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EB病毒诱导人鼻咽上皮细胞逃避复制性衰老YANG Jing, TANG Faqing, GU Huanhua, DENG Xiyun, WENG Xinxian, TANG Min, CAO Ya
中华医学杂志英文版2002年 115卷 06期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.0366-6999.2002.06.101
目标观察原代人鼻咽上皮细胞永生化早期的生物学变化。
方法相差显微镜观察鼻咽上皮细胞形态学变化，SA-β-Gal染色检测衰老相关β-半乳糖苷酶（SA-β-Gal）活性谱。p16的表达INK4a通过免疫化学测定法测试蛋白质，并将鼻咽上皮细胞的体外寿命计算为群体倍增。此外，还通过免疫荧光染色检测EB病毒潜伏膜蛋白1（LMP1）的表达。
结果形态学上，经EB病毒和12-o-十四烷酰基-佛波醇-13-乙酸酯（TPA）处理的细胞形成多层病灶，其体外细胞寿命延长（培养约155天）。低百分比的细胞（约4.8%）在原代培养后期表达SA-β-Gal活性，并且并不总是表达p16INK4a培养过程中的蛋白质。
结论经EB病毒协同TPA处理的鼻咽上皮细胞可度过衰老阶段，进入永生化早期。在这些细胞中发生一些表型变化。我们的结果为进一步研究永生化机制和建立人鼻咽上皮细胞系提供了数据。115(6)：803-809
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维甲酸受体β是胃癌细胞中维甲酸抗激活蛋白-1活性所必需的WU Qiao, ZHANG Mingqing, LIU Su, CHEN Yuqiang, SU Wenjin
中华医学杂志英文版2002年 115卷 06期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.0366-6999.2002.06.102
目标探讨视黄酸受体β(RAR β)在介导全反式视黄酸(ATRA)抑制胃癌细胞激活蛋白-1(AP-1)活性中的作用。
方法使用瞬时转染和氯霉素乙酰转移酶(CAT)测定、Northern印迹、基因转染、3-[4, 5-二甲基噻唑-2-基]-2, 5-二苯基溴化四唑(MTT)测定和锚定非依赖性生长测定。
结果将RAR β表达载体瞬时转染到MKN-45细胞中导致由12-o-十四烷酰基佛波醇-13-乙酸酯(TPA)诱导的AP-1活性的RAR β浓度依赖性抑制，与ATRA的存在无关。当c-jun和c-fos表达载体与RAR β表达载体共转染MKN-45细胞时，AP-1活性也明显受到抑制。抑制作用也是RAR β浓度依赖性的。RAR β基因稳定转染到MKN-45细胞中导致ATRA抑制细胞生长和抑制集落形成。此外，即使在存在ATRA的情况下，RAR β/DNA结合结构域(DBD)和报告基因两者的共转染也不能改变AP-1活性。然而，当共转染被RAR β/配体结合结构域(LBD)取代时，ATRA显著增强了抑制作用。
结论RAR β可能是抗AP-1活性所必需的，并有助于ATRA抑制胃癌细胞的生长。115(6)：810-814
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聚合酶链反应鉴定腹泻患儿志贺样毒素大肠埃希菌ZHU Qingyi, Li Lianqing, GUO Zhaobiao, YANG Ruifu
中华医学杂志英文版2002年 115卷 06期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.0366-6999.2002.06.103
目标目的：探讨志贺样毒素产生的病因大肠杆菌(SLTEC)用于腹泻儿童。
方法我们设计并合成了3对位于肠出血性疾病SLT1、SLT2和eaeA基因的引物大肠杆菌（EHEC），而强毒基因SLT1、SLT2和eaeA来自大肠杆菌通过聚合酶链式反应(PGR)扩增物种。
结果29株腹泻参考菌株中的1株EHEC具有SLT1、SLT2和eaeA大肠杆菌（DCEC）和PCR检测的10株其他肠杆菌呈阳性反应，而其他DCEC和肠杆菌均为阴性。474株大肠杆菌从1032例腹泻患儿中分离并经PCR检测，20株产SLT1菌株大肠杆菌（4.2%）阳性，7株SLT2产生菌株大肠杆菌(1.5%)阳性；而74株产肠SLT和侵袭性菌株大肠杆菌（ESIEC），SLT1阳性15株（20.3%），SLT2阳性5株（6.8%）。
结论志贺样毒素大肠杆菌已被确定为中国太原儿童腹泻的主要病原体。115(6)：815-818
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精神分裂症患者海马小清蛋白免疫反应神经元相对密度的选择性降低ZHANG Zhijun, SUN Jing, Reynolds Gavin P
中华医学杂志英文版2002年 115卷 06期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.0366-6999.2002.06.104
目标确定由钙结合蛋白定义的GABA能亚群的相对密度，并进一步研究精神分裂症病例海马GABA能中间神经元的变化对神经病理学的重要性。
