2005年 · 第43卷第06期

目的 观察重症肺炎患儿肺泡灌洗液(BALF)中成熟树突状细胞(DC)的数量及与白细胞介素12(IL-12)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、临床炎症评分的关系，了解DC在重症肺炎发病机制中的作用。 方法 依据病情轻重将患儿分为重症肺炎组(27例)，轻症肺炎组(30例)，同期外科收治患儿29例为对照组。重症肺炎组和对照组取BALF测定成熟DC，重症肺炎组和轻症肺炎组进行临床评分。ELISA法检测血清TNF-α、IL-6、IL-12。 结果 (1)插管当天重症肺炎组BALF中成熟DC百分率[%，中位数(P5~P95)][14.2(3.9~51.8)]高于对照组[1.3(0.2~22.5)](Z＝5.44，P<0.01)。(2)重症肺炎组中IL-12[117.0(79.9~159.4) ng/L]、TNF-α[90.6(52.2~185.9) ng/L]、IL-6[128.7(73.3~793.8) ng/L]浓度高于轻症肺炎组的IL-12[71.6(19.4~196.8)]、TNF-α[26.6(2.5~113.9)]、IL-6[39.9(7.8~82.5)](P均<0.01)，并高于对照组的IL-12[6.4(12.2~92.0)]、TNF-α[6.4(1.8~91.9)]、IL-6[23.0(6.4~54.2)](P均<0.01)。轻症肺炎组浓度均高于对照组(P<0.01)。(3)相关分析：插管当天成熟DC百分率与IL-12、TNF-α、IL-6和急性肺损伤评分均呈显著正相关(r分别为0.48、0.58、0.51和0.39，P均<0.01)，与儿童重危评分无显著相关性(r＝-0.11，P>0.05)。 结论 (1)儿童重症肺炎中存在着促炎症细胞因子的过度分泌与肺部树突状细胞过度成熟、活化。(2)肺部树突状细胞的过度成熟、活化与促炎症细胞因子水平、病情严重程度密切相关，表明其在重症肺炎发病机制中起重要作用。

目的 观察布地奈德对反复暴露于变应原的致敏豚鼠气道变应性炎症和细胞外基质沉积的影响。 方法 雄性Hartley系豚鼠共32只，分为4组。A组：反复卵白蛋白(OVA)暴露组；B组：反复OVA暴露＋布地奈德(BUD)干预组；C组：中断OVA暴露＋中断BUD干预组；D组：正常对照组。实验8周时对各组支气管肺泡灌洗液行细胞分类计数及肺组织切片气道嗜酸细胞计数，免疫组织化学染色检测并定量分析气道壁沉积的纤维黏连蛋白和Ⅲ型胶原。 结果 (1)支气管肺泡灌洗液嗜酸细胞数：A组、B组高于C组和D组(P<0.01),且A与B，B与C间差异有统计学意义。(2)各级气道壁浸润的嗜酸细胞：A、B组高于C、D组，且中小气道A与B，B与C间差异有统计学意义。(3)中小气道纤维黏连蛋白灰度值：A组(中气道122±22，小气道135±29)、B组(中气道174±23，小气道165±41)低于C组(中气道219±34，小气道236±20)和D组(中气道229±20，小气道220±16)(P均<0.05), A与B，B与C间差异有统计学意义。(4)中小气道Ⅲ型胶原灰度值：A组(中气道153±21，小气道133±23)、B组(中气道174±22，小气道176±20)低于C组(中气道189±14，小气道191±14)、D组(中气道200±18，小气道198±20)(P均<0.05)，且A与B间差异有统计学意义。 结论 在反复暴露于OVA的情况下持续BUD干预仅能部分抑制豚鼠慢性哮喘模型的气道变应性炎症和细胞外基质沉积，而早期BUD干预并中断OVA暴露可能完全抑制这类变化。

