Open Access
Proteomic analysis of nuclear matrix proteins during arsenic trioxide induced apoptosis in leukemia K562 cells WANG Zi-hui, YU Ding, CHEN Yan, HAO Jian-zhong
Chinese Medical Journal Vol.118, No.02 2005
DOI: 10.3760/cma.j.issn.0366-6999.2005.02.102
背景 三氧化二砷2O3 )已被鉴定为非常有效的抗急性白血病剂。然而，它在细胞凋亡中的作用需要阐明。作为2 O3 通过多种机制干扰肿瘤细胞的增殖和存活。核基质(NM)水平的药物-靶相互作用可能是As诱导细胞死亡的关键事件2 O3 本研究涉及As2 O3 -通过蛋白质组学在慢性髓性白血病细胞系K562中NM水平的靶标相互作用。
方法 K562细胞在MEM中培养，并用不同浓度的As处理2 O3 通过高分辨率双向凝胶电泳和计算机辅助图像分析对核基质蛋白进行分析。
结果 作为2 O3 在低浓度下显著抑制慢性粒细胞白血病细胞株K562的生长。虽然在核基质中有超过200个蛋白质点是共有的，但在核基质中发现了大约18个不同的点是As的特征2 O3 处理过的细胞。
结论： 作为2 O3 以剂量和时间依赖性方式诱导K562细胞凋亡。我们的结果表明，对于检测凋亡的开始，核基质蛋白组成的改变是比核小体DNA片段化试验更敏感的指标。这些结果表明2 O3 可能在临床上用于治疗慢性粒细胞白血病。处理细胞中核基质蛋白的变化可以作为该处理的有用指标。118(2)：100-104
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Experimental studies of the effects of ZnPcS2 P2 -based-photodynamic therapy on bone marrow purging HUANG Hui-fang, CHEN Yuan-zhong, WU Yong
Chinese Medical Journal Vol.118, No.02 2005
DOI: 10.3760/cma.j.issn.0366-6999.2005.02.103
背景 有效的清除技术在自体造血干细胞移植中起着重要作用。光动力疗法（PDT）为此提供了一种新的方法。本研究探讨了二磺基二邻苯二甲酰亚胺甲基酞菁锌（ZnPcS）的净化作用2 P2 ）为基础的光动力疗法（ZnPc-PDT）。
方法 使用荧光分光光度法测量细胞提取物的荧光强度。采用MTT比色法、Typan蓝排斥法、集落形成法检测K562细胞和HL60细胞的增殖能力。使用混合物集落形成单位（CFU-Mix）、粒细胞—巨噬细胞集落形成单位（CFU-GM）和红细胞集落形成单位（CFU-E）测定法评估正常造血细胞的增殖效力。将K562细胞与正常单核细胞（MNCs）以1:10 0和1:10 00的比例混合，用于创建模拟缓解骨髓模型。进行集落形成试验和巢式RT-PCR检测细胞混合物中残留的K562细胞。
结果 与ZnPcS孵育5小时后2 P2 、ZnPcS的含量2 P2 在正常MNCs中是最低值。同时在K562细胞和HL60细胞中含量很高。因此，选择时间点作为照射细胞悬浮液的最佳时间点。ZnPc-PDT可显著杀伤增殖K562细胞和HL60细胞，且呈剂量依赖性。在1.0 μ g/ml浓度下，ZnPc-PDT对K562细胞集落形成的抑制率为100%，89。7% 对于HL60细胞。0.25 μ g/ml ZnPc-PDT可使模拟缓解期骨髓中残留的K562细胞完全光灭活。在相同条件下，CFU-Mix、CFU-GM、CFU-E的抑制率分别为18.0%、18.6% 和17。8% 分别地。
结论 ZnPc-PDT似乎是一种有前途的骨髓清除方法。中国医学杂志2005；118（2）：105-110
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Change and significance of nuclear factor-κB in adriamycin induced cardiomyopathy in rats LI Hong-li, LIU Bin, ZHOU Ling-wang, YU Wei-han
Chinese Medical Journal Vol.118, No.02 2005
DOI: 10.3760/cma.j.issn.0366-6999.2005.02.104
背景 本研究旨在探讨核因子-κ B(NF-κ B)在阿霉素(ADR)诱导的大鼠心肌病中的变化及其意义。
方法 将60只雄性Wistar大鼠随机分为3组：对照组、ADR组和ADR+吡咯烷二硫代氨基甲酸酯（PDTC）组。实验30天后，进行心肌组织病理学观察。通过免疫组化检测NF-κ B p50的位置和分布。通过免疫栓法检测NF-κ B p50蛋白的表达。电泳迁移率偏移测定检测NF-κ B的活性；RT-PCR检测心肌p53基因表达。
结果 ADR+PDTC组大鼠心肌损害较ADR组轻。与对照组相比，心肌细胞核表达NF-κ B p50并分布于心外膜下。ADR组核内NF-κ B p50蛋白表达显著增加。ADR组NF-κ B结合活性显著升高。ADR组心肌p53 mRNA表达增加。
结论 在ADR诱导的大鼠心肌病中，NF-κ B结合活性显著升高。此外，NF-κ B在引起心肌组织变性和调节相关凋亡基因的表达中起重要作用。中国医学杂志2005；118（2）：111-115
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Effects of antihypertensives on arterial responses associated with obstructive sleep apneas ZHONG Xu, XIAO Yi, Basner Robert C.
