2002年 · 第115卷第05期

研究培养的角膜干细胞的增殖和分化，并确定羊膜上培养的角膜干细胞对治疗角膜烧伤的角膜缘面积的影响。

使用集落形成效率和免疫组织化学检查了角膜干细胞在体外的增殖和分化。干细胞已经在羊膜上培养并移植到角膜缘区域用于治疗角膜烧伤。

角膜干细胞在原代和第1代均有较高的增殖能力，细胞角蛋白3在原代培养中不表达，但在第1代中部分表达。干细胞可以增殖以在羊膜上形成细胞层。当移植时，干细胞可以在角膜缘存活。移植后，眼部炎症消退，角膜重新上皮化，基质混浊减少，浅表新生血管减少，结膜穹窿重建。

通过羊膜上培养的角膜干细胞的同种异体移植可以改善眼表状况。115(5)：767-769

探讨经皮东莨菪碱是否增加心肌梗死急性期患者的心脏迷走神经活动。

30例首次急性心肌梗死和保留窦性心律且未服用可能影响窦房结的药物的患者被随机分配到治疗组或安慰剂组。在治疗前后，通过数字24小时动态心电图记录获得接受药物或安慰剂的患者的心率变异性（HRV）测量值。压力反射敏感性采用去氧肾上腺素法进行。

两组治疗前时域和频域指标均无显著差异。经皮东莨菪碱患者治疗后正常RR间期的标准差（SDNN）、所有五个最小平均正常RR间期的标准差（SDANN）、连续正常RR间期差异的均方根（rMSSD）、总功率（TP，0.00-0.40 Hz）、低频峰值（LF，0.04-0.15 Hz）、高频峰值（HF，0.15-0.40 Hz）和压力反射敏感性显著增加（P<0.05-0.01).在服用安慰剂的患者中，这些指数没有变化。

低剂量经皮东莨菪碱可安全增加急性心肌梗死患者的心脏副交感神经活性并改善自主神经指数。115（5）：770-772

了解我国部分地区中老年人骨质疏松症患病率分布情况。

采用分层多步整群抽样方法，对全国5个行政区5593名40岁以上人群进行骨密度测定和问卷调查。

骨质疏松症总患病率为16.1%。男性患病率为11.5%，女性为19.9%（P<0.01).城市、年龄组、性别组和地区之间的骨质疏松症患病率也存在差异。

骨质疏松症的预防和治疗对女性非常重要，但对男性也不容忽视。115(5)：773-775

探讨短肠综合征康复治疗对患者营养状况及肠道适应的影响。

康复治疗包括肠内或肠外营养、谷氨酰胺、重组人生长激素和康复饮食。从1997年1月至2000年7月，27例短肠综合征患者接受了治疗。患者平均年龄38.5±19.3岁，残余小肠长度15~80cm，平均46.8±23.4 cm。14例保留回盲瓣，短肠综合征发病至康复治疗时间平均86±105天。

治疗后患者营养状况明显改善，肠道吸收能力提高。8例患者随访2年以上，其中4例（50%）脱离全肠外营养。13例患者随访1年以上，10例（76.9%）脱离全肠外营养。

短肠综合征康复治疗能有效改善患者营养状况，促进肠道适应，为这些患者提供了新的希望。治疗效果与残余小肠的长度、患者年龄以及大肠切除和开始治疗之间的持续时间有关。早期开始康复治疗可促进肠道适应，提高患者脱离全肠外营养的能力。

115(5)：776-778

研究直接给予含有血管内皮生长因子165（Ad-VEGF165）互补脱氧核糖核酸（cDNA）的腺病毒载体（Ad）是否诱导猪冠状动脉侧支血管形成，改善局部心肌灌注和功能，是否安全。