目的 研究糖皮质激素(地塞米松)对哮喘豚鼠血浆、肺组织中神经激肽A(NKA)含量的影响及其分子机制。 方法 用吸入卵蛋白致敏及激发诱喘方法制作豚鼠哮喘模型30例，随机分成地塞米松腹腔注射治疗组及非地塞米松治疗组，各15例；正常对照组15例，以生理盐水替代卵蛋白雾化溶液吸入及地塞米松腹腔注射；用ELISA方法检测各组血浆及肺组织中NKA含量；用反转录多聚酶链式反应检测肺组织中NKA mRNA相对含量。 结果 (1)非地塞米松治疗组哮喘豚鼠血浆NKA含量为[(2.20±0.46) ng/ml]，肺组织中NKA含量为[(5.02±2.11) ng/g蛋白]，肺组织中NKA mRNA表达为(1.10±0.06)，均高于正常对照组豚鼠[(0.84±0.33) ng/ml，(2.56±0.80) ng/g蛋白，(0.30±0.04)],差异有统计学意义(P均<0.001)；(2)地塞米松治疗组哮喘豚鼠血浆NKA含量为[(0.98±0.23) ng/ml]，肺组织中NKA含量为[(2.71±0.50) ng/g蛋白]，肺组织中NKA mRNA表达为(0.35±0.07)，均低于非地塞米松治疗组哮喘豚鼠，差异有统计学意义(P均<0.001)；地塞米松治疗组与正常对照组比较，各指标差异无统计学意义(P均>0.05)。 结论 (1)哮喘豚鼠肺组织中NKA mRNA表达上调，血浆及肺组织中NKA含量明显增高；(2)糖皮质激素具有显著降低哮喘豚鼠血浆、肺组织中NKA含量的作用，其机制与糖皮质激素下调肺组织中NKA mRNA的表达有关。

目的 探讨IL-4基因VNTR区的基因多态性与小儿激素敏感性肾病综合征复发的关系。 方法 选择激素敏感性肾病综合征患儿55例，按发病后1年疾病复发情况分为频复发组28例和非频复发组27例(40例有肾活检资料)。对照组115例，选自健康献血员。采用聚合酶链式反应(PCR)及PCR产物测序方法，检测患儿与对照组IL-4基因VNTR区的基因型别。对48例患儿于发病初(频复发组23例，非频复发组25例)检测其血清IgE水平。 结果 (1)激素敏感性肾病综合征患儿和对照组IL-4基因VNTR区的基因型的分布差异无统计学意义(P>0.05)。(2)频复发组B1B1分布频率(96.4%)明显高于非频复发组(66.7%)(P<0.05)。(3)发病初期血清中IgE水平：频复发组为(1.98±0.23)g/L，非频复发组为(1.05±0.19)g/L(P<0.05)。B1B1组IgE水平为(1.68±0.18)g/L，B1B2和B2B2组为(0.81±0.21)g/L(P<0.05)。 结论 激素敏感性肾病综合征患儿携带IL-4 VNTR区的B1B1基因型者，容易表现为频复发。

目的 探讨HBsAg阳性产妇新生儿外周血单个核细胞(PBMC)乙型肝炎病毒(HBV)感染率、影响因素及检测的临床意义。 方法 50例HBsAg阳性产妇和其新生儿为研究组，另18例血清乙肝标志物均阴性者为对照组。采用套式聚合酶链反应(n-PCR)法分别检测产妇、新生儿血清及PBMC HBV- DNA。 结果 HBsAg阳性母亲血清及PBMC HBV-DNA检出率分别为60.0%和40.0%；其新生儿血清及PBMC HBV-DNA阳性率分别为46.0%及30.0%；其中仅血清阳性10例，仅PBMC阳性2例，血清和PBMC均阳性13例。对照组母儿血清及PBMC中未检出HBV-DNA。新生儿PBMC HBV-DNA阳性率在母血清HBeAg、HBV-DNA阳性组高于阴性组(P<0.05，P<0.01)；母PBMC HBV-DNA阳性组高于阴性组(P<0.01)；母血清和PBMC HBV-DNA均阳性组高于仅血清阳性组(P<0.01)；新生儿血清HBV-DNA阳性组高于阴性组(P<0.05)。 结论 HBsAg阳性母亲新生儿HBV-DNA感染率为30.0%；其感染率与母、儿血清病毒血症水平及孕妇PBMC HBV-DNA状态有关，检测出新生儿PBMC HBV-DNA具有重要临床意义。

