2006年 · 第44卷第04期

目的 分析我国0～14岁儿童新发现的痰涂片阳性(简称新涂阳)肺结核患者监测报告现状，了解儿童结核病患病和发现趋势，进一步认识儿童结核病监测的流行病学意义，以及在现代结核病控制策略下，如何重视和加强儿童结核病防治的问题。 方法 根据1992—2004年全国结核病监测年报中0～14岁儿童新涂阳肺结核患者登记报告资料，分析我国儿童新涂阳肺结核患者占全国新涂阳肺结核患者的比例、新涂阳肺结核患者登记率，分析我国东部、中部、西部和京津沪地区以及除京津沪地区以外，自1992年开始实施现代结核病控制策略(DOTS)的世界银行贷款中国结核病控制项目的13省(简称项目地区)与未实施该策略的另15省(简称非项目地区)的新涂阳肺结核患者登记情况。 结果 1992—2004年，登记的0～14岁儿童新涂阳肺结核患者31 358例，男14 727例(47%)，女16 631例(53%)。占同期新涂阳患者总数的1.26%，男0.89%，女2.03%(P<0.01)。儿童新涂阳肺结核患者登记率在0.42/10万～1.08/10万之间。在全国不同地区登记的儿童新涂阳肺结核患者中，西部地区占44.9%，其次为中部和东部地区，京津沪占0.9%。除京津沪外，1992年开始实施DOTS策略的项目地区与非项目地区比较，0～14岁儿童新涂阳肺结核患者登记数分别占75%和25%。各年度儿童新涂阳肺结核患者数占总涂阳肺结核患者数的比例，以西部地区最高。 结论 在登记的儿童新涂阳肺结核患者中，女性儿童新涂阳肺结核患者登记数高于男性，女性儿童新涂阳肺结核患者占女性总新涂阳肺结核患者比例高于男性。西部地区儿童新涂阳肺结核患者数多于中部和东部地区，项目地区多于非项目地区。儿童涂阳肺结核患者的患病和发现，不仅与当地结核病疫情有关，还与是否实施现代结核病控制策略有着密切的关系。

目的 确定临床诊断为严重急性呼吸综合征(SARS)患儿感染的病原是否为SARS相关冠状病毒(SARS－CoV)；同时探讨儿童SARS患者的传播能力。 方法 2003年6—8月收集到的SARS患者及其接触者血清标本177例，同时期的来源于非疫区择期手术儿童血清标本49例，以及无SARS接触史的北京健康儿童血清标本93例，SARS流行前儿童血清标本90例，总计409例。应用不同方法(包括酶联免疫吸附实验、间接免疫荧光、Western－blot等)、不同单位生产的试剂盒测定抗SARS－CoV抗体。 结果 不同检测方法中，SARS－CoV特异性IgG抗体阳性率在SARS患儿中为39.1%～43.5%，成人SARS患者中为57.1%～71.4%；与SARS患儿接触的儿童中均为阴性，与SARS患儿接触的成人中为6.0%～9.0%；与成人SARS接触的儿童中为0～9.7%；与成人SARS接触的成人中为4.4%～7.1%；同时期的正常儿童与非疫区择期手术儿童以及SARS流行前的正常儿童血清标本用不同方法和试剂检测结果不尽相同。 结论 临床诊断为SARS的患儿SARS－CoV特异性IgG抗体阳性率(40%左右)明显低于临床诊断为SARS的成人患者，提示在流行期间有相当一部分儿童SARS实际上是由其他的呼吸道病毒感染所致。与成人SARS接触的儿童和成人中，有一部分SARS抗体为阳性，提示可能存在SARS－CoV的隐性感染。目前已推广使用的SARS诊断试剂对于儿童SARS诊断的正确性还需要进一步的验证。