Chinese Medical Journal Vol.118, No.02 2005
DOI: 10.3760/cma.j.issn.0366-6999.2005.02.105
背景 许多阻塞性睡眠呼吸暂停综合征（OSAS）患者合并高血压，可能会开抗高血压药物来控制他们的血压。但是抗高血压药物是否也可以降低动脉僵硬度或控制梗阻事件后血压升高还没有很好的描述。本研究旨在探讨抗高血压药物是否可以改善与OSA相关的动脉僵硬度和血压的变化。
方法 61例OSAS患者[13例女，48例男，平均年龄(53.4±12.3)岁]，26例血压正常患者(N)，7例未服用抗高血压药物的高血压患者(H)，28例接受各种联合抗高血压治疗的高血压患者(HM)，均采用标准夜间多导睡眠图进行前瞻性诊断。在基线睡眠期间，通过压平眼压计从桡动脉连续记录每搏血压。作为动脉僵硬度的量度，动脉增强指数(AAI)计算为增强的收缩压(SBP)与脉压的比率，并表示为以下情况的百分比：觉醒、阻塞性事件（呼吸暂停或呼吸不足）的前10个（“早期呼吸暂停”）和最后10个（“晚期呼吸暂停”）心动周期，以及对于最低点为0的所有事件，事件终止后的前15个心动周期（“呼吸暂停后”）2 饱和度≤89%。
结果 呼吸暂停后收缩压(SBP)[(142.74±13.06)mmHg(N)、(137.06±26.56)mmHg(H)、(136.94±14.1)mmHg(H)]分别较觉醒后[(135.76±14.76)mmHg(N)、(135.58±23.17)mmHg(H)、(129.77±14.00)mmHg(H)、(124.47±24.97)mmHg(H)、(126.04±13.12)mmHg(H)、(124.48±13.82)mmHg(H)]、觉醒后[(129.8±12.68)mmHg(H)、(124.48±13.82)mmHg(H)]显著升高(P <0.001，重复测量ANOVA)。N组的AAI显著升高（P< 0.001）从觉醒到晚期呼吸暂停[(10.45±2.62)%vs(14.43±3.21)%]和从早期呼吸暂停到晚期呼吸暂停[(10.61±2.34)%vs(14.43±3.21)%]P <0.05)从觉醒到晚期呼吸暂停[(11.23±3.87)%vs(16.32±8.02)%]和从早期呼吸暂停到晚期呼吸暂停[(11.75±3.79)%vs(16.32±8.02)%]。同时，HM组在觉醒、早期呼吸暂停、晚期呼吸暂停和呼吸暂停后状态下的AAI无显著差异。
结论 目前的数据表明，与觉醒期和呼吸暂停期相比，OSAS呼吸暂停后期的全身血压显著升高，即使使用联合抗高血压治疗可以使高血压患者觉醒期间的血压正常化。然而，阻塞性事件期间动脉僵硬度的增加可以通过联合抗高血压药物来改善。中国医学杂志2005；118（2）：123-129
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Effect of nicardipine combined with esmolol on systemic and tissue oxygenation during off-pump coronary artery bypass grafting surgery WANG Tian-long, JIANG Yan, YANG Ba-xian
Chinese Medical Journal Vol.118, No.02 2005
DOI: 10.3760/cma.j.issn.0366-6999.2005.02.106
背景 非体外循环冠状动脉旁路移植术（OPCABG）期间血流动力学和氧合严重波动。本研究旨在探讨尼卡地平联合艾司洛尔（1:10）在OPCABG期间是否能维持全身和组织氧合。
方法 20例拟行OPCABG的患者随机分为尼卡地平（N）组和硝酸甘油（X）联合艾司洛尔（E）组（剂量比：1~10）（N+E组和X+E组），每组10例。麻醉诱导后，滴定N+E或X+E的混合溶液以将平均动脉血压维持在70至80 mmHg之间。在以下时间点测量血流动力学变量、动脉血乳酸含量(Lac)和胃粘膜内二氧化碳分压：麻醉诱导后2 ）、血运重建前（T2 ），左前降支移植（T3 ）、右冠状动脉降支（T4 ）和左冠状动脉回旋支（T5 ）、血运重建后（T6 ），操作结束（T7 ).氧气的输送2 ）、耗氧量（VO2 ）和胃粘膜内pH（pHi）。