在小型猪进行左胸廓切开术并在左回旋冠状动脉(LCX)上放置Ameroid收缩器3周后，将Ad-VEGF165(n=6)或对照，表达β-半乳糖苷酶cDNA的Ad(Ad-Gal，n=6)直接施用到回旋分布的缺血心肌中。在第二次手术后4周处死所有动物。通过心电图门控单光子发射计算机断层扫描（GSPECT）成像评估心肌灌注和功能。进行离体冠状动脉造影以检查侧支血管。通过在载体递送前一天(第0天)和在载体递送后第1、3、7、28天的血液分析以及在处死后通过血管、心肌和肝组织学评估毒性。

施用Ad-VEGF165后4周的GSPECT成像显示缺血面积显著减少（P<0.01）和静息缺血严重程度（P<0.01）和显著改善左室射血分数（P<0.01）和局部室壁运动（P<0.05)与Ad-Gal和Ad-VEGF165给药前相比。通过冠状动脉造影评估的侧支血管发育在Ad-VEGF165组中显著大于Ad-Gal组（P<0.05).一般安全性参数，包括常规血液参数、肝肾功能和心脏特异性参数，除了第28天的红细胞计数外，Ad-VEGF165和Ad-Gal动物之间没有差异（P<0.05)和第7天血尿素氮(P<0.05)肌酸磷酸激酶仅短暂升高（P<0.05）和天冬氨酸转氨酶（P<0.05)在第1天，与两组中载体给药前相比。组织学上，在一只Ad-VEGF165动物（面积≤20%）和一只Ad-Gal动物（面积≤20%）中未发现回旋动脉粥样硬化病变，肝脏未发现炎症，仅观察到小的心肌坏死<10%).

Ad-VEGF165可以诱导冠状动脉侧支血管形成，改善局部心肌灌注和功能，并且通过直接注射的方式是安全的，这表明该策略可能用于治疗人类缺血性心脏病。115(5)：643-648

目的：探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对大鼠平滑肌细胞(VSMCs)迁移的生物学效应，探讨其在血管损伤发生中的作用机制。

从Wistar大鼠主动脉中分离VSMCs，采用改良的外植体法进行培养。应用免疫细胞化学和荧光细胞化学技术研究了血管平滑肌细胞AngⅡ受体(ATR)的表达、肌动蛋白骨架的重组和粘着斑的变化。用改良的Boyden室进行迁移测定。AT的影响₁R拮抗剂（CV-11974），AT₂研究了R拮抗剂（PD123319）对上述靶点的作用。

加入AngⅡ刺激VSMCs迁移。肌动蛋白细胞骨架的动态重组和粘着斑可能是AngⅡ促进VSMCs运动的重要机制。AT的表达₁血管平滑肌细胞的R在AngⅡ治疗后开始升高，随后逐渐降低。AT的表达₁R被AT下调₁，R拮抗剂。AT介导AngⅡ对血管平滑肌细胞迁移的影响₁R，而在₂R无显著影响。

AngⅡ诱导的VSMCs迁移需要黏着斑和肌动蛋白细胞骨架的动态重组。这种效应是由AT介导的₁R.115(5)：649-653

验证先前研究中确定的候选区域（2号染色体上的标记物D2S168、D2S151、D2S142）与中国家庭高血压的连锁。

对240个包含856例原发性高血压患者的中国家系进行了以2号染色体为重点的遗传连锁研究。使用平均间距为5 cM的2号染色体候选区域周围的9个高度多态性微卫星标记对总共1080个个体进行基因分型。使用GENEHUNTER软件进行非参数连锁（NPL）、参数连锁分析和传递不平衡检验（TDT）来评估连锁证据。

通过不同的统计学方法（NPL、LOD评分和TDT）证实了2号染色体上D2S151和D2S142周围的区域与高血压的连锁。然而，在这项延伸研究中不能复制D2S168的连锁。

这些数据表明，2号染色体上位于或靠近D2S142和D2S151基因座的区域可能含有与中国人原发性高血压发展相关的基因。115(5)：654-657

观察尸检老年高血压左室肥厚(LVH)患者冠状动脉微血管病变(CML)的特点及原发性高血压(EHT)、冠心病(CHD)和糖尿病(NIDDM)合并LVH组CML的差异。

