2006年 · 第44卷第03期

目的 探索准确性更高的新生儿窒息的诊断标准。 方法 连续纳入本院分娩活产婴10 376例，检查和登记与窒息有关的5大项目：产前高危因素，系列Apgar评分，脐动脉血气，脏器损伤，低Apgar评分病因的鉴别诊断。统计分析前4项之间的相关性，通过鉴别诊断考察各单项在诊断窒息中的敏感性和特异性以及各项之间的互补性。 结果 各单项间均呈明显相关(P<0.01或<0.05)但并不完全平行一致。显示各项间可以互相补充，但不能互相取代。高危因素、低Apgar评分、脐动脉血pH<7.00、脏器损伤筛查窒息的敏感性分别为100%、100%、44.44% 、100%，特异性分别为17.99%、98.90%、96.05%、99.62%。本组230例低Apgar评分与窒息的符合率仅50.9%，对此230例，低Apgar评分结合脐动脉血pH<7.00评估窒息的敏感性为44.44%，特异性为99.12%；结合脐动脉血pH<7.20的敏感性为100%，特异性为29.20%，加入脏器损伤后特异性提高到65.49%，再通过鉴别诊断排除低Apgar评分的其他病因后，基本消除了误诊。 结论 目前，新生儿窒息的诊断尚无准确的单一指标，为增加诊断依据和减少误诊，有必要以多项指标的综合诊断标准取代单一的Apgar评分。

目的 总结新生儿喉喘鸣的发生原因，以减少新生儿喉喘鸣的误诊。 方法 分析2004年4月至2005年12月我院新生儿科住院的全部喉喘鸣患儿(16例)的临床资料。全部病例均完成了血清总钙及离子钙的测定、胸部X光片、喉部及肺部CT扫描检查，部分病例进行了喉镜检查、上消化道造影及染色体检查等。 结果 本组16例患儿院外均诊断为先天性单纯性喉喘鸣；入院后16例中5例(31%)经喉部CT扫描诊断为甲状舌管囊肿(其中2例经喉镜检查已疑似为本病)，1例(6%)经染色体检查证实为猫叫综合征，2例(13%)依据临床症状及体征诊断为Pierre-Robin综合征，其余8例(50%)拟诊为先天性单纯性喉喘鸣；院外诊断与入院后诊断相比误诊50%；全部病例血清总钙及离子钙水平均在正常范围内；6例行上消化道造影的患儿，5例诊断为胃食管反流。 结论 新生儿喉喘鸣非常容易误诊，必须排除引起喉喘鸣的其他病理因素(如占位病变，先天性综合征等)方可拟诊先天性单纯性喉喘鸣；新生儿甲状舌管囊肿是新生儿喉喘鸣的常见原因之一；建议将喉镜检查作为喉喘鸣患儿的常规筛选手段，有条件者可进行喉部CT扫检查。

目的 探讨新生大鼠缺氧缺血性(HI)脑损伤后HBO干预的最佳时间窗。 方法 84只7日龄SD大鼠随机分为7组：假手术组(sham)、HI组、HI(1 h)＋HBO组、HI(3 h)＋HBO组、HI(6 h)＋HBO组、HI(12 h)＋HBO组、HI(24 h)＋HBO组，应用单次高压氧(2.5 ATA, 1.5 h)进行干预。观察大鼠HI后48 h皮质区和海马CA1区神经元密度的改变以及大鼠在5周龄的感觉运动功能和6周龄的记忆功能的改变。 结果 HI后48 h，HI(1 h)＋HBO组、HI(3 h)＋HBO组、HI(6 h)＋HBO组3组大鼠皮质区和海马CA1区的神经元密度明显高于HI组(P<0.05)；HI(12 h)＋HBO组和HI(24 h)＋HBO组与HI组比较差异没有统计学意义(P>0.05)。在5周龄的感觉运动功能测试中，HI(1 h)＋HBO组、HI(3 h)＋HBO组、HI(6 h)＋HBO组3组在握力试验和转杆试验中，各组的抓握时间和停留时间均明显长于HI组(P<0.05)；而HI(12 h)＋HBO组和HI(24 h)＋HBO组与HIBD组比较，差异没有统计学意义(P>0.05)。在6周龄的记忆功能测试中，HI(1 h)＋HBO组、HI(3 h)＋HBO组、HI(6 h)＋HBO组3组在测试期的跳台潜伏期明显长于HI组(P<0.05),而HI(12 h)＋HBO组和HI(24 h)＋HBO组与HI组比较，差异没有统计学意义(P>0.05)。 结论 单次高压氧(2.5 ATA, 1.5 h)治疗新生大鼠HIBD的最佳时间窗在HIBD后的6 h之内。

