2005年 · 第43卷第05期

目的 探讨串联质谱技术在遗传性代谢病高危儿童有机酸血症筛查和诊断中的意义。 方法 遗传性代谢病高危儿童1000例，男642例，女358例，年龄中位数为2岁(5天~15岁),手指采血，滴于滤纸片上。取直径3 mm的干血滤纸片放入96孔聚丙烯板，经含酰基肉碱内标的甲醇萃取，盐酸正丁醇衍生后，进行串联质谱分析。 结果 1000例高危儿童中筛查并诊断有机酸血症40例(4.0%)，其中甲基丙二酸血症20例，丙酸血症6例，异戊酸血症3例，戊二酸血症Ⅰ型3例，戊二酸血症Ⅱ型3例，3-甲基巴豆酰辅酶A羧化酶缺乏症1例，3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A裂解酶缺乏症1例，生物素酶缺乏症2例，β-酮硫解酶缺乏症1例。患儿临床表现主要为运动和智力发育落后、抽搐、意识障碍、肌张力低下、呕吐和喂养困难等。常规实验室检查主要表现为酸中毒、高血氨、高乳酸血症和低血糖等。 结论 串联质谱技术能够通过检测血滤纸片中的不同酰基肉碱浓度，对部分有机酸血症进行快速筛查和诊断，结合尿气相色谱/质谱技术，有助于提高有机酸血症诊断的准确性。

目的 探讨尿素循环障碍的发生情况、病因、发病、临床经过与实验室特点。 方法 以254例高氨血症患儿中发现的26例(10.2%)尿素循环障碍为对象，通过血液氨基酸分析、气相色谱-质谱联用尿有机酸分析、串联质谱法血液酯酰肉碱谱分析进行病因诊断，3例瓜氨酸血症Ⅱ型患儿通过肝脏病理分析进一步鉴别诊断。 结果 26例尿素循环障碍患儿中鸟氨酸氨甲酰基转移酶缺乏症15例(57.7%)，瓜氨酸血症Ⅰ型5例(19.2%)，瓜氨酸血症Ⅱ型3例(11.5%)，精氨酸血症3例(11.5%)。26例中3例(11.5%)为新生儿期发病，13例(50.0%)为婴儿期发病，7例(26.9%)于1~3岁发病，3例(11.5%)为6~13岁起病。11例(42.3%)有异常家族史。入院原因为惊厥、智力运动落后、呕吐、意识障碍9例(34.6%)，发作性呕吐、头痛、意识障碍8例(30.8%)，肝功能异常6例(23.1%)，3例(11.5%)瓜氨酸血症Ⅱ型表现为胆汁淤积性黄疸。患儿初诊时血氨58~259 μmol/L，20例(76.9%)伴不同程度的肝损害。4例为死亡后确诊，21例(80.8%)接受了治疗，其中6例病情一度缓解，因急性高氨血症性脑病或消化道出血死亡，1例肝移植术后排异反应严重，合并感染死亡。14例好转，其中1例接受了活体部分肝移植，现术后2年，全身情况良好。 结论 尿素循环障碍是先天性高氨血症的主要原因，本组254例高氨血症中26例(10.2%)为尿素循环障碍所致，患儿临床表现复杂，以严重神经系统损害及肝损害为主。建议对于原因不明的脑病、肝病患儿进行血氨检测及病因分析，早期发现尿素循环障碍，合理治疗。

