2005年 · 第43卷第01期

目的 探讨流式细胞技术检测PP65抗原血症对巨细胞病毒(CMV)感染的诊断价值。 方法 对136例CMV感染患儿流式细胞技术检测血PP65抗原、实时荧光定量PCR(RFQ-PCR)检测尿CMV DNA及血清ELISA法检测CMV IgM，比较3种方法的检测结果，并以35例非CMV感染的患儿作为PP65检测的阴性对照。对18例PP65抗原阳性患儿进行短期随访。 结果 136例CMV感染患儿从血单个核细胞(MNC)中检出PP65抗原118例(118/136,阳性率86.8%)。其中53例患儿分别作MNC和多形核白细胞(PMNL)检测，从MNC中检出PP65抗原45例(45/53,阳性率84.9%)，PMNL中检出PP65抗原43例(43/53，阳性率81.1%), MNC与PMNL阳性率差异无统计学意义(χeq \o\al(2,m)＝0.25，P> 0.05)。PP65与尿CMV DNA2种方法所检测的结果间差异无统计学意义(χeq \o\al(2,m)＝1.78，P>0.05)；但PP65与血CMV IgM检测结果间差异有统计学意义(χeq \o\al(2,m)＝52.92，P<0.01)。PP65抗原水平与CMV感染的病情程度有明显相关性，全身性感染通常伴高水平抗原血症，单脏器感染抗原水平相对较低或阴性(χ2＝ 38.51，P<0.005)。PP65在感染恢复期转为阴性或低水平，病情恶化时明显增高。 结论 流式细胞技术检测PP65抗原血症是诊断活动性CMV感染的有效手段，量化结果有助于监测病情。

目的 建立沙眼衣原体(Ct)主要外膜蛋白基因(omp1)上游引物5′末端地高辛标记裂解酶片段长度多态性(CFLP)分型方法；了解重庆地区近年来临产孕妇Ct感染和母婴垂直传播状况及常见基因型。 方法 取临产孕妇宫颈刮片及其新生儿鼻咽拭子组成母婴配对标本300对605份，采用Ct omp1套式聚合酶链反应(omp1-nPCR)检测Ct；用建立的CFLP方法对临床Ct分离株进行分型。 结果 孕妇宫颈Ct检出率11%(33/300)，母婴传播率24.2%(8/33)。生后24 h内和5~10 d采集Ct阳性母亲所生新生儿鼻咽拭子标本Ct检出率分别为3.0%(1/33)和38.9%(7/18)，χeq \o\al(2,c)＝8.79，P<0.01。剖宫产和阴道分娩母婴传播率分别为8.3%(2/24)和66.7%(6/9)，χeq \o\al(2,c)＝9.16，P<0.01。Ct阳性和阴性孕妇胎膜早破发生率分别为30.3%(10/33)和13.5%(36/267)，χ2＝6.40，P<0.05。8对Ct阳性母婴配对标本CFLP图谱呈4类，经测序证实分别为E、F、H、D型(各3、2、2、1对)，各占37.5%、25.0%、25.0%和12.5%，且每对母子CFLP图谱完全一致。 结论 本研究结果在一定意义上反映了重庆地区近年来临产孕妇Ct感染和母婴垂直传播状况及常见基因型；上游引物5′末端地高辛标记Ct omp1 CFLP分型方法灵敏度高、重复性好、操作简便、快速、花费相对低廉，没有放射污染，是一种极具潜力的Ct分型方法。

