2005年 · 第43卷第02期

目的 对糖原贮积症Ⅲ型(GSDⅢ)及其缺陷酶(糖原脱支酶)进行临床和基因突变分析。 方法 对6例临床疑诊为GSDⅢ患儿进行临床分析，并对患儿及其父母的外周血DNA，应用PCR扩增糖原脱支酶的33个外显子，测序。 结果 GSDⅢ的临床表现为肝脾肿大、低血糖、高血脂、生长迟缓、肝转氨酶升高和酸中毒，肾上腺素刺激试验符合GSDⅢ，生玉米淀粉治疗可以改善病情。对糖原脱支酶基因的外显子PCR产物直接测序：患儿1未发现突变；患儿2为外显子8(父源1294C>T，L 298 L)和外显子34(母源4747G>T，E1450X)复合杂合突变；患儿3为外显子8(父源1294C>T，L 298 L)和外显子3(母源-10G>A)复合杂合突变；患儿4为外显子35纯合突变(4664insCT)；患儿5为外显子16(父源2341delGCCATAGA，移码突变)和外显子10(母源1559G>A，R 387 Q)复合杂合突变；患儿6为外显子26(父源3742G>A，G 1115 R)和外显子12(母源1686T>G，Y429 X)复合杂合突变。 结论 GSDⅢ临床表现多样，基因分析发现新的糖原脱支酶基因突变类型。

目的 了解我国色素失禁症病例的NEMO基因共有序列NEMOΔ4~10缺失情况。 方法 儿童色素失禁症病例7例及其部分家庭成员共15人被纳入实验组，同期50例无血缘关系，无遗传性疾病儿童随机抽取作为正常对照。依据色素失禁症基因结构特点，选取NEMO基因特异引物In2/JF3R和假基因ΔNEMO特异引物Rev-2/JF3R，采用长链聚合酶链反应(PCR)进行检测。 结果 7例患儿5例(5/7)(例1、2、3、4和6)有NEMO基因共有序列NEMOΔ4~10缺失，其中例1和例6母女患病，母亲1a和6a检测结果同样显示有NEMO基因共有序列NEMOΔ4~10缺失；7例患儿，只有例2和例4假基因ΔNEMO中出现共有序列NEMOΔ4~10缺失，相关家族成员假基因ΔNEMO无共有序列NEMOΔ4~10缺失。正常对照组50例NEMO和假基因ΔNEMO均未发现有共有序列NEMOΔ4~10缺失。 结论 色素失禁症基因突变方式大部分为NEMO基因共有序列NEMOΔ4~10缺失。

目的 了解肥胖和超重儿童糖代谢及胰岛细胞功能状况。 方法 对52例单纯性肥胖与超重儿童进行口服糖耐量试验，并测定其血糖及胰岛素水平。计算胰岛素抵抗指数(IR)，胰岛素敏感指数(IS)，服糖后30 min胰岛素增加值与血糖增加值的比值。并查甘油三酯、肝脏B超。体重指数(BMI)与IR之间、不同BMI组之间、糖耐量减低组与对照组之间进行比较。 结果 发现糖尿病1例(1.9%)，IGT者5例(9.6%)。IR≥2.8为胰岛素抵抗，占76.9%。BMI与IR之间无相关关系。不同BMI组之间IR、IS、服糖后30 min胰岛素增加值与血糖增加值的比值差异均无统计学意义。糖耐量减低组与对照组之间IR、IS差异无统计学意义，服糖后30 min胰岛素增加值与血糖增加值的比值之间差异有统计学意义。甘油三酯升高19例(37%)，脂肪肝16例(53%)。 结论 肥胖与超重儿童普遍存在胰岛素抵抗和敏感性下降，其与BMI程度无关。肥胖伴糖耐量减低儿童除胰岛素抵抗外存在明显的B细胞功能减退。许多肥胖和超重儿童同时存在脂代谢紊乱。

目的 观察Turner综合征(TS)患儿甲状腺自身抗体(TAA)的阳性率及其对患儿甲状腺功能的影响。 方法 采用放射免疫方法及化学发光法对24例经临床检查和染色体分析确诊的TS患儿血抗甲状腺球蛋白抗体(TgAb)、抗甲状腺过氧化酶抗体(TPOAb)及甲状腺功能进行检测。超过正常值(TgAb<30%、TPOAb<20%)者为TAA阳性。对TAA阳性和TAA阴性患儿的年龄、骨龄及甲状腺功能等进行了分析。 结果 24例TS患儿中有7例(29%)为TAA阳性，17例为阴性。两组患儿年龄、骨龄差异均无统计学意义。TAA阳性者中3例为亚临床甲状腺功能低下，2例为甲状腺功能低下，而TAA阴性患儿只有4例表现为亚临床甲状腺功能低下，两组差异有统计学意义(P<0.05)。 结论 TS患儿的TAA阳性率约为29%，TAA阳性的TS患儿甲状腺功能异常的例数远多于TAA阴性的TS患儿。