方法从取自精神分裂症患者和匹配良好的对照受试者（每组15名）的海马组织切片中确定对钙结合蛋白小清蛋白和钙视蛋白免疫反应的细胞的相对密度和神经元体大小以及海马亚区的面积大小。
结果在受试者组之间，未发现钙视蛋白免疫反应神经元的密度和钙视蛋白阳性神经元的神经元体大小的显著差异。相对于正常对照组，精神分裂症患者在所有海马亚区的小清蛋白免疫反应神经元的相对密度都表现出显著和深刻的缺陷。这些减少在男性精神分裂症患者中更为明显，与抗精神病药物治疗、年龄或病程无关。
结论这些发现提供了进一步的证据，支持精神分裂症病例中海马中GABA能神经元亚群的深刻和选择性异常，并与精神分裂症神经发育的病因学假设相一致。115(6)：819-823
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单次给药无反应患者的比较分析153Sm-EDTMP姑息治疗骨转移瘤TIAN Jiahe, CAO Limin, ZHANG Jinming, OUYANG Qiaohong, HOU Qingtian, HE Yijie
中华医学杂志英文版2002年 115卷 06期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.0366-6999.2002.06.105
目标一定比例的患者在姑息治疗中失败153Sm-乙二胺四亚甲基磷酸（153Sm-EDTMP）治疗疼痛性骨转移。设计了一项比较分析，以确定与治疗反应相关的因素。
方法从一项为期3年的多中心临床试验中，收集了51例对静脉注射153Sm-EDTMP，剂量为0.5-1.5 mCi/kg。通过症状、一般状况、镇痛药消耗量、效应产物总和和Karnofsky评分的变化来评估治疗效果。将患者的年龄、性别、治疗史、肿瘤类型、骨受累位置、转移灶摄取率和数量以及使用的剂量与应答者进行比较。
结果在51例无应答者中，43例为男性，34例患有肺癌，41例椎骨骨病变，39例骨盆骨病变，24例下肢骨转移。应答者和无应答者的性别分布、肿瘤类型和病变位置有显著差异。没有其他因素显示两组之间的差异。尽管临床上观察到，年龄较小的患者和放射性药物摄取较低的病变似乎更容易治疗失败，但这并未通过统计分析得到证实。
结论发现患者的性别、某些类型的原发性肿瘤和向身体下部的转移会影响患者对单剂量153Sm-EDTMP姑息治疗。需要进一步探索更好的方法来确定剂量和预测每个个体病例的反应。115(6)：824-828
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两个中国X连锁视网膜色素变性家系中视网膜色素变性GTP酶调节基因的两个新突变LIU Li, CHEN Haoming, LIU Mugen, JIN Lei, WEI Yong, WU Xuejun, ZHU Renyuan, LIU Youe, CHAI Jianhua
中华医学杂志英文版2002年 115卷 06期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.0366-6999.2002.06.106
目标检测两个中国X连锁视网膜色素变性家系的视网膜色素变性GTP酶调节因子（RPGR）基因突变。
方法使用基因组DNA作为模板，用内含子引物扩增RPGR基因的外显子1-19的片段。通过单链构象多态性（SSCP）和直接测序分析聚合酶链反应（PCR）产物。通过比较患者的DNA序列与正常对照的DNA序列来鉴定突变。
结果在两个家族中，在RPGR基因的外显子12和9中鉴定出两个新突变c1536delC和E332X。每个突变是在它们各自的外显子中发现的第一个突变。预测这两种突变都会导致过早终止，这导致截短的蛋白质没有RPGR产物的正常功能。
结论这两种突变都是各自家族发病机制的遗传基础。我们的数据可能有助于分析RPGR蛋白的功能。115(6)：833-836
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二次谐波心肌灌注对比超声心动图评价冠心病DONG Shaohong, LIANG Xu, ZHANG Shaoweng, ZHAI Lihua, HU Xuesong, XIA Lingqiong, WANG Zengying, YANG Chunyu, YUAN Nuanrong
中华医学杂志英文版2002年 115卷 06期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.0366-6999.2002.06.107
目标评价静脉注射Levovist二次谐波心肌声学造影（MCE）的心肌局部灌注与冠状动脉造影检测的冠状动脉狭窄之间的关系，以确定MCE是否可用于检测冠状动脉疾病（CAD）及其检测CAD的敏感性和特异性。
方法36例接受冠状动脉造影和MCE的患者组成研究组。对来自图像的10个心肌节段(在心尖二腔和四腔视图中各5个)进行评分以检测心肌灌注，如下所示：1、正常灌注；2、灌注减少；和3，灌注缺陷。动脉分为正常或病变。根据灌注评分将病变动脉分为三组。
