Volume 117 · Issue 07 · 2004

本综述的目的是评估RNA干扰（RNAi）及其作为开发基于高度特异性双链RNA（dsRNA）或小干扰RNA（siRNA）的基因沉默疗法的潜在和强大工具的可能性。

本综述中使用的数据来自当前的RNAi相关研究报告。

dsRNA介导的RNAi最近作为一种强大的反向遗传工具出现，用于沉默多种生物体中的基因表达。21个核苷酸siRNA的合成双链体在哺乳动物细胞中触发基因特异性沉默的发现进一步扩展了RNAi在哺乳动物系统中的效用。

包括目前发表的报道RNAi现象的发现和机制以及RNAi在哺乳动物细胞基因功能中的应用的论文。

自从最近RNAi技术在哺乳动物系统中的发展以来，研究人员已经使用RNAi来阐明基因功能，并通过递送外源siRNA或siRNA表达载体来开发基于基因的治疗剂。类似报道中提到的RNAi的一般和序列特异性抑制作用将是选择性的、长期的和全身性的以调节基因靶标，这引起了对其在哺乳动物中的有效性及其作为治疗性死亡的最终用途的极大关注。

可以肯定的是，哺乳动物中RNAi沉默特定基因的能力，无论是当作为siRNA直接转染时还是当从DNA载体产生时，无疑将加速基因功能的研究，并且也可能用作开发高度基因特异性治疗方法的潜在有用方法。还预期RNAi有朝一日可用于治疗人类疾病。中国医学杂志2004;117(7):1084-1091

遗传性痉挛性截瘫是一组临床和遗传异质性的运动系统神经退行性疾病，以下肢缓慢进行性痉挛和无力为特征。本研究旨在探讨遗传性痉挛性截瘫伴薄胼胝体（HSP-TCC）的临床特征。

回顾性分析了5例患者的临床资料和35例先前发表的HSP-TCC病例报告。

大多数患者发病时为青少年，表现为下肢痉挛性轻瘫和精神障碍。一些患者还具有其他临床特征，包括上肢痉挛、小脑性共济失调和感觉障碍。5例患者的头颅MRI显示胼胝体极薄，有时伴有脑沟和脑室增宽，以及小脑和脑萎缩。

HSP-TCC的主要临床特征包括缓慢进行性痉挛性截瘫、生命第二个十年期间的精神障碍以及头颅MRI显示的极薄胼胝体。中国医学杂志2004;117(7):1002-1005

非穿透性小梁手术是一种新的滤过手术，在骨小梁结构中没有开口。本研究旨在评估非穿透性小梁手术治疗开角型青光眼的总体疗效。

本研究选择的已发表文章是通过计算机化的Medline和中国生物医学磁盘文献检索和手动检索相关文章的参考书目获得的。对符合纳入标准的文章进行系统回顾，并使用荟萃分析的统计技术汇总报告的数据。

荟萃分析共纳入37篇文章。不同技术非穿透性小梁手术的总成功率分别为：单纯深部巩膜切除术69.7%(95%CI：58.5%~81.0%);深部巩膜切除术伴胶原植入，59.4%(95%CI：47.0%~71.8%)；深部巩膜切除术伴网状透明质酸植入，71.1%(95%CI：56.8%~85.3%);和粘液管造口术，72.0%(95%CI：57.6%~86.4%)。非穿透性小梁手术的总加权完全成功率为67.8%(95%CI：61.4%~74.3%)。

非穿透性小梁手术是医学上无法控制的开角型青光眼的最佳治疗方法，完全成功率超过60%。但是不同的技术不能掩盖非穿透性小梁手术的完全成功率。中国医学杂志2004;117(7):1006-1010

功能性神经成像已被用于正常受试者和脑损伤患者的神经语言学研究。本研究旨在调查正常受试者和失语症受试者之间语言处理的神经基础的差异。

应用功能磁共振成像（fMRI）对6例正常人和3例处于急性脑卒中恢复期的失语症患者进行语言网络映射。参与者在多层功能扫描期间执行单词生成任务，以测量与任务诱导的局部神经活动相关的信号变化。

