2008年 · 第46卷第01期

目的 探讨钙蛋白酶抑制剂3(MDL 28170)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的保护作用及机制。 方法 将新生7 d SD大鼠随机分为对照组、HIBD组及钙蛋白酶抑制剂-3治疗组(MDL组)，分别于HI后6、24、72 h取材，采用实时荧光定量PCR技术检测μ-calpain mRNA变化，免疫印迹法检测μ-calpain及caspase-3活性蛋白表达，TUNEL法观察大脑皮质凋亡细胞数；并计数HI后24 h海马CA1区神经元死亡数。 结果 脑缺氧缺血后μ-calpain mRNA在6 h即增高，24 h达到高峰(P<0.05)；μ-calpain蛋白质的活化片段76 000与总片段80 000比值6 h即高于对照组(P<0.05)，24 h达到高峰(P<0.01)，72 h仍处于较高水平(P<0.05)；caspase-3活性蛋白质在HI后24 h达到高峰(P<0.01)，72 h降至对照组水平(P>0.05)；损伤侧大脑皮质凋亡细胞随着时间延长逐渐增多，24 h达到高峰，72 h与对照组差异仍有统计学意义(P<0.01)；24 h时HIBD组CA1区神经元死亡数显著高于对照组(P<0.01)。予MDL 28170干预后，MDL 6 h及24 h组μ-calpain及caspase-3活性蛋白质表达、凋亡细胞数均较同时间点HIBD组减少(P<0.05)，同时24 hCA1区神经元死亡数明显减少(P<0.05)；MDL 28170虽然能降低μ-calpain mRNA的表达量，但与HIBD组相比差异不明显(P>0.05)。 结论 HI后μ-calpain基因及蛋白质表达增加，参与了HIBD的发生；钙蛋白酶抑制剂-3可通过抑制μ-calpain及caspase-3蛋白质表达，对抗细胞坏死和凋亡，发挥脑保护作用。

目的 提高对新生儿红斑狼疮(neonatal lupus erythematosus, NLE)的认识。 方法 分析2003年9月至2006年2月诊断为NLE患儿的临床表现、狼疮相关血清学指标及头颅CT等辅助检查，并随访至正常或1.5岁。 结果 共8例患儿诊断为NLE，其中男3例，女5例，足月小样儿4例，临床表现为皮疹(8例)、肝脾肿大(5例)、血小板减少(4例)、神经系统异常(2例)、Ⅲ度房室传导阻滞(AVB)(1例)等。仅3例患儿的母亲产前诊断为系统性红斑狼疮。患儿均有抗核抗体(ANA)和/或抗干燥综合征A抗体(Ro/SSA)和/或抗干燥综合征B抗体(La/SSB)阳性，母亲均有ANA阳性。所有症状除Ⅲ度AVB外均消失，1例神经系统异常者1.5岁随访时也表现正常。 结论 需提高对NLE的认识才能避免漏诊，早期神经系统异常者不能轻易下有后遗症的结论。

目的 分析6例由血培养证实的新生儿李斯特菌病临床特征、治疗方法与转归，提高临床对本病的识别。 方法 调查2004年1月1日至2006年6月30日我院分娩活产婴儿12 538例，其中6例检出李斯特菌。比较此6例中的早产儿与足月儿在发病时间、临床表现、病情严重程度、实验室指标变化、治疗措施、预后的差异。 结果 李斯特菌病检出率为4.8%。6例均为早发型感染，由母亲孕期宫内感染所致。3例早产儿生后即有败血症多样临床表现，反应低下，肤色苍灰，呼吸窘迫，肝脏增大，皮疹，四肢肌张力低下；实验室指标明显异常，WBC(21.6～33.8×109)/L, N0.77～0.83；PLT(102～59×109)/L；CRP>(160～118)mg/L。3例早产儿合并有肺部病变，需机械通气辅助呼吸，死亡1例，痊愈2例。3例足月儿发病时间较晚，分别在生后62、63、165h，仅表现为发热，精神反应欠活跃；实验室指标轻度异常，WBC (4.8～40.7×109)/L, N 0.72～0.80；PLT (202～192×109)/L；CRP(22～33)mg/L。治疗后痊愈。确诊必须依赖于细菌培养。氨苄青霉素或青霉素治疗有效。 结论 我国存在成人李斯特菌病散发病例，并导致母婴传播的发生。早期发现和检测，针对性选择敏感抗生素治疗可有效降低死亡率。对孕妇进行食品安全性宣传教育，避免孕期感染，是防止新生儿李斯特菌病的重要措施。

