2002年 · 第40卷第10期

目的 探讨广西新生儿迁延性黄疸与胆红素-尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(UGT1A1，B-UGT)基因Gly71Arg突变的关系。 方法 采用常规方法提取广西25例病因不明的迁延性黄疸新生儿及60例正常健康儿DNA,用聚合酶链反应(PCR)方法扩增UGT1A1第1外显子，琼脂糖凝胶电泳鉴定产物，用等位特异性寡核苷酸探针杂交法(ASO)检测基因Gly71Arg突变。选部分经ASO检测正常和突变的PCR产物进行DNA测序。 结果 25例迁延性黄疸新生儿中15例UGT1A1基因存在Gly71Arg错义突变，即第211位核苷酸有G→A点突变(G211A)，使第71位密码子GGA变成AGA，相应编码的甘氨酸变成精氨酸。13例为杂合子，2例为纯合子，等位基因频率0.34。60例正常健康儿Gly71Arg等位基因频率0.08。迁延性黄疸新生儿等位基因频率较正常健康儿显著增高(P<0.0001)。送检样品测序结果与ASO结果一致。 结论 广西存在UGT1A1基因Gly71Arg突变。广西迁延性黄疸患儿与UGT1A1基因Gly71Arg突变密切相关，提示这可能是广西新生儿迁延性黄疸的原因之一。

目的 探讨恶性血液病患儿骨髓抑制期发生深部真菌感染的诊断和治疗。 方法 近10年来诊断为恶性血液病合并深部真菌感染的患儿15例，行血培养、骨髓培养、局部组织检查以了解病原菌，并予以抗真菌治疗。 结果 从发热到确诊的时间平均为9.7 d；15例中13例口腔见特异性真菌感染病灶，10例真菌病原学检查阳性，9例为念珠菌，1例为曲霉菌感染；9例氟康唑治疗无效者改用脂质体二性霉素B(L-AMB)后5例治愈；死于真菌感染的患儿共5例。 结论 深部真菌感染的早期诊断及治疗困难，死亡率高；口腔特异性病灶是真菌感染的早期临床表现；L-AMB是治疗深部真菌感染的首选药物，临床使用安全有效。

目的 研究急性白血病(AL)细胞浸润及转移与黏附分子CD49d表达之间的关系及相应单克隆抗体的阻断效应，探讨AL细胞发生浸润和远处转移的分子机理。 方法 对20例急性淋巴细胞性白血病(ALL)和20例急性非淋巴细胞性白血病(ANLL)患儿，采用免疫荧光染色(IFS)和流式细胞术(FCM)检测AL细胞表面CD49d的表达水平。采用ELISA和FCM检测体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)经白血病细胞培养上清液或肿瘤坏死因子α(TNF-α)作用后细胞间黏附分子(ICAM-1)，血管细胞黏附分子(VCAM-1)的表达水平；采用甲基噻唑基四唑(MTT)法检测AL细胞与HUVEC间黏附率，并观察相应单克隆抗体对黏附的抑制作用。 结果 (1)临床浸润明显的ALL和ANLL细胞表面CD49d明显高于正常对照组和非浸润组(P<0.01)。(2)HUVEC经AL细胞培养上清液或TNF-α刺激后ICAM-1、VCAM-1表达水平均增加，但是CD49d高表达的AL细胞与HUVEC之间黏附率随VCAM-1上调而增高，与ICAM-1表达无关。 结论 AL细胞浸润与表面黏附分子CD49d表达水平有明显关系，提示，非常晚期抗原4(VLA-4)及配体VCAM-1是AL细胞与血管内皮细胞黏附作用的主要分子基础。使用相应的单克隆抗体可抑制黏附分子间的作用，阻断AL细胞的异常生物学行为，对防止AL细胞浸润具有一定的价值。

目的 探讨儿童急性淋巴细胞性白血病(ALL)WT1基因与肿瘤多药耐药基因(mdr1)表达的关系，为临床判断预后、指导个体化治疗提供依据。 方法 采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)对33例ALL患儿的同一份标本进行WT1 mRNA及mdr1 mRNA检测，用GQS-960图像处理系统软件进行半定量分析。 结果 (1)初治组ALL的WT1及mdr1阳性率分别为67%及15%，完全缓解组分别为22%及18%，复发难治组分别为92%及75%，初治组和复发难治组WT1阳性率及表达水平与完全缓解组相比，P均<0.01，复发难治组中mdr1阳性率及表达水平与初治组和完全缓解组相比，P均<0.01，差异均有极显著性；(2) WT1与mdr1表达无明显相关关系，但复发难治组WT1与mdr1均阳性者多，占67%，均阴性的为0；与初治组及完全缓解组比较差异有极显著性。 结论 ALL患儿WT1基因表达的同时出现肿瘤多药耐药基因表达，是白血病难治及复发的重要因素，提示预后差。动态监测WT1及mdr1，可预测白血病难治及复发，指导个体化治疗，有利于清除微小残留白血病细胞。

