2004年 · 第42卷第02期

目的 探讨哮喘急性发作患儿T细胞协同刺激途径和T细胞亚群激活状况。 方法 随机选择哮喘急性发作期患儿35例，对照组31例。用直接免疫荧光流式细胞术检测外周血单个核细胞(PBMC)中白细胞分化抗原14阳性(CD14+细胞表达CD86的平均荧光强度；经脂多糖刺激后PBMC中CD19+细胞百分率及CDeq \o\al(＋,19)CDeq \o\al(＋,86)双阳性细胞百分率；ELISA检测植物血凝素刺激后PBMC培养上清白细胞介素(IL)-4、IL-13、IFN-γ水平及血浆总IgE水平，并分析它们之间的相关性。 结果 (1)哮喘组CD14+细胞表达CD86的平均荧光强度(31.8±9.2)、CD19+细胞百分率[(13.5±4.0)%]、CD19+CD86+细胞百分率[(4.6±2.0)%]及血浆总IgE水平[186.6(64.3~723.6) kIU/L]与对照组[(23.5±6.4)、(8.2±3.0)%、(2.3±1.4)%、42.0(0.9~115.2)]比较差异有显著性；(2)哮喘组IL-4和IL-13水平均增高，IFN-γ水平降低，与对照组比较差异有显著性；(3)哮喘组CD14+细胞的CD86平均荧光强度与CD19+CD86+细胞百分率、CD19+CD86+百分率与血浆总IgE水平及CD19+、CD19+CD86+百分率与IL-4、IL-13水平均呈显著正相关。 结论 哮喘急性发作患儿PBMC中抗原递呈细胞表达CD86的强度或数量增高；B细胞和TH2细胞对丝裂原的活化作用应答增强。这提示CD86及TH亚群失衡在哮喘发病机制中起重要作用。

目的 测定缓解期哮喘患儿支气管反应性及小气道功能，探讨支气管反应性与小气道功能及临床缓解时间的关系。 方法 对39例缓解期哮喘患儿进行支气管激发试验，用传统方法测定肺通气功能。比较最大呼气中段流量(maximal mid-expiratory flow，MMEF)<80%患儿和MMEF≥80%患儿的支气管激发试验阳性率，以及临床缓解时间≤12个月和>12个月的患儿支气管激发试验阳性率。 结果 缓解期哮喘患儿39例中28例(72%)支气管激发试验阳性；15例(38%)MMEF<80%。在MMEF<80%患儿和MMEF≥80%患儿之间支气管激发试验阳性率差异无显著意义(P>0.05)。缓解时间≤12个月和>12个月的患儿间支气管激发试验阳性率差异无显著意义(P>0.05)。 结论 缓解期哮喘患儿仍然存在支气管高反应性及小气道阻塞，提示缓解期气道炎症仍持续存在；症状缓解时间超过1年者支气管激发试验阳性率较缓解时间1年之内者无明显改善。

目的 探讨巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α)及其mRNA在哮喘小鼠气道炎症中的作用。 方法 70只二级雄性BALB/C小鼠随机分为2大组7小组：(1)正常小鼠组，分成灌洗组(A24组)和未灌洗组(A0组)；(2)哮喘小鼠组，分成灌洗组(根据末次激发时相不同分成B3组、B8组、B24组和B36组)和未灌洗组(B0组)。对支气管肺泡灌洗液(BALF)进行嗜酸性粒细胞(EOS)计数和分类计数；应用双抗体夹心酶联免疫吸附试验法测定血清和BALF中MIP-1α的浓度；采用免疫组化法和原位杂交法检测MIP-1α蛋白和MIP-1α mRNA的表达。 结果 (1)BALF和血清中MIP-1α的浓度B3组[(30.2±4.2)pg/ml，(30.8±4.6)pg/ml]、B8组[(35.3±4.9)pg/ml，(34.9±5.1)pg/ml]、B24组[(42.9±5.8)pg/ml，(41.7±6.3)pg/ml]和B36组[(37.8±4.7)pg/ml，(35.7±4.9)pg/ml]均高于A24组[(20.9±3.8)pg/ml，(22.4±4.3)pg/ml](P均<0.01); MIP-1α浓度3 h开始升高，24 h达峰值，36 h已下降；(2)免疫组化和原位杂交显示，B0组支气管MIP-1α蛋白和MIP-1α mRNA的阳性表达率[(26.4±6.2)%, (23.9±4.2)%]均高于A0组[(10.3±2.5)%, (8.7±1.8)%](P均<0.01)，其表达的主要细胞是上皮细胞；(3)哮喘小鼠BALF中MIP-1α的浓度和EOS绝对值之间呈显著正相关(r＝0.890, P<0.01)，MIP-1α的浓度和EOS占细胞总数百分比(EOS %)之间呈显著正相关(r＝0.897, P<0.01)。 结论 哮喘小鼠MIP-1α蛋白和mRNA较强表达，上皮细胞是主要表达细胞，MIP-1α动力学特点为3 h开始升高，24 h达峰值，36 h已下降，并与EOS聚集密切相关。

