Volume 117 · Issue 08 · 2004

趋化因子样因子1（CKLF1）最近被鉴定为一种新的细胞因子。全长CKLF1 cDNA包含530bp，编码99个氨基酸残基，具有与其他CC家族趋化因子相似的CC基序。重组CKLF1对白细胞表现出趋化活性并刺激鼠骨骼肌细胞增殖。我们质疑CKLF1是否参与肺部炎症和增殖的发病机制。因此我们使用了高效的体内基因递送方法研究CKLF1在鼠肺中的生物学效应。

构建表达CKLF1的质粒pCDI-CKLF1并注射到骨骼肌中，然后进行电穿孔。分别在注射后第1、2、3和4周末获得肺组织。光镜观察肺组织病理变化。

将CKLF1质粒DNA单次肌内注射到BALB/c小鼠中，在治疗小鼠的肺中引起显著的病理变化。这些变化包括支气管周围白细胞浸润、上皮脱落、胶原沉积、支气管平滑肌细胞增殖和肺纤维化。

CKLF1诱导的支气管和细支气管壁的持续形态异常、急性肺炎和肺间质纤维化与在慢性持续性哮喘、急性呼吸窘迫综合征和严重急性呼吸综合征中观察到的现象相似。这些数据表明CKLF1可能在这些重要疾病的发病机制中起重要作用，该研究还暗示基因电转移体内可以作为评估动物中新基因功能的有价值的方法。中国医学杂志2004;117(8):1123-1129

既往研究表明，血B型利钠肽（BNP）水平可预测急性冠脉综合征（ACS）的预后。本研究探讨循环BNP对ACS患者早期经皮冠状动脉介入治疗（PCI）的评估价值。

纳入了960例连续ACS患者。当每个患者到达急诊室时，测量循环BNP水平。尽管有禁忌症，所有患者均在90分钟内接受了PCI。随访期间记录心脏事件（任何原因导致的死亡、心力衰竭和急性心肌梗死或ACS复发）。

在BNP≥80 pg/ml的患者中，接受延迟PCI（≥6小时）的患者1个月和6个月内全因死亡率显著高于接受早期PCI的患者（<6小时）（9.53%vs 3.49%，P=0.027；13.61%对5.24%，P=0.010)。同样，延迟PCI患者在1个月和6个月内心力衰竭的发生率明显高于接受早期PCI的患者（12.93%vs 4.66%，P=0.008；14.97%对6.98%，P=0.021)。然而，在BNP≥80 pg/ml组中，早期PCI和延迟PCI患者的急性心肌梗死或ACS复发率无显著差异。在BNP患者中<80 pg/ml，在1个月或6个月内发生上述任何心脏事件的早期PCI和延迟PCI患者之间未观察到显著差异。

当早期循环BNP水平≥80 pg/ml时，早期PCI治疗的ACS患者死亡率和心力衰竭的发生率显著降低，但急性心肌梗死复发的发生率没有显著降低。中国医学杂志2004;117(8):1130-1134

Janus激酶-信号转导子和转录激活子（JAK-STAT）途径和细胞外信号调节激酶1/2（ERK_1/2）途径是两种主要的独立信号转导途径。然而，最近发现₃可能受ERK负调节_1/2在gp130依赖性信号传导中。心肌营养素-1(CT-1）是一种有效的新型肥大细胞因子，依赖于gp130诱导信号传导，并依赖于STAT₃以发挥肥大作用。在这项研究中，我们检查了STAT₃活性受ERK负调节_1/2在大鼠心肌细胞中CT-1诱导的信号传导过程中，如果是，这种串扰是否干扰CT-1的肥大作用，此外，串扰的潜在机制是否涉及STAT中丝氨酸727(S727）的磷酸化₃.

ERK的活动_1/2和统计₃分别通过凝胶内激酶测定和蛋白质印迹分析进行评估。S727磷酸化在ERK间串扰中的作用_1/2和统计₃通过使用STAT的瞬时转染研究确定₃S727A突变体。通过细胞蛋白与DNA的比值和[³H]-亮氨酸掺入。

CT-1同时激活两个ERK_1/2和统计₃在大鼠心肌细胞中。抑制ERK_1/2U0126导致CT-1诱导的STAT酪氨酸磷酸化增加₃因此，蛋白质与DNA的比率和[³H]-亮氨酸掺入。用STAT瞬时转染细胞₃S727A对CT-1诱导的STAT酪氨酸磷酸化无显著影响₃.