目的 探讨别嘌呤醇对未成熟鼠脑白质损伤的保护作用。 方法 将新生1日龄SD大鼠84只随机分为假手术组(Sham)(n＝28)、双侧颈总动脉结扎(BCAO)组(n＝28)及别嘌呤醇干预组(ALLO)(n＝28)，BCAO制作脑白质损伤模型。观察BCAO后7 d(P7，每组各6只)和14 d(P14，每组8只)脑组织病理改变及MBP免疫组化变化；RT-PCR荧光定量法检测P7(每组6只)和P14 (每组8只)脑组织MBP-mRNA的表达。 结果 BCAO组白质改变明显，ALLO组较之明显减轻；P14平均脑室大小指数，ALLO组较(2.44±0.71)% BCAO组(3.27±0.73)%明显减小(P<0.05)。P14 MBP阳性染色光密度值，BCAO组(6.60±0.68)较Sham组(9.40±0.53)明显降低(P<0.01)，而ALLO组(7.10±0.18)较BCAO组明显升高(P<0.05); P7、P14 MBP-mRNA拷贝数(log10)，BCAO组和ALLO组均明显低于Sham组(P<0.01)，而ALLO组则较BCAO组明显升高(P<0.05)。 结论 利用1日龄大鼠行BCAO可较好地制作早产儿脑白质损伤模型。别嘌呤醇对缺血引起的未成熟大鼠脑白质损伤具有保护作用。

目的 了解北京地区婴幼儿急性呼吸道感染是否与一种新发现的冠状病毒——HCoV-NL63相关。 方法 选取2003年12月—2004年3月，从首都儿科研究所附属儿童医院收集的245份因急性呼吸道感染就诊的门诊患儿的咽拭子标本以及住院患儿的鼻咽洗液标本，进行HCoV-NL63的筛查。这些标本已经过间接免疫荧光法和病毒分离检测，常见的七种呼吸道病毒(包括RSV，甲、乙型流感病毒，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型副流感病毒和腺病毒)检测均为阴性；同时还经逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测人偏肺病毒(hMPV)也为阴性。首先用位于HCoV-NL63 1b基因的两对引物用巢式PCR方法进行筛查，阳性者再用位于HCoV-NL63 1a基因的两对引物扩增进行复核。对用HCoV-NL63 1a基因扩增的长片段产物进行测序并与GenBank中相关序列进行比较分析。 结果 用HCoV-NL63 1b基因的引物经巢式PCR方法从245份标本中检测到3份阳性标本，阳性率为1.2%。3份阳性标本用HCoV-NL63 1a基因的两对引物经巢式PCR方法进行复核均得到阳性结果，这3份标本均取自住院患儿，患儿年龄分别为4个月、1岁和1岁5个月，临床诊断分别为毛细支气管炎、喉炎和支气管炎，男女比例为2∶1。对其中基因扩增产量较高的BJ3140和BJ3787的1a基因长片段扩增产物(838 bp)进行序列测定和分析的结果显示，这两株HCoV-NL63与GenBank公布的不同地区的HCoV-NL63的1a基因序列同源性最高，达到98%～99%。基于部分1a基因序列的系统进化分析显示，BJ3140和BJ3787属于HCoV-NL63的第一簇(group 1)。 结论 结果提示北京地区部分婴幼儿的急性呼吸道感染与HCoV-NL63相关。

