2001年 · 第39卷第03期

目的 了解中国人戈谢病(GD)基因型及其与临床表型的相关性。 方法 10例中国GD患儿(男9，女1。其中5例Ⅰ型，2例Ⅱ型，3例Ⅲ型)，来自无关的家庭，年龄1.5~13岁。所有GD患儿的诊断是根据白细胞或成纤维细胞中β-葡萄糖苷酶活性明显缺乏及骨髓象中出现戈谢细胞确定。采用巢氏聚合酶链反应扩增葡萄糖脑苷脂酶功能基因，产物覆盖了全部编码区；再分别扩增11个外显子，用于限制酶切片断多态性(RLFP)，单链构像多态性(SSCP)及序列分析。 结果 5例Ⅰ型GD患儿的基因型是R48W/R120W、 G46E/L444P、 F37V/L444P、 N188S/L444P及Y205C/L444P; 2例Ⅱ型GD均为F213I/L444P; 3例Ⅲ型GD为D409H/D409H、 G202R/D409H及L444P/L444P。检出了2个新生突变F37V及Y205C。 结论 中国GD患儿的L444P突变的等位基因频率最高(40%)。它同时出现在有神经病变及无神经病变的表型中。F213I、D409H及G202R突变基因型与有神经病变表型相关。

目的 分析中国儿童家族性高胆固醇血症低密度脂蛋白受体基因突变，并建立筛查该基因突变的方法。 方法 以一家两患儿及其父母的基因组DNA为模板，用聚合酶链反应(PCR)扩增该基因的启动子和全部18个外显子。用温度梯度凝胶电泳(TGGE)分析检测PCR产物，对电泳结果异常者进行DNA测序。 结果 平行TGGE发现，两患儿第13外显子存在一纯合突变，其父母此外显子存在杂合突变。DNA测序证实两患儿第13外显子发生Ala606→Thr纯合错义突变，其父母均为此Ala606→Thr杂合突变。 结论 此家系家族性高胆固醇血症患者的LDL受体基因存在Ala606→Thr突变。TGGE结合DNA测序法的建立可用于本症的基因诊断。

目的 通过临床表现和实验室检查探讨我国主动脉瓣上狭窄(SVAS)患儿中Williams综合征(WS)的诊断标准。 方法 对26例因SVAS就诊的患儿，根据Lowery的WS表现型评分表对主要症状进行评分，同时观察患儿一般症状，并采用荧光原位杂交(FISH)技术检测WS相关的弹性蛋白(ELN)基因和LIM激酶1(LIMK1)基因的微缺失情况。 结果 26例SVAS患儿中，WS表现型评分大于4分者19例，均存在ELN基因和LIMK1基因的微缺失。等于4分者3例，小于4分者4例，均未检测到相关基因的缺失。 结论 SVAS患儿中，Lowery的WS表现型评分大于4分者可诊断为WS，WS患儿存在ELN基因和LIMK1基因的微缺失。

目的 制作中国人Turner综合征(TS)自然生长曲线。研究Turner综合征患儿自然生长规律。 方法 对全国5省市8所医院确诊的253例TS患者治疗前的身高、体重和骨龄进行观测。同一患者的2次测量值间隔至少超过1年才作为2例次参数计，共取得289个身高值和106个骨龄值。身高值经曲线参数估计法绘制曲线并与正常女孩生长曲线进行比较。 结果 患儿平均出生身长为(47.2±2.5) cm,身长标准差得分(HtSDS)为-1.52。3岁至13岁各年龄组患儿平均身高及其HtSDS值随年龄增大与正常值差距增大， HtSDS从3岁的-2.11降至13岁的-4.83,患儿平均身高与同年龄正常身高均数之差由3岁的8.03 cm增加至13岁的27.89 cm,从13岁起逐渐减少至20岁的18.87 cm。成年身高为(140.0±7.9) cm。8岁前TS患儿生长曲线~(＋2s)的范围与正常女孩曲线~(-2s)的范围重叠，8岁起开始偏离，13~14岁时完全偏离。TS患儿生长曲线在青春期无生长高峰表现，年龄与骨龄差值随年龄增大而增大。12岁以前差值<2岁，13岁起差异增大(>3岁)。 结论 TS患儿身高和骨龄随年龄增长逐渐偏离正常生长曲线，无青春期生长高峰，生长时间较正常人为长。

