1999年 · 第37卷第05期

目的 观察诱导分化剂对抗肿瘤药物促进HL-60细胞凋亡的影响。 方法 采用苏木精染色、流式细胞仪及DNA电泳的方法，研究全反式维甲酸（ATRA）分别与阿糖胞苷、长春新碱、鬼臼乙叉甙、柔红霉素4种抗肿瘤药协同作用后HL-60细胞凋亡的发生情况。 结果 当先以ATRA作用HL-60细胞3天后再分别给予抗肿瘤药物，发现各个药物引起的凋亡细胞的数量减少60%以上。反之，先以抗肿瘤药作用后再以ATRA处理HL-60细胞，各个药物可使凋亡细胞的数量增加15%以上。 结论 ATRA对某些抗肿瘤药的促HL-60细胞凋亡作用可能有一定影响。

目的 探讨多肿瘤抑制基因（MTS1）突变与恶性血液病间的关系。 方法 应用聚合酶链反应-单链构象多态性（PCR-SSCP）分析和DNA印迹（southern blot）方法检测35例急性白血病患儿MTS1基因的改变。 结果 急性淋巴细胞白血病（ALL）患儿的MTS1基因缺失（包括点突变）为26%（8/31），其中纯合子缺失，B-ALL为16%（4/25），T-ALL为6例中有2例。点突变则两型各占1例。 结论 我国儿童ALL有MTS1基因失活，T-ALL高于B-ALL，点突变仅见于少数病例。提示该基因的失活与小儿急性白血病的发生、发展及预后有密切关系。

目的 探讨采用筑巢式聚合酶链反应（Nested-PCR）等多项指标监测小儿急性淋巴细胞白血病（ALL）微量残留病（MRD）的临床意义。 方法 98例ALL进行了形态学、免疫学和细胞遗传学（MIC）分型，结合Nested-PCR、姐妹染色单体交换（SCE）、染色体核型分析，对58例ALL进行MRD监测。 结果： （1）58例ALL进行了T细胞受体（TOD）Vδ2Dδ3基因重排检测，在41例B-ALL中34例（83%）及4例T-ALL中1例具有此基因重排。检测敏感度为10-5~10-6。（2）58例ALL中44例ALL进行了MRD-PCR动态监测。结果显示，维持强化治疗期间PCR检测由阴性转为阳性或持续阳性者，易引起骨髓复发死亡，提示预后较差。PCR检测转阴时间有明显的个体差异性，持续完全缓解（CCR） 3年以上的ALL患儿PCR持续转阴可作为停用化疗药的可靠指标。（3）50例ALL进行了SCE的动态监测，初发组SCE频率高于CR组，差异有非常显著意义（P< 0.001）。部分缓解组显著高于CR组（P<0.01），SCE频率变化与疾病的严重程度呈平行关系。（4）初发ALL中无论染色体核型正常或异常其SCE频率均显著增高，两者无显著性差异（P>0.05），表明均有DNA严重损伤。 结论 在MIC分型诊断的基础上，采用Nested-PCR、SCE、染色体核型分析等指标进行ALL的MRD动态监测，综合分析评价，对指导治疗、预测复发、决定终止化疗时间及判断预后有临床意义。

目的 探讨郎格罕组织细胞增生症是否与免疫遗传学有关。 方法 采用国际标准人类白细胞抗原（HLA）抗血清和国际标准微量淋巴细胞毒试验方法，对北京地区经北京儿童医院确诊的48例年龄为2.5~15岁的朗格罕组织细胞增生症患儿进行了HLA-A、HLA-B、HLA-DR抗原检测，并以100例北京健康成人作为对照组进行分析。 结果 本病患儿呈显著性增高的抗原有HLA-DR3（RR =7.46、Pc<0.01）和HLA-B40（RR= 3.44、Pc<0.04），提示它们可能为易感基因。而HLA-B35（RR=0.07、Pc<0.01）在患儿组呈显著性减少，另一个下降的抗原是HLA-DR9（RR =0.28，Pc< 0.04）。 结论 HLA与朗格罕组织细胞增生症的发病有一定关系，这为本病与免疫遗传关系的研究提供了线索。

目的 观察新发现的两种苯丙氨酸羟化酶基因突变与临床表现型的关系，对其中一个位点进行基因表达的研究。 方法 通过变性梯度凝胶电泳（DGGE）突变检测和固相DNA直接序列分析等方法，对58例苯丙酮尿症（PKU）患儿进行突变检测，对新突变进行体外寡核苷酸定点诱变和在COS细胞中PAH活性表达研究。 结果 共发现有IVS6nt-1的G→A突变和Arg252Gln突变的患儿7例，均有典型的PKU临床表现，并有不同程度的智能低下，苯丙氨酸浓度均大于1.2 mmol/L。带有Arg252Gln突变位点的cDNA表达的PAH酶活性为野生型的24%。 结论 上述两种新发现的突变是致病性的，但相同基因型的患者临床表现并不均一；携带Arg252Gln位点突变的患者PAH酶活性明显降低。