目的 研究EB病毒(EBV)转化"永生"B细胞(CD23＋/ CD19＋)在儿童EBV感染传染性单核细胞增多症(IM)时的动态变化。 方法 用流式细胞术测定30例EBV感染儿童IM急性期、恢复早期、恢复期外周血单个核细胞膜CD23＋/CD19＋、CD23和CD19的表达，并与24例相同年龄健康儿童组成的对照组比较。 结果 (1)急性期、恢复早期CD23＋/CD19＋、CD23表达明显下降[急性期CD23＋/CD19＋ (2.22±1.47)%，(132±91)/ mm3；CD23 (3.12±1.88)%，(195±102)/mm3；恢复早期CD23＋/CD19＋ (4.51±2.25)%，(166±85)/mm3；CD23(5.55±2.76)%，(231±130)/mm3；对照组CD23＋/CD19＋ (6.71±2.25)%，(215±68)/mm3；CD23(7.85±3.09)%，(249±86)/mm3，P<0.05]。病程越早，下降越明显。恢复期CD23＋/CD19＋恢复到正常水平，而CD23升高超过了正常值[恢复期CD23＋/CD19＋(6.72±2.16)%，(213±108)/mm3；CD23(9.46±2.73)%，(366±200)/mm3]。(2)在急性期、恢复早期及恢复期，CD23＋/CD19＋与CD23表达均呈正相关(P<0.01)；CD23＋/CD19＋仅在急性期与CD19呈正相关(P<0.01)；CD23与CD19无相关关系(P>0.05)。 结论 在EBV感染儿童IM急性期、恢复早期EBV转化"永生"B细胞受到明显抑制，恢复期恢复到正常水平，而CD23表达有增高趋势。

目的 分析去甲肾上腺素的合成限速酶——多巴胺β羟化酶基因(DBH)在伴或不伴破坏性行为障碍(DBD)的注意缺陷多动障碍(ADHD)核心家系中的传递情况，探讨伴或不伴DBD的ADHD与DBH基因之间的关系。 方法 以DSM-IV诊断标准为依据，选择292例ADHD核心家系作为研究对象，选取DBH 5′侧翼序列的-1021C→T多态为遗传标记，通过PCR扩增，酶切和电泳确定DBH -1021C→T多态的基因型。采用传递不平衡检验(TDT)分析DBH -1021C→T多态在伴或不伴DBD的ADHD核心家系中的传递情况。 结果 DBH-1021C→T多态在伴或不伴DBD的ADHD中均存在传递不平衡，前者优先传递T等位基因(P<0.05)；后者优先传递C等位基因(P<0.05)。考虑到ADHD亚型的影响，DBH-1021C→T多态仅在ADHD-C伴DBD组中存在传递不平衡，优先传递T等位基因(P<0.05)。 结论 伴或不伴DBD的ADHD与DBH-1021C→T多态均存在关联，但优先传递的等位基因不同，前者优先传递的是低活性的T等位基因，而后者优先传递的是高活性的C等位基因，提示伴与不伴DBD的ADHD在遗传机制上存在差异。结合ADHD亚型分析，仅ADHD-C伴DBD与DBH-1021C→T多态存在关联，提示在ADHD 3种亚型中二者的关系可能较为密切。

目的 探讨基因芯片用于地中海贫血(简称地贫)检测的应用价值。 方法 应用基因芯片技术对62例初筛诊断为α地贫；93例初筛诊断为β地贫(轻型60例，重型33例)的患儿血样标本进行α及β珠蛋白的基因分析。 结果 (1)成功检测出中国人中常见的3种缺失型α地贫(--SEA ，-α3.7, -α4.2 )，2种非缺失型α地贫(HbCS，HbQS )的杂合子、纯合子及双重杂合子。(2)在60例轻型β地贫，33例重型β地贫126条染色体中共检测到8种突变类型，其中CD41-42占33.5%，IVS-Ⅱ- 654占23.9%，TATAbox- 28占15.0%，CD17占15.0%，CD71- CD72 (＋A )占4.8%，βE26占2.4%, CD27- CD28 (＋ C )占2.4%，CD71-CD72 (＋T)占1.5%。(3)在60例β地贫杂合子中检测到8例(13.3% )，在33例重型β地贫中检测到2例(6%)同时复合有α地贫基因。 结论 基因芯片技术具有简便、省时等特点，其无需接触放射性同位素，可同时检测α与β地贫，便于推广应用。

