2005年 · 第43卷第11期

目的 分析并确定一个中国先天性肾病综合征(CNS)家系NPHS1基因突变及特征。 方法 对先证者及其家系成员采用聚合酶链反应(PCR)和DNA直接测序方法进行NPHS1基因突变检测，确定基因突变的位点。同时应用限制性内切酶酶切分析的方法，分析先证者及其家系成员和对照人群的基因组DNA，确定突变特征。 结果 在本家系的先证者发现同时存在NPHS1的G928A(D310N)、1893~1900del 8(CGAAACCG)和G2869C(V957L)的3个杂合突变。具有相同表型的姐姐(Ⅲ：11)与先证者的测序结果完全一致，而在表型正常的先证者的同父异母的大姐及对照样本均未发现这些突变。患儿母亲尿检正常，基因检测显示仅有第8外显子G928A突变；患儿父亲尿检也正常，基因检测显示仅存在第14外显子的1893~1900del 8和第21外显子的G2869C突变，没有第8外显子G928A突变。同时还在先证者发现了4种碱基变异：E117K (rs3814995)、S1105S(rs2071327)、IVS27＋45c>t和IVS8＋68 a>g，经比对前3种均为单核苷酸多态性，位于内含子内的变异(IVS8＋68 a>g)意义有待进一步研究。 结论 首次发现中国人CNS存在NPHS1基因突变，并证实致病突变为国际首次报道的3个杂合突变。

目的 探讨甲基丙二酸尿症肾脏损害的临床特点，以期提高认识，达到早期诊断、早期干预和改善预后的目的。 方法 对尿有机酸分析确诊的5例有肾脏受累的甲基丙二酸尿症患者的临床表现、生化特点以及诊疗情况进行分析。 结果 5例患者均有不同程度的肾小球及肾小管受累表现，其中2例有肾功能不全，肾脏受累可先于、同时或晚于神经系统受累。5例均为钴胺素反应型，治疗后肾脏损害得到不同程度的改善。 结论 对于不明原因的血尿、蛋白尿、肾功能下降的患者，特别应注意有无合并神经系统体征，尽早行代谢病筛查及尿有机酸分析，以免延误诊断。

目的 探讨幼年大鼠持续蛋白尿致肾损伤的不同时间点肾组织NF-κB亚单位P65/Rel-A及凝血酶敏感蛋白(TSP-1)、转化生长因子(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)和纤维连接蛋白(FN) mRNA动态表达的趋势。 方法 3周龄幼年Wistar雌性大鼠80只，分为BSA组(40只)和对照组(40只),采用BSA诱导制备蛋白负荷肾病模型；考马斯亮蓝比色测大鼠尿蛋白；HE染色评价肾组织常病理变化；原位杂交检测P65/Rel-A、TSP-1、TGF-β1及CTGF mRNA表达；Northern blot检测FN mRNA表达。SPSS10对实验数据进行统计学处理。 结果 (1)BSA组大鼠至3~4周蛋白尿达大量蛋白尿程度，肾间质炎症细胞浸润，肾小管蛋白管型形成，间质水肿，间质区加宽。(2)BSA组各级肾小管上皮细胞P65/Rel-A mRNA于细胞核的表达强度趋于增加，第1、2、3、4周半定量积分分别为： 2.33±0.20、2.76±0.12、2.96±0.19、 3.76±0.18(F＝37.34，P<0.01)。(3) BSA组TSP-1 mRNA表达第1、2、3、4周半定量积分分别为： 2.60±0.28、3.39±0.41、2.77±0.08、2.71±0.13，于第2周时达高峰(F＝11.14，P<0.01)。(4)伴随蛋白尿的加重，BSA组TGF-β1及CTGF的mRNA于各级肾小管上皮细胞表达趋势进行性增强，与对照组比较及自身各时间点比较差异均有统计学意义(P<0.01)。(5)Northern blot结果提示，BSA组FN mRNA于第2周明显上调，至第4周是对照组的3.6倍，是第1周的2.7倍，与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。 结论 大量持续蛋白尿过程中肾组织NF-κB信号途径活化，TSP-1、TGF-β1、CTGF的异常表达，肾间质FN的合成和异常集聚，可能是促进肾间质进一步损伤的机制之一。

