2003年 · 第41卷第09期

目的 通过病原学检测鉴别诊断严重急性呼吸综合征(SARS)。 方法 对1例没有明确SARS接触史，入院时临床诊断疑为"支原体肺炎"的患儿进行病原学鉴别诊断。(1)对患儿的咽拭子标本进行常见呼吸道病毒(包括呼吸道合胞病毒、甲、乙型流感病毒、腺病毒和Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型副流感病毒)的抗原检测。(2)用RT-PCR进行人类偏肺病毒、肠道病毒和鼻病毒的检测。(3)采用巢式RT-PCR方法，进行SARS病毒基因检测。根据WHO在网上公布的SARS冠状病毒复制酶基因1b区合成3对引物，其中1对为所有冠状病毒所保守的，用来进行第一次PCR，另2对为SARS冠状病毒所特异的，分别用于第二次PCR，这2对引物可分别扩增368和348bp的基因片段。 结果 患儿咽拭子标本7种常见呼吸道病毒和人类偏肺病毒、肠道病毒和鼻病毒的检测结果均为阴性，而用不同引物对检测，SARS冠状病毒基因均为阳性。经测序显示，该基因片段与GenBank已公布的17株SARS冠状病毒的序列同源性为100%，而与人冠状病毒的标准株有很低的同源性。同时该患儿的恢复期血清SARS冠状病毒特异性IgM和IgG均为阳性。 结论 从患儿标本中未检测到常见的7种呼吸道病毒、人类偏肺病毒、肠道病毒和鼻病毒，而检测到了SARS冠状病毒。经病原学检测，确诊患儿为SARS。在SARS流行期间，用检测常见呼吸道病毒抗原或基因的方法，可以将儿科的急性呼吸道病毒感染与SARS进行区别。

目的 探讨儿童SARS的临床和胸部X线表现特点。 方法 分析5例经流行病学、临床、实验室和放射学检查确诊的SARS患儿临床资料和胸部X线表现。 结果 5例SARS患儿中，3例有明确的SARS密切接触史。发热为首发症状，4例体温在38℃以上，最高40℃，持续时间4~7 d，平均5.6 d。实验室检查：SARS病毒RNA特异性片段RT-PCR检测阳性1例；SARS病毒抗体IgM和IgG双项阳性1例，SARS病毒抗体IgG单项阳性2例，IgM单项阳性1例。肺炎支原体，肺炎衣原体IgG、IgM及血培养等均阴性。胸部X线表现：单侧肺部片状影或斑片状阴影4例，其中磨玻璃样阴影及游走性改变者1例；肺内间质性改变者1例，表现为不规则网格状及索条状影；肺部病灶吸收时间最短7 d，最长33 d，平均(15±6) d，无1例出现肺部纤维化改变。5例全部治愈出院。 结论 儿童SARS与成人相比，其临床症状和体征相对比较轻。胸部X线表现以肺的单侧片状阴影改变为主，亦可见磨玻璃样影和病灶上下游走性改变。

目的 探讨纤维支气管镜(简称纤支镜)在儿童感染性肺不张治疗中的作用。 方法 125例住院儿童经X光胸片或CT证实为肺不张，且经纤支镜除外异物、畸形、肿瘤、结核等，明确为感染所至，分为纤支镜组及临床组，纤支镜组65例以纤支镜治疗为主，经纤支镜治疗2~6次。临床组60例，以临床抗炎、对症治疗为主，两组均定期复查胸X线片，30~40 d时比较疗效；此外还对纤支镜组中不同病程的疗效进行了观察。 结果 纤支镜组治愈39例，好转20例，无效6例，临床组治愈17例，好转25例，无效18例(P<0.01)；纤支镜组中病程<3月、3~6月、>6月三组疗效比较差异有显著性(P<0.01)。 结论 纤维支气管镜在儿童感染性肺不张的治疗中起着十分重要的作用，病程短时有利于肺不张的恢复，支气管冲洗克服了支气管肺泡灌洗的缺点，更适应于感染性肺不张的治疗。