目的 探讨溶血性尿毒症综合征(HUS)患儿渡过急性期后如何促进肾功能的修复、延缓肾损害进程，探讨HUS急性期后的治疗方法。 方法 分析1993年至2005年我科收治的17例HUS患儿的临床资料。13例接受急性期后治疗患儿除用血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)和限制蛋白质摄入外，参照中华医学会儿科学分会肾脏病学组制定的"小儿肾小球疾病的临床分类、诊断及治疗"(方案)，按临床分型、对泼尼松治疗的反应及病理类型拟定治疗方案。2例临床表现为肾小球肾炎的患儿中1例应用雷公藤多甙。11例表现为肾病综合征的患儿均用泼尼松；其中5例泼尼松治疗不缓解或部分缓解者，加用环磷酰胺冲击(4例)或甲泼尼龙冲击(1例)治疗；3例因肾组织病理改变为膜增殖＋/-局灶节段性肾小球硬化、新月体形成，加用甲泼尼龙冲击。 结果 随访2个月～8年，轻型4例(1例复发1次)血压、血尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr)及尿常规均正常。重型9例中6例血压、BUN、Cr、尿常规正常；3例持续尿检异常，肾功能不全，且没有坚持治疗，分别于病程的第3、9和13个月死亡。4例(均为重型)放弃治疗者分别于病程的第27～48天死亡。 结论 对渡过急性期的HUS患儿依据其临床分型和肾病理改变参照肾脏病学组制定的方案治疗有望改善预后。除急性期病情轻重、治疗的合理性影响预后外，患儿家长对治疗的依从性也是一个重要因素。

目的 回顾性分析62例舌尖音发音缺陷患儿的临床资料，为此类发音缺陷疾病的评估和治疗提供参考。 方法 对62例3.0～8.0岁舌尖音发音缺陷儿童，采用图片词汇测试评估其语言理解能力；采用发育或智能测试评估其非言语智商(发育商)和认知发育水平；采用普通话语音测试评估其语音状况。给予患儿语音治疗，每周1～2次，每次约60 min。治疗时，根据发育进程确立目标语音，采用语音定位法让儿童对正确的发音部位和方式有清晰的认识。对存在口腔运动功能障碍的儿童，改变食物的质地并分别给予口腔功能训练。 结果 按发音部位分类，舌尖音发音缺陷分为四种类别，以混合性发音异常最为常见，共40例(64.5%)；其他依次为舌尖中音异常15例(24.2%)；舌尖后音4例(6.5%)和舌尖前音3例(4.8%)。发音错误形式分为三类，舌后音化59例(95.2%)；省略音化19例(30.6%)；不送气音化8例(12.9%)。临床上部分患儿存在口腔运动功能障碍；部分患儿存在进食问题，如食物偏软、常含在口中、进食慢、咀嚼不充分。经5～18次治疗，82.3%患儿有显著疗效。 结论 舌尖音发音缺陷分为四种表型，以混合性发音异常最为常见。发音错误形式分为三类，以舌后音化最多见。治疗宜采用语音定位法让儿童认识正确的发音部位和方式。对存在进食问题和口腔运动功能障碍的儿童，需改变食物的质地并进行必要的口腔功能训练。