结果 N+E组心脏指数(CI)显著升高（P <0.05）与T相比1 OPCABG期间，X+E组轻度降低。T时的每搏输出量4 , T5 在N+E组和T组3 -T6 X+E组显著降低（P <0.05).N+E组全身血管阻力指数较T组显著降低1 (P <0.05).这两组患者术中心率均显著升高（P <0.05).DO2 输注N+E后显著增加（P <0.05）或调平至T1 和Lac均在正常范围内。但确实如此2 X+E组在整个手术过程中降低，在T时达到显著水平5 (P <0.05），Lac显著升高超出正常范围（P <0.05).N+E组在OPCABG期间pHi维持在7.35以上，而T组pHi低于7.354 到T7 在X+E组。
结论 尼卡地平联合艾司洛尔（1:10）方案可维持OPCABG期间的全身和组织氧合。中国医学杂志2005；118（2）：130-135
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Relationship between antimicrobial resistance and aminoglycoside-modifying enzyme gene expressions in Acinetobacter baumannii SHI Wei-feng, JIANG Jian-ping, Ml Zu-huang
Chinese Medical Journal Vol.118, No.02 2005
DOI: 10.3760/cma.j.issn.0366-6999.2005.02.107
背景 鲍曼不动杆菌 是临床上主要的革兰阴性杆菌之一。多药耐药引起的医院感染鲍曼不动杆菌 很难治疗。本研究旨在探讨N-乙酰转移酶和O-磷酸转移酶等4种氨基糖苷类修饰酶的耐药特征和耐药基因表达鲍曼不动杆菌。
方法 采用Phoenix进行细菌鉴定和药敏试验TM 247株鲍曼不动杆菌。 庆大霉素、阿米卡星、卡那霉素、妥布霉素、奈替米星、新霉素和链霉素等7种氨基糖苷类药物对15株多重耐药菌株的最低抑菌浓度鲍曼不动杆菌 通过琼脂稀释检测。采用聚合酶链反应（PCR）扩增了4个氨基糖苷类修饰酶基因，并经DNA测序仪验证。
结果 247株细菌耐药率鲍曼不动杆菌 对头孢噻肟、左氧氟沙星、哌拉西林、氨曲南、四环素、环丙沙星、氯霉素均超过50%。亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为3.2%和4.1%。麦克风50 和麦克风90 庆大霉素、阿米卡星、链霉素和卡那霉素对15株多重耐药菌株的影响鲍曼不动杆菌 均大于1024 mg/L，耐药率分别为100%、100%、100%和93.3%。对妥布霉素、奈替米星和新霉素的耐药率分别为86.7%、93.3%和46.7%。在15个菌株中发现了3个修饰酶基因，包括aacCl、aacC2和aacA4基因，但未检测到aphA6。阳性率分别为93.3%、20.0%和20.0%。这三个基因同时存在于19号菌株中。aacCl、aacC2和aacA4基因的核苷酸序列与GenBank基因（AY307113、S68058和AY307114）具有100%、97.9%和99.1%的同一性。
结论 多重耐药性鲍曼不动杆菌 菌株在我院迅速传播，其对氨基糖苷类药物的耐药性可能与氨基糖苷类药物修饰酶基因表达有关。中国医学杂志2005；118（2）：141-145
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Combined effects of ramipril and angiotensin Ⅱ receptor blocker TCV116 on rat congestive heart failure after myocardial infarction TAO Ze-wei, HUANG Yuan-wei, XIA Qiang, XU Qi-wen