目的 探讨膜周部室间隔缺损(ventricular septal defect ，VSD)经导管介入治疗的并发症及其预防。 方法 2002年7月-2004年5月，262(男138，女124)例膜周部VSD患儿，年龄2~18(9.3±5.8)岁，体重11.0~65.0(平均30.5)kg 。3例合并动脉导管未闭，4例合并房间隔缺损，1例合并动脉导管未闭和房间隔缺损。 结果 262例患儿术前经胸超声检测VSD大小为2.7~13.0 mm(平均6.5 mm)，术中心室造影测量VSD大小为1.3~14.0 mm(平均6.8 mm), 256/262例(97.7%)封堵成功。所选封堵器大小为4~16 mm (平均8.6 mm)。严重并发症8例(3.1%)。其中高度房室传导阻滞(atrioventricular conduction block ，AVB)5例(2.0%)，溶血2例(0.8%)。封堵器明显移位1例(0.4%)。5例AVB患儿治疗后除1例术后50 d安装永久起搏器外，其余4例均恢复正常窦性心律。溶血患儿经常规治疗后恢复正常。封堵器明显移位则采用心脏外科手术处理。其他并发症有：1例(0.4%)术后6个月复查有微量残余分流；5例(2.0%)术后新出现主动脉瓣微量返流；4例(1.6%)术后新出现三尖瓣少量返流；75例(29%)术后出现间歇性加速性交界性心律或加速性室性自主心律伴干扰性房室脱节，治疗后均恢复正常；41例(16%)术后出现不完全性或完全性右束支传导阻滞；4例(1.6%)术后出现完全性左束支传导阻滞。 结论 经导管介入治疗膜周部VSD的严重并发症发生率低，是相对安全、疗效可靠的治疗方法。

目的 探讨内脏脂肪组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)的mRNA表达与宫内生长迟缓(IUGR)大鼠成年后胰岛素抵抗(IR)发生的关系，以及生后早期不同的营养模式的远期影响。 方法 用母鼠全程饥饿法建立IUGR动物模型。32只IUGR新生雌鼠随机分为4组：IUGR模型组(S/N组)给予常规饮食，IUGR高热能饮食组(A组)，IUGR高蛋白高热能饮食组(B组)，IUGR高蛋白质等热能饮食组(C组)。各组幼鼠在3周哺乳期间母鼠分别摄取上述饲料。第4周起各组幼鼠断乳后全部改为自由进食常规饮食至实验结束。另以正常母鼠所生正常新生雌鼠8只为正常对照组(C/N组)生后给予常规饮食喂养至实验结束。各组大鼠在48周(中老年期)时分别测定体重、肾周脂肪重量、脂肪组织TNF-α mRNA表达，计算ISI(胰岛素敏感指数)并分析其与TNF-α mRNA表达量及肾周脂重、脂重/体重的相关性。 结果 IUGR模型组及IUGR A、B组胰岛素敏感性下降，并且脂肪组织TNF-α mRNA表达及肾周脂重、脂重/体重显著高于正常对照组(P<0.05或0.01)；IUGR的C组胰岛素敏感性及TNF-α mRNA表达量、脂重/体重与正常对照组差异无统计学意义(P>0.05)。脂肪组织TNF-α mRNA水平与肾周脂肪重量、脂重/体重量呈正相关，与ISI呈负相关。脂重/体重与ISI呈负相关。 结论 IUGR大鼠成年后发生胰岛素抵抗可能经由中心性肥胖的途径，与腹脂增多、脂肪细胞过度表达TNF-α有关，脂源性TNF-α可能是IUGR胰岛素抵抗的重要协病因素。高蛋白的早期营养模式可能通过实现IUGR个体的骨骼肌的生长追赶而非脂肪追赶避免了中心性肥胖和胰岛素抵抗的发生，是较合理的早期营养饮食模式。