目的 探讨四氢生物蝶呤(BH4)反应性苯丙氨酸羟化酶(PAH)缺乏症的临床诊断方法，进一步了解其临床特征，为该型患儿应用BH4药物治疗提供科学依据。 方法 73例高苯丙氨酸血症(HPA)患儿，男47例，女26例，平均年龄1.93个月。所有患儿都进行口服BH4负荷试验，同时进行尿蝶呤谱分析、红细胞二氢蝶啶还原酶测定。对其中血苯丙氨酸(Phe)浓度<600 μmol/L者给予口服Phe-BH4联合负荷试验，对部分BH4反应性PAH缺乏症患儿，在普食条件下给予BH4片剂(10~20 mg/kg)替代治疗6~7天，观察其疗效。 结果 (1)在BH4负荷试验中，不同类型HPA患儿的血Phe浓度表现出特征性的曲线改变， 22例诊断为经典型苯丙酮尿症(PKU)，39例中度PKU，12例四氢生物蝶呤缺乏症；(2)在中度PKU患儿中发现22例(56.4%)对BH4有反应；(3)6例BH4反应性PAH缺乏症患儿以BH4 10 mg/kg治疗6~7天，其中4例血Phe浓度能控制到正常或接近正常治疗水平，另2例BH4需增加到20 mg/kg使Phe浓度显著下降。 结论 在BH4负荷试验中，部分因苯丙氨酸羟化酶缺乏引起的中轻度PKU患儿对BH4有反应性，给予这些患儿BH4治疗可部分或全部替代低苯丙氨酸饮食治疗，拓宽了PKU的治疗方法，有助于提高患儿的生活质量。

目的 探讨孕母患自身免疫性甲状腺疾病对婴儿智能发育的影响因素。 方法 对77例孕母患自身免疫性甲状腺疾病的婴儿采用Gesell发育量表进行跟踪调查，采用病例对照研究的方法对可能影响婴儿应人能、应物能、粗动作能、细动作能发育的因素进行非条件Logistic回归分析。 结果 (1)孕母患自身免疫性甲状腺疾病的婴儿其应人能、应物能、粗动作能、细动作能发育落后，与健康孕母的婴儿比较差异有统计学意义(P<0.01),慢性淋巴细胞性甲状腺炎孕母的婴儿其细动作能、应物能的发育比Graves病孕母的婴儿差，二者比较差异有统计学意义(P<0.05)。(2)经多因素非条件Logistic回归分析筛选出婴儿体内的抗过氧化物酶抗体、母体内的促甲状腺激素受体抗体与婴儿的应物能、应人能，粗动作能有关，而母体内抗过氧化物酶抗体、孕期母亲甲状腺功能则与细动作能有关(P<0.05)。 结论 孕母患自身免疫性甲状腺疾病对婴儿的智能发育有影响。

目的 探讨X连锁肾上腺脑白质营养不良(X-linked adrenoleukodystrophy, X-ALD)的携带者筛查及产前诊断方法。 方法 应用气相色谱-质谱联用法对83例X-ALD可疑携带者血浆、9例高危孕妇羊水细胞及其中5例胎儿出生后的血浆中极长链脂肪酸(VLCFAs)水平进行了检测。应用PCR、测序方法对31例X-ALD可疑携带者及羊水细胞VLCFAs增高的男性及女性各1例进行了基因突变分析。 结果 83例X-ALD可疑携带者中，51例血浆VLCFAs水平增高，31例ABCD1基因突变分析，29例有突变。9例胎儿中，7例羊水细胞VLCFAs水平正常，2例增高(1例男性，1例女性)。5例出生后进行了血浆VLCFAs水平检测，结果与产前诊断结果相一致。 2例羊水细胞VLCFAs水平增高的胎儿，均有ABCD1基因突变，其核苷酸与氨基酸的改变分别为871G>A(E291K)和726G>A(W242X)。 结论 血浆及羊水细胞中VLCFAs水平检测结合基因突变分析可以准确地进行X-ALD携带者筛查及产前诊断。

目的 在中国19家新生儿重症监护病房开展猪肺表面活性物质治疗足月儿或近足月儿重症胎粪吸入综合征(MAS)多中心随机对照临床试验，判断其疗效和安全性。 方法 61例重症MAS患儿在生后36 h内入选试验，随机分为表面活性物质治疗组(PS，n＝31)和对照组(C，n＝30)。PS首剂给药量为200 mg/(kg·w)，重复给药时追加剂量为200、100、100 mg/kg。主要疗效评估指标为PS治疗后24 h氧合指数(OI)小于10，动脉/肺泡氧分压比值(a/A PO2)较用药前基础值增加100%；次要评估指标为机械通气时间、并发症发生率和存活出院的患儿数。 结果 两组患儿一般临床特征相似。在随机化治疗后24 h，与C组相比，PS组平均OI值降低(10.9 vs. 8.1)、有较多患儿a/A PO2较基础值增加100%(48% vs. 83%, P<0.01)、PaO2/FiO2曲线下面积更大[(3762±1877) vs. (2715±1644) mm Hg·h (P<0.05，1 mm Hg＝0.133 kPa)]。在治疗的3、7天，上述参数PS组仍优于C组。两组间在机械通气时间、主要并发症发生率和存活率上差异无统计学意义。 结论 表面活性物质治疗重症MAS能改善氧合，不增加并发症的发生。