目的 探讨在使用脉冲振荡肺功能(IOS)检测时，如何判断支气管舒张试验阳性。 方法 随机抽取发作期哮喘患儿156例，均进行最大呼气流量-容积和IOS测定，然后进行支气管舒张试验。以第一秒用力呼气容积(FEV1)和最大呼气中段流量(MMEF)作为金标准，分别计算IOS主要参数，即呼吸总阻抗(Zrs)、气道总粘性阻力(R5)、电抗(X5)在不同改善率水平时其对诊断的敏感度与特异度，并计算两种肺功能主要参数间的回归方程。 结果 吸入支气管舒张剂后，患儿肺功能显著改善，两种肺功能主要参数的改善率均存在显著相关(P<0.01)，其中X5改善率与最大呼气流量-容积曲线参数改善率相关性最强(相关系数分别为0.676、0.571)，Zrs次之。无论使用FEV1改善率≥15%，还是使用MMEF改善率≥30%作参照，IOS参数以Zrs、R5下降≥20%，X5下降≥30%作为舒张试验阳性有着较高的敏感度和特异度。回归方程结果显示，与FEV1改善15%、MMEF改善30%对应的Zrs、R5、X5的降低率分别为21.7%、21.3%；19.9%、19.5%；30.1%、29.6%。 结论 用IOS进行支气管舒张试验，只有在Zrs、R5下降≥20%，X5下降≥30%时，才能考虑作为试验阳性。

目的 探讨学龄前儿童用力肺活量测定的可行性，并建立儿童常规用力肺活量的正常参考值。 方法 对深圳地区3~6岁正常儿童343例(男性184例，女性159例),采用意大利COSMED公司生产的COSMED流量传感仪，参考美国胸科协会可接受曲线标准，测定用力肺活量(FVC)、0.5 s用力呼气容积(FEV0.5)、0.75 s用力呼气容积(FEV0.75)、1 s用力呼气容积(FEV1)、0.5 s用力呼气容积占用力肺活量比值(FEV0.5/FVC)、0.75 s用力呼气容积占用力肺活量比值(FEV0.75/FVC)、1 s用力呼气容积占用力肺活量比值(FEV1/FVC)、最大呼气中段流量(FEF25%~75%)、最高呼气流量(PEF)、最高吸气流量(PIF)、呼气时间(FET100%)等11个指标，并对各实测指标作多元逐步线性回归及曲线回归，得出回归方程式。比较本方程与国外Nystad方程对指定身高、体重、年龄的儿童的差异。 结果 所有儿童测试的总成功率为81.3%，其中3~岁、4~岁、5~岁、6~岁各年龄段测试的成功率分别为69.9%、70.8%、92.3%、91.6%；217例(77.7%)可以完成至少2条可接受的曲线。FVC、FEV0.5、FEV0.75、FEV1、FEF25%~75%、PEF、PIF在各年龄组间差异均有统计学意义(P均<0.01)；大多数肺功能指标与身高、体重和年龄均呈密切正相关，男性儿童的大多数肺功能指标与身高的关系最为密切，而女性儿童的大多数肺功能指标则与年龄的关系最为密切。所有儿童的呼气时间为(1.61±0.52) s(±s)，5百分位数为0.9 s，受试儿童中有18例(6.5%)呼气时间<1 s。建立了各肺功能指标的多元回归方程。 结论 利用儿童心理特点，通过形象比喻、竞赛游戏的方法进行用力肺活量的测定在中国的学龄前儿童中也是可行的。男性儿童肺功能指标受身高变化影响大于体重和年龄变化；女性儿童肺功能指标受年龄变化影响大于身高和体重变化；首次建立了中国深圳地区学龄前儿童用力肺活量正常值及其回归方程式。

