苄青霉素三联短程疗法对幽门螺杆菌(Hp)感染的根除率及远期疗效，探讨初治失败后治疗方案的选择。 方法 经胃镜检查、组织活检等确诊为Hp感染的门诊患儿192例，男118例，女74例。将本组患儿分成2组：克拉霉素组157例，采用奥美拉唑、克拉霉素、羟氨苄青霉素三联1周疗法；灭滴灵组35例，采用奥美拉唑、灭滴灵、羟氨苄青霉素三联2周疗法。疗程结束后4周，分别于1~36个月内进行复查随访，检测Hp根除率，其中对克拉霉素组中22例Hp根除患儿进行3年跟踪随访。对2组Hp未根除(初治失败)者进行复治，灭滴灵组失败的复治方案：克拉霉素三联1周疗法；克拉霉素组失败的复治方案：增加其中克拉霉素剂量和延长奥美拉唑疗程；复治再失败的方案：奥美拉唑、铋剂、呋喃唑酮、羟氨苄青霉素四联疗法。 结果 克拉霉素组Hp根除率(90.4%，142/157)较灭滴灵组(77.1%，27/35)高，差异有显著性(χ2＝4.69，P<0.05)。克拉霉素组22例Hp根除患儿，3年内随访复发率4.5%(1/22)。本组共29例次根除失败，采用3种复治方案后，根除率分别为75%(6/8)、77%(11/15)、100%(6/6)。 结论 奥美拉唑、克拉霉素、羟氨苄青霉素三联1周疗法是根除儿童Hp感染的理想方案，其根除率高、副作用少、耐受性好、疗程短、顺应性好、复发率低。适当增加克拉霉素剂量和延长奥美拉唑疗程的方法可提高根除率。奥美拉唑、铋剂、痢特灵、羟氨苄青霉素四联疗法对克拉霉素耐药者有效。

目的 研究宫内乙型肝炎病毒(HBV)感染患儿的干扰素γ(IFN-γ)＋874单核苷酸多态性(SNP)与宫内HBV感染易感性的关系，探讨宫内HBV感染的遗传易感因素。 方法 母亲为HBV携带者，新生儿出生后按程序使用乙肝疫苗或乙肝疫苗联合乙肝免疫球蛋白进行免疫。出生时外周静脉血HBsAg和(或)HBV-DNA阳性并持续阳性6个月以上者为宫内HBV感染组，共46例。出生时及以后随访中未曾出现过HBsAg或HBV-DNA阳性，1岁时抗HBs达保护滴度以上者为正常免疫组，共73例。用ABI Prism7700高通量荧光PCR系统对IFN-γ＋874SNP进行测定。 结果 宫内HBV感染组IFN-γ＋874AA、AT和TT基因型分布频率分别为67.4%、19.6%和13.0%；正常免疫组AA、AT和TT基因型分布频率分别为45.2%、30.1%和24.7%。两组IFN-γ＋874基因型的分布频率差异有显著性(χ2＝5.102，P<0.05)。宫内HBV感染儿童IFN-γ＋874AA基因型占优势。 结论 IFN-γ＋874基因多态性与宫内HBV感染有关，提示IFN-γ＋874基因多态性可能在决定个体宫内HBV感染遗传易感性方面有一定意义。

目的 探讨良性家族性婴儿惊厥(benign familial infantile convulsions, BFIC)基因与染色体19q12-13.1, 16p12-q12以及2q24区域的连锁关系。 方法 1个中国湖南地区4代BFIC家系，采集本家系中19名成员的血样，选择位于19q12-13.1、16p12-q12以及2q24的17个微卫星标记：D19S49、 D19S250、 D19S414、 D19S416、 D19S245、D16S3131、D16S3093、 D16S401、 D16S415、 D16S517、D16S3120、 D2S111、 D2S399、 D2S2345、 D2S2330、D2S2380、D2S2195，应用聚合酶链式反应(PCR)得到扩增产物片断，采用ABI377全自动测序仪或Strategene Eagle Eye Ⅱ型图象分析仪测定PCR产物片段大小。根据相应微卫星标记的产物片断大小不同，得到每个样本的基因型。对基因型数据进行校对后，用连锁分析软件LINKAGE的MLINK程序计算每个标记的LOD值，根据两点间LOD值判断连锁关系。 结果 D16S3131、D16S517、D16S3120、D16S3093、D2S2380、D19S250、D19S414因不能进行基因分型、杂合度低或者不符合孟德尔遗传予以舍弃。连锁分析结果示其余位点的LOD值均小于0，D19S49、D19S416、D19S245、D16S401、 D16S415、D2S399、D2S111、D2S2195、D2S2330、D2S2345处的LOD值在重组率为0.0时均小于-2，说明该BFIC家系与19q12-13.1、16p12-q12以及2q24区域没有紧密连锁关系。 结论 该BFIC家系的疾病基因与已报道的BFIC定位区域19q12-13.1、16p12-q12以及2q24区域没有连锁关系。