Chinese Medical Journal Vol.118, No.02 2005
DOI: 10.3760/cma.j.issn.0366-6999.2005.02.108
背景 充血性心力衰竭（CHF）是全世界发病率和死亡率的主要原因，血管紧张素转换酶抑制剂（ACEI）是其治疗的基石。然而，尽管进行了这种治疗，CHF仍继续进展，这可能是因为通过替代途径产生血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）。本研究旨在探讨慢性ACEI、雷米普利和慢性AngⅡ1型受体阻滞剂TCV116对心肌梗死(MI)后大鼠CHF的联合作用。
方法 采用结扎冠状动脉左前降支诱发大鼠MI致充血性心力衰竭。实验方案包括假手术大鼠(sham)、MI对照大鼠(MI-control)、每天用雷米普利3mg/kg(MI-ramipril)或TCV116 2mg/kg(MI-TCV116)治疗的MI大鼠、两者的半剂量(MI-1/2R&T)或全剂量(MI-R&T)组合。22周时，心脏血流动力学参数如平均动脉压(MAP)、左室收缩压(LVSP)、左室压力最大发展和下降率(LV dP/dt马克斯 ）和左室舒张末压(LVEDP)，并测定心脏重量(HW)、左室重量(LVW)和左室腔面积(LVCA)等心脏形态计量学参数，β肌球蛋白重链(β MHC)、B型利钠肽(BNP)、转化生长因子-β等心脏分子基因mRNA表达1 ,(TGF-β1 用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)定量存活间隔心肌中Ⅰ、Ⅲ型胶原，计算存活率。
结果 每个MI相关实验组之间的MI大小（%）无显著差异（MI对照、MI雷米普利、MI-TCV116、MI-1/2R&T和MI-R&T分别为33±13、34±14、33±13、35±13和33±14，所有均无统计学意义）。与假手术大鼠相比，未经治疗的MI大鼠的形态计量学参数以及心脏分子基因的mRNA表达显著增加（P <0.01);而他们的血流动力学参数明显受损（P <0.01），而就自发性死亡而言，生存率缩短（P <0.05).与未接受治疗的MI大鼠相比，接受每种单一药物治疗的MI大鼠心脏分子基因的mRNA表达显著减弱（P <0.01);而他们的血流动力学参数显著改善（P <0.05或P <0.01），在自然死亡方面，生存率延长（P <0.05).半剂量和全剂量联合治疗对改善心脏表型变化和减弱β MHC、BNP mRNA表达均有更强的作用（P <0.05 vs单一疗法)；而LVEDP进一步降低（P <0.05 vs单药治疗）。然而，全剂量联合治疗的MI大鼠的总死亡人数更多，尽管与其他治疗相比没有显著差异。
结论 结果表明，用适当剂量的慢性ACEI和慢性ARB组合治疗可以进一步改善MI后的心脏重塑和心功能。118(2)：146-154
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Effects of cecropin-XJ on growth and adherence of oral cariogenic bacteria in vitro HAO Yu-qing, ZHOU Xue-dong, XIAO Xiao-rong, LU Jun-jun, ZHANG Fu-chun, HU Tao, WU Hong-kun, CHEN Xin-mei
Chinese Medical Journal Vol.118, No.02 2005
DOI: 10.3760/cma.j.issn.0366-6999.2005.02.109
背景 天蚕素-XJ属于天蚕素-B，天蚕素-B是天然发现的最有效的抗菌肽。本研究的目的是探讨天蚕素-XJ对口腔致龋菌生长和粘附的影响。
方法 四种口腔致龋菌（变形链球菌 ,嗜酸乳杆菌 ,粘性放线菌 和奈氏放线菌 ）被选择用于这个实验。使用最小抑制浓度（MIC）和细菌生长的还原百分比来测定天蚕素-XJ的抗菌活性。用人牙周膜成纤维细胞通过四唑（MTT）比色测定测试天蚕素-XJ的哺乳动物细胞毒性。在扫描电子显微镜（SEM）上检查天蚕素-XJ诱导的细菌形态变化。通过闪烁计数测量天蚕素-XJ对细菌粘附唾液包被的羟基磷灰石（S-HA）的影响。