目的 研究Foxp3基因表达与CD4＋CD25＋调节性T细胞在哮喘发病中的作用。 方法 以确诊哮喘的患儿为研究对象，急性发作期15例、缓解期15例，同期选10例正常儿童作对照，提取外周血单个核细胞(PBMC)进行CD4、CD25表面标志及血浆、培养上清液IL－4、IFN－γ、IL－10和TGF－β等细胞因子的ELISA检测，同时收集哮喘患儿和正常儿童的诱导痰，用RT－PCR方法检测PBMC及诱导痰中转录因子Foxp3－mRNA的表达。 结果 PBMC CD4＋CD25＋T细胞百分率在哮喘急性发作期、缓解期分别为(10.1±2.1)%、(11.7±2.5)%，低于对照组的(15.5±2.7)%(P分别<0.01、<0.05)；对照组PBMC在体外培养后CD4＋CD25＋细胞百分率显著升高，同培养前比较差异有统计学意义(P<0.01)。PBMC Foxp3－mRNA表达水平(Foxp3/β－actin)在哮喘急性发作期、缓解期分别为0.46±0.14 、0.50±0.19，低于对照组0.77±0.22，诱导痰Foxp3－mRNA表达水平哮喘患儿也低于对照组；PBMC在体外培养后对照组Foxp3－mRNA表达水平较培养前升高(P<0.05)，而哮喘患儿培养前后Foxp3－mRNA表达水平无显著变化。血浆及培养上清液IFN－γ、TGF－β在哮喘急性发作期、缓解期低于对照组(P<0.05)，且IFN－γ、TGF－β与PBMC Foxp3－mRNA水平、CD4＋CD25＋细胞百分率呈正相关。哮喘患儿血浆及培养上清液IL－4显著高于对照组，急性发作期血浆IL－10显著高于对照组，而缓解期与正常组无显著性差异；IL－4、IL－10与PBMC Foxp3－mRNA水平、CD4＋CD25＋细胞百分率无相关性。 结论 哮喘患儿的TGF－β分泌不足、Foxp3基因表达降低、CD4＋CD25＋调节性T细胞数量减少及分化发育障碍可能在儿童哮喘的发病中起重要作用。

目的 初步探讨高渗及低渗造影剂对儿童肾脏功能的影响，以及水化对造影剂相关性肾病(CAN)的预防作用。 方法 将行静脉肾盂造影或增强CT检查的患儿分为高渗造影剂组(HOCM)27例和低渗造影剂组(LOCM)33例，各组患儿随机分为水化组和非水化组。水化组于造影后立即给予1/5张含钠维持液20 ml/kg于3 h内静脉滴入，非水化组不给予静脉补液。 结果 (1)HOCM组造影前，非水化组与水化组相比，SCr、Ccr差异均无统计学意义。造影后，HOCM非水化组SCr[(59.71±12.49)μmol/L]较造影前[(49.91±6.09)μmol/L]显著增高(P<0.05)，而Ccr造影后[(71.33±7.51)ml/(min·1.73 m2)]较造影前[(97.81±15.10)ml/(min·1.73 m2 )]明显降低(P<0.05)；HOCM水化组SCr、Ccr在造影前、后差异无统计学意义(P>0.05)。HOCM非水化组有3例(23.1%，3/13)发生CAN，HOCM水化组无1例发生CAN(P>0.05)。(2)LOCM水化和非水化组造影前、后SCr、Ccr差异均无统计学意义。LOCM非水化组CAN发生率为6.7%(1/15)，LOCM水化组11.1%(2/18)(P>0.05)。(3)HOCM非水化组与LOCM非水化组相比，造影后SCr显著升高(Z＝－2.42，P<0.05)，而Ccr降低(Z＝－2.83，P<0.05)。(4)HOCM与LOCM组共计6例CAN在2周内SCr及Ccr恢复至造影前水平。 结论 (1)肾功能正常的儿童应用高渗或低渗造影剂均可发生可逆的造影剂肾病；(2)高渗造影剂对儿童血肌酐及肌酐清除率的影响大于低渗造影剂；(3)水化可减轻高渗造影剂对儿童肾脏功能的损害；(4)儿童应用低渗造影剂水化后仍可发生CAN。

目的 了解不典型Rett综合征患儿MECP2基因的突变频率、突变类型、是否存在突变热点，寻找基因型和表型的相互关系。 方法 取26例不典型Rett综合征患儿外周静脉抗凝血，采用Miller′s蛋白酶K氯化钠盐析法提取基因组DNA，采用PCR方法扩增MECP2基因的外显子及结合区，1%的琼脂糖凝胶电泳鉴定目的PCR产物，然后进行DNA直接测序。DNA测序结果与人基因组序列(GeneBank AF030876)比较。 结果 26例不典型Rett综合征患儿中有12例存在突变。突变类型包括错义突变，由于单个碱基缺失导致的移码突变和剪切位点的突变，其中错义突变为最常见类型。c.397C>T为3例，c．473C>T、c.916C>T、c.806delG各为2例，c.397A>G、c. 1005G> A、c.IVS2－2A>T各为1例。 结论 不典型Rett综合征患儿存在MECP2基因突变，R133C、T158M和R306C为其热点突变。基因突变类型和表型之间有一定的相关性。

