2005年 · 第43卷第04期

目的 探讨早期干预对降低早产儿脑性瘫痪(简称脑瘫)发生率的作用。 方法 来自全国各协作单位的1053例早产儿按研究开始前、后的时间和家长意愿分为早期干预组(551例)和常规育儿组(502例)。干预组自早产儿出院开始除接受常规育儿指导外，通过家长对早产儿进行认知、语言、情感和交往能力培养，并重点进行按摩、体操和主动运动训练，出现运动异常者做相应康复训练。常规组只接受与干预组相同的常规育儿指导。 结果 两组男女比例、孕母并发症、平均胎龄和出生体重、小于胎龄儿的比例、单胎和多胎的比例、胎内窘迫、生后窒息、新生儿缺血缺氧性脑病和颅内出血的发生率、Apgar评分和纠正胎龄40周新生儿行为神经测查评分差异均无统计学意义(P>0.05)，说明两组有可比性。1岁时脑瘫发生率干预组为0.91%(5/551)，常规组为3.19% (16/502)(P<0.01)。干预组5例脑瘫患儿中3例为轻度，2例为重度；常规组16例中7例为中度，9例为重度。 结论 早产儿早期干预可降低早产儿脑瘫发生率，此结论有待扩大样本重复验证。

目的 探讨神经元移行异常(NMD)的临床特征和诊断依据。 方法 对37例NMD患儿的临床、影像和实验室资料进行分析，并进行随访。 结果 37例NMD中无脑回-巨脑回21例，主要临床表现为智力低下(20例)、癫(14例)和脑性偏瘫(6例)，头围小于正常同龄儿是一重要体征，占80%(17/21)；无脑回-巨脑回合并其他畸形8例；灰质异位5例，主要表现为癫(4例)；脑裂畸形3例，脑性偏瘫为其主要临床特征(2例)。16例脑电图中12例异常，全导阵发不规则尖棘慢波、慢波10例。本组随访18例，癫患儿14例，经抗癫药物治疗后均难以控制发作，运动发育有改善但语言发育障碍4例。 结论 NMD的临床特征以智力低下、癫及脑性偏瘫为主，头颅MRI是诊断本病的最佳检查方法。

目的 探讨内源性血红素氧合酶(HO)-一氧化碳(CO)系统对反复热性惊厥(febrile seizures，FS)脑损伤的影响。 方法 21日龄SD大鼠24只，随机分为3组：对照组、FS组和FS＋锌原卟啉Ⅸ(ZnPPⅨ)组。采用热水浴诱导大鼠FS，隔日诱导1次，共诱导10次。用双波长分光光度计间接测定大鼠血浆中CO含量；记录大鼠惊厥强度、潜伏期、持续时间及惊厥时的肛温；HE染色观察海马神经元形态学改变；电镜观察海马神经元超微结构的改变；尼氏染色对海马神经元进行半定量计数分析。 结果 反复FS后，血浆CO含量明显高于对照组，FS＋ZnPPⅨ组血浆CO含量较FS组低，与对照组比较无统计学意义；随着惊厥次数的增加，FS组大鼠惊厥持续时间呈延长趋势，FS＋ZnPPⅨ组大鼠惊厥潜伏期呈缩短趋势，惊厥持续时间较FS组长，惊厥强度和惊厥时的肛温两组差异无统计学意义；反复FS后，光镜和电镜下均发现海马神经元出现损伤改变，ZnPPⅨ的干预加重了神经元的损伤；反复FS后未见海马神经元的丢失，ZnPPⅨ的干预导致了神经元的显著丢失。 结论 内源性HO-CO系统对反复FS脑损伤发挥着重要的保护作用。