目的 研究人类白细胞抗原DQA1(HLA-DQA1)等位基因与桥本甲状腺炎(HT)的相关性。 方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)基因分型技术，对51例HT患儿及51名正常儿童对照进行了HLA-DQA1基因分型并计算比较其基因频率。所有研究对象均为天津汉族儿童。 结果 在HT组，HLA-DQA1*0301等位基因频率明显高于正常对照(44.12%对28.43%, RR＝1.99，P<0.025)而HLA-DQA1*0201等位基因频率则明显低于正常对照(5.88%对18.63%, RR＝0.27，P<0.01)。 结论 HLA-DQA1*0301可能是HT的一个易感等位基因，而HLA-DQA1*0201则可能是一个保护等位基因， HT的发病与HLA-DQA1基因位点密切相关。

目的 研究儿童1型糖尿病TH1/TH2免疫应答状况。 方法 测定30例儿童1型糖尿病和30例健康儿童的干扰素γ(IFN-γ)、IL-4水平。根据不同病程、不同糖化血红蛋白(HbA1c)水平及自身抗体的存在与否进行比较。 结果 1型糖尿病患儿的IFN-γ水平高于对照组，但差异无显著性。其中病程<2年者，IFN-γ水平高于病程≥2年者，但差异无显著性。1型糖尿病患儿的IL-4水平明显低于对照组(P<0.01)。 IFN-γ/IL-4比值明显高于对照组(P<0.01)。HbA1-c<7.0%、HbA1-c 7.0%~9.0%及HbA1-c>9.0%的三组患儿作IFN-γ、IL-4水平及IFN-γ/IL-4比值比较，差异无显著性。自身抗体阳性患儿和自身抗体阴性患儿的IFN-γ、IL-4水平及IFN-γ/IL-4比值比较差异无显著性。 结论 儿童1型糖尿病存在TH1细胞免疫应答增强，TH2细胞免疫应答减弱，且这种特征在糖尿病发病早期表现得更突出。

目的 探讨肾活检免疫病理"满堂亮"(指肾组织免疫荧光染色IgG、IgA、IgM、C3、C1q同时阳性)的现象与临床肾脏疾病关系。 方法 对1984~1999年有完整临床资料及肾活检免疫荧光呈"满堂亮"的50例病例进行分析。 结果 50例"满堂亮"的诊断为：(1)狼疮性肾炎21例，其病理改变Ⅱ型(系膜增生型)4例，Ⅲ型(局灶节段型)5例， Ⅳ型(弥漫增殖型)9例，V型(膜型)3例。(2)乙型肝炎病毒相关肾炎13例，其病理为轻系膜增生型4例；膜性肾病7例；膜增生型肾小球肾炎2例。(3)过敏性紫瘢性肾炎(均为肾病型)9例。 (4)IgA肾病6例。(5)抗中性粒细胞胞浆抗体阳性的急进性肾小球肾炎1例。 结论 (1)"满堂亮"现象可见于多种肾小球疾病，最多见于狼疮性肾炎，是狼疮性肾炎最有特征性的免疫病理改变。(2)"满堂亮"现象也可出现于乙型肝炎病毒相关肾炎。(3)对呈'满堂亮’而临床诊断为非狼疮性肾炎的病例应追踪观察，尤应注意其与狼疮性肾炎的密切关系。以便发现某些延迟出现狼疮血清学阳性反应的和(或)狼疮临床表现的狼疮患者。