目的 探讨新生期大鼠反复FDA1性发作对海马神经发生的影响。 方法 64只生后1 d的Wistar大鼠随机分为惊厥组40只和对照组24只。惊厥组新生鼠在生后1 d(P1)、4 d(P4)、7 d(P7)给予腹腔注射匹罗卡品，制备新生鼠癫FDA1模型，对照组腹腔注射生理盐水。惊厥组分别在第3次致FDA1后即刻、第4、14、45天4个时间点处死，各时间点设相应对照组，处死前36 h给予惊厥组和对照组大鼠腹腔注射BrdU，用BrdU标记新生细胞，再以NF200双标免疫荧光法标记神经元。 结果 对照组BrdU标记阳性细胞呈年龄依赖性变化，不同年龄组BrdU阳性细胞的差异有统计学意义(P<0.01)，惊厥组3次发作后即刻和第4天齿状回BrdU阳性细胞数明显少于相应日龄对照组(P<0.01)，而发作后14 d和45 d BrdU阳性细胞数高于相应日龄对照组，发作后14 d差异无统计学意义。各时间点惊厥组和对照组大多数BrdU阳性细胞同时表达NF200 。 结论 正常大鼠的神经发生有年龄依赖性，随着日龄增大，齿状回颗粒细胞增生减慢，而新生期反复FDA1性发作对大鼠不同时期影响不同，反复发作会导致幼鼠早期神经发生减少，而后期神经发生增加，这些新生细胞不仅存在于齿状回，还可见于CA3区及海马以外的某些区域，并可分化为神经元。

目的 探讨卵清蛋白(OVA)胃肠致敏时，BALB/c小鼠肠黏膜分泌性免疫球蛋白A (sIgA)抗体反应系统特点，以期为临床食物过敏的诊断和治疗提供一定依据。 方法 选用6周龄无鸡蛋蛋白饲养的BALB/c雌鼠为实验对象，分为激发(Ch)组及正常生理盐水对照(NS)组，每组8只。ELISA法测定小鼠小肠黏液中总IgA、OVA特异性IgA含量；免疫组织化学法检测小鼠小肠固有层(LP)IgA＋浆细胞，集合淋巴小结中膜表面IgA＋(smIgA＋)淋巴细胞数量；RT－PCR法检测小鼠小肠组织白介素4(IL－4)mRNA表达；组织原位杂交法检测小鼠小肠集合淋巴小结(PP)中IL－4的mRNA表达。 结果 Ch组小鼠肠道黏液中总IgA、OVA特异性IgA、肠道固有层IgA＋浆细胞、PP中smIgA＋淋巴细胞均较NS组升高(P均<0.01)，各指标间存在正相关(P均<0.01)，Ch组小鼠小肠LP及PP中IL－4 mRNA表达高于NS组(P均<0.01)，小鼠小肠LP与PP内IL－4 mRNA表达分别与LP内IgA＋浆细胞、PP内smIgA＋淋巴细胞数量呈正相关(P均<0.01)。 结论 OVA致敏小鼠肠黏膜sIgA抗体系统存在功能亢进现象，其原因可能与炎症状态下肠道黏膜诱导部位和效应部位IL－4转录异常增高有关。

目的 探讨NF－κB在幼兔较大潮气量机械通气致肺生物伤中的作用以及对肿瘤坏死因子α(TNF－α)和白细胞介素8(IL－8)的影响。 方法 27只普通级幼兔随机等分为3组，(1)对照组(NMV, n＝9)：不进行机械通气；(2)常规机械通气组CMV(CMV, n＝9)：潮气量(VT)＝8 ml/kg；(3)大潮气量机械通气组(LMV，n＝9)：VT＝24ml/kg 。采用凝胶电泳迁移率改变分析法(EMSA)检测各时相点肺组织核蛋白提取物中NF－κB活性，Western Blot法测定肺组织IκBα含量，同时应用RT－PCR和ELISA法检测肺组织匀浆中TNF－α和IL－8 mRNA表达及其蛋白含量，并观察肺组织病理改变。 结果 在各时相点LMV的NF－κB活性明显高于NMV和CMV(P<0.01)；CMV的NF－κB活性则高于NMV(P<0.01)。IκBα含量在LMV随通气时间延长呈进行性降低，与NMV和CMV比较有显著性差异(P<0.01)。机械通气后LMV的TNF－α和IL－8含量及表达较CMV、NMV明显增高(P<0.01)，TNF－α表达及含量在通气后4 h达高峰，6 h明显降低，而继TNF－α达峰后，IL－8在通气后6 h达最高。肺组织病理学显示，随通气时间延长，LMV的肺泡结构破坏，肺泡壁和肺间质内有大量中性粒细胞浸润和较多红细胞渗出。CMV的肺间质及肺泡壁轻度水肿、有少量粒细胞浸润。NMV未见病理性改变。 结论 在损害性机械通气肺损伤的发生过程中，IκBα降解和NF－kB活化可能参与了肺组织致炎细胞因子基因表达的调控过程。