目的 探讨褪黑素(MT)对支气管哮喘(BA)大鼠模型肺组织核因子-κB(NF-κB)表达的影响及其抗炎作用。 方法 将24只体重120~170克的健康雄性SD大鼠随机分为3组，每组8只：(1)哮喘组：用10%鸡卵白蛋白(OVA)1 ml、氢氧化铝100 mg无菌腹腔注入，2周后用1%OVA超声雾化每天吸入激发20 min，连续激发1周致其哮喘发作，在每次激发前30 min腹腔注入生理盐水(NS)1 m/只。(2)MT组：诱喘方法同哮喘组，在每次激发前30分钟腹腔注入MT 10 mg/kg。(3)对照组：以NS代替诱喘剂和腹腔注入药。每组分别于最后一次激发后6 h测定气道反应性，随后处死大鼠，并行支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞计数、分类；用硝酸还原酶法测定BALF中一氧化氮(NO)含量，以及肺组织中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和结构型一氧化氮合酶(cNOS)活性；用免疫组织化学染色法观察气道上皮细胞NF-κB的表达。 结果 (1)MT组大鼠气道反应性及BALF中淋巴细胞、嗜酸性粒细胞数明显低于哮喘组(P<0.01)；(2)MT组BALF中NO含量、肺组织中iNOS低于哮喘组(P<0.01)，且等级相关分析显示哮喘组BALF中NO含量与肺组织iNOS高度正相关(r＝0.83 P<0.01)；(3)免疫组织化学染色显示哮喘组、MT组、对照组NF-κB表达胞核阳性的上皮细胞占气道上皮细胞的百分比分别为(32.4±4.7)%、(20.1±4.8)%、(14.5±5.5)%。哮喘组显著高于其他两组(P<0.01)，MT组高于对照组(P<0.05)。 结论 MT能部分阻断哮喘大鼠肺组织NF-κB的激活，降低其调控的iNOS活性及BALF中NO含量，减轻哮喘大鼠气道炎症和气道高反应性。

目的 分析中国汉族人家族性激素耐药型肾病综合征(SRNS)家系NPHS2基因及突变特点。 方法 研究对象为一个中国汉族人家族性SRNS家系中的先证者及其兄和父母，对照人群为53例尿检正常成年人。取肾组织做常规光镜检查和podocin、nephrin、α-actinin、WT1表达的检查。提取外周血白细胞基因组DNA，PCR扩增NPHS2基因8个外显子；应用变性高效液相色谱(DHPLC)分析PCR产物，对DHPLC洗脱曲线异常者进行DNA序列测定。 结果 先证者及其兄肾脏病理示：局灶节段性肾小球硬化。先证者肾组织podocin重组蛋白P35染色弱阳性，P21染色阴性；nephrin、α-actinin和WT1染色的范围、定位、分布和荧光强度与对照组无差异。DHPLC示先证者及其父母洗脱曲线异常；DNA测序证实先证者为467_468insT与503G>A复合杂合突变，其父为503G>A杂合突变，其母为467_468insT杂合突变。 结论 首次发现了一中国汉族人家族性SRNS家系中NPHS2基因突变——467_468insT与503G>A复合杂合突变，且503G>A突变为新发现的突变；同时还发现该复合杂合突变引起肾组织中抗podocin重组蛋白P35的染色明显减弱，抗podocin重组蛋白P21的染色阴性。

目的 了解1997年~2000年北京地区儿童1型糖尿病发病率，与1988~1996年的调查结果进行比较。 方法 按照世界卫生组织(WHO)标准的捕获再捕获调查法，通过2个渠道搜集所有1997年1月1日~2000年12月31日新发病的北京地区15岁以下1型糖尿病儿童，按人口统计资料计算发病率，按2000年人口普查公布的结果计算年龄校正的发病率。泊松分布公式计算发病率的可靠性(95%可信限)，卡方检验法检验发病率差异的显著性。 结果 1997~2000年间，北京地区儿童1型糖尿病的年发病率波动在0.759/10万~1.215/10万之间，平均年发病率为1.014/10万，95%可信限为0.98/10万~1.16/10万。与1988~1996年比较，年粗发病率差异无显著性；按2000年普查资料，以年龄矫正后，发病率分别为0.83/10万和0.86/10万，差异无显著性。年龄比较依然为10~14岁组发病率高(P＝0.002)。虽然女性较男性发病率高，但与北京地区前述的报告不同，男女发病率比较差异无显著性。 结论 1997~2000年北京地区儿童1型糖尿病平均年发病率为1.014/10万，与1988~1996年调查结果比较未见明显增高。