结果不同灌注评分组冠状动脉直径狭窄程度差异有显著差异（P<0.001).总闭塞动脉10条，因侧支循环不同，心肌灌注评分不同。正常灌注组（A组）冠脉直径狭窄65%±12%，心肌灌注评分指数1±0.00。灌注减少组（B组）冠脉直径平均狭窄82%±8%，心肌灌注评分1.93±0.16。63%的冠状动脉直径狭窄小于85%（包括12%的血管直径狭窄≤75%）。22%的冠状动脉直径狭窄为85%-90%，15%的冠状动脉直径狭窄>90%。灌注缺损组（C组）平均直径狭窄90%±6%，心肌灌注评分指数2.89±0.24。94%的冠状动脉直径狭窄≥85%，直径狭窄为<85%和>75%仅在6%的冠状动脉中。MCE识别造影冠状动脉直径狭窄的总体敏感性和特异性分别为67%和100%。108支冠状动脉的假阴性率为32.6%。进一步细分分析显示，A、B和C组的敏感性分别为0、100%和100%。敏感性随着冠状动脉管腔直径狭窄的增加而增加。
结论冠状动脉狭窄与MCE灌注评分有密切关系。静脉注射新一代造影剂的MCE可以确定CAD的存在和病变分级分类。灌注评分和狭窄冠脉直径之间的一些不一致可能表明其他因素，如不同的侧支循环，这应该进一步研究。随着动脉狭窄程度的增加，MCE的敏感性增加。115(6)：837-841
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闭孔器在治疗腭咽闭合不全中的应用SUN Jian, LI Ningyi, SUN Guilan
中华医学杂志英文版2002年 115卷 06期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.0366-6999.2002.06.108
目标评估应用闭孔器后腭咽闭合不全（VPI）治疗系统的效果。
方法使用鼻咽纤维镜（NPF）和计算机分析系统，我们定量分析了100例单侧和/或双侧腭裂患者腭咽闭合不全的改善状态。
结果通过使用临时口腔假体（闭孔器）和言语训练，可以大大改善腭咽闭合（VPC）。建立了评价腭裂患者手术及保守治疗后腭咽闭合度变化的客观量化标准。
结论所用方法比以往的方法更简洁、准确、实用。为了反映腭咽功能不全的状态，提出了腭咽功能不全改善率（IRVPI）的概念。115(6)：842-845
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系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞白细胞介素-12及其信号分子的表达LI Zhijian, LI Youji, HUANG Linghong, XU Hanshi, YU Xueqing, YE Rengao
中华医学杂志英文版2002年 115卷 06期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.0366-6999.2002.06.109
目标探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血单个核细胞（PBMCs）白细胞介素-12（IL-12）的体外表达及其对信号转导和转录激活因子（STAT）信号分子的影响。
方法收集了39例明确的系统性红斑狼疮患者和11例健康志愿者的外周血单个核细胞。逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)检测PBMCs中IL-12 P40mRNA的表达。通过酶联免疫吸附试验（ELISA）测量IL-12蛋白上清液的量。通过免疫印迹检测PBMC中磷酸化STAT3和STAT4信号分子的水平。
结果活动期或非活动期SLE患者IL-12蛋白和mRNA表达水平显著高于对照组。植物血凝素（PHA）可能促进IL-12的表达。单独IL-12诱导SLE患者PBMC中STAT3和STAT4的磷酸化，尤其是在活动性SLE中。但对正常PBMC无明显影响。在用IL-12加PHA处理的正常PBMC中可以观察到磷酸化的STAT3和STAT4。
结论IL-12在SLE患者中异常产生。IL-12可能通过异常磷酸化的STAT3和STAT4信号分子在SLE中发挥其生物学作用。
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类风湿性关节炎T细胞受体V β基因偏倚ZHANG Zhuoli, ZHANG Guozhu, DONG Yi
中华医学杂志英文版2002年 115卷 06期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.0366-6999.2002.06.110
目标目的通过研究T细胞受体（TCRs）的表达，探讨类风湿关节炎（RA）的发病机制。
方法分析了8例RA患者、2例骨关节炎患者和2例意外截肢者滑膜和外周血T细胞受体V β(TCR V β)基因的使用和表达。通过逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）半定量扩增未选择的T细胞群中25个TCR V β亚家族基因的互补决定区3（CDR3）。通过genescan进一步研究了产品的V β使用频率。
结果RA外周血和滑膜T细胞表达的V β亚家族数量未受到显著限制。更重要的是，在RA滑膜中观察到有偏见的V β基因表达，V β 6、V β 17和V β 22基因是主要的亚家族。值得注意的是，RA滑膜中V β 17的表达显著增加。
结论我们的数据与几种抗原或超抗原驱动的过程可能参与RA的发病机制的假设一致。115(6)：856-859