在正常受试者中，分布式语言网络被激活。激活存在于额叶、颞叶、顶叶和枕叶区域。然而，在患者组中，无论患者是否在左额叶中有病变，在左额下回中都没有检测到激活。两名患者在正常受试者中未出现激活的一些右半球区域显示激活。

具有单词生成任务的功能磁共振成像用于评估失语症患者的语言功能是可行的。在失语症患者中可以发现局灶性病变和功能再分布或重组的远程效应。中国医学杂志2004;117(7):1011-1016

本研究的目的是确定人孤儿核受体类固醇生成因子1（SF-1）在蛋白激酶A（PKA）信号通路激活和不激活的活细胞中的亚核分布模式，从而试图解释PKA增强SF-1反式激活的未知机制。

克隆野生型和天然突变体(G35E)人SF-1的全长cDNA，并与绿色荧光蛋白(GFP)融合。在确认基因序列的有效性后，通过激光共聚焦显微镜研究了人SF-1在PKA信号激活或未激活的活细胞中的亚细胞分布模式。

GFP-SF-1嵌合蛋白的反式激活能力是高度保守的。当PKA不活跃时，野生型人SF-1在细胞核内均匀扩散，当PKA激活时会聚至清晰的病灶。即使在存在PKA激活的情况下，突变SF-1也在细胞核内扩散，令人惊讶地在核仁内聚集为荧光点，这种现象不会被PKA改变。

PKA的激活导致野生型而不是突变型SF-1将其亚核分布模式改变为反式激活活性形式（病灶形成）。这一发现可能为PKA激活孤儿核受体的机制提供新的线索。中国医学杂志2004;117(7):1017-1022

缺氧诱导因子-1 α(HIF-1 α)是肺对氧利用率降低的反应的关键介质之一，并且越来越多地与肺动脉高压的发病机制有关。血管内皮生长因子（VEGF）是HIF-1 α的下游靶基因，在缺氧性肺动脉高压和缺氧性肺动脉重塑的发病机制中起重要作用。本研究探讨了缺氧性肺动脉高压大鼠肺动脉HIF-1 α和VEGF的动态表达。

40只雄性Wistar大鼠暴露于缺氧0、3、7、14或21天。评估平均肺动脉压（mPAP）、血管形态测量和右心室肥厚指数（RVHI）。肺充气并固定原地杂交和免疫组织化学。

缺氧7d后mPAP值显著高于对照组[(18.4±0.4)mmHg,P<0.05].缺氧14天后RVHI显著发展。所有缺氧大鼠肺动脉内膜HIF-1 α蛋白表达增加。肺动脉中膜HIF-1 α蛋白在第3天显著升高(0.20±0.02,P<0.05)，第7天达到高峰，第14天后下降。缺氧14天后HIF-1 α mRNA显著升高(0.20±0.02,P<0.05).VEGF蛋白在缺氧第7天开始明显升高，在缺氧第14天左右达到高峰(0.15±0.02,P<0.05).VEGF mRNA在缺氧第7天后开始增加，然后从第7天开始或多或少保持稳定。VEGF mRNA主要位于内膜和中膜，而VEGF蛋白主要位于内膜。线性分析显示HIF-1 α mRNA、VEGF和mPAP与缺氧性肺动脉重塑相关。HIF-1 α mRNA与VEGF mRNA和蛋白呈正相关（P<0.01).

