2008年 · 第46卷第09期

目的 研究缺氧缺血对妊娠中期人类胚胎脑室管膜下区(subventricular zone, SVZ)神经细胞亚群的影响。 方法 取即刻解离的妊娠中期人类胚胎脑SVZ细胞，分缺氧缺血组(HI组)和对照组短时培养。以氧糖缺失法(OGD)制备缺氧缺血损伤细胞模型。培养前以细胞成活率评价损伤程度，培养后以细胞特异性标志蛋白nestin、MAP2、GFAP、PDGFRα及RCA120的抗体通过免疫荧光细胞化学法分别鉴定神经干细胞(NSCs)、神经元、星形胶质细胞、少突胶质祖细胞及小胶质细胞，比较其百分含量。 结果 HI组的细胞成活率(63.41%±0.06%)，明显低于正常组(98.9%±0.01%)(P<0.001)，短时培养后HI组中细胞亚群中含量最高的是GFAP(＋)的星形胶质细胞56.48%±0.03%，其次为神经干细胞NSCs 22.47%±0.03%而PDGFRα(＋)的少突胶质祖细胞含量最低；在对照组中最高则为MAP2 (＋)的神经元48.81%±0.03%，其次为GFAP(＋)的星形胶质细胞32.31%±0.03%，含量最少的为小胶质细胞1.15%±0.01%。 结论 妊娠中期人类胚胎脑SVZ含有NSCs、神经元、星形胶质细胞、少突胶质祖细胞和小胶质细胞，缺氧缺血对SVZ神经细胞损伤明显，不同细胞对缺氧缺血损伤的耐受性不同：NSCs、星形胶质细胞对缺氧缺血损伤的耐受性相对强于神经元、少突胶质祖细胞。

目的 研究经不同处理的大鼠骨髓间充质干细胞(rMSCs)对新生鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后学习记忆功能重建的作用，探讨rMSCs移植优化方案与MSCs的作用机制。 方法 全骨髓贴壁筛选法体外扩增rMSCs，Rice法构建新生Wistar大鼠HIBD模型，造模后5 d经侧脑室植入不同处理条件的rMSCs(1~2×105/只)，将HIBD新生鼠分为3组：①PBS对照组，②rMSCs组，③视黄酸(retinoic acid，RA)预诱导组。移植后14、42 d取脑组织行免疫组化检测植入的rMSCs的存活、迁移、分化及表达神经细胞标志蛋白的情况，鼠龄7周做穿梭箱实验检测各组模型鼠学习记忆能力。移植后14 d，采用神经营养素与受体基因芯片检测各组损伤侧脑组织差异基因表达，用Real-time PCR对差异显著的部分基因进行验证。 结果 (1)在rMSCs移植后14、42 d，RA预诱导组分别检测到少量植入细胞表达神经元中间丝蛋白重链(NF-H)和神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)；(2)穿梭箱实验结果显示rMSCs组(74.60±29.21)次与PBS对照组(94.10±38.18)次比较学习记忆功能有较好恢复，但差异无统计学意义，而RA预诱导组(47.90±21.13)次与PBS对照组和rMSCs组比较学习记忆功能明显恢复(P<0.05)；(3)基因芯片结果显示，与正常对照组比较，PBS对照组IL-6(高达11.4倍)、肿瘤坏死因子超家族成员之一Fas、脑源性神经营养因子(BDNF)表达明显上调；与PBS对照组比较，rMSCs组三种因子的表达同时降到较低水平，而RA预诱导组的IL-6和Fas下调后水平均高于rMSCs组，BDNF仍保持在PBS对照组水平。Real-time PCR结果显示，IL-6和Fas变化与基因芯片结果基本一致，而RA预诱导组BDNF水平有明显下调，但下调后水平仍略高于rMSCs组。 结论 在促进HIBD新生鼠学习记忆功能重建中，rMSCs植入有一定作用，RA预诱导的rMSCs植入有明显作用，它们可能通过调节HIBD大鼠脑内的IL-6、Fas和BDNF等因子保持在适宜水平而发挥作用。