目的 应用苯丙氨酸羟化酶（PAH）基因内（TCTA）n多态性连锁分析进行经典型苯丙酮尿症（PKU）的基因诊断和产前诊断。 方法 应用聚合酶链反应-扩增片段长度多态性（PCR-Amp-FLP）方法，分析云南省13个家系苯丙氨酸羟化酶（PAH）基因内（TCTA）n多态性。 结果 在13个家系中检测到224~252 bp的8种等位片段，其PIC为0.698，杂合频率是51%。可诊断率为100%和50%的家系各6个，1个家系因双亲带型为纯合型而未能诊断，可诊断率为69%。完成1例产前基因诊断和2例回顾性的基因诊断。 结论 （TCTA）n的PCR-Amp FLP分析可作为经典型PKU基因诊断和产前诊断的一种简便有效的方法。

目的 探讨心力衰竭（简称心衰）患儿血浆内皮素（ET）和血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）的变化，并观察苯那普利对心衰患儿的疗效。 方法 40例充血性心力衰竭（CHF）患儿中坚持药物疗程的为35例，分为苯那普利组（20例）和常规组（15例）。用放射免疫法测定血浆ET和AngⅡ, Percoll密度梯度离心法测定循环内皮细胞（CEC），比色法测定血管紧张素转换酶（ACE）。常规组用常规抗心衰治疗（洋地黄，利尿剂及血管扩张剂）；苯那普利组在常规治疗基础上加用苯那普利，疗程8周，观察二组疗效。 结果 正常对照组20例和CHF组40例血浆ET、CEC、AngⅡ和ACE水平分别为（80± 19） ng/L对（130±51）ng/L;（2.6± 1.3）个细胞／0.9 μl对（6.6±2.7）个细胞／0.9 μl；（96± 36）ng/L对（230 ±95） ng/L;（327±38）IU/L对（414±77）IU/L，CHF组各项指标显著增高（P值均<0.001）。苯那普利组治疗后ET、CEC、AngⅡ及ACE明显下降，与治疗前比较t分别为3.82、5.64、3.92、8.45，P值均<0.01；而常规组治疗前后差异无显著意义，P值均>0.05。 结论 CHF患儿血浆ET、CEC、AngⅡ及ACE水平高于正常对照组，苯那普利组疗效明显优于常规组。

目的 查明1997年11月在北京医院产科母婴同室病房发生的新生儿腹泻暴发流行的病原。 方法 对患儿的粪便进行了细菌培养及聚丙烯酰胺凝胶电泳检测，并进一步采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）扩增标本中检测到的轮状病毒VP7全基因及VP4基因，再用巢式PCR和核酸杂交分别对扩增得到的VP7及VP4基因进行分型。 结果 采集到的9例腹泻患儿的粪便标本中显示完全一致的A组轮状病毒核酸图型，而4例无腹泻症状的新生儿粪便标本3例为阴性，1例为阳性（经随访，该例患儿出院后发生腹泻），表明这是一次由轮状病毒引起的新生儿腹泻流行。此次新生儿腹泻标本中检测到的轮状病毒均为VP4 2型（P2）、VP7 4型（G4）型，不同于从同期门诊收集到的婴幼儿腹泻标本中的轮状病毒。 结论 通常认为P2型轮状病毒是无毒株或减毒株，仅引起新生儿的无症状感染，而作者的研究证明：（1）此次新生儿腹泻暴发流行的病原为轮状病毒是独立的病原；（2） P2型轮状病毒可以引起较严重的新生儿腹泻的暴发流行。这是国内外首次报告由P2型轮状病毒引起新生儿病房内腹泻的暴发流行，对该病毒株的更深入的分子生物学研究将进一步进行。

目的 探讨流行性喘憋性肺炎（简称流喘肺炎）与散发肺炎呼吸道合胞病毒（RSV）分离株F蛋白的异同。 方法 采用PCR片段直接测序及克隆测序，对11株流喘肺炎RSV分离株及5株散发肺炎RSV分离株F蛋白基因序列进行了分析比较。 结果 被检测流喘肺炎RSV分离株中，36%（4/11）的毒株其F蛋白基因3'非编码区（3'-NCR） （第1741位核苷酸）存在6个核苷酸插人，而散发肺炎RSV分离株均无此插入存在。 结论 RSV流喘肺炎分离株与散发肺炎分离株F蛋白基因的3'-NCR有差异。

目的 评价结节性硬化症的临床特征和CT、MRI对其诊断价值。 方法 对16例结节性硬化症患儿的临床资料进行分析。 结果 16例患儿的临床特征为起病年龄3岁以内15例，占93%，全部患儿均以癫痫发作为首发症状，有皮肤表现者13例，占81%，以色素脱失斑最多见，智力低下者3例，占19%，全部患儿均有脑CT或MRI改变，对3例不典型病例通过脑CT检查确诊。 结论 癫痫、特殊的皮肤损害为本病的主要临床特征，脑CT或MRI检查有助于明确诊断。