目的 观察幼年哮喘大鼠嗜酸细胞(EOS)凋亡及凋亡基因fas和bcl-2的mRNA表达及牛膝多糖对其的作用。 方法 清洁级雄性SD大鼠随机分为5组：正常对照组(C)，哮喘组(A)，牛膝多糖治疗组(T1、T2、T3)。采用卵清白蛋白复制幼年大鼠哮喘模型。用寡核苷酸探针原位杂交法和TUNEL法检测各组大鼠fas和bcl-2 mRNA在气道壁EOS上的表达和气道壁EOS的凋亡率。 结果 (1)C组大鼠肺组织EOS上fas mRNA的表达率为(73.2±11.9)%，A组为(43.4±10.0)%(P<0.01)；在T1、T2、T3组分别为(59.0±8.1 )%、(57.5±9.6) %、(76.2±2.7)%，与A组相比差异均有显著性(P< 0.05，0.01)。C组大鼠EOS bcl-2 mRNA的表达率为(47.9±8.7)%，在A组为(67.4±7.3)%(P<0.01); T1组的bcl-2 mRNA表达率为(57.7±12.7)%、T3组为(57.3±6.8)%，与A组相比差异均有显著性(P均<0.05)，T2组与A组相比差异无显著性。(2) A组EOS凋亡率为(5.3±2.2)%，而C组为(15.9±2.4)%(P<0.01)。T1、T3组EOS凋亡率分别为(8.7±2.9)%、(9.8±2.2)%，与A组相比差异均有显著性(P均<0.05)。 结论 哮喘大鼠气道EOS表现为fas 、bcl-2基因表达的明显改变及凋亡率明显下降。ABPS可调节EOS上fas及bcl-2基因的表达进而促进EOS在哮喘大鼠肺组织内的凋亡。

目的 筛选人类糖皮质激素受体基因(NR3C1)的多态性，并分析其在激素耐药型、激素敏感型肾病综合征患儿以及参照人群(随机抽取的脐血标本)中的分布，以研究NR3C1多态性与肾病综合征患儿激素耐药的关系。 方法 提取39例激素耐药型、67例激素敏感型肾病综合征患儿以及64例参照人群血基因组DNA，PCR扩增NR3C1中编码人类糖皮质激素受体全部功能区的第2~9α外显子，以变性高效液相色谱(DHPLC)分析检测PCR产物，对洗脱曲线异常者进行DNA测序。 结果 在总计170份基因组DNA样本中，DHPLC分析发现12种多态性，均经DNA测序证实。另外，有3组多态性呈紧密连锁的单倍型([198G>A ＋ 200G>A], [1374A>G ＋ IVSG-68_IVSG-63delAAAAAA ＋ IVSH-9C>G ＋ 2382C>T], [1896C>T ＋ 2166C>T ＋ 2430T>C])。后2种单倍型为首次报道，它们在激素耐药型肾病综合征组的基因型频率(10.3%和15.4%)明显高于敏感型肾病综合征(1.5%和7.5%)，2种单倍型的OR值分别为7.54和2.26。其余多态性在各组中出现频率相对较低。 结论 在NR3C1基因中筛选出12处多态性；而且新发现的2种多位点紧密连锁的单倍型可能与肾病综合征患儿发生糖皮质激素耐药有关。

目的 分析乙型肝炎疫苗计划免疫的实施对儿童乙型肝炎病毒相关性肾炎(HBV-GN)及膜性肾病(MN)患病率的影响。 方法 对我院727例肾脏活检的肾脏病患儿进行分析。(1)以1992年1月1日为界分为A、B两组。A组211例：1979年11月至1991年12月；B组516例：1992年1月至2002年3月将B组按每两年为一组再分为5组(B1组~B5组)。(2)根据每个患儿有无乙型肝炎疫苗接种史分为接种组和未接种组。 结果 (1)727例中符合HBV-GN诊断标准的有64例。A组211例中HBV-GN有28例，B组516例中HBV-GN为36例(χ2＝7.397, P<0.01)；B1至B5组的HBV-GN患病情况依次为13.04%(9/69)，7.32%(6/82)，6.25%(4/64)，4.88%(4/82)，5.94%(13/219)，有下降趋势。(2)727例中有115例接种史不详。在接种组231例中HBV-GN仅8例，而未接种组381例中有HBV-GN 48例(χ2＝14.44，P<0.001)。(3)727例中病理类型为MN的有46例，均为HBV-GN。接种组中MN仅6例，未接种组中MN有40例(χ2＝12.92，P<0.001)。(4)8例接种过疫苗仍然患HBV-GN的患儿，均有血清学乙型肝炎病毒(HBV)标志物异常。其中有2例MN患儿的母亲有明确的乙型肝炎病毒感染证据。 结论 1992年全国实施乙型肝炎疫苗计划免疫后，儿童HBV-GN的患病明显减少，并呈逐年下降趋势；同时儿童MN的患病将随之逐渐减少；部分接种过乙型肝炎疫苗仍然患HBV-GN者可能与HBV母婴传播及免疫失败有关。