目的 从脐带血单个核细胞(CBMC)和CD3＋T淋巴细胞膜表面CD25、CD45RA、CD45RO分子表达的角度，探讨静脉免疫球蛋白(IVIG)对新生儿免疫功能的抑制机制。 方法 利用IVIG和植物血凝素(PHA)不同组合对CBMC或CD3＋T淋巴细胞进行刺激培养，再利用四色免疫荧光抗体标记-流式细胞技术检测细胞表面CD25、CD45RA、CD45RO分子的表达情况。 结果 IVIG可以抑制PHA诱导的CBMC的活化，表现为CD25分子表达的明显抑制；并且随着CD25分子表达的抑制，CD4＋细胞表面的CD45RO分子的表达也被抑制，阻止了CBMC中的CD4＋CD45RA＋细胞向CD4＋CD45RO＋细胞转换。IVIG也可以抑制PHA诱导的脐带血CD3＋T淋巴细胞CD25分子和CD45RO分子的表达，但这种抑制程度远远不如对CBMC作用明显。 结论 IVIG可以抑制脐带血T淋巴细胞的活化过程，这种抑制作用除了与IVIG对T淋巴细胞的直接作用外，还可能通过了其他免疫细胞或免疫分子的间接介导。IVIG对CD4＋CD45RO＋ T淋巴细胞的抑制作用可能是IVIG抑制B淋巴细胞免疫球蛋白释放的重要机制之一。新生儿期应用IVIG有可能使免疫功能低下加重。

目的 观察弗氏完全佐剂(CFA)引起的慢性疼痛对幼鼠空间学习记忆行为及海马Bcl-2 mRNA、脑源性生长因子(BDNF)mRNA基因表达的影响，探讨慢性疼痛对幼鼠空间学习记忆能力的影响及作用机制。 方法 新生SD大鼠60只，随机分为疼痛组和对照组，每组30只。在幼鼠出生后2天，疼痛组左足底皮下注射CFA 20 μl，对照组注射0.9%生理盐水20 μl。分别在出生后10天和21天，每组各取10只处死取海马，采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测海马Bcl-2 mRNA、BDNF mRNA表达的变化。出生后21天，每组剩余的10只进行Morris水迷宫实验。 结果 Morris水迷宫实验中，疼痛组幼鼠寻找隐蔽平台的潜伏期较对照组延长(P<0.05)；在空间探索实验中，疼痛组幼鼠在平台所在象限游泳的时间和路径比例，均小于对照组(P<0.05)。两组可视平台实验的潜伏期差异无统计学意义(P>0.05)。在出生后10天，疼痛组海马Bcl-2 mRNA和BDNF mRNA的表达均小于对照组(P<0.05)；在出生后21天，疼痛组与对照组比较差异均无统计学意义。 结论 CFA引起的慢性疼痛可使幼鼠空间学习记忆能力下降，海马Bcl-2 mRNA、BDNF mRNA的改变可能参与了慢性疼痛影响幼鼠学习记忆的机制。