目的 比较国内制订的小儿感染性心内膜炎(infective endocarditis, IE)的诊断标准(简称试行标准)与Duke标准的诊断结果和诊断价值。 方法 33例临床诊断为IE的患儿，29例行手术治疗；4例具有尸检资料；用惠普超声心动图仪探查其心脏内赘生物。以手术、病理或尸检资料为金标准，按Duke标准和试行标准分别进行诊断分组，其诊断结果分为"确诊"、"可疑"和"排除"。 结果 23例经手术、病理或尸检证实为IE，10例排除IE。Duke标准和试行标准的特异性和阳性预测值均为100%，但Duke标准的敏感性和准确性分别为65.2%和75.8%，而试行标准分别为91.3%和93.9%。对于血培养阳性者两种标准的敏感性和特异性均为100%；对于血培养阴性患者虽然特异性和阳性预测值均为100%，但Duke标准的敏感性和准确性分别为11.1%和57.9%，而试行标准分别为77.7%和89.5%。对于33例临床诊断为IE者，两种标准的Youden指数差异无显著性(P>0.05)，但对于19例血培养阴性患儿，两种标准的Youden指数差异有显著性(P<0.01)。 结论 试行标准和Duke标准具有相同的特异性和阳性预测值，但前者敏感性和准确性较高。

目的 检测左向右分流型先天性心脏病(CHD)合并肺动脉高压患儿手术前后血浆肾上腺髓质素(ADM)的变化，同时观察血浆内皮素(ET-1)及血清一氧化氮(NO)的变化，以探讨其在CHD肺动脉高压中的作用及其临床意义。 方法 左向右分流型CHD患儿33例，其中25例成功施行了修补术；正常对照组15例。用放射免疫法测定血浆ADM及ET-1，比色法测定血清NO，并比较手术后7 d三者的变化；分析血浆ADM与ET-1、NO及肺动脉收缩压(PASP)间的相互关系。 结果 (1)CHD合并肺动脉高压组ADM明显高于无肺动脉高压组及正常对照组(P<0.05, P<0.01)，且ADM随着肺动脉高压病情的加重而升高；手术后ADM明显下降，差异有显著性(P<0.05)。(2)肺动脉高压组ET-1明显升高，术后ET-1下降，差异有显著性(P<0.05)。(3)肺动脉高压组NO明显降低，差异有显著性(P<0.05)，术后NO轻度升高，但差异无显著性(P>0.05)。(4)CHD患儿ADM及ET-1与PASP呈显著正相关(r分别为0.82、0.77，P<0.01)，ADM与NO呈显著负相关(r＝-0.56，P<0.05)。 结论 ADM、ET-1及NO共同参与了左向右分流型CHD肺动脉高压的病理生理过程。ET-1合成增多，NO合成减少，使缩血管物质与舒血管物质间失衡，促进了肺动脉高压的形成和发展；ADM的升高则为机体的一种防御性反应，对维持肺循环稳定，减缓肺动脉高压的发展有积极作用。测定血浆ADM，可作为判断肺动脉高压严重程度的一种实验方法。

目的 观察支气管哮喘患儿急性发作期、缓解期及哮喘急性发作不同程度时嗜酸性粒细胞趋化蛋白(Eotaxin)水平的变化，评价其反映哮喘气道炎症的临床价值。 方法 采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)方法对51例哮喘急性发作患儿、47例哮喘缓解期患儿及30例正常儿童的外周血标本进行血清Eotaxin水平的测定，并对其中9例哮喘急性发作患者、10例哮喘缓解期患者及8例正常人的外周血做了外周血单个核细胞(PBMC)分离和培养，并测定了PBMC表达的Eotaxin水平。 结果 哮喘急性发作组血清Eotaxin水平为(137±64)ng/L，缓解期组为(94±36)ng/L，正常组为(80±41)ng/L，(F＝13.57，P<0.001)；且急性发作组Eotaxin水平的升高程度与病情严重程度相关，中、重度组Eotaxin水平为(160±72)ng/L，高于轻度组(112±48)ng/L(t＝2.849，P<0.01) 。而三组的PBMC的Eotaxin水平均极低，不能被测出。 结论 血清Eotaxin升高是反映哮喘急性发作、病情严重程度及气道炎症变化的较为客观的指标。