目的 研究原发性肾病综合征患儿PBMCs GRβ表达水平与肾组织中原位GRβ表达水平的关系及其在PNS患儿糖皮质激素耐药中的作用。 方法 40例原发性肾病综合征患儿分成激素敏感组与激素耐药组，每组各20例，应用免疫组织化学技术，对其肾活检组织与PBMCs中GRα、GRβ进行检测，应用半定量评分法对各组肾病患儿肾小球与肾小管间质病理改变进行半定量分析。 结果 激素耐药组肾小球病理积分与肾小管病理积分高于激素敏感组(P均<0.01)；激素敏感组与激素耐药组原发性肾病综合征患儿肾活检组织GRα与PBMCs中GRα表达低于正常对照组(P均<0.01)；激素敏感组与激素耐药组原发性肾病综合征患儿肾活检组织GRβ与PBMCs中GRβ表达高于正常对照组(P均<0.01)；中度损害组肾活检组织与PBMCs GRβ表达高于轻度损害组，重度损害组高于中度损害组(P均<0.01)；相关分析表明：原发性肾病综合征患儿PBMCs和肾固有细胞GRβ表达明显正相关(r＝0.651; P<0.01), PBMCs和肾固有细胞中GRβ表达与肾脏病理积分正相关(r＝0.579, 0.623，P均<0.01)。 结论 原发性肾病综合征患儿肾局部、PBMCs中GRβ过表达与PNS患儿糖皮质激素耐药发生有关，与PBMCs和肾局部GRα数目的多少无关，过表达的GRβ可能是通过拮抗GRα的活性影响激素效应的发挥。

目的 探讨儿童慢性肺曲霉菌病的诊断和治疗。 方法 分析4例儿童慢性肺曲霉菌病的表现、诊断和治疗，并复习有关文献。 结果 (1)4例均表现为长期或间断发热、咳嗽，病程3月~1年。其中2例合并胸壁脓肿。(2)2例肺部闻及细湿啰音并肝脾肿大，另2例肺部及其他部位检查无异常。(3)2例患儿发病前无基础疾病史，1例患慢性肉芽肿病，1例曾患原发性肺结核。4例患儿IgG、IgA、IgM、 IgE, T细胞亚群、总补体和C3、C4、中性粒细胞数量均正常。3例四唑氮蓝试验正常，1例异常。(4)胸部影像学表现：4例在病程中均表现为单侧肺叶实变伴胸膜肥厚。2例病初表现为多发结节影。(5)4例痰液培养均有曲霉菌生长，2例行肺活检，在肺组织中发现曲霉菌菌丝或孢子。2例合并胸壁脓肿者，脓液培养也有曲霉菌生长。(6)4例患儿均联合应用二性霉素B和伊曲康唑治疗，10 d~1个月症状控制。 结论 对于有长期发热、咳嗽，胸部影像表现为肺叶实变伴胸膜肥厚或为结节性阴影，病情进展缓慢的儿童，应考虑慢性肺曲霉病的可能。确诊依赖于多次痰液培养或肺组织培养或在肺组织中发现曲霉菌生长。一旦确诊，联合应用二性霉素B和伊曲康唑可使病情控制。

目的 探讨苦杏仁甙对体外高氧暴露早产鼠肺泡Ⅱ型细胞( type 2 alveolar epithelial cell，AECⅡ)的保护作用机制。 方法 原代培养早产鼠AECⅡ，建立高氧细胞模型，采用MTT比色法、流式细胞术、免疫印迹(Western blot)、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)等方法，观察苦杏仁甙对高氧暴露早产鼠AECⅡ增殖及表面活性物质蛋白(surfactant associated protein, SP)mRNA表达的影响。 结果 高氧暴露导致早产鼠AECⅡ增殖抑制，AECⅡSPs mRNA表达降低。MTT试验显示，苦杏仁甙50~200μmol/L时呈剂量依赖方式促进早产鼠AECⅡ细胞增殖，200 μmol/L浓度时，其作用最强，400 μmol/L浓度时反而呈抑制作用。200 μmol/L苦杏仁甙可显著促进体外高氧暴露AECⅡ增殖，提高其SP mRNA表达水平。 结论 高氧暴露导致早产鼠AECⅡ增殖抑制及SP mRNA表达降低，200 μmol/L苦杏仁甙对体外高氧暴露的早产鼠AECⅡ有一定保护作用。