目的 探索空肠弯曲菌(Campylobacte jejuni，CJ)致外周神经损伤的关键结构，为CJ感染相关格林-巴利综合征的分子模拟理论提供动物实验证据。 方法 将32只豚鼠随机分为亲代株组(10只)、变异株组(10只)、对照组(6只)、PBS组(6只)，分别用亲代株及弗氏佐剂、galE变异株及弗氏佐剂、PBS及弗氏佐剂、单纯PBS进行全身免疫；动态检测血清细胞壁脂寡糖(LOS) IgG及神经节苷脂GM1 IgG抗体水平；检查坐骨神经病理改变，包括单纤维分离、半薄切片光镜及电镜检查。 结果 ①免疫后变异株组及亲代株组LOS IgG抗体水平均明显增高，两组间差异无统计学意义；②免疫后14、28 d，亲代株组GM1 IgG抗体滴度(0.661±0.290，0.984±0.025)明显高于变异株组(0.193±0.078，0.180±0.063)，差异均有统计学意义；③变异株组坐骨神经单纤维病变率4.9%(98/2000)，明显低于亲代株组(16%，320/2000)，差异有统计学意义，后者主要为轴索变性；④亲代株组半薄切片显示以轴索变性为特征的病理改变；变异株组仅见极少数异常，两组间差异有统计学意义；⑤电镜检查证实光镜所见。 结论 与亲代株相比，galE变异株缺失神经节苷脂GM1样表位，不能诱导动物产生GM1抗体及周围神经损伤，支持CJ感染后格林-巴利综合征发生的分子模拟理论。

目的 探讨布洛芬-安定混合溶液(IBU-DZP)经直肠给药的实效性和安全性。 方法 (1)动物实验：观察IBU-DZP直肠给药后在兔体内的药动学、对戊四氮诱发的大鼠实验性惊厥发作的止惊疗效、对酵母诱导的大鼠发热退热疗效，以及对直肠黏膜的刺激性；(2)临床观察：该混合溶液直肠给药后在儿童体内的初步药动学研究。 结果 (1)动物实验：IBU-DZP中的IBU和DZP均能经直肠迅速吸收，在兔体内分别约(11.7±1.2)min和(9.4±2.7)min达到峰值。IBU-DZP混合液能快速有效地抑制戊四氮诱发的大鼠惊厥发作和死亡，有效降低酵母诱发的大鼠发热。该混合液连续多次直肠给药后对大鼠直肠黏膜没有明显刺激作用。(2)临床观察：IBU-DZP混合液经儿童直肠给药后，IBU和DZP分别约在用药后30 min和15 min达峰值血药浓度[分别为(57.8±7.9)mg/L和(450.1±158.7)μg/L]，且在用药后5 min血药浓度就分别达到(41.4±5.5)mg/L和(321.8±53.9)μg/L，均远远超过最低有效血药浓度。 结论 直肠注入IBU-DZP溶液是一种简便、安全、快速、有效的给药途径，对发热性惊厥的现场抢救和预防有实用价值。

目的 采用反义寡核苷酸技术研究survivin与白血病细胞K562分化的关系。 方法 实验分为反义寡核苷酸组、无义寡核苷酸组、脂质体组、空白对照组，转染后48 h观察细胞形态及超微结构的变化；转染后24、48 h分别进行联苯胺染色、过氧化物酶染色及硝基四氮唑蓝(NBT)还原实验检测细胞功能；流式细胞仪检测细胞表面分化抗原CD33的表达；免疫组织化学方法检测survivin蛋白水平。 结果 反义寡核苷酸作用后，K562细胞出现向成熟红系及粒系分化的形态学及超微结构的改变，联苯胺染色阳性率、过氧化物酶染色阳性率、NBT还原实验阳性率均高于无义寡核苷酸组、脂质体组及空白对照组(P<0.01)；细胞表面分化抗原CD33的平均荧光强度在反义寡核苷酸组降低(P<0.01)；反义寡核苷酸作用24 h后细胞内survivin蛋白的表达水平低于空白对照组(P<0.05)，但与无义寡核苷酸组、脂质体组比较差异无统计学意义(P>0.05)，而48 h后survivin蛋白表达水平进一步降低，与其他各组比较差异有统计学意义(P<0.05)。 结论 survivin反义寡核苷酸能诱导K562细胞向成熟红系及粒系方向分化。