HIF-1 α和VEGF均参与了大鼠缺氧性肺动脉高压的发病过程。中国医学杂志2004;117(7):1023-1028

雷洛昔芬已被批准用于预防和治疗高加索妇女绝经后骨质疏松症。它对白种人的血脂也有一些积极的影响。本研究的目的是确定盐酸雷洛昔芬对中国绝经后骨质疏松症妇女腰椎和全髋骨密度（BMD）、骨代谢和血脂的影响。

这是一项多中心、随机、双盲、安慰剂对照的临床试验，其中204名绝经后中国骨质疏松症妇女被分配接受雷洛昔芬（60 mg）或安慰剂治疗，每日一次，持续12个月。给药前后测定BMD、血清骨代谢标志物、血脂。采用双能X线吸收法（DEXA）测定BMD，采用一步酶联免疫吸附法分析骨代谢标志物。通过酶分析测量血清脂质。

在12个月的研究结束时，两组的腰椎BMD均增加，雷洛昔芬组平均增加（3.3±4.8）%，安慰剂组平均增加（1.0±4.9）%（P<0.001).雷洛昔芬组髋关节总BMD平均增加(1.4±4.8)%,安慰剂组平均减少(0.9±5.0)%(P<0.001).雷洛昔芬组无受试者发生新的椎体骨折，安慰剂组有5例受试者发生新的骨折（P>0.05).雷洛昔芬组骨代谢生化标志物血清骨钙素和C-端肽的中位下降分别为41.7%和61.5%。这些变化与安慰剂组（10.6%和35.6%，P<0.001)。与安慰剂组相比，雷洛昔芬组的总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇均显著降低（P<与安慰剂相比，雷洛昔芬对高密度脂蛋白胆固醇和甘油三酯没有显著影响。

雷洛昔芬60 mg/d治疗12个月可显著增加中国绝经后骨质疏松症妇女的腰椎和全髋BMD，显著降低骨转换，并对血脂有有利影响。中国医学杂志2004;117(7):1029-1035

在哺乳动物和人体上激活LDR被认为可以诱导适应性反应，增强免疫功能，增加抗肿瘤能力。本研究旨在评估低剂量辐射对荷瘤小鼠肿瘤生长、红细胞免疫功能和超氧化物歧化酶（SOD）活性的影响。

雄性昆明小鼠皮下植入S₁₈₀右腹股沟肉瘤细胞建立实验性原位动物模型。在植入前6小时，小鼠全身接受75mGy X射线辐射。5天后观察肿瘤大小，同时每隔一天计算肿瘤体积，允许创建描绘肿瘤生长的图。植入后15天，处死小鼠测量肿瘤重量，观察坏死区域和肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）的位置。同时测定红细胞免疫功能和SOD活性。

预先暴露于低剂量辐射的小鼠的肿瘤形成率低于未接受辐射的小鼠（P<0.05).在预先暴露于低剂量辐射的小鼠中，肿瘤生长显著较低；15天后，预暴露于低剂量辐射的小鼠的平均肿瘤重量也较低（P<0.05).低剂量照射组肿瘤坏死面积和TILs浸润面积均大于非照射组。低剂量辐射组红细胞免疫功能和SOD活性高于非辐射组（P<0.05).

低剂量辐射能显著增强机体的抗肿瘤能力，提高红细胞免疫功能和红细胞SOD活性，提示低剂量辐射可能在癌症的临床治疗中发挥作用。中国医学杂志2004;117(7):1036-1039

检测糖尿病大鼠肾脏基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达变化，探讨Ⅳ型胶原(C-Ⅳ)的降解途径及吡格列酮对实验性糖尿病肾病模型的保护作用。

在我们研究中使用的54只SD大鼠中，18只作为正常对照。通过腹腔注射链脲佐菌素（70mg/kg）在36只年龄和体重匹配的大鼠中诱导糖尿病；将18只糖尿病大鼠随机分配接受吡格列酮（20 mg•kg^-1•d^-1）在他们的饮用水中，18人作为糖尿病对照。在治疗2、4或8周后处死大鼠。对肾脏进行病理形态学检查，免疫组化分析MMP-2、MMP-9、C-Ⅳ的表达，并用图像分析技术对结果进行定量。