目的 调查儿科重症监护病区(PICU)危重病患儿发生急性颅内高压及脑水肿的原因、流行病学特点和病死危险因素。 方法 总结1999年1月-2003年12月，我院PICU危重病患者中，急性颅内高压及脑水肿患儿的病因、预后与多器官功能不全综合征(MODS)的关系。利用队列研究对患者病死危险因素进行分析。 结果 1446例危重病患儿中，216例发生急性颅内高压及脑水肿，病死率29.2%。5年间病死率无明显变化(χ2＝0.371，P＝0.985)。神经系统与非神经系统原发疾病病死率差异无统计学意义(χ2＝0.546，P＝0.460)。神经系统感染、意外伤害和败血症是常见病因，分别占27.8%、22.4%和10.2%。对12个死亡因素进行统计学分析，显示合并器官衰竭数目、年龄小、入科当日危重评分值、有基础疾病、呼吸衰竭和瞳孔大小改变与病死率显著相关(P<0.05或P<0.001)。 结论 1999年以来，颅内高压及脑水肿患儿的病死率依然很高。神经系统感染、意外伤害和败血症是主要发病危险因素；患病年龄小于1岁、低危重评分及合并MODS是病死主要危险因素。

目的 探讨甲状腺功能低下(简称甲低)对新生期大鼠海马神经元凋亡及Bcl-2、Bax基因表达的影响。 方法 孕15天SD大鼠丙基硫氧嘧啶(50 mg/d)灌胃造成仔鼠甲低动物模型。采用化学发光法测定1、5、10、15日龄仔鼠血清FT3及FT4水平。取各日龄海马组织，应用光镜和透射电镜观察神经元形态学特点，琼脂糖凝胶电泳检测DNA降解片段，Western Blotting检测Bcl-2和Bax基因蛋白表达的变化。 结果 模型仔鼠各日龄血清FT4水平始终接近于药盒检测限(2.8 nmol/L)，显著低于对照仔鼠(1、5日龄P均<0.01; 10、15日龄P均<0.001)；血清FT3较同日龄对照仔鼠降低(1日龄P<0.05;其他日龄P均<0.01)。模型仔鼠海马组织光镜下变性神经元增多，透射电镜下神经元凋亡明显增加，以10、15日龄为著。DNA片段分析显示模型仔鼠各日龄均出现不同程度的DNA降解片段，对照仔鼠仅在10日龄可见少量DNA降解片段。Western Blotting结果显示对照仔鼠Bcl-2蛋白各日龄间表达水平不同(P<0.05)，1、5日龄表达较高，10日龄有所下降，15日龄回升；各日龄模型仔鼠与对照组相比表达水平明显下降(1日龄1.95±0.27比2.59±0.19，P<0.05; 5日龄1.86±0.24比2.47±0.17，P<0.05; 10日龄1.29±0.22比1.86±0.28，P<0.05; 15日龄1.21±0.27比2.18±0.17，P<0.01)，其10日龄内变化趋势和对照组相似，但在15日龄仍持续降低。模型仔鼠Bax蛋白各日龄与对照仔鼠相比表达水平明显增加(1日龄1.69±0.14比1.24±0.23，P<0.05; 5日龄1.78±0.16比1.29±0.17，P<0.05; 10日龄1.92±0.18比1.45±0.14，P<0.05; 15日龄1.86±0.14比1.51±0.12，P<0.05)，而两组各日龄间变化差异无统计学意义(P均>0.05)。Bcl-2/Bax比值各日龄模型仔鼠与对照仔鼠相比明显下降(1日龄1.16±0.17比2.12±0.35，P<0.05; 5日龄1.05±0.16比1.94±0.36，P<0.05; 10日龄0.68±0.17比1.29±0.16，P<0.05; 15日龄0.67±0.19比1.45±0.22，P<0.01)。 结论 甲状腺功能低下可致新生期大鼠海马神经元凋亡，其机制可能与海马神经元Bcl-2蛋白下调、Bax上调及Bcl-2/Bax比值下降有关。