目的 研究我国X连锁无丙种球蛋白血症(XLA)患者Bruton′s酪氨酸激酶(BTK)基因的突变类型。 方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)，获得7例XLA患者cDNA。使用8对不同引物分2步扩增BTK cDNA，PCR产物测序。突变结果通过对DNA外显子相应部位扩增、测序证实。对其中4例母亲进行基因分析。 结果 7例患者的基因突变均位于BTK基因的编码区，3例在BTK的血小板-白细胞C激酶底物同源区，2例位于酪氨酸激酶区，其他2例分别位于Src同源区2和Src同源区3。突变包括：错义突变、无义突变、重复序列和片段缺失。除错义突变引起单一BTK氨基酸改变外，突变还分别造成终止密码子形成和阅读框架移位。其中4例为未见报道的新突变。进行基因分析的4例母亲中，3例为携带者。 结论 本组患者临床表现为典型XLA，检测出的7种突变均位于BTK基因编码区，其中4种是未见报道的新突变。XLA可以通过基因分析进行确诊以区别与其他低丙种球蛋白血症。

目的 研究幽门螺杆菌(Hp)感染儿童胃窦黏膜T淋巴细胞CD4＋、CD8＋及CD4＋/CD8＋的变化。 方法 流式细胞仪(FCM)直接免疫荧光法测定79例慢性浅表性胃炎(CSG)患儿(Hp＋44例，Hp-35例)胃窦黏膜及其中33例(Hp＋12例，Hp-21例)患儿外周血的T淋巴细胞CD4＋、CD8＋变化。所有患儿均行内镜检查并取胃窦黏膜作快速尿素酶试验、组织病理学检查及胃窦黏膜单个核细胞提取。33例儿童同时抽取外周静脉血2 ml。提取的胃窦黏膜及外周血单个核细胞经异硫氰酸荧光素标记CD3(CD3-FITC)、藻红蛋白标记CD4(CD4-PE)、多甲藻(黄)素叶绿素蛋白标记CD8(CD8-PerCP)单克隆抗体染色后行流式细胞术测定，其中胃窦黏膜T淋巴细胞的检测以CD3设门。 结果 (1)胃窦黏膜CD3＋细胞的检出率分别为：Hp-CSG组(3.26±1.98)%，Hp＋CSG组(4.37±1.97)%。(2)胃窦黏膜CD3＋细胞中CD4＋，CD8＋的相对百分比及CD4＋/CD8＋值分别为：Hp-CSG组为(23.74±10.37)%，(47.04±12.00)%，0.52±0.23，Hp＋CSG组为(40.28±11.35)%，(27.91±8.84)%，1.55±0.52。Hp＋CSG组胃窦黏膜CD4＋细胞相对百分比、CD4＋/CD8＋比值明显高于Hp-CSG组，CD8＋细胞相对百分比则低于Hp-CSG组(P均<0.01)。(3)两组外周血T淋巴细胞CD3＋(%)、CD4＋(%)、CD8＋(%)、CD4＋/CD8＋的比较差异无统计学意义。 结论 儿童Hp＋CSG的T淋巴细胞变化为局部胃窦黏膜的细胞免疫应答所致。

目的 探讨双歧三联活菌片治疗小儿腹泻的疗效和安全性。 方法 按照系统评价的要求全面检索了中国数字医院图书馆(www.chkd.cnki.net)、中国医学科学院的中国生物医学文献光盘数据库(CBMdisk)，对符合纳入标准的12篇文献共计1326名患者进行了Meta分析。 结果 发表性偏倚分析显示12篇文献的倒漏斗图是对称的。异质性检验，双歧三联活菌片组与抗生素组、抗病毒药组、空白对照组具有临床及统计学上的同质性(P＝0.66、0.67、0.85，I2＝0%)，可用固定效应模型进行分析；双歧三联活菌片组与蒙脱石粉组不具有统计学上的同质性(P＝0.02，I2＝70.9%)，故用随机效应模型进行分析。合并分析显示：双歧三联活菌片组与抗生素组、抗病毒药组、空白对照组比较，疗效的差异有统计学意义，而双歧三联活菌片与蒙脱石粉的疗效差异无统计学意义。 结论 从现有的临床证据来看，双歧三联活菌片治疗小儿腹泻有效，安全性可能较高，但还需要严格设计的、大样本的随机双盲对照试验来进一步验证和支持。