糖尿病与肾小球MMP-2表达降低有关（P<0.05，vs对照)。相反，间质中MMP-2的表达增加，但不显著（P>0.05，相对于对照)。MMP-9的表达在三组比较时没有显示出任何变化（P>0.05，相对于对照)。STZ糖尿病大鼠肾小球和间质中C-Ⅳ表达增加（P<0.05，vs对照)。吡格列酮治疗可减轻所有糖尿病相关MMP-2表达的变化，并减少C-Ⅳ积累。

提示MMP-2在糖尿病大鼠肾小球中的表达减少可能导致C-Ⅳ降解障碍，并可能促进糖尿病肾病中基质的积累。吡格列酮治疗可减轻肾小球MMP-2的下降和C-Ⅳ降解的增加，对糖尿病肾病有疗效。中国医学杂志2004;117(7):1040-1044

在不明原因的胃肠道（GI）出血中，通常很难用常规的放射学、闪烁照相术或血管造影技术检测出位于小肠的出血部位。推动式肠镜检查和胶囊式内窥镜检查目前被认为是最有效的诊断程序。本研究的目的是比较胶囊内镜和推进式小肠镜的检出率。

从2002年5月到2003年1月，我们通过胶囊内镜前瞻性地检查了仁济医院39例疑似小肠疾病，特别是不明原因胃肠道出血的患者。其中，32例主诉不明原因的复发性胃肠道出血。在1993年1月至1996年10月期间，我们对36例不明原因胃肠道出血的患者使用了推进式肠镜检查。所有患者既往胃镜、结肠镜、小肠钡剂造影、闪烁扫描和/或血管造影结果正常。

M2A胶囊内镜检查显示32例患者中有26例（82%）小肠异常。其中21人有解释其临床疾病的重要病理学发现。因此，诊断率为66%（32例患者中的21例）。21例患者经胶囊内镜诊断的明确出血部位包括血管发育不良（8例）、炎性小肠（5例）、小肠息肉（4例）、胃肠道间质瘤（2例）、类癌和脂肪瘤（1例）以及出血性胃炎（1例）。推入式肠镜在36例患者中的9例（25%）中检测到明确的出血来源。明确出血来源的患者包括血管发育不良（2）、平滑肌肉瘤（2）、平滑肌瘤（1）、淋巴瘤（1）、克罗恩病^'s病(1)、小肠息肉(1)和壶腹腺癌(1)。另外2名患者（6%）和另外5名患者（16%）通过胶囊内窥镜检查显示疑似出血源。

目前对不明原因胃肠道出血患者的研究表明，胶囊内镜在检测胃肠道出血方面明显优于推进式肠镜（P<0.001).胶囊内镜安全无痛，应成为不明原因胃肠道出血患者的首选诊断方法。中国医学杂志2004;117(7):1045-1049

人胚胎干（ES）细胞的传统冷冻保存效率较低，很少有尝试证明新的冷冻保存方法有效。本研究旨在评价玻璃化冷冻保存人ES细胞的效率。

将从相同细胞系聚集的人ES细胞随机分配通过玻璃化或缓慢冷冻进行冷冻保存。比较两组解冻人ES细胞的回收率、生长和分化潜能。鉴定解冻后人ES细胞的多能性。

81.9%（59/72）的人ES细胞团块在玻璃化后恢复，而只有22.8%（16/70）在缓慢冷冻后恢复（P<0.01).当与经受慢速冷冻方案的集落相比时，玻璃化后的集落不仅具有更快的生长，而且具有更低水平的分化。然而，在延长的培养期后，两组未分化集落的生长和分化速率与非冷冻保存的干细胞的生长和分化速率相同。玻璃化人ES细胞的第6代保留了多能细胞的特性，正常核型，并表达转录因子OCT-4、阶段特异性表达抗原-4(SSEA-4)和SSEA-3。这些细胞的畸胎瘤生长证明了发育到所有三个胚层的能力。

玻璃化冷冻保存人ES细胞是有效的。在延长的培养过程中，人ES细胞在冷冻保存后保留其多能性。中国医学杂志2004;117(7):1050-1055