对我院1954~1996年连续3195例尸检病例中年龄≥60岁的EHT、CHD和NIDDM合并LVH患者206例，正常人30例作对照。用HE、弹性纤维+VG染色和CD31免疫组化方法显示肌层中直径10~60 μ m的小动脉和毛细血管。采用光学显微镜观察和计算机图像分析，定量测定小动脉密度(AD)、小动脉壁腔比(RWC)、毛细血管密度(CD)和内皮细胞面积(AEC)。根据左室游离壁的厚度，将LVH的严重程度分为0~Ⅲ4度。EHT组出现0~Ⅲ级LVH，CHD、EHT+CHD、NIDDM组仅出现I级LVH。采用SAS系统进行统计分析。

随着LVH的进展，EHT组AD和RWC显著增加，CD和AEC显著降低（P<0.05-0.01).（HT+CHD）组也有类似但更严重的变化（P<0.01);广告增加了（P<0.05），而所有其他测量结果在CHD组中均未显示明显变化。AD增加，CD和AEC减少（均P<0.05)，但NIDDM组RWC变化不大。

EHT组CML的特征是AD和RWC增加，CD和AEC减少，其中RWC增加是EHT组与CHD和NIDDM组相比的典型变化。受损的CML可能是EHT伴LVH病例冠状动脉血流储备减少和心肌缺血的主要因素之一。115(5)：658-663

探讨肌浆网状Ca表达的变化²⁺-ATP酶（SERCA）和IP3-I受体（IP₃R₁、）心房颤动患者的mRNA。

研究了38例接受心内直视手术的二尖瓣狭窄患者。手术期间从右附件和右心房获得100 mg心房组织。信使核糖核酸（mRNA）的量SERCA和IP的量₃R₁通过逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）测量，并标准化为甘油醛3-磷酸脱氢酶（GAPDH）的mRNA水平。

与窦性心律相比，房颤患者SERCA mRNA表达水平较低，IP患者SERCA mRNA表达水平较低₃R₁，更高。房颤持续时间越长，mRNA水平越高。右心房游离壁与右心耳无显著差异。

SERCA和IP3R mRNA的表达变化可能与房颤的发生或维持有关。

115(5)：664-667

探讨蛋白激酶A（PKA）调节人乙醚-a-go-go相关基因（HERG）钾通道的分子机制。

HERG通道在人胚胎肾（HEK）293细胞中稳定表达，并用膜片钳技术测量电流。非洲爪蟾卵母细胞中异源表达的HERG通道蛋白的直接磷酸化³²用抗HERG抗体进行P标记和免疫沉淀。

通过与腺苷酸环化酶激活剂毛喉素(10 μ mol/L)和广谱磷酸二酯酶抑制剂IBMX(100 μ mol/L)孵育，细胞内cAMP浓度升高，导致HERG尾电流降低83.2%。此外，直接应用膜渗透性cAMP类似物8-Br-cAMP(500 μ mol/L)可使尾电流幅度降低29.3%。蛋白激酶A催化亚基（200 U/ml）的细胞内应用导致尾电流降低56.9%，并使激活曲线向更正的电位移动15.4 mV。HERG WT蛋白显示两条磷酸化条带，分子量约为155 kDa的上条带和分子量约为135 kDa的下条带，表明蛋白质的核心和完全糖基化形式都被磷酸化。

PKA介导的HERG通道磷酸化导致人细胞系中的电流降低。在病理生理条件下，复极心脏HERG钾电流与蛋白激酶A系统之间的偶联可能有助于心律失常的发生。115(5)：668-676

探讨川崎病所致冠状动脉病变的病程，以及冠状动脉造影（CAG）和二维超声心动图（2-D Echo）在冠状动脉病变评估和随访中的价值。

对1979~1997年川崎病致冠状动脉病变患者87例进行回顾性分析。随访期间，87例患者进行了167次CAG。每例患者每1-3年重复一次CAG，直至确认完全消退。每次CAG前均行二维回波检查。最长随访16年6个月。患者接受阿司匹林或阿司匹林和华法林治疗。