目的 研究人骨髓来源间充质干细胞对新生大鼠高氧肺损伤的干预作用。 方法 采用贴壁选择法分离、培养、扩增hMSCs，并予BrdU进行标记；32只3日龄SD大鼠随机分为A、B、C、D 4组，每组8只；A组：高氧暴露＋hMSCs注射组，B组：空气暴露＋hMSCs注射组，C组：高氧暴露对照组，D组：空气暴露对照组。A、C组：高氧(95%)暴露后7 d，腹腔分别注射含5×105MSC的磷酸盐缓冲液(PBS)、单纯的PBS 50 μl，B、D组：空气暴露后7 d，腹腔分别注射含5×105hMSCs的PBS、单纯的PBS 50 μl。注射后3 d处死全部动物取肺组织，ELASA法检测肺组织匀浆TNFα、TGFβ1水平；免疫组织化学方法检查肺组织BrdU积分情况，HE染色观察肺组织学形态学结构，做辐射状肺泡计数(RAC)；RT-PCR方法检测各组肺组织Alu序列表达情况。 结果 (1)A、B、C、D 4组TNFα水平分别为142.933±24.017，79.033±11.573，224.088±41.915，76.500±10.373(F＝59.970，P＝0.000)；而TGFβ1水平分别为1726.484±91.086，1530.359±173.441，2047.717±152.057，1515.777±131.049(F＝24.977，P＝0.000)。(2)RAC值分别为11.145±1.331，13.941±0.985，9.595±0.672，14.819±1.080(F＝43.234，P＝0.000)。(3)RT-PCR检测显示A、B组均有Alu序列表达，而C、D组均未见Alu序列表达。免疫组织化学显示A、B组均有BrdU阳性染色细胞，BrdU积分分别为0.230±0.026，0.190±0.015，t＝3.769，P＝0.002；C、D组均未见阳性染色细胞。 结论 新生大鼠腹腔注射hMSC后肺组织有hMSCs定植，且与暴露的条件相关；hMSCs可改善新生大鼠因高氧引致的肺组织损伤。

目的 探讨汉族群体新生儿呼吸窘迫综合征发病的遗传机制，为进一步开展基因治疗NRDS提供科学实验依据。 方法 选择彼此无关的汉族NRDS 20例作为NRDS组，选择彼此无关的汉族20例其他病例作为对照组，年龄与NRDS组相匹配，这些患儿可患有先心病、支气管肺发育不良、持续肺动脉高压。所有研究对象在临床确诊或住院后取血样本，NRDS组和对照组在患者死后30 min内取肺组织。采用免疫组化技术检测SP-B在肺部的表达，PCR技术分析筛选SP-B基因Intron 4的遗传缺陷变异体。 结果 20例NRDS患儿中，26周2例、34周1例、42周2例SP-B蛋白在肺部的表达明显较同胎龄对照组少；而对照组随着胎龄的增加，SP-B在肺部的表达增加，但在NRDS组却无这种规律可寻，进一步对这5例进行基因分析发现，2例42周的NRDS患儿SP-B基因Intron 4 121ins2遗传缺陷变异体。临床资料表明，42周胎龄的NRDS患儿病情重。 结论 SP-B减少参与了NRDS的发病，汉族群体NRDS存在SP-B基因intron 4 121ins2遗传缺陷变异体，进一步在国内研究SP-B遗传缺陷变异体可望为疾病基因组样本库积累资料。

目的 总结ECMO救治新生儿心脏术后严重低心排的成功经验。 方法 2007年7月18日我们对一例患先天性大动脉转位(TGA)合并房间隔缺损(ASD)、动脉导管未闭(PDA) 2.8 kg出生6 d的新生儿，进行了大动脉调转术(arteries switch)、ASD修补、PDA结扎术，畸形矫正后出现严重低心排综合征，低血压[<39/30 mm Hg(1 mm Hg＝0.133 kPa)]、高乳酸血症(Lac 8.8 mmol/L)、高左房压(LAP>20 mm Hg)、血性痰、少尿[< 1ml/(kg·h)]，由于转流时间较长(263 min)且难以脱离体外循环，常规治疗无效后接V-A ECMO进行心肺辅助。 结果 经87h ECMO辅助后，左心功能明显恢复，患儿顺利脱离ECMO, ECMO第1天LVEF 20%，第2天34%，第3天43%；ECMO第1天CK-MB 41 μ/L,第2天恢复正常。脱离ECMO后，在较高浓度血管活性药支持下[肾上腺素0.2 μg/(kg·min)，多巴胺/多巴酚丁胺8 μg/(kg·min),米力农0.56 μg/(kg·min)]，循环基本稳定。ECMO撤离后第4天，关闭胸部切口。ECMO撤离后第22天，撤离呼吸机，术后30 d撤离血管活性药。术后58 d康复出院。出院时心肺、肝肾功能正常，神志清醒，四肢肌张力和运动正常。整个病程中多次头颅超声检查均未发现脑出血、梗死等病灶。ECMO并发症：(1)肺出血；(2)伤口出血和心包填塞；(3)溶血；(4)高胆红素血症。 结论 ECMO对抢救新生儿心脏术后严重心功能不全有良好的疗效。