目的 比较晚期早产儿或足月儿和早产儿呼吸窘迫综合征(respiratory distress syndrome, RDS)的特点，探讨晚期早产儿或足月儿RDS的临床特征和发病机理。 方法 2005年5月至2007年5月，在本院住院177例RDS患儿，<35周为早产组，103例，≥35周为晚期早产儿或足月儿组，74例。 结果 早产组开始应用呼吸机时间为8.7 h，持续应用呼吸机时间4.3 d，氧合指数(Oxygenation index, OI)11.9，PaO2/PAO2 0.29，有28例应用表面活性物质(pulmonary surfactant, PS)，其中11例应用呼吸机，应用PS前及后2 h、8~12 h、20~24 h OI分别为10.5、5.4、3.4、4.3( P<0.01)。晚期早产儿或足月儿组开始应用呼吸机时间为27.8 h(与早产组比，下同，P<0.01)，持续应用呼吸机时间3.7 d，OI 19.70(P<0.01)，PaO2/PAO20.16(P<0.01)，8例应用PS中有7例应用呼吸机，应用PS前及后2 h、8~12 h、20~24 h OI分别为11.2、7.6、7.5、7.6(其中8~12 h、20~24 h OI与早产组比，P均<0.05)。 结论 晚期早产儿或足月儿RDS患儿以产程未发动的剖宫产为主，开始应用呼吸机时间较晚，氧合情况较差，表面活性物质应用效果较差，易发生气胸和PPHN。

目的 通过对先天性无症状性巨细胞病毒(HCMV)感染的新生儿进行系统随访，观察其听力学、体格发育、智能发育、行为发育等多方面的改变，探讨先天性无症状性HCMV感染对婴儿期发育的影响。 方法 按照1998年宜昌会议通过的《巨细胞病毒感染诊断方案》标准及美国Fowler标准确定先天性无症状性巨细胞病毒感染。2003年7月至2005年7月符合入选条件感染病例41例，对照组21例。进行静脉血荧光定量PCR(FQ-PCR)检测确定HCMV感染。感染组与对照组于新生儿期、3月龄、6月龄、1岁分别进行新生儿20项行为神经检查(NBNA)、听力学检查包括耳声发射听力检查(OAE)、听力脑干诱发电位检查(ABR)、Bayley婴幼儿发育量表评估发育智商、52项运动神经检查(Amiel-Tison法)和体格发育检查、一般状况检查。 结果 (1)两组新生儿12~14 d时20项NBNA得分分别为38.8±2.75和38.5±2.29，差异无统计学意义(t＝0.98 ，P>0.05)。(2)ABR检查：感染组中23例做ABR检查者V波阈值升高异常率为15.2%；对照组21例未发现V波阈值升高，差异有统计学意义，所有病例均通过OAE检查。(3)感染组中38例1岁时行Bayley婴幼儿发育量表检查智力发育指数(MDI)及精神运动发育指数(PDI)分别为106.86±10.24和108.45±18.25，与对照组21例(107.49±19.31和107.19±10.98)差异亦无统计学意义(t＝0.33，P>0.05，t＝0.35，P>0.05)。(4)52项运动神经发育：两组比较，差异无统计学意义(t＝0.02，P>0.05)。 结论 (1)先天性无症状HCMV感染在婴儿期即可出现脑干听性反应V波阈值升高，而OAE听力筛查未能检出异常。(2)先天性无症状性HCMV感染对新生儿期行为神经、婴儿期智力、婴儿期神经运动发育无明显影响。

目的 含气的脑炎在新生儿非常罕见。我们报道1例日龄为5 d的新生儿，因败血症并发颅内感染而导致颅腔大量积气。对新生儿阴沟肠杆菌感染引起颅腔积气患儿进行临床和疾病转归及泸州地区阴沟肠杆菌耐药分析。 方法 对本例阴沟肠杆菌感染引起脑膜炎、颅腔大量积气的患儿进行蓝光治疗、抗生素、静脉补液、纠正酸中毒及支持治疗，反复检查血常规、CRP、头颅CT、血培养、脑积液常规、脑脊液培养等。 结果 血培养及脑脊液培养均为阴沟肠杆菌，头颅CT表现为颅腔大量积气，随着病情好转颅腔气体逐渐吸收后形成严重颅腔积水，并遗留严重神经系统后遗症。 结论 本病案强调阴沟肠杆菌感染在新生儿是应引起足够的重视，新生儿阴沟肠杆菌颅腔感染早期临床表现不典型，可以导致颅腔积气，对喹诺酮类敏感率93.75%~100%、庆大霉素敏感率73.33%、亚胺培南敏感率94.12%，对半合成青霉素、头孢菌素三代易产生耐药性，病死率高，存活后遗留有严重神经系统后遗症。