目的 确认中国儿童失神癫(childhood absence epilepsy，CAE)是否与染色体8q24连锁。 方法 选取染色体8q24上5个微卫星DNA标记(D8S554、D8S534、D8S1100、D8S1783、D8S1753)，对30个CAE核心家系的患儿及其父母的单体型进行分析，另有10个正常家系作为对照。从外周血白细胞中常规抽提基因组DNA，应用PCR方法扩增各个微卫星片断，PCR产物用基因测序确定各个等位基因的长度。统计学方法选用基于单体型的单体型相对风险(HHRR)和传递不平衡检验(TDT)分析。 结果 经HHRR分析显示，D8S5544 χ2＝5.939(P<0.05)、D8S11003 χ2＝5.081(P<0.05)、D8S17836 χ2＝4.308，(P<0.05)，差异有显著性；TDT显示D8S5544 χ2＝4.46(P<0.05)、D8S17836 χ2＝4(P<0.05)，差异有显著性。为了排除HHRR和TDT分析可能存在的假关联，我们对所有患儿家系作了详细的分析，结果发现只有在位点D8S1783提示与CAE致病基因存在传递不平衡，而另二个位点均为假关联。 结论 ①中国儿童失神癫可能与染色体8q24连锁，与位点D8S1783存在传递不平衡；结合国外的结论，CAE致病基因可能存在于染色体8q24上的ECA1区域内。②CAE基因在不同地区、不同种族的人群中可能存在遗传异质性。③对于核心家系，HHRR和TDT为首选的检验标志与疾病易感位点连锁和传递不平衡的方法。

目的 探讨静脉注射免疫球蛋白(IVIg)对空肠弯曲菌脂多糖(CJ LPS)诱导的免疫性周围神经病的治疗机理。 方法 (1)在CJ LPS免疫大鼠后的不同时间，按400 mg/(kg·d)注射IVIg。第35天取坐骨神经进行病理学检查，ELISA方法检测血清中抗CJ LPS抗体滴度，免疫组化及原位杂交技术检测神经上特异性IgG及TNF-α mRNA表达；(2)在CJ LPS刺激下体外培养外周血单核细胞(PBMC)，并分别在培养液中加入1、2.5、5、10 mg/ml IVIg。将上清分别注入同种大鼠的神经外膜下，7 d后进行病理学检查；采用原位杂交技术检测培养PBMC的TNF-αmRNA表达。 结果 (1)IVIg干预下，经CJ LPS免疫大鼠神经原纤维病变率仅为1.0%，未干预者达15.0%，差异有显著性(P<0.01)。未干预组血清中抗CJ LPS特异性IgG滴度比干预组高9倍。IVIg干预组神经上无明显特异性IgG及TNF-α mRNA表达，而未用IVIg者表达强阳性；(2)CJ LPS免疫的大鼠PBMC的TNF-α mRNA，IVIg干预组(1.0%)比IVIg未干预免疫组(9.5%)减少；(3)CJ LPS刺激下健康鼠PBMC体外培养，5 mg/ml和10 mg/ml大剂量IVIg干预组的TNF-αmRNA阳性表达率(3%和2%),较2.5 mg/ml和1 mg/ml小剂量组阳性率(13%和11.5%)为低(P<0.01)。其上清液神经外膜下注射后，大剂量干预组原纤维病变率(9.8%和8.5%)较小剂量IVIg组(50.0%和41.0%)，以及未用IVIg的对照组(50.8%)为低(均P<0.01)。 结论 IVIg通过对特异性体液免疫和细胞免疫的同时抑制，达到对CJ LPS诱导的周围神经病治疗作用。