目的 研究当归多糖(APS)、血小板源性生长因子(PDGF)和血小板生成素(TPO)对巨核细胞株M-07e生长和凋亡的影响作用，为进一步探讨细胞因子对巨核细胞/血小板造血的作用及其机制提供基础。 方法 采用细胞计数和锥虫蓝拒染法进行细胞存活率检测，Annexin V、Caspase-3和JC-1 3种流式方法检测APS 、PDGF和TPO对无血清培养诱导的M-07e凋亡的影响。 结果 M-07e培养24、48、72 h后，APS组、PDGF组和TPO组细胞增殖及细胞存活率都显著高于对照组(P<0.05)。Annexin V法检测72 h各组死亡细胞，APS组、PDGF组和TPO组中全部死亡细胞分别占(19.41±7.59)%、(21.38±7.25)%和(18.77±8.00)%，与对照组(34.33±5.46)%比较差异有统计学意义；Caspase-3检测结果显示，APS组、PDGF组和TPO组中Caspase-3活性增高的细胞分别占(12.27±5.18)%、(12.39±6.26)%和(13.75±8.25)%，其中APS组、PDGF组与对照组(18.92±6.09)%比较，差异均有统计学意义(P<0.05)；JC-1检测结果显示，APS组、PDGF组、TPO组和对照组中死亡细胞分别占(23.64±6.69)%、(28.00±10.05)%、(27.99±8.99)%和(39.48±11.86)%，APS组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)，APS组与PDGF组、TPO组比较，差异无统计学意义。 结论 APS与PDGF、TPO都具有促进M-07e增殖和抵抗无血清培养诱导的M-07e细胞凋亡的作用，且APS与PDGF、TPO的作用相当。

目的 探讨急性期川崎病(KD) Toll样受体(TLRs)信号途径调节因子的变化及意义。 方法 急性期KD患儿48例，正常同年龄对照组儿童(对照组)16例，感染性疾病对照组(ID组)16例。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及荧光定量PCR检测外周血单核/巨噬细胞(MC) TLR4信号途径传导分子，调节因子及前炎症细胞因子mRNA的表达；流式细胞术检测MC TLR4的表达。 结果 (1)急性期KD患儿TLR4、髓样分化蛋白2(MD-2)、髓样分化蛋白88(MyD88)、白细胞介素1受体相关激酶4(IRAK-4)、肿瘤坏死因子相关因子6(TRAF6)、转化生长因子-β-活化激酶1(TAK1)、TAK结合蛋白1(TAB1)和TAK结合蛋白2(TAB2) mRNA表达明显高于对照组(P<0.05)；(2)KD患儿及ID组患儿MC正性调节因子TLR4相关蛋白(PRAT4B)和信号转导接头蛋白2(STAP2)表达明显高于对照组(P<0.05),两组间比较差异无统计学意义(P>0.05)；KD患儿DAP12基因表达明显低于对照组(P<0.05), FLN29、RP105及MD-1 mRNA表达上调(P<0.05), 4种负性调节因子均显著低于ID组(P<0.05); KD患儿前炎症细胞因子表达明显高于ID组(P<0.05)；(3)体外细菌脂多糖(LPS)刺激后KD患儿及对照组正性调节因子mRNA表达显著上调，对照组负性调节因子表达上调(P<0.05), KD患儿除DAP12表达上调外(P<0.05)，FLN29、RP105及髓样分化蛋白1(MD-1)刺激前后无明显变化(P>0.05)；(4)KD合并冠状动脉损伤组(KD-CAL＋组)MC正性调节因子PRAT4B和STAP2表达明显高于无冠状动脉损伤组(KD-CAL-组) (P<0.05); KD-CAL＋组负性调节因子FLN29、RP105和MD-1表达显著低于KD-CAL-组(P<0.05); KD-CAL＋组前炎症细胞因子白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及CD14＋细胞表面TLR4蛋白表达高于KD-CAL-组[(11.9±2.4)% vs. (6.5±1.7)%, P<0.05]。 结论 急性期KD患儿TLRs信号途径负性调节因子调控失衡可能是导致KD免疫功能紊乱的因素之一。