目的 探讨视黄酸(RA)对儿童淋巴结B细胞成熟分化的影响，及其与视黄酸受体基因表达水平变化的关系。 方法 本组24例，按年龄分为<1岁组、1~3岁组和~5岁组，每组8例。取患儿正常淋巴结分离细胞进行体外培养，分为RA组，RA＋视黄酸受体α(RARα)拮抗剂(Ro41-5253)组(RA＋Ro)，脂多糖组(LPS)，(LPS＋RA)组和对照组。分别加入atRA、Ro41-5253 、LPS。培养24 、48 h收集细胞。采用流式细胞术分析细胞表面标志，观察B细胞的成熟分化；RT荧光定量PCR测定视黄酸受体基因mRNA。 结果 <1岁组，RA组成熟B细胞的百分比明显高于对照组(24 h：23%±5% vs 17%±3%；48 h：28%±6% vs 22%±4%)(P均<0.05)；LPS＋ RA组活化B细胞数明显高于LPS组(24 h：82%±10% vs 76%±8%；48 h：83%±8% vs 78%±10%)(P均<0.05)。同时，RARα基因表达水平也显著上调，而该受体拮抗剂可抑制RA的调节作用。1~3岁组淋巴结B细胞的成熟和活化呈现完全相同的调节变化，而~5岁组RA的这些调节作用不明显。 结论 RA能促进体外培养的淋巴结B细胞的分化发育和活化，该作用在3岁以下小儿明显。RARα基因的表达调节可能是介导RA作用的主要途径。

目的 了解苏州地区儿童肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae，Sp)临床分离株青霉素、红霉素耐药的状况。 方法 对呼吸道感染患儿痰标本中分离到的26株Sp进行青霉素、头孢呋辛、头孢曲松、头孢噻肟、红霉素E-test药敏试验，和与青霉素、红霉素耐药相关的pbp2B、ermB、ermA/B、mefA基因PCR检测，测得pbp2B基因产物进行测序并与Sp R6株(青霉素敏感株，登录号：NC-003098)序列比较。 结果 (1)pbp2B基因突变15株(58%)，均为点突变，突变类型有A型11株(73%)、B型2株(13%)、C型1株(7%)、D型1株(7%); (2)11株无突变菌中青霉素、头孢呋辛、头孢曲松、头孢噻肟敏感株分别为9株(82%)、10株(91%)、11株(100%)、11株(100%)；15株突变菌中青霉素、头孢呋辛、头孢曲松、头孢噻肟不敏感株分别为13株(87%)、11株(73%)、1株(7%)、1株(7%)；11株A型突变株对青霉素均不敏感，10株对二代头孢不敏感；(3)ermB基因阳性9株(35%)、ermA/B基因阳性16株(62%)、mefA基因阳性7株(27%)、erm或(和)mef基因阳性21株(81%); (4)erm或(和)mef基因阳性株红霉素最低抑菌浓度为2~>256 mg/L。 结论 pbp2B基因突变是本地区Sp青霉素耐药机制的主要遗传学基础之一；突变株中，A类突变率最高，表现对青霉素、二代头孢不敏感；ermA、ermB和mefA 3种红霉素耐药基因单独或共同表达均可致红霉素耐药；本地区Sp耐药菌已挑战青霉素、红霉素疗效。