在随访期间，48/87（55%）患者的冠状动脉病变消退，然而，在接受冠状动脉旁路手术的6/87（7%）患者中，冠状动脉病变发展为严重病变。部分患者冠状动脉瘤消退，而狭窄病变保留或发展。冠状动脉狭窄病变与动脉瘤的比率进行性增加。结果表明，冠状动脉病变的超声诊断存在“假阳性”和“假阴性”，二维超声仅能发现76%的冠状动脉瘤和18%的狭窄病变，冠状动脉远端未发现狭窄病变。

长期随访显示，55%的患者出现自发消退，7%的患者发展为严重冠状动脉狭窄。有必要对川崎病引起的冠状动脉病变患者进行长期随访。在川崎病所致冠状动脉病变的随访中，二维超声不能完全取代CAG。115（5）：681-684

探讨核因子-κ B(NF-κ B)在蛋白激酶C(PKC)调控支气管肺泡灌洗液(BALF)中T淋巴细胞增殖、凋亡及Th2细胞因子-白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-5(IL-5)表达的信号传导中的作用。

从正常组和哮喘组哮喘豚鼠BALF中分离纯化T淋巴细胞，分别用PKC激动剂佛波醇12-肉豆蔻酸13-乙酸酯（PMA）和NF-κ B抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸酯（PDTC）刺激。采用免疫组化、原位杂交、ELISA、MTT和TUNEL法分别观察NF-κ B、IL-4和IL-5mRNA和蛋白的表达以及T淋巴细胞的增殖和凋亡。

PMA刺激的T淋巴细胞NF-kB激活、增殖反应、IL-4、IL-5 mRNA和蛋白表达均显著高于空白对照（P<0.01），而PMA和PDTC同时刺激T淋巴细胞的那些指数显著低于PMA单独刺激（P<0.01).PMA刺激的T淋巴细胞凋亡指数显著低于空白对照组（P<0.01），PMA和PDTC同时刺激哮喘豚鼠T淋巴细胞凋亡指数显著高于PMA单独刺激（P<0.01).NF-κ B的激活与增殖呈显著正相关（r=0.64,P<0.001），T淋巴细胞IL-4和IL-5 mRNA和蛋白的表达（r=0.55-0.68.P<0.001).NF-κ B活化与T淋巴细胞凋亡呈显著负相关（r=0.62,P<0.001).

NF-κ B可能参与PKC调控哮喘T淋巴细胞增殖、凋亡及IL-4、IL-5表达的信号传导。T淋巴细胞PKC信号传导通路中NF-κ B的活化可能在哮喘发病中起重要作用。115(5)：685-689

通过检测神经肽Y（NPY）在STZ糖尿病大鼠下丘脑和胰腺中的含量、分布及其mRNA表达，探讨NPY与糖尿病的关系。

将30只Wistar大鼠随机分为3组（糖尿病组、糖尿病胰岛素治疗组和对照组）。喂养24周后，处死大鼠。免疫组化法检测NPY在下丘脑和胰腺的表达原地杂交。

(1)与正常对照组相比，STZ糖尿病大鼠下丘脑NPY及其mRNA含量显著升高。糖尿病大鼠NPY mRNA表达增加仅见于弓状核，而不见于室旁核，提示NPY产生于弓状核。(2)胰岛素治疗后STZ糖尿病大鼠下丘脑NPY及其mRNA含量明显低于未治疗的糖尿病大鼠。这支持了大脑中胰岛素缺乏可能是糖尿病大鼠下丘脑NPY基因表达增加的原因的假设。(3)胰岛素替代可逆转STZ糖尿病大鼠下丘脑NPY的升高，提示下丘脑NPY升高有助于糖尿病状态的病理生理进展。(4)本研究