目的 探讨黄芪对IgA肾病(IgAN)模型大鼠免疫紊乱的调节作用。 方法 采用口服牛血清白蛋白(BSA)、皮下注射四氯化碳(CCl4)加用尾静脉注射脂多糖(LSP)复合方法，复制IgAN模型大鼠。实验分为3组：正常组、模型组和黄芪治疗组；黄芪治疗组给予黄芪颗粒剂灌胃，正常组及模型组分别灌注等量蒸馏水。检测各组大鼠血尿、蛋白尿及肾脏病理改变，采用免疫组织化学技术检测各组大鼠肾组织中Th2类细胞因子转化生长因子β1(TGF-β1)、白细胞介素5(IL-5)表达情况，ELISA法检测血清中Th1类细胞因子干扰素γ(IFN-γ)和Th2类细胞因子白细胞介素4(IL-4)的水平。 结果 ① IgAN模型组大鼠尿红细胞计数高于正常组和黄芪治疗组(P<0.01)；而IgAN模型组大鼠24 h蛋白尿亦高于正常组(P<0.05)和黄芪治疗组(P<0.05)。② IgAN模型组大鼠肾小球系膜区、肾小管、肾间质病理损害较正常对照组和黄芪治疗组明显加重；模型组大鼠肾小球系膜区IgA免疫荧光较正常组和黄芪治疗组明显增强。③免疫组化结果显示，正常组肾组织有少量TGF-β1和IL-5表达，而IgAN模型组大鼠肾组织中TGF-β1和IL-5表达明显增强，与正常对照组和黄芪治疗组TGF-β1(P<0.05)和IL-5(P<0.05)比较差别有统计学意义。④模型组大鼠血清IL-4含量[(33.74±7.52 )pg/ml]显著升高，与正常对照组[(2.36±0.85) pg/ml]和黄芪治疗组[(3.24±1.13 )pg/ml]比较差别有统计学意义(P<0.05)；而模型组大鼠IFN-γ水平[(18.79±3.80) pg/ml]显著下降，与正常组[(46.53±5.56)pg/ml]和黄芪治疗组[(41.28±2.95)pg/ml]比较差别有统计学意义(P<0.05)。 结论 黄芪可降低IgAN模型大鼠血尿和24 h蛋白尿水平，减轻肾脏病理变化及IgA在肾小球系膜区的沉积。可能的机制是通过调节IgAN模型大鼠Th1、Th2平衡紊乱，从而改善血清中Th类细胞因子IL-4和IFN-γ的水平，并减少肾组织中Th2类细胞因子TGF-β1和IL-5的表达，来延缓IgAN的发生发展。

目的 探讨乙肝免疫球蛋白(HBIG)预防乙型肝炎病毒(HBV)母婴垂直传播的效果。 方法 以2001年1月至2005年5月在台州医院产科初次进行妊娠健康检查，HBsAg测定阳性或HBsAg、HBeAg均阳性孕妇作为研究对象，共279例。将单纯HBsAg阳性孕妇与HBsAg、HBeAg双阳性孕妇分别应用随机数表方法随机分组，分别为单阳注射组(n＝80)、单阳对照组(n＝60)、双阳注射组(n＝79)、双阳对照组(n＝60)。单阳注射组、双阳注射组于妊娠20周开始肌肉注射HBIG 200 U，每4周注射1次，直至临产。两对照组不注射HBIG。4组孕妇所产婴儿，除常规接种乙肝疫苗外，均于出生后16 h内和2周肌肉注射HBIG。然后随访并测定婴儿HBsAg。 结果 单阳注射组、单阳对照组、双阳注射组、双阳对照组所生婴儿HBsAg感染率分别为3%、13%、10%、32%。单阳注射组与单阳对照组之间(χ2＝6.07，P<0.05)，以及双阳注射组与双阳对照组之间婴儿HBsAg感染率(χ2＝10.11，P<0.01)均有统计学意义，注射HBIG组，对单纯HBsAg阳性孕妇及HBsAg、HBeAg双阳性孕妇，出生婴儿HBsAg感染率均显著低于对照组；单阳注射组与双阳注射组之间婴儿HBsAg感染率差异亦有统计学意义，说明HBIG对单纯HBsAg阳性孕妇预防效果优于HBsAg、HBeAg双阳性孕妇。 结论 HBIG能有效预防母婴传播，降低HBV感染率。因此，妊娠妇女应及时进行健康检查，发现HBV感染阳性，及时采取注射HBIG等有效措施，以促进优生优育。