目的 探讨免疫球蛋白对戊四氮致惊大鼠海马神经元死亡及IL-1β和IL-1ra表达的影响。 方法 在Wistar大鼠腹腔内注射戊四氮(pentylenetetrazol, PTZ)诱发大鼠惊厥发作，制作癫癎模型。将45只大鼠随机分为3组，正常对照组，PTZ静脉注射免疫球蛋白组(PTZ-IVIG)，PTZ-生理盐水组(PTZ-NS)。经HE和TUNEL染色，在光镜下，观察神经细胞死亡，采用免疫组织化学方法检测神经细胞内IL-1β和IL-1ra表达。 结果 海马CA1区IL-1β/ IL-1ra比值PTZ-IVIG组(0.5±0.1)较PTZ-NS组(1.9±0.5)低，两者比较差异有统计学意义(t＝12.9，P<0.05)。PTZ-IVIG组海马CA1区凋亡细胞数较PTZ-NS组少，阳性细胞数前者为(16.4±3.3)个/1000 μm2，后者为(41.7±3.5)个/1000 μm2，两者差异有统计学意义(t＝27.1，P<0.05)。PTZ-IVIG组海马CA1区坏死细胞数少，为(19.0±2.6)个/1000 μm2，PTZ-NS组为(42.3±4.9)个/1000 μm2，两者差异有统计学意义(t＝20.9，P<0.05)。 结论 免疫球蛋白具有抑制惊厥所致的神经元死亡的作用，其作用可能机制为调节神经细胞内白介素1网络系统。

目的 研究中药金银花水提物(以下简称金银花)对卵清蛋白(OVA)致敏小鼠的免疫调控作用，探索中药治疗食物过敏的可行性。 方法 取BALB/c小鼠40只，均分为5组，每组8只，按照肠道激发后灌服不同浓度的金银花水提物分为100 mg/100 ml(H)、50 mg/100 ml(M)、25 mg/100 ml(L)浓度组，激发后不给药组(Ch)，以及正常生理盐水(NS)对照组。取空肠行HE及甲苯胺蓝染色；组织荧光法测定小肠组胺含量； ELISA法测定外周淋巴组织单个核细胞(PLNMC)培养上清液中白细胞介素4(IL-4)、γ干扰素(IFN-γ)及血清OVA特异性IgE(OVA-sIgE)水平；RT-PCR测定PLNMC中IL-12p40 mRNA表达；足垫肿胀实验检测迟发型超敏反应。 结果 H、M组浓度的金银花水提物可缓解过敏小鼠小肠绒毛炎症，减轻肥大细胞聚集和脱颗粒，提高固有层完整肥大细胞比率，减轻过敏小鼠肠道组胺释放，降低过敏小鼠体内IL-4、OVA-sIgE水平及IL-4/IFN-γ比值，抑制PLNMC中IL-12 mRNA表达；三种浓度金银花可缓解OVA介导的小鼠足垫迟发性超敏反应(DTH)。 结论 证实金银花水提物可参与OVA致敏小鼠的免疫调控，对缓解OVA介导的小鼠IgE及细胞介导的变态反应有利，用于食物过敏治疗具有潜在研究价值。

目的 构建针对人类呼吸道合胞病毒(RSV)M2-1基因mRNA的pshRNA表达载体，并在培养细胞内观察其对RSV复制的影响，为从基因水平抑制RSV感染的研究奠定基础。 方法 将构建成功的表达载体pshRNA7816转染Hep2细胞，然后利用光镜观察pshRNA7816对RSV致Hep2细胞病变效应的影响，空斑实验检测RSV滴度变化以及四甲基偶氮唑盐比色实验检测pshRNA7816对被RSV感染后细胞的保护作用。 结果 成功构建了针对RSV M2-1基因mRNA的pshRNA7816载体质粒，研究发现pshRNA7816能明显改善RSV所致的病变效应，降低RSV在细胞内复制的病毒滴度，并且能明显提高被RSV感染后细胞的存活率(P<0.001)，非特异性质粒无抗RSV效应。 结论 针对RSV M2-1基因的pshRNA7816的载体质粒具有明显的和特异性的抗RSV效应的作用。

目的 探讨儿童型纤维肌痛综合征(FMS)的临床特点。 方法 对1997年3月—2004年11月间我院收治的6例FMS患儿的临床表现、实验室检查以及治疗效果进行回顾性分析，并复习国内外文献。 结果 6例FMS患儿中，5例女性患儿均以腹痛起病，1例男性患儿以广泛性疼痛及左膝关节痛起病，均误诊为其他疾病。6例FMS患儿均有全身弥漫性疼痛(平均疼痛得分8.8，压痛点数13.7个)、疲乏、睡眠障碍、气温下降及活动后疼痛加重，出现关节痛、肌痉挛、腹痛、肠激惹征及尿急各有5例患儿，痛经4例，抑郁3例，晨僵、感觉异常及焦虑各2例。实验室和器械检查基本正常，治疗效果尚可。 结论 儿童FMS临床并非少见，应引起重视，避免误诊。