统计₃在大鼠心肌细胞中被CT-1激活，但ERK的同时激活可减轻完全激活_1/2ERK的抑制_1/2增加STAT的活性₃进而增强CT-1的肥大作用。ERK之间的串扰_1/2和统计₃不依赖于STAT中S727的磷酸化₃这种串扰可能有助于充分的心脏肥大的发展。中国医学杂志2004;117(8):1135-1142

Weibel-Palade小体(WPB)的释放是内皮细胞活化的一种形式。但导致WPB释放的信号转导途径尚未确定。我们假设小G蛋白rac1和活性氧（ROS）介导配体诱导的Weibel-Palade小体的释放。

我们通过使用野生型和突变型腺病毒rac1表达载体，并通过操纵人主动脉内皮细胞（HAEC）中超氧化物和过氧化氢的产生和破坏来测试这一假设。

凝血酶（1.0单位，30 min）诱导HAEC WPB释放增加3.7倍₂0₂(0.1 mmol/L，30min)诱导4.5倍。这些结果与凝血酶刺激的rac-GTP结合活性激活3.5倍，ROS产生增加3.4倍相关。与未感染细胞相比，显性阴性腺病毒rac-N17基因转染显著抑制WPB释放64.2%（对照）和77.3%（凝血酶刺激），ROS产生减少65.5%（对照）和83.6%（凝血酶刺激）。与未感染细胞相比，抗氧化剂、过氧化氢酶和N-乙酰半胱氨酸显著降低对照细胞WPB的释放34%和79%，在rac-N17转移细胞中进一步降低63.6%和46.7%。我们还证实rac1位于WPB释放途径中ROS的上游。

小G蛋白rac1治疗配体诱导的人主动脉内皮细胞Weibel-Palade小体释放，WPB释放的信号通路是rac1依赖性ROS调节机制。中国医学杂志2004;117(8):1143-1150

环氧合酶2（COX-2）参与中枢神经系统前列腺素的合成，在人类致癌过程中也起作用。本研究旨在探讨COX-2在结直肠癌不同发展阶段的表达，并探讨该基因表达与癌症临床病理特征的关系。

采用免疫组化方法检测76例大肠癌手术标本（晚期44例，早期32例）、33例腺瘤和18例正常结肠黏膜组织中COX-2的表达。Kaplan-Meier生存曲线和Cox比例风险回归用于评估COX-2与预后的关系。

COX-2在正常结肠粘膜组织中的表达分为“-”至“+++”4个等级，分别为83.3%、16.7%、0%和0%；腺瘤分别为12.1%、42.4%、36.4%和9.1%；早期结直肠癌为6.3%、28.1%、46.9%和18.7%，晚期结直肠癌为6.8%、20.5%、18.2%和54.5%。晚期结直肠癌与早期结直肠癌（ECCs）之间以及晚期结直肠癌与腺瘤之间COX-2表达的差异具有统计学意义（P<0.01);但ECCs与腺瘤之间无显著差异。Kaplan-Meier生存分析显示低高COX-2组之间的生存曲线有显著差异（P<0.05).Cox比例风险回归显示COX-2表达与较差的长期预后相关，未校正其他变量的风险比为2.665（P<COX-2表达是预后不良的独立危险因素。

在从正常上皮到腺瘤和从ECCs到晚期CRCs的发展过程中，COX-2表达逐渐上调。虽然COX-2蛋白不能作为早期诊断CRC的肿瘤标志物，但COX-2表达可以被视为晚期CRC患者术后不良预后的独立危险因素。中国医学杂志2004;117(8):1151-1154

人们越来越关注大蒜，因为研究表明，摄入更多的生大蒜可以降低消化系统癌症的风险。在本研究中，我们试图检测大剂量大蒜素和微剂量硒是否能预防胃癌。

对年龄（35-74岁）的参与者进行了一项双盲干预研究，这些参与者至少符合以下标准之一：（1）胃病病史，（2）肿瘤家族史，或（3）吸烟和/或饮酒。随机抽取山东省栖霞县7个社区288个自然村的2526人和对照组2507人。干预组每人在1989年11月至1991年12月期间每天口服合成大蒜素200 mg，每隔一天口服硒100 μ g，持续每年1个月。同时，对照组给予2粒与干预组外观相同的玉米粒安慰剂胶囊。