目的 探讨注意缺陷多动障碍混合型、注意缺陷型与正常儿童的神经心理特征的差异。 方法 采用视觉记忆、Stroop效应、倒背数字、词汇流畅性、威斯康辛卡片分类、Temporal discounting等测验、分别测试124例注意缺陷多动障碍儿童(包括85例混合型和39例注意缺陷型)和124例正常儿童的视觉工作记忆、反应抑制能力、语音工作记忆、执行功能和延迟满足能力。 结果 ADHD儿童完成字义与字色相矛盾的字色命名时间[注意缺陷型：84(20)，混合型：98(31)]较正常组[70(28)]延长，错误数[注意缺陷型：3(3)，混合型：6(19)]较正常儿童[2(5)]增多(P<0.01)；ADHD儿童倒背数字分数[注意缺陷型：3(3)，混合型：3(4)]较正常儿童[4(4)]低(P<0.01)；延迟视觉记忆[注意缺陷型：19(5)，混合型19(5)]也较正常儿童[20(5)]低(P<0.01)；ADHD儿童视觉工作记忆得分[注意缺陷型：21(3)，混合型：20(5)]较正常儿童[20(3)]明显偏低(P<0.01)；ADHD儿童词汇流畅性错误数[注意缺陷型：1(1)，混合型2(1)]显著高于正常儿童[0(0)](P<0.01)；ADHD儿童的威斯康辛卡片分类错误数[注意缺陷型：15(17)，混合型：15(15)]显著高于正常儿童[13(13)]，分类数[注意缺陷型：5(4)，混合型：5(4)]低于正常儿童[5(3)](P<0.01)；ADHD儿童的延迟满足能力显著低于正常儿童(P<0.01)。ADHD的两种亚型之间在部分测试的结果差异有统计学意义，混合型的ADHD儿童受损更为明显(P<0.01)。 结论 ADHD儿童存在视觉工作记忆、语音工作记忆、延迟满足能力、反应抑制等多项认知功能缺陷，其中混合型的儿童受损更为明显。

目的 比较传染性单核细胞增多症(infectious mononucleosis，IM)和EB病毒相关性噬血细胞综合征(EBV-associated hemophagocytic syndrome，EBV-AHS)的临床特点，分析IM患儿发生EBV-AHS的临床危险因素。 方法 回顾性比较我院2000年1月至2006年4月430例IM和EBV-AHS患儿临床症状、体征和实验室检查特点，采用Logistic回归分析IM患儿发生EBV-AHS的临床危险因素。 结果 (1)本组IM病例中EBV-AHS发生率为3.72%(16/430)，EBV-AHS组患儿热程明显长于IM组患儿，体温峰值、肝脏和脾脏肿大程度均较IM组患儿明显，但咽峡炎发生率(37.5%)显著低于IM组(91.1%)，差异均有统计学意义。(2)EBV-AHS组外周血三系均低于IM组，且变异淋巴细胞升高不明显，其比例(中位数10%)显著低于IM组(中位数18%)，差异亦有统计学意义。(3)EBV-ASH组肝功能损害显著重于IM组，尤其乳酸脱氢酶(LDH)(中位数为2128.5 U/L)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)(中位数为489 U/L)水平升高显著高于IM组，且常伴有高胆红素血症及低白蛋白血症。(4)多因素Logistic回归分析发现：热程>10 d(OR＝8.097)、LDH进行性升高>1000 U/L(OR＝7.998)、低白蛋白血症(OR＝7.838)、中性粒细胞<1.5×109/L(OR＝7.587)和血小板<100×109/L(OR＝7.190)是本组IM患儿发生EBV-AHS的临床危险因素，本组EBV-AHS病死率高达50%。 结论 绝大多数IM患儿呈良性自限性过程，约3.7%患儿进展为EBV-ASH。热程>10 d、LDH>1000 U/L、低白蛋白血症、中性粒细胞<1.5×109/L、血小板<100×109/L是IM患儿发生EBV-AHS的临床危险因素，该病预后凶险，病死率高，多次骨髓检查有助于及时诊断。