目的 探讨谷氨酰胺(Gln)对慢性腹泻幼鼠肠黏膜修复的作用。 方法 40只21日龄Wistar幼鼠，随机分为5组，每组8只。用高乳糖饲料喂养模型组，制备慢性腹泻模型，基础饲料喂养对照组，14 d后处死模型组和对照组，以确证模型的建立。余Wistar幼鼠在造模成功后改基础饲料喂养，并分为自然恢复组、Gln干预组和正常组，继续观察7 d后处死。应用高效液相色谱法检测各组幼鼠血Gln浓度，光镜和电镜观察幼鼠小肠的形态学变化，应用免疫组化技术检测肠黏膜的增殖细胞核抗原(PCNA)表达。 结果 模型组腹泻率达100%，平均每日腹泻指数为1.16±0.06，对照组幼鼠腹泻率与腹泻指数均为0(P均<0.01)，说明模型制作成功。自然恢复组的体重、Gln浓度、绒毛高度、绒毛面积和PCNA数量均低于正常组(P<0.01)；Gln干预组体重、绒毛高度、绒毛面积仍低于正常组，但Gln浓度和PCNA数量已恢复至正常水平，与正常组比较差异无统计学意义(P>0.05)；Gln干预组除体重外，其余4项指标均高于自然恢复组(P<0.01)。 结论 慢性腹泻时，幼鼠出现营养不良，肠黏膜受损，肠黏膜增殖减慢，伴血Gln浓度下降；补充Gln可促进慢性腹泻后幼鼠的隐窝细胞增殖，使肠黏膜修复加快。

目的 总结双盘封堵器(Amplatzer)关闭年龄小、体重轻患儿的继发孔型房间隔缺损(ASD)的病例。 方法 1998年8月至2004年5月，165例5岁和18 kg以下小年龄组继发孔型ASD病例接受Amplatzer封堵器介入治疗。所有患儿均经临床体检、X线胸片、心电图、经胸超声心动图(TTE)确诊为继发孔型ASD。TTE观察和测量ASD和房间隔(IAS)最大径，测量球囊导管测量ASD最大伸展径，必要时加用食道超声(TEE)测定，筛选后的患儿依此选择封堵器。 结果 163例成功封堵ASD，成功率98.8%。本组ASD最大径(8~30 )mm ，平均(18.3±5.1)mm,选择封堵器直径(8~30) mm ，平均(18.6±5.0) mm，P>0.05。Qp/Qs＝3.3±2.0。147例(89.0%)为单纯单孔ASD病例；6例为多孔ASD，其中3例伴有房间隔瘤样改变，均用一个封堵器成功封堵ASD。另外12例合并其他心内畸形，其中6例合并肺动脉瓣狭窄(PS), 6例合并动脉导管未闭(PDA)。右心容量超负荷术后明显改善。本组中大ASD占60.0%(100)例。操作上有一定难度。 结论 Amplatzer封堵器关闭5岁以下儿童房间隔缺损是可行的，但不主张2岁以下行介入治疗。严格掌握适应证；良好的小儿心血管内外科条件是成功封堵的基本保证。

目的 探讨甲氧基聚乙二醇(mPEG)修饰供者小鼠骨髓移植物单个核细胞表面抗原对移植物抗白血病作用(graft-versusleukemia effect，GVL)的影响。 方法 小鼠随机分为A、B、C、D四组。A组单纯接受60Coγ照射；B、C、D组每只小鼠腹腔接种1×106 L615肿瘤细胞制成白血病模型；全部照射后，C、D组分别移植mPEG未修饰和修饰的骨髓、脾细胞悬液。观察小鼠一般反应、外周血涂片L615细胞计数、组织病理及生存时间。 结果 A组全部死于造血衰竭；B组死于白血病；C组全部出现明显移植物抗宿主病(GVHD)表现并死亡； D组部分小鼠(4/15)长期存活，11/15死于白血病，平均生存24.2天，长于其他组(P<0.05)，生存率27%，高于其他组(P<0.05)，两者差异有统计学意义。 结论 小鼠移植mPEG修饰骨髓移植物后保留了一定GVL作用，并且减轻GVHD。