目的 探讨中药黄芩苷体外诱导人脐血间充质干细胞(MSCs)向神经元样细胞分化的可行性及其可能的机制。 方法 采集健康孕妇足月顺产儿的脐带血，共5人份，以肝素抗凝，采用明胶沉降加密度梯度离心两步法分离脐血单个核细胞，加入含黄芩苷50 μmol/L的液体培养体系中进行扩增培养。取黄芩苷体外扩增2周的人脐血MSCs，采用黄芩苷诱导24 h后，继续维持诱导6 d，诱导30 min后开始在倒置显微镜下动态观察脐血MSCs生长情况及诱导前后形态学变化。免疫细胞化学染色评价神经细胞特异性烯醇化酶(NSE)，微管相关蛋白2(MAP-2)阳性细胞的表达。诱导液(DMEM培养基，200～400 μmol/L黄芩苷)，37℃，5%CO2诱导24 h。维持诱导液(DMEM培养基，200～400 μmol/L黄芩苷，B27)继续维持诱导1周。实验共分4组，分别为诱导组；对照1组(诱导液和维持液均不含黄芩苷)、对照2组(诱导液和维持液含3 mmol/L的β-巯基乙醇，不含黄芩苷)、对照3组(诱导液和维持液含20 g/L二甲基亚砜和20 mmol/L丁化羟基苯甲醚，不含黄芩苷)、对照4组(诱导液和维持液均含有上述浓度的黄芩苷、β-巯基乙醇、二甲基亚砜和丁化羟基苯甲醚)，各组分别在诱导6 h、24 h、7 d留取标本，制作细胞爬片，细胞固定后，免疫细胞化学染色评价NSE和MAP-2阳性细胞的表达率；Hoechest 33 258染色，评价细胞存活率。 结果 诱导组诱导6 h后，细胞微丝收缩，原来梭形的脐血MSCs胞体已发生收缩，细胞边缘变得不规整，出现了细的突起。7 d后多数细胞成锥形，交织成网，形成较典型的神经元细胞样形态结构，免疫细胞化学染色显示黄芩苷诱导组NSE、MAP-2阳性细胞表达率以及细胞存活率分别为(76.3±9.2)%、(78.5±5.5)%、(85.3±4.8)%,显著高于对照1、2、3组(P<0.01)，分别为(4.6±0.6)%、(0.7±0.6)%、(46.7±9.2)%；(63.3±6.8)%、(40.9±5.1)%、(66.5±5.2)%和(71.6±4.7)%、(42.3±4.5)%、(72.8±7.6)%。此外，各组胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达率均低于1%。 结论 低浓度的黄芩苷体外扩增2周后的MSCs中已有少量表达NSE的阳性细胞出现，这在一定程度上黄芩苷起到了预诱导分化作用；黄芩苷能够体外诱导脐血MSCs分化为神经元样细胞，诱导过程中黄芩苷的诱导作用温和、稳定而持久；诱导出的神经元样细胞成活时间长，其诱导机制可能与黄芩苷的抗氧化、调控细胞NF-κB的活性从而刺激多种细胞因子的表达和生成有关。

目的 1998—2004年，广州脐血库向国内25家移植中心提供非亲缘性脐血治疗恶性及非恶性肿瘤性疾病患者65例，对其进行回顾性分析，探讨与非亲缘性脐血移植密切相关的影响因素。 方法 脐带血均采自广州市妇婴医院正常分娩的足月顺产产妇，脐血分离、冻存、复温方法参照纽约脐血库的标准及相关文献；选择脐血的依据是HLA相合程度及有核细胞数量。 结果 65例接受非亲缘性脐血移植的病例中，白血病49例，遗传缺陷性疾病16例；男性42例，女性23例；受者中位年龄10岁(1～33岁)；中位体重27 kg(10～67 kg)；HLA-A、B, DRB1匹配全相合9例，1个位点不合43例，2个位点不合13例；总有核细胞(TNC)中位输入量5.7×107/kg[(1.84～20.00)×107/kg]。移植后植入50例有核细胞总数(ANC>500/μl)，植入的中位时间为17.5 d(7～44 d)，植入率77%；41例受体发生GVHD，发生率为63%。30例长期存活(无病生存时间>365 d)，无病存活率为61%。 结论 非亲缘性脐血移植具有良好的临床应用前景。