对于所有受试者，大剂量的大蒜素都是可接受的，并且在研究期间没有发现有害的副作用。在停止干预后的第一个5年（1992-1997）随访中，干预组恶性肿瘤发病率下降了22%，而对照组下降了47.3%。在校正年龄、性别和其他潜在混杂因素后，全人群所有肿瘤和胃癌的相对危险度(RR)分别为0.67(95%CI：0.43-1.03)和0.48(95%CI：0.21-1.06)，男性组分别为0.51(95%CI：0.30-0.85)和0.36(95%CI：0.14-0.92)。对女性亚组没有发现显著的保护作用。

本研究证明，大剂量大蒜素和微量硒可能有效预防胃癌，尤其是在男性中。中国医学杂志2004;117(8):1155-1160

阿尔茨海默病(AD)的一个重要方面是胆碱能神经元的丢失或损伤。在血管性痴呆（VD）的情况下是否存在类似的胆碱能损伤和乙酰胆碱（ACh）脑缺乏是有争议的。本研究旨在探讨AD和VD患者脑脊液（CSF）中ACh和胆碱（Ch）的水平及其与认知障碍的可能关系。

招募了22名AD患者、22名VD患者和20名正常对照，并用简易精神状态检查（MMSE）进行评分。使用高效液相色谱法和电化学检测器（HPLC-ECD）测量CSF中ACh和Ch的浓度，然后将结果与认知状态进行比较。

AD患者[(10.7±5.1)nmol/L]和VD患者[(16.8±7.4)nmol/L]脑脊液中ACh浓度均显著低于对照组[(34.5±9.0)nmol/L,t=10.67,P<0.001;t=6.91,P<0.001].两种结果均与MMSE评分呈正相关（r_s=0.88且r_s=0.85，P<0.01).VD患者脑脊液Ch浓度[(887.4±187.4)nmol/L]显著高于AD患者[(627.6±145.1)nmol/L,t=6.4,P<0.001]和对照[(716.0±159.4)nmol/L,t=4.2,P=0.002].脑脊液Ch浓度在AD患者和正常对照组之间没有差异，也与三组中任何一组的MMSE评分无关。

ACh缺乏与认知障碍呈正相关，提示ACh是记忆的重要神经递质。AD和VD患者ACh浓度的相似降低可能意味着这两种疾病涉及的认知障碍过程的相似发病机制。与AD患者相比，VD患者CSF中Ch水平升高可能在诊断上是有用的。胆碱酯酶抑制剂可能不仅对AD患者有帮助，对VD患者也有帮助。中国医学杂志2004;117(8):1161-1164

糖尿病患者最令人生畏的病理变化是心血管疾病，心血管疾病是糖尿病患者死亡的主要原因，并且由于动脉粥样硬化加速，其患病率远高于非糖尿病患者。在本研究中，我们试图阐明糖尿病大鼠大血管内皮超微结构和内皮一氧化氮合酶（eNOS）mRNA基因表达的变化。

该研究在52只10周龄的Sprague Dawley(SD)大鼠上进行，体重为(320±42)g。SD大鼠分为：实验组，单次腹腔注射链脲佐菌素（STZ，60 mg/kg），（雄性，n=20，糖尿病（DMM））；女性，n=12，糖尿病女性（DMF））和对照组（男性，n=10，糖尿病男性对照（DMMC）；女性，n=10，糖尿病女性对照（DMFC））。治疗4周后，处死一半大鼠；其余的在治疗后10周处死。将一部分腹主动脉样品储存在戊二醛（体积分数Ψ_B=2.5%).在化学固定、化学脱水、干燥和电导率增强过程之后，使用扫描电子显微镜（Leica-Stereoscan 260，英格兰）观察和拍摄所有样品。腹主动脉样品的另一部分用液氮处理，并通过半定量RT-PCR评估eNOSmRNA的表达。