目的 研究接种卡介苗对新生小鼠T细胞功能发育的影响。 方法 新生清洁级BALB/c小鼠卡介苗接种与未接种组各8只，4周后取脾细胞进行CD4、CD25、CD44等表面标志及CD3＋细胞胞内IFN-γ、IL-10和IL-4等细胞因子的双标流式检测，并RT-PCR方法检测脾细胞转录因子T-bet、Foxp3、GATA-3 mRNA的表达。 结果 卡介苗接种组小鼠脾脏CD4＋T细胞百分率为(23.50±2.59)%明显低于对照组(47.38±10.41)% (P<0.01)，但CD4＋ T细胞中CD25＋和CD44＋百分率[(24.92±2.74)%和(89.29±2.56)%]高于对照组[(20.27±2.85)%和(82.98±5.51)%] (P<0.05)；卡介苗接种组CD3＋细胞中IFN-γ、IL-10阳性细胞百分率分别为(6.52±2.40)%、(14.81±3.65)%，高于对照组[(3.13±2.03)%、(10.90±1.61)%](P<0.05)，IL-4表达两组差异无统计学意义[(1.17±0.46) %和(1.51±0.75)%，P>0.05]。T-bet mRNA表达卡介苗接种组较未接种组明显增强[T-bet/β-actin为0.44±0.11和0.28±0.06，P<0.05]，但Foxp3、GATA-3 mRNA表达两组差异无统计学意义[Foxp3/β-actin为0.27±0.11和0.30±0.16，GATA-3/β-actin为0.46±0.08和0.50±0.10，P均>0.05]。 结论 卡介苗接种能诱导新生小鼠体内产生Th1反应，而非Th2反应，尽管接种卡介苗不能诱导新生小鼠产生表达Foxp3的CD4＋CD25＋调节性T细胞，但可诱导其产生IL-10＋CD3＋T细胞，后者可能代表了某些分泌IL-10的调节性T细胞。

目的 评价定量超声(QUS)技术在新生儿中的应用，取得新生儿出生时骨QUS的基础资料。 方法 采用以色列Sunlight公司生产的Omnisense定量超声仪，对157例新生儿进行出生时胫骨声波速度(SOS)测量。 结果 ①男女婴儿之间SOS值差异无统计学意义(男88例，SOS值为2968±115 m/s；女69例，SOS值为2956±105 m/s；P＝0.524)。早产儿(68例，平均胎龄33.0±2.5周)SOS值平均为2935±96 m/s，足月儿(89例，平均胎龄39.4±1.3周)SOS值平均为2984±116 m/s，早产儿SOS值显著低于足月儿(t＝2.837，P＝0.005)。②不同季节出生的新生儿其SOS值差异有统计学意义(F＝4.377，P＝0.005)；新生儿SOS值在春夏季出生者显著低于秋冬季出生者，夏季出生者比冬季出生者低2.3%。③出生体重<1500 g新生儿SOS值(11例，SOS值为2908±99 m/s)显著低于出生体重>2500 g新生儿(86例，SOS值为2980±113 m/s)(P＝0.042)。④在109例适于胎龄儿中，SOS值与胎龄显著相关(r＝0.270，P＝0.005)，与出生体重也显著相关(r＝0.232，P＝0.015)，多元回归分析发现胎龄和出生季节是影响SOS值的重要因素(F＝8.515.P<0.001，校正决定系数R2＝0.141)。 结论 QUS适用于新生儿骨状况的研究；本研究取得了新生儿出生时骨SOS值的资料。

目的 在既往工作的基础上，进一步明确T型钙通道CACNA1H基因是否为儿童失神癫(CAE)的易感基因。 方法 本组48例，分别来源于北京大学第一医院、首都医科大学附属北京儿童医院、首都儿科研究所附属医院以及山西省儿童医院。对本组患儿进行T型钙通道CACNA1H基因外显子6~12及其相邻的部分内含子PCR产物测序，寻找突变。96个正常对照来自同一地区的无关个体，均无癫病史或遗传病家族史。 结果 共发现13个单核苷酸多态性，还发现4个突变位点只在CAE中出现，其中2个为错义突变：G773D和H515Y，均为杂合突变。突变H515Y是新发现的错义突变，患儿从其母亲接受该突变。G773D在第3个CAE家系中发现相同的突变，本例从其父亲接受该突变。 结论 T型钙通道CACNA1H基因很可能是CAE的易感基因。

目的 探讨幽门螺杆菌(Hp)感染的彝族儿童是否有HLA-DRB1和DQB1易感和抵抗基因。 方法 对156名儿童以整群抽样的方法取静脉血，用ELISA金标免疫法检测各研究对象的血Hp抗体；根据血Hp抗体结果将儿童分为Hp抗体阳性组(61人)和Hp抗体阴性组(95人)；从以上2组中各随机抽取40名儿童行13C尿素呼吸试验，两者均阳性者诊断为Hp感染，共31名；两者均阴性者则为Hp无感染，共39名；分别提取本组儿童的外周血基因组DNA，并应用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)方法行HLA-DRB1、DQB1基因分型，并比较无感染组和感染组中的HLA-DRB1和DQB1等位基因分布频率。 结果 70名彝族儿童无感染的39人，有感染的31人。无感染组中的HLA-DRB1*12等位基因频率(42.31%)高于感染组(14.52%)(P<0.001，Pc<0.012)；而HLA-DRB1*11等位基因频率无感染组(3.85%)低于感染组(12.9%)(P<0.05，Pc>0.05)。HLA-DQB1*0301等位基因频率无感染组(55.13%)高于感染组(32.26%)(P<0.007，Pc<0.05); HLA-DQB1*04等位基因频率无感染组(2.56%)低于感染组(11.29%)(P<0.05，Pc>0.05)。 结论 HLA-DRB1*12和HLA-DQB1*0301等位基因可能是儿童抵抗Hp感染的保护基因；HLA-DRB1*11和HLA-DQB1*04等位基因是否为儿童易感基因有待加大样本量进一步研究。