目的 探讨脐血IgE用于预报食物过敏(FA)高危儿童的可行性及影响因素，为早期预防提供线索。 方法 随机选取2001年4~7月出生的婴儿118人，随访至生后4个月，资料完整者105人。诊断及分组采用标准问卷调查和食物皮肤点刺试验，应用纸片放射免疫吸附法测定脐血IgE值。 结果 4个月时，经确诊为食物过敏患儿组的脐血IgE值高于未发生食物过敏的婴儿组及不能确诊为食物过敏的婴儿组(P<0.05)；当脐血IgE值的预报界值定为0.9 IU/L(CBIgE0.9)或0.5 IU/L(CBIgE0.5)时，高脐血组FA检出率高于低脐血组(P<0.01)，提示脐血IgE升高是导致食物过敏的危险因素之一；CBIgE0.9预报食物过敏的准确性优于CBIgE0.5(P<0.01)；婴儿生后过早接触香烟、动物皮屑、过早添加鸡蛋均是影响脐血IgE值预报食物过敏准确性的危险因素(P<0.01)。 结论 高脐血IgE值是食物过敏的高危因素，对食物过敏高危儿童有预报作用；CBIgE0.9进行预报的准确性高于CBIgE0.5；某些婴儿生后的环境因素如过早接触香烟、动物皮屑，过早添加鸡蛋等可影响脐血IgE值预报的准确性。

目的 对早产儿生后体重下降和血浆瘦素水平之间的相关性进行动态研究，初步探讨瘦素在早产儿体重下降和能量平衡中的作用。 方法 采用放射免疫分析法动态测定早产儿血浆瘦素水平，同时维持基本的液体和最低的能量需求，并进行为期7~12 d的观察。由专人定期测量体重、身长、头围，计算Kaup指数。 结果 共有26例早产儿入选，其中男14例，女12例，胎龄30~36周，早产儿体重和瘦素浓度下降至最低点的时间为分别为生后第(5.2±1.6)天和第(4.7±1.4)天；两者下降的最大幅度分别为(6.5±3.0)%和(59.6±11.3)%。体重下降和血浆瘦素浓度下降之间呈显著正相关(出生时：n＝26，r＝0.766；第3天：n＝26，r＝0.636；第5天：n＝26，r＝0.629；第7天：n＝26，r＝ 0.717；第9~12天：n＝24，r＝0.587；P均<0.01)；两者下降至最低点的时间也高度相关(r＝0.611，P<0.01)。此外，血浆瘦素浓度和身长(出生时：n＝26，r＝ 0.609, P<0.01；第3天：n＝26，r＝0.419 P<0.05；第5天：n＝26，r＝0.583, P<0.01；第7天：n＝26，r＝ 0.626, P<0.01；第9~12天：n＝24，r＝ 0.482；P<0.05 )、Kaup指数(出生时：n＝26，r＝0.634；第3天：n＝26，r＝ 0.534；第5天：n＝26，r＝ 0.542；第7天：n＝26，r＝ 0.611；第9~12天：n＝24，r＝0.539；P<0.01 )显著相关。虽然早产儿出生后1周内，血浆瘦素浓度和头围呈高度相关(出生时：n＝26，r＝0.580 , P<0.01；第3天：n＝26，r＝ 0.417, P<0.05；第5天：n＝26，r＝ 0.426；P<0.01 )，但是早产儿出生1周以后，血浆瘦素浓度和头围的大小已经没有明显相关性(第7天：n＝26，r＝0.369；第9~12天：n＝24，r＝0.323；P均>0.05 )。 结论 早产儿体重下降和血浆瘦素浓度下降之间存在显著正相关，瘦素可能参与早产儿的能量平衡和体重的调节；瘦素和早产儿的营养状态密切相关。