目的 探讨CAP过敏原检测系统在高危哮喘儿中的应用。 方法 对82例高危哮喘儿和40例支气管肺炎患儿(无过敏病史)进行吸入性变应原过筛试验(Phadiatop)、血清尘螨特异性IgE(sIgE)检测。 结果 高危哮喘组Phadiatop阳性率为56.1%，支气管肺炎组Phadiatop阳性率为20.0%，两组比较差异有显著意义(χ2＝14.20, P<0.01)；高危哮喘组尘螨sIgE阳性率为47.6%，支气管肺炎组为5.0%，两组比较差异亦有显著意义(χ2＝21.85，P<0.01)。Phadiatop和尘螨sIgE检测的敏感性分别为56.1%和47.6%；特异性分别为80.0%和95.0%；阳性符合率分别为63.9%和63.1%；假阳性率分别为20.0%和5.0%；两种检测方法一致率为89.3%，经一致性χ2检验，有较好的一致性(χ2＝77.76，P<0.01)。 结论 Phadiatop可用于高危哮喘儿的筛查；与Phadiatop相比，尘螨sIgE特异性高，假阳性较低，Phadiatop阳性者应行尘螨sIgE检测。尘螨是高危哮喘儿的常见致敏原。对于高危哮喘儿，CAP检测是一种可用于筛查和寻找过敏原的重要体外检测手段。

目的 探讨一氧化氮(NO)在缺血再灌注脑损伤中的作用，比较两类钙通道阻滞剂的脑保护作用。 方法 采用四血管夹闭法制作兔脑缺血再灌注模型。首先测定假手术及再灌注不同时间兔脑皮层NO及含水量。并将动物分为假手术组、安慰剂组、尼莫地平组、氯胺酮组、尼莫地平＋氯胺酮治疗组，于再灌注30 min开始持续静脉给药至再灌注6 h。测定脑皮层NO、含水量、细胞内游离钙([Ca2＋]i)相对荧光强度。 结果 再灌注后脑皮层NO、含水量逐渐升高，于再灌注6 h达较高水平[分别为(14.7±1.7) μmol/g，(86.7±1.9)%，P<0.05]，NO与含水量间具有相关性(P<0.01)。尼莫地平、尼莫地平＋氯胺酮组NO明显降低[分别为(5.1±0.9)μmol/g、(5.1±1.1)μmol/g，P<0.01]，尼莫地平、氯胺酮以及尼莫地平＋氯胺酮组含水量明显降低[分别为(76.3±4.0)%、(81.0±1.9)%、(78.2±1.4)%，P<0.01]，尼莫地平组较氯胺酮组降低更明显(P<0.01)。安慰剂组[Ca2＋]i较假手术组明显升高[分别为(26.8±1.4)、(5.0±0.4)，P<0.01]，尼莫地平、氯胺酮及尼莫地平＋氯胺酮治疗后[Ca2＋]i明显降低[分别为(7.7±1.1)、(13.3±2.0)、(9.0±2.0)，P<0.01]。尼莫地平组较氯胺酮组降低更明显(P<0.01)。 结论 NO与脑缺血再灌注损伤的发生有密切关系。尼莫地平、氯胺酮均有一定脑保护作用，但氯胺酮作用弱于尼莫地平。

目的 回顾随机对照试验(RCT)研究对评估儿科危重症医学预防和治疗措施的益处及对其的争议。 结论 RCT设计能控制其他研究方法所不能控制的许多潜在偏差的发生。RCTs结果常可否定那些设计不够严谨的实验结果。在进行RCT前，研究者不能预先对所要研究的两种或多种临床治疗有偏见，必须有足够数量的合格患儿，而且必须对疾病流行病学存在的问题进行很好的分析。在进行高质量的RCTs研究时会遇到很多挑战。对危重病多因素生命支持措施进行研究较对单一药物治疗研究困难得多。由于患儿及临床实践的变异较大，且疾病诊断不明，致使信息与背景干扰的差异减小。多数危重症的治疗措施可能仅有中度或轻微疗效，因此大大增加了所需样本含量。只有很少一部分方法被临床接受，用于评估危重患儿的预后，如常以死亡率评估罕见事件的预后。处于发展过程中的事件，不能予以满意解释和未能成功进行药代动力学研究及安全性研究是儿科研究人员面临的另一些挑战。尽管存在这些限制，但一个好的RCT仍然是证明一种治疗有效与否的最好方法。的确，RCTs目前是而且会一直是评估一种治疗或预防措施有效与否的金标准。