目的 探讨人脐血CD＋,34细胞体外诱导树突状细胞(dendritic cells，DCs)的可能性，并检测DCs的功能。 方法 利用吸附单克隆抗体-磁珠分离系统(MACS)获得脐血CD＋,34细胞，体外以重组的人干细胞集落刺激因子(hSCF)、人粒-巨噬细胞集落刺激因子(hGM-CSF)、人肿瘤坏死因子α(hTNF-α)、人酪氨酸激酶受体家族III的配体(hFL)诱生DCs。流式细胞仪检测DCs的表型，3H-TdR掺入法检测DCs体外刺激同种异体T细胞增殖的功能，最后通过乳酸脱氢酶法检测DCs活化的T细胞对肿瘤细胞的杀伤性。 结果 从人脐血分离到的CD＋,34细胞，经hSCF、hGM-CSF、hTNF-α、hFL共同培养后，第7天镜下即可见典型形态的DCs，第10天时明显增多，细胞表型检测见CD＋,1a细胞的比例增加到(28±4)%(P<0.01)，人类白细胞抗原DR(HLA-DR)表达占(94±11)% 。在三种不同的混和比例下，DCs均可刺激异源T细胞增殖，其中以DCs∶T细胞为1∶5时增殖最明显。而且被激活的T细胞对三种不同组织来源的肿瘤细胞均产生了明显的杀伤性(P<0.01)。 结论 人脐血CD＋,34细胞体外经细胞因子诱导培养，可生成大量具有典型功能的成熟DCs。

目的 观察过敏性紫癜(HSP)患儿是否存在T淋巴细胞功能紊乱，以探讨其发病原理。 方法 分别采用单向免疫扩散法、酶联免疫吸附实验(ELISA)和流式细胞技术，检测HSP患儿血清、外周血单个核细胞(PBMC)培养上清液中免疫球蛋白的浓度、细胞因子水平及PBMC细胞膜上CD30的表达。 结果 HSP患儿血清IgA为( 1.6±0.5) g/L,对照组(1.0±0.5)g/L；IgE(4.4±3.5) mg/L，对照组(1.1±0.7)mg/L，水平明显增高。PBMC产生IgG亚类：(中位数比较)G1为1.20 mg/L，对照组0.15 mg/L；G2为1.13 mg/L，对照组0.12 mg/L；G3 0.34 mg/L，对照组0.02 mg/L；G4 0.17 mg/L，对照组0.014 mg/L。IgE 0.05 mg/L，对照组0.03 mg/L。IL-4 33 ng/L，对照组16 ng/L；IL-5 47 ng/L，对照组10 ng/L；IL-6 498 ng/L，对照组310 ng/L，均较对照组增高。产生IL-2 137 ng/L，对照组1 537 ng/L；产生干扰素γ 395 ng/L，对照组721 ng/L，较对照组减少。表达CD30 (14.3±5.8)%，对照(4.4±2.9)%，明显增强。IL-4与IgE(r＝0.87)及IL-5与IgA(r＝0.63)呈正相关关系。 结论 HSP患儿存在T淋巴细胞功能紊乱。

目的 建立一种高效、快速、灵敏的方法，探讨6-巯嘌呤(6-MP)细胞药理学。 方法 应用反相高效液相色谱分析技术，定量测定急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿红细胞内6-MP三种代谢产物浓度：6-巯嘌呤核苷酸(6-TGN), 6-次黄巯嘌呤单核苷酸(6-TIMP)和6-甲基巯嘌呤(6-MeMP)。选择31例ALL缓解期随访的患儿，口服6-MP 50~75 mg/(m2·d)治疗2个月以上且期间未进行强化治疗者。 结果 红细胞内6-TGN和6-MeMP浓度个体间差异很大。6-TGN浓度为50~692 pmol/8×108 RBC，口服相同剂量时个体间变异系数(CV)为72%。 6-MeMP浓度为0.7~29.1 nmol/ 8×108RBC。6-TGN与6-MeMP大致成负相关(r＝-0.582 9，P＝0.002)；口服6-MP个体间耐受性差异很大，6-TGN浓度与6-MP剂量无线性关系，而与剂量强度成正相关。6-TGN浓度与治疗后白细胞数及中性粒细胞绝对值呈负相关(r＝-0.668 1，P＝0.004和r＝-0.656 4, P＝0.003)。此外，6-TGN浓度与诊断时白细胞数、年龄、维持治疗时间、免疫分型等均无关。 结论 6-MP的细胞药理学变异与其细胞毒作用有密切关系，红细胞内6-TGN浓度能较好地反映6-MP的治疗强度，而且可能为一种独立的影响疗效的因素。检测6-MP细胞内活性产物浓度有助于进行剂量个体化治疗，并为随访观察6-MP细胞药理学与ALL患儿复发危险性的关系提供依据。