目的 探讨FasL基因转移后造血细胞活性是否受到影响，骨髓移植(bone marrow transplantation，BMT)后受者造血重建是否受影响。 方法 常规收集Balb/C小鼠和BAC小鼠股骨和胫骨骨髓单个核细胞(bone marrow monomuclear cells，BMMNC)，采用脂质体转移法将FasL基因转入Balb/C小鼠BMMNC，然后按1∶0.625体外与BAC鼠BMMNC混合培养，6 d后进行实验。取8周龄Balb/C小鼠经致死量照射后随机分为4组。第1组10只(空白对照组：未移植细胞)；第2组10只(未转染基因Balb/C鼠BMMNC＋BAC鼠BMMNC)；第3组10只(转基因Balb/C鼠BMMNC＋BAC鼠BMMNC)；第4组10只(同基因BMT组)。观察移植后受者鼠造血重建及细胞来源，移植物抗宿主病(graft versus host disease，GVHD)及生存率。 结果 BMT＋10 d(移植后为"＋")，＋20 d，第4组白细胞及血小板计数明显高于第2、3组(P<0.01)；第2、3组间差异无统计学意义(P>0.05)；＋30 d，第2、3、4组间差异无统计学意义(P>0.05)；第1组小鼠相继于1周内死亡，死亡后取脾观察未见脾结节形成。第2、3组存活的11只雌性Balb/C小鼠BMMNC中，Y染色体分析表明，各组均有供者来源的造血干细胞植入。第2、3、4组2个月生存率分别为30%、80%、100%。第3组生存率明显高于第2组(P<0.01)，与第4组比较差异无统计学意义(P>0.05)。第3组中2只及第2组中9只鼠出现GVHD表现，两组死亡鼠及第2组存活鼠病理组织学改变符合Ⅱ~Ⅲ度GVHD病理变化，第3组存活8只鼠中7只有I度GVHD病理变化。 结论 转染mFasL-cDNA基因自体造血细胞与异基因供体BMMNC混合培养后移植，能使受者获得供体来源的造血重建，并明显减轻GVHD的发生。

目的 克隆Lipoxin A4受体样蛋白(LRLP)基因，并转染人肺成纤维细胞(HLF)。观察其增强Lipoxin A4拮抗结缔组织生长因子(CTGF)诱导的细胞增殖作用。 方法 构建LRLP与绿色荧光蛋白(GFP)融合基因的真核表达载体pEGFP/LRLP，并转染HLF，用G418筛选稳定表达融合基因的细胞克隆株HLF/LRLP。用10 nmol/L Lipoxin A4预处理HLF和HLF/LRLP细胞30 min后，加入1 μg/mlCTGF诱导细胞增殖。MTT法检测细胞增殖抑制率。流式细胞术检测细胞周期。Western blot检测细胞周期蛋白D1的蛋白表达量。凝胶迁移率改变试验检测信号转导子和转录激活子3(STAT3)的DNA结合力。 结果 (1)成功建立稳定表达LRLP和GFP融合基因的HLF/LRLP细胞株。(2) 1 μg/ml CTGF刺激24 h，可显著诱导HLF增殖。Lipoxin A4预处理对其有抑制作用，10 nmol/L Lipoxin A4对HLF/LRLP的细胞增殖抑制率显著高于对HLF细胞的增殖抑制率(P<0.05)。(3)与未转染和空载体转染的HLF相比，10 nmol/L Lipoxin A4诱导更多的HLF/LRLP细胞生长停滞在G0/G1期(P<0.05)。(4) 10 nmol/L Lipoxin A4拮抗CTGF诱导的细胞周期蛋白D1表达上调，并且对HLF/LRLP细胞的拮抗作用强于对HLF细胞(P<0.05)。(5) 10 nmol/L Lipoxin A4拮抗CTGF诱导的STAT3 DNA结合力上调，并且对HLF/LRLP细胞的拮抗作用强于对HLF细胞(P<0.05)。 结论 LRLP基因转染，增强Lipoxin A4拮抗CTGF诱导的人肺成纤维细胞增殖。