目的 探讨脑性瘫痪(脑瘫)患儿脑MRI的表现及其与出生胎龄和脑瘫类型的关系。 方法 回顾性分析104例脑瘫患儿的病史、临床与MRI表现。 结果 早产与足月儿脑瘫类型构成显著不同，早产儿以痉挛性双瘫多见(占66.0%)，而足月儿偏瘫和失调型高于早产儿。104例脑瘫患儿MRI异常率为84.7%，早产和足月儿组MRI异常率差异无显著性。痉挛型双瘫、四肢瘫、偏瘫、手足徐动型和失调型脑瘫MRI异常率分别为89.4%、100%、100%、54.5%和90.0%。31/42例痉挛性双瘫表现为脑室周围白质软化症(PVL)，而以早产儿双瘫更多见(90%)；各类型脑瘫的MRI异常表现不同，双瘫以PVL为主，徐动型表现为基底节病变或PVL，失调型绝大部分存在先天性小脑发育不全，偏瘫型突出表现为单侧脑损伤。出生胎龄与MRI特点有关，早产儿组以PVL为特征，见于除失调型外的其他脑瘫类型；足月儿脑瘫MRI异常表现变化多且病变广泛。 结论 MRI有助于评价各型脑瘫的病理特点及其与出生胎龄的关系，对脑瘫病因的推测有帮助。

目的 探讨1，6-二磷酸果糖(FDP)对大鼠热性惊厥性脑损伤是否具有保护作用。 方法 30只雄性SD大鼠随机均分为热性惊厥组(FS)，盐水对照组(NS)及果糖干预组(FD)。水浴法建立热性惊厥模型；FD组于惊厥前30 min腹腔注射FDP 25 mg/100 g大鼠体重；而NS组腹腔注射相同体积的0.9%氯化钠溶液。观察各组大鼠惊厥表现并制作电镜标本以了解海马CA1区神经元、线粒体及突触超微结构变化。 结果 诱发热性惊厥前腹腔注射FDP可使大鼠惊厥潜伏期延长[FD组为(5.16±0.88)min，FS组为(4.25±0.98)min，NS组为(4.23±0.87)min]、惊厥持续时间缩短[FD组为(47±34)s，FS组为(66±32)s，NS组为(66±32)s]、惊厥级别下降。以上3组数据中，FD组与其他两组相比差异均有显著性(P<0.05)。电镜标本观察发现FDP可使大鼠海马CA1区神经元变性坏死减轻，神经元变性坏死百分比在FD组、FS组及NS组分别为13%、28%及30%，FD组与其他两组相比差异有显著性(P<0.05)。FDP防止神经突触间隙异常增宽，平均神经突触间隙在FD组、FS组及NS组分别为(6.47±0.37)μm、(7.60±0.36)μm及(7.53±0.40)μm，FD组与其他两组相比差异有显著性(P<0.01)。 结论 FDP可使大鼠惊厥潜伏期延长、惊厥持续时间缩短、惊厥严重程度下降、海马CA1区神经元变性坏死减轻，同时防止神经突触间隙异常增宽，提示FDP对大鼠热性惊厥性脑损伤具有保护作用。

目的 观察抗氧化剂—U74389G对高氧暴露新生大鼠肺内自由基产物、巨噬细胞聚集、硝基酪氨酸形成以及肺细胞增殖活性的影响，研究高氧性肺损伤发生机制及各种介质的相互关系，探讨抗氧化干预的作用。 方法 采用Sprague Dawley新生大鼠95%O2暴露7 d建立急性高氧肺损伤模型。应用气相色谱-质谱联用技术测定肺组织羟自由基，酶联免疫法测定脂质过氧化产物8-异前列腺烷，免疫组织化学法测定肺内巨噬细胞聚集和硝基化酪氨酸形成，3H-TdR掺入法(放射自显影)测定肺细胞增殖状况。 结果 95%高浓度氧暴露可致新生大鼠严重肺损伤，肺组织羟自由基(2，3-DHBA与2，5-DHBA分别为49.2±3.5 pmol/mg、55.8±2.3 pmol/mg)及脂质过氧化产物(8-异前列腺烷含量为546.6±32.2 pg/mg)与空气对照组比较均显著增加(P<0.05)，肺内巨噬细胞聚集明显，蛋白质酪氨酸发生显著硝基化，肺上皮细胞增殖停滞。抗氧化剂U74389G可降低肺组织自由基及其衍生物产生(2，3-DHBA、2，5-DHBA与8-异前列腺烷水平分别为37.9±2.4 pmol/mg、31.3±1.9 pmol/mg和358.5±24.1 pg/mg，P<0.05)，减少巨噬细胞聚集和蛋白质硝基化，肺上皮细胞增殖部分恢复，但未能显著改善高氧所致的肺实质病理形态学变化，且对正常肺细胞增殖有一定影响。 结论 高氧暴露通过增加肺内自由基产物及炎性细胞浸润等机制导致肺损伤，抗氧化干预可抑制或阻断其过程而具有治疗应用前景，但应充分考虑抗氧化对正常细胞增殖分化的影响。