目的 探讨急性特发性血小板减少性紫癜(acute idiopathic thrombocytopenic purpura, AITP)患儿外周血T细胞蛋白激酶C(protein kinase C，PKC)的活性变化及其与T细胞活化和血小板减少程度之间的关系。 方法 无菌采集35例急性ITP患儿及30例正常儿童外周抗凝血，用T淋巴细胞分离富集柱法分离纯化T细胞，分别用非同位素标记法检测T细胞PKC的活性变化，用流式细胞仪检测T细胞活化标志FasL蛋白的表达，血细胞计数仪计数血小板。 结果 急性ITP患儿T细胞PKC的总活性与正常儿童相比明显增强[(0.97±0.21) nmol/(min·ml) 、(0.55±0.13)nmol/(min·ml)，P<0.01]，T细胞活化标志FasL蛋白表达与正常儿童比较显著升高[Th FasL：(32.7±3.4)% 、(14.7±4.2)%；Tc FasL: (17.3±9.7)%、(11.6±8.5)%, P<0.01]，并且T细胞PKC的活性变化与Th FasL、Tc FasL的表达均呈显著正相关(r1＝0.68，r2＝0.53，P<0.05)，与血小板计数呈显著负相关(r＝-0.75，P<0.05)。 结论 急性ITP患儿外周血PKC活性增强可引起患儿T细胞的活化，活性T细胞增多可导致患儿血小板大量损伤，并引起临床症状，提示PKC信号传导在急性ITP的免疫病理机制中发挥重要作用。

目的 探讨砷剂(arsenic trioxide，ATO)和沙利度胺(thalidomide，THAL)单用及联用在人骨髓增生异常综合征(MDS)荷瘤小鼠体内抗瘤作用及其机制。 方法 (1)建立动物模型：取对数生长期人MDS细胞株MUTZ-1细胞接种于第一代4～6周龄SCID小鼠和裸鼠(BALB/CA-nμde)的肩胛皮下；用组织病理学、免疫组织化学(immunohistochemistry，IHC)、流式细胞术免疫学、染色体分析等方法对荷瘤组织来源及其生物学特性进行鉴定。动物传代，观察第二代61只SCID小鼠和8只裸鼠的成瘤率和成瘤潜伏期。(2)动物实验：随机取56只MDS荷瘤小鼠，分为治疗组40只(ATO、THAL单用及联用)和对照组16只(生理盐水和未治疗)；用病理学、IHC、微血管密度计数(microvessel density count，MVD)、DNA凝胶电泳、PI染色、TUNEL染色等多参数方法，观察药物对各组荷瘤小鼠生长、瘤体大小、生存期、存活率及细胞凋亡等影响。 结果 (1)动物模型的建立：SCID小鼠成瘤率(98.4%，60/61)明显高于裸鼠(62.5%，5/8)(P＝0.0027); SCID小鼠成瘤潜伏期(中位数12 d)较短；而裸鼠潜伏期明显延长(中位数26 d)(Z＝4.605，P<0.001)。荷瘤组织的来源鉴定结果证实为人源性的、保持了原细胞系(MUTZ-1细胞)生物学特性，表明动物模型建立成功。(2)动物体内实验：与对照组比较，大剂量ATO(7.5 μg)单用有较强的抑制荷瘤生长(F＝146.94，P＝0.000)和诱导凋亡作用(F＝30.10，P＝0.000)，但副作用较大，小鼠难以耐受；小剂量ATO(5.0 μg)单用亦有明显的抑瘤作用和诱导细胞凋亡作用、副作用较轻，小鼠平均生存期较长(F＝25.11，P<0.01)、疗效较好。大剂量ATO与THAL联用副作用大、小鼠平均生存期较短(P<0.01)，疗效不佳。THAL单用抑瘤有效，但显效较迟缓，其机制并非诱导细胞凋亡(P>0.05),而可能与抑制血管生成机制有关。 结论 (1)成功建立人MDS-SCID荷瘤小鼠模型；(2)小剂量(5.0 μg)ATO在MDS荷瘤小鼠体内抑瘤有效、副作用较轻，能延长荷瘤小鼠生存期、提高存活率，其机制与诱导细胞凋亡有关。