目的 分析新生儿脑梗死的临床特征与预后的关系，并通过早期诊断和干预，以改善本病的远期预后。 方法 总结6例确诊病例的临床特征，进行围产期因素和其它可能病因分析，并对存活患儿进行6~8个月的随访。 结果 1年内发现6例新生儿脑梗死，占同期住院患儿0.6%（6/969）。6例中3例经MRA确诊为脑血管畸形，1例为严重脑室内出血，1例与早产、母亲患重度妊娠高血压综合征及继发于支气管肺发育不良的呼吸衰竭等综合因素有关，1例原因不明。本组4例（4/6）出现各种形式惊厥，占同期新生儿惊厥的20%（4/20），是引起新生儿惊厥的第二位原因；6例在早期均无定位体征，仅有部分患儿表现为肌张力异常。头颅B超示6例中5例有阳性发现；弥散加权核磁共振成像（DW-MRI）能够做到早期准确诊断。1例随访至1岁未发现异常，其余5例均有不同程度不良预后。 结论 新生儿脑梗死并不少见，而且是新生惊厥的重要原因之一，影像检查是本病主要确诊方法，未能早期诊治和累及范围较广者预后不良。

目的 观察金黄色葡萄球菌(简称金葡菌)感染大鼠肺炎时心肌组织肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6 mRNA的表达和核因子-κB(NF-κB)活性，以及腺苷的作用。 方法 30只SD大鼠被随机分为对照组、肺炎组和腺苷治疗组。将金葡菌经气管插管注入复制肺炎大鼠模型，于注菌后第2、3、4天静脉滴注腺苷治疗，每天90 min，剂量150 μg/(kg·min)。第5天处死大鼠，立即取心脏液氮保存，心肌组织用于病理检测、提取核蛋白后用EMSA方法检测核因子-κB活性，采用RT-PCR方法检测TNF-α、IL-6 mRNA的表达。 结果 (1)心肌病理组织检查示肺炎组病变明显，与正常组比较差异有显著意义(P<0.01),经腺苷治疗后病变较肺炎组明显减轻(P<0.05)；(2)肺炎组心肌中TNF-α(2.27±0.27)、IL-6 mRNA(1.89±0.31)的表达高于对照组(1.05±0.16、1.12±0.25)(均P<0.01)；腺苷治疗组(1.25±0.18、1.31±0.25)低于肺炎组(均P<0.01)，与对照组比较差异无显著意义；(3)肺炎组心肌中NF-κB活性(13 033±1 286)高于对照组(383±15)(P<0.01)，腺苷治疗组(4 487±562)低于肺炎组(P<0.01)。 结论 金葡菌感染大鼠肺炎可致心肌损害，NF-κB和细胞炎症因子IL-6和TNF-α参与心肌损伤的发生和发展，外源性腺苷可通过抑制NF-κB活性，下调炎症因子TNF-α、 IL-6的基因表达，有利于炎症的减轻和保护心肌。

目的 探讨未成熟脑在缺氧缺血（HI）后细胞色素C释放的时相变化及细胞色素C释放与半胱天冬酶的激活和DNA损伤的关系。 方法 7日龄Wistar新生大鼠在缺氧缺血后不同时间点处死取脑，部分脑组织进行手工匀浆分离胞浆和线粒体成分进行Western蛋白印迹检查，部分进行组织切片用于细胞色素C免疫组化染色和免疫荧光双染色。 结果 Western蛋白印迹显示线粒体中细胞色素C在HI后1h未见明显变化，HI后14hHI侧较对侧（H）减少46%；而HI侧脑组织胞浆中细胞色素C的含量在HI后1h已明显增加，在HI后14h增加更明显。免疫组化结果显示大脑皮层细胞色素C阳性细胞数在HI后1h为8.4±1.8个/高倍视野，明显高于正常对照的1.5±0.8个/高倍视野（P<0.01），并随HI后恢复时间的延长阳性细胞逐渐增加，在HI后14h达到峰值（29.0±5.2个/高倍视野）；而TUNEL阳性细胞数在HI后1h为14±3个/高倍视野，明显高于正常对照的1.5±0.8个/高倍视野（P<0.01），在HI后24h达到峰值（286±86个/高倍视野）。荧光染色发现细胞色素C释放与活性半胱天冬酶-3仅在HI后早期同时染色，并且阳性细胞表现为核浓缩，随HI后恢复时间的延长，细胞色素C的阳性细胞明显少于活性半胱天冬酶-3的阳性细胞；细胞色素C与TUNEL双染色显示仅细胞色素C弱阳性的细胞表现为TUNEL强阳性和核浓缩。 结论 缺氧缺血后细胞色素C的释放是凋亡的早期改变之一。