目的 监测肺炎链球菌对青霉素和其他抗生素的耐药情况；分析pbp2 b基因扩增产物图谱与青霉素耐药性的相关性；对31株青霉素耐药菌株进行血清分型；分析血清型23F和血清型6的青霉素耐药菌株的脉冲电场凝胶电泳(PFGE)图型，初步了解北京地区耐药菌株分子流行病学上的特点。 方法 (1)抗生素药物敏感试验；(2)用聚合酶链反应(PCR)和限制性内切酶片段长度多态性分析(RFLP)方法，分析pbp2 b基因扩增产物图谱与青霉素耐药性的相关性；(3)使用乳胶凝集的方法，对31株青霉素耐药菌株进行血清分型；(4)使用PFGE图型方法分析6株血清型23F和3株血清型6的青霉素耐药菌株流行病学上的基本特性。 结果 (1)对青霉素的耐药性由1997年9.9%上升到2000年14.6%(P>0.05)。对红霉素、复方磺胺甲基异唑和氯霉素耐药性分别由1997年76.8%、74.7%和22.6%上升到2000年的87.4%、88.3%和40.8%(P<0.05)；(2)通过PCR和RFLP方法分析青霉素耐药菌株和青霉素敏感菌株表明，pbp2b基因扩增图谱与青霉素耐药性之间有较好的相关性；(3)对31株青霉素不敏感肺炎链球菌(PRSP)做了血清型23F和6分型。前者为6株(19%)；后者为3株(9%)。6株血清型23F肺炎链球菌均为低水平(MICs 0.12~ 0.19 μg/ml)青霉素耐药，对头孢菌素和氯霉素敏感，对红霉素耐药，对复方磺胺甲基异唑中度耐药，并且PFGE图型基本相同。3株血清型6肺炎链球菌对各种抗生素耐药呈不均一性，对青霉素耐药高于血清型23F组(MICs 0.5~1.5 μg/ml)，对氯霉素敏感，对头孢菌素和红霉素耐药，对复方磺胺甲基异唑2株耐药，PFGE图型彼此不相同。 结论 北京地区的肺炎链球菌对青霉素和β-内酰胺类抗生素具有活性。但对红霉素、复方磺胺甲基异唑和氯霉素耐药率高，而且耐药速度增长较快。pbp2b基因扩增产物图谱与青霉素耐药性只有较好的相关性。北京地区有一个血清型23F低水平青霉素耐药肺炎链球菌的优势菌株。

目的 应用聚合酶链反应(PCR)、限制性内切酶片段长度多态性分析(RFLP)及测序技术，建立检测不同属种细菌的16S-23SrRNA基因区间的特异图谱。 方法 对临床上常见的细菌进行PCR扩增、RFLP、分子克隆及序列分析，同时对临床标本进行培养与PCR-RFLP比较。 结果 27株不同细菌行PCR扩增后，得到不同DNA图谱。其中15种细菌经PCR扩增即可区分，另10种经Hinf I或Alu I酶切后才能区分。肺炎克雷伯菌与坚韧肠球菌的差异只在第779位碱基上不同，Xma III酶能区别。42例临床诊断为新生儿败血症者，15例培养阳性，阳性率35.7%；而PCR阳性者则为27例，阳性率为64.29%，明显高于血培养(P<0.01)。6例脑脊液标本中，1例PCR及培养均阳性(表皮葡萄球菌)；2例培养阴性标本，其PCR也阳性；经图谱分析为葡萄球菌，1例培养为新型隐球菌的脑脊液标本PCR检测为阴性。另2例PCR及培养均阴性。 结论 建立了PCR-RFLP技术快速检测细菌16S-23S rRNA基因区间的方法，具有特异、敏感、快速、准确的特点，为临床细菌感染的病原诊断提供新的科学依据。

目的 观察小于胎龄儿(small for gestational age infants, SGA)的临床分型情况，并评价我国现行的SGA分型方法与SGA定义分型的相关性。 方法 采用回顾性调查方法，根据"试行草案"中重量指数(ponderal index，PI)及身长/头围比值分型标准对417例SGA进行临床分型，并以SGA的定义分型为"金标准"，评价PI及身长/头围比值的分型结果。 结果 (1)按PI、身长/头围比值及定义的标准，417例SGA中匀称型分别为376例(90.17%)、376例(90.17%)和187例(44.84%)。PI与身长/头围比值的诊断符合率为80.82%，但反映诊断结果一致性的指标Kappa值为-0.093。(2) PI和身长/头围比值分型与SGA定义分型的符合率分别为49.88%和50.84%。与定义标准相比，PI及身长/头围比值的敏感性为91.84%~96.38%，特异性为9.30%~25.86%，假阳性为74.14%~90.70%，诊断指数为4.95%~17.70%，Kappa值为0.070~0.167。(3)ROC曲线分析显示，足月儿和早产儿PI值的ROC曲线下面积分别为0.635和0.698；身长/头围比值法的ROC曲线下面积为0.673。 结论 我国目前"试行草案"中PI及身长/头围比值两种分型标准不够合理，有进一步探讨的必要。ROC结果亦提示此两种分型方法总体上诊断价值偏低。