结果 天蚕素-XJ对4种细菌生长抑制的MIC范围为4.0~42.8 μ mol/L，对细菌的敏感性最高奈斯伦迪A. 最不容易受到长度嗜酸杆菌。 在pH值为6.8、5.5和8.2时，1/2 MIC的天蚕素-XJ使活菌数分别降低40.9%、67.8%和32.8%变异链球菌 分别为28.1%、57.2%和37.9%长度嗜酸杆菌。 反对的活动变异链球菌 和嗜酸乳杆菌 与pH 6.8相比，pH 5.5时增加（P <0.01)。在50%唾液存在下，1/2 MIC的肽使活细胞直接计数分别降低29.2%和14.4%变异链球菌 和嗜酸乳杆菌、 分别（P< 0.01和P >0.05），而在20%血清存在下，两种细菌几乎没有检测到减少计数（P >0.05)。天蚕素-XJ在1.0~100 μ mol/L范围内对人牙周膜成纤维细胞无细胞毒性（P >0.05).在SEM上检测的天蚕素-XJ的MIC诱导的细菌形态变化显示细胞表面破坏。此外，奈斯伦迪A. 天蚕素-XJ的MIC作用10分钟和20分钟，对S-HA的粘附显著降低(P=0. 001和0.000），以及变异链球菌、 随着天蚕素-XJ的MIC持续20分钟，粘稠形容词（P =0.000)。
结论 天蚕素-XJ对致龋病原体表现出杀菌作用，并且在酸性环境中抗菌活性增强。结果还表明天蚕素-XJ预防变异链球菌 和放线菌 吸附到S-HA上。这些发现表明天蚕素-XJ可能具有预防龋齿的潜力。中国医学杂志2005：118(2)：155-160
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A new 2-aminosteroid induces cellular differentiation and upregulates the expression of MafB and Egr-1 genes respectively in HL-60 and K562 leukemia cells HE Qun, LI Qiong, YUAN Lin-bo, HE Jun
Chinese Medical Journal Vol.118, No.02 2005
DOI: 10.3760/cma.j.issn.0366-6999.2005.02.101
背景 在以前的工作中，我们提出一些2-氨基类固醇抑制人和鼠白血病细胞的增殖并诱导分化。在这里，我们报道了另一种新的2-氨基类固醇H89712对人白血病细胞的作用。
方法 细胞集落计数和MTT测定用于确定增殖。细胞形态学、组织化学染色、紫外检测和细胞术用于确定分化。RT-PCR检测基因表达。采用标准统计方法分析数据。
结果 H89712对HL-60白血病细胞增殖有抑制作用，MTT法测定其抑制率为18%8 mol/L和65%，剂量为10-5 mol/L。在菌落试验中，HL-60在10剂量下的抑制率为23%-8 mol/L，剂量为10时为96%-5 mol/L。H89712还诱导HL-60细胞向巨噬细胞样分化。流式细胞术证实，在10剂量下，分化的HL-60细胞中CD14阳性表达的百分比比对照高约9倍-8 mol/L，比对照高20倍，剂量为10-5 mol/L，这一作用涉及HL-60白血病细胞中MafB基因的上调。另一方面，H89712抑制K562白血病细胞的增殖，MTT法显示在10的剂量下对K562白血病细胞的抑制率为34%-8 mol/L，剂量为10时为88%-5 mol/L。在集落试验中，K562白血病细胞的抑制率为53%-8 mol/L和10剂量下的100%-5 mol/L。H89712还诱导K562细胞向红系样分化，通过流式细胞术验证，在10剂量下，分化的K562细胞中CD71阳性表达的百分比比对照高约9倍-8 mol/L，比对照高16倍，剂量为10-5 mol/L。这种作用与K562白血病细胞中Egr-1基因的上调有关。
结论 我们的结果显示MafB在人髓系白血病细胞的巨噬细胞分化中起重要作用，Egr-1在人髓系白血病细胞的红系分化中起重要作用。中国医学杂志2005；118（2）：91-99