两个实验组的主动脉腔比任何一个对照组吸附更多的碎片。糖尿病大鼠内皮表面粗糙、起皱、突起如手指或绒毛。糖尿病雄性大鼠4周后血管内皮损伤非常明显，与10周时一样明显。糖尿病雌性大鼠的血管内皮损伤在4周时不严重，仅在10周后变得明显。在雄性和雌性中，4周和10周糖尿病大鼠的腹主动脉eNOSmRNA含量非常显著地降低（P<0.01)高于对照组。

与对照组相比，DM大鼠主动脉内皮超微结构受损。雄性DM大鼠主动脉内皮异常改变较雌性明显。DM大鼠腹主动脉eNOSmRNA含量表达明显低于对照组。中国医学杂志2004;117(8):1165-1169

转化生长因子-β 1(TGF-β 1)在培养激活的HSC中发挥强的纤维化潜能。Smad₄是生长因子转化生长因子-β(TGF-β)超家族的关键细胞内介质。本研究的目的是评估反义Smad的作用₄Ito细胞系LI90上的基因。

重组逆转录病毒载体pLXSN-Smad₄通过克隆大鼠反义Smad构建₄cDNA导入逆转录病毒载体pLXSN中。通过转染pLXSN-Smad获得具有或不具有反义基因的逆转录病毒₄和pLXSN载体进入PA317细胞。用这些逆转录病毒感染人肝星状细胞(HSC)LI90，然后用G418选择。Smad的表达₄通过Northern和Western印迹检测。细胞生物学特性，包括细胞生长曲线，³H-TdR和³评估HSC对H-脯氨酸的摄取和细胞外基质的产生。

Smad的mRNA和蛋白表达₄在用含有反义Smad的逆转录病毒转染的LI90细胞中₄基因表达比用空载体转染的LI90细胞或亲本LI90细胞低得多。低表达Smad的细胞₄基因表现出较慢的生长速度，较低的摄取³H-TdR和³H-脯氨酸（P<0.01)，与亲本LI90细胞和空逆转录病毒转染的细胞相比，th细胞外基质的产生较少。

反义Smad₄基因可以抑制Smad的表达₄基因，减少Smad的内源性产生₄mRNA和蛋白，阻断TGF-β 1信号通路，抑制Ito细胞的活化，阻碍Ito细胞的生长，减少细胞外基质(ECM)的产生。我们的结果可能为抗纤维化基因治疗的发展提供基础。中国医学杂志2004;117(8):1170-1177

本研究旨在评估通过阻断CD40-CD154和CD28-B7共刺激途径诱导的无反应细胞是否可以作为有效的免疫调节细胞体外并延长过继转移后同种异体心脏移植物的存活。

诱导无能细胞体外通过将抗CD154和抗CD80单克隆抗体(mAb)添加到由BALB/c作为应答者和C3H作为刺激物组成的原发性MLR(混合淋巴细胞反应)中。在评估无能细胞的调节能力和抗原特异性时，将无能细胞添加到新形成的MLR中。测试无反应细胞对抗原和/或外源重组小鼠白细胞介素-2(rmlL-2)的反应能力。为了体内研究中，将无反应细胞静脉注射到3。异位腹部心脏移植后立即用O-Gy y照射BALB/c小鼠。为了延长同种异体移植物的存活，注射无能细胞的受体小鼠接受雷帕霉素治疗（1 mg•天^-1•公斤^-1).

无能细胞以剂量依赖性方式强烈抑制幼稚BALB/c脾细胞针对原始(C3H)刺激物的增殖，但它们未能抑制幼稚BALB/c脾细胞针对第三方(C57BL/6J)刺激物的增殖。原始（C3H）刺激剂和额外的外源性IL-2都逆转了无能状态。在体内研究表明，未经治疗的辐照BALB/c小鼠排斥C3H心脏同种异体移植物，平均存活时间为(8.6±1.1)天，而注射无能细胞的小鼠排斥异体移植物，平均存活时间为(11.8±1.9)天，略长于未经治疗的小鼠。以无反应细胞注射加雷帕霉素治疗为基础的方案可显著延长同种异体移植物存活[(29.6±4.4)天]。

通过阻断CD40-CD154和CD28-B7共刺激途径诱导的无能细胞可作为有效的免疫调节细胞在体外，以及在存在雷帕霉素治疗的情况下延长过继转移后同种异体心脏移植物存活。如果开发出最佳方案，该程序可能在临床上用于延长同种异体移植物存活。中国医学杂志2004;117(8):1178-1183