目的 探讨二氧化硫(sulfur dioxide，SO2)对于低氧性肺动脉高压大鼠肺动脉结构的影响。 方法 将大鼠分为3组：对照组(n＝8)、低氧组(n＝8)和低氧＋SO2组(n＝10，给予Na2SO3/NaHSO3)。对低氧组和低氧＋SO2组大鼠进行低氧处理21 d。同时对照组置于常氧环境。检测各组大鼠肺动脉平均压，并通过光镜检测肌型小动脉相对中膜厚度(RMT)，应用透射电镜观察各组大鼠肺小动脉超微结构的变化，检测血浆SO2含量。 结果 低氧组大鼠肺动脉平均压[(5.12±0.51)kPa]较对照组[(2.25±0.50)kPa]高(t＝5.091，P<0.01)，低氧组肺动脉RMT测定值(9.66±1.27)较对照组(6.83±1.57)高(t＝3.392，P<0.01)，超微结构观察显示低氧组大鼠肺小动脉内皮细胞体积增大变性，内弹力层疏松厚薄不均。平滑肌细胞体积增大，细胞器丰富，细胞间见胶原原纤维增多，同时低氧组血浆SO2含量[(27.01±4.17) μmol/L]较对照组[(33.36±5.62) μmol/L]低(t＝3.767，P<0.05)；低氧＋ SO2组大鼠的肺动脉平均压[(3.94±0.33)kPa]较低氧组[(5.12±0.51)kPa]低(t＝2.712，P<0.01)，低氧＋ SO2组RMT测定值(6.97±1.83)较低氧组(9.66±1.27)低(t＝3.009，P<0.01)，超微结构观察显示给予SO2干预后上述改变较低氧组明显改善，同时血浆SO2含量[(29.89±4.52) μmol/L]较低氧组[(27.01±4.17) μmol/L]高(t＝1.263，P>0.05)。 结论 SO2对低氧性肺动脉高压大鼠肺小动脉结构具有重要的调节作用。

目的 探讨血小板活化因子(PAF)受体拮抗剂在内毒素血症幼年大鼠肠道黏液蛋白(MUC2)损伤中的作用。 方法 18日龄Wistar大鼠，随机分为对照组和实验组，实验组又分为内毒素组(LPS组)、PAF受体拮抗剂预防组(简称预防组)和PAF受体拮抗剂治疗组(简称治疗组)，每一时点(注射LPS后1.5、3、6、24、48、72 h)各8只，注射LPS后1.5、3、6、24、48、72 h取回肠。LPS组和对照组分别腹腔注射内毒素5 mg/kg及生理盐水1 ml/kg；预防组于注射LPS前30 min、治疗组于注射LPS后30 min腹腔注射PAF受体拮抗剂BN52021 5 mg/kg。用透射电镜做形态学检查。应用免疫组化方法检测肠黏膜中MUC2变化。 结果 电镜下对照组肠微绒毛及细胞间紧密连接未见异常。LPS组上皮细胞连接增宽；微绒毛变细、稀疏，部分断裂、脱落；细胞器受损。预防组和治疗组改变较LPS组轻。对照组MUC2蛋白均匀地分布于回肠上皮细胞表面，MUC2蛋白染色阳性的杯状细胞轻度膨胀、扩张。实验组细胞表面MUC2阳性染色明显减少，分布不均。对照组MUC2表达平稳且水平较高，其他3组均下降，LPS组降低最为明显，低谷在注射后6 h(0.1841±0.0047)，明显低于对照组(0.2091±0.0060)(P<0.01)，预防组及治疗组变化趋势同LPS组，各时点MUC2均较LPS组高，方差分析提示组内及组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。 结论 PAF在内毒素血症肠道黏液屏障功能损伤中可能起一定作用，预防和治疗性应用PAF受体拮抗剂BN52021可减轻肠损伤。

目的 观察原发性心内膜弹力纤维增生症(endocardial fibroelastosis，EFE)患儿血浆脑利钠肽(brain natriuretic peptide，BNP)变化及卡维地洛的临床疗效，探讨治疗剂量、方案及安全性。 方法 21例原发性EFE患儿分为2组，常规治疗组(n＝10)及卡维地洛治疗组(n＝11)，治疗前及治疗后6个月进行多普勒超声心动图检测、观察血浆BNP；观察2组治疗前后血浆BNP水平、临床症状、心胸比例、心率的变化、心功能的改善、患儿对卡维地洛的耐受量及不良反应。 结果 原发性EFE患儿血浆BNP水平[(865±702)ng/L]明显高于正常对照组[(154±78)ng/L](P<0.01)，且心功能越差升高越明显，心功能Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级分别为(286±125)ng/L、(437±386)ng/L、(1673±859)ng/L；卡维地洛治疗后血浆BNP水平[(219±87)ng/L]低于常规组[(403±216)ng/L](P<0.05)，临床症状明显改善，患儿心胸比例降低，心率减慢，射血分数(EF)、短轴缩短率、平均左室周径缩短率显著提高(P<0.01)，左室收缩末期内径(P<0.05)、左室质量、室间隔收缩末厚度明显降低(P<0.01)。 结论 原发性EFE患儿血浆BNP水平显著升高，与EF呈负相关；卡维地洛可以降低血浆BNP水平，明显抑制EFE患儿心室重塑，改善患儿的心功能；心功能Ⅱ~Ⅳ级原发性EFE患儿卡维地洛长期治疗安全有效。

目的 探讨选择性α1受体激动剂盐酸米多君对体位性心动过速综合征(POTS)的治疗效果。 方法 本组55例，为2000年5月-2007年9月在北京大学第一医院就诊或住院的POTS患儿，其中男23例，女32例；年龄5~19岁，平均(12.3±3.1)岁，随机分为治疗组(应用盐酸米多君及口服补液盐治疗)22例和对照组(应用口服补液盐治疗)33例，对两组儿童进行临床研究及直立试验、基础直立倾斜试验(BHUT)或硝酸甘油激发直立倾斜试验(SNHUT)研究，比较治疗前后患者的好转率、HUT转阴率以及随访终点时的临床痊愈率和有效率。采用SPSS10.0软件进行统计。 结果 治疗3周和6周后治疗组的好转率均明显高于对照组(100.0% vs 42.4%，P<0.001；100.0% vs 42.4%，χ2＝19.352，P<0.001)，随访终点时治疗组的临床痊愈率明显高于对照组(77.3% vs 27.3%，χ2＝13.239，P<0.001)，有效率也明显高于对照组(100.0% vs 36.4%，χ2＝22.647，P<0.001)。治疗3周后治疗组和对照组HUT转阴率相比差异无统计学意义(31.8% vs 12.1%，P>0.05)；治疗6周后治疗组的HUT转阴率明显高于对照组(81.0% vs 48.5%，P<0.05)。 结论 选择性α1受体激动剂盐酸米多君对POTS患儿的治疗有效。

目的 分析激素耐药性肾病伴泌尿生殖器异常患儿的临床特点、WT1基因及足细胞分子表达，提高对WT1基因突变在该类疾病的重要致病作用的认识。 方法 收集3例激素耐药性肾病伴有或怀疑有泌尿生殖器异常的患儿。采用PCR及RT-PCR的方法分析WT1基因及＋KTS(赖氨酸-苏氨酸-丝氨酸)/-KTS比例；采用间接免疫荧光及免疫组化的方法进行足细胞分子(nephrin，podocin，α-actinin4，WT1及CD2AP)表达。 结果 3例患儿发病年龄分别为6个月、1岁及10岁；2例为男性伴泌尿外生殖器异常，1例为男性假两性畸形；临床均表现激素耐药肾病，2例肾脏病理为局灶节段性肾小球硬化。2例检测到WT1突变，即WT1 IVS 9 ＋5 G>A和WT1外显子9 1186 G>A杂合突变。足细胞分子在WT1突变肾组织表达发生改变；1例无WT1表达，1例WT1在足细胞细胞核内的分布与正常对照不同。 结论 对于激素耐药性肾病的女性患者或伴有泌尿生殖器异常的男性患者应行染色体核型和WT1基因分析。WT1突变除可能引起＋KTS /-KTS比例异常，还伴有足细胞分子表达异常，从而导致蛋白尿的形成和(或)发展。

目的 观察激素耐药的儿童肾病综合征(SRNS)应用环孢素A(CsA)长疗程治疗的疗效并分析影响疗效的相关因素。 方法 回顾性分析疗程2年的CsA治疗SRNS病例20例，男∶女为3∶1；平均年龄5.5岁，肾病病理类型微小病变(MCNS)15例，局灶节段肾小球硬化(FSGS)4例，系膜增生性肾炎(MsPGN)1例。 结果 (1)完全缓解13例(65%)，部分缓解4例(20%)，CsA无效3例(15%)，总有效率85%。平均随访时间40.5个月，复发率45%。(2)CsA治疗微小病变肾病的有效率为93%，非微小病变为60%，但两者差异无统计学意义。(3)毒副作用：多毛、齿龈增生和高血压的发生率分别为75%、25%和10%，2例出现可逆性的肾损伤，4例出现尿NAG/Cr增高，神经系统症状2例。3例重复肾活检未发现CsA相关的肾小管间质纤维化病变。 结论 对儿童激素耐药型肾病综合征CsA长疗程治疗有良好的疗效。小剂量CsA长期治疗未发现药物相关的肾小管间质纤维化和肾功能损伤。CsA长期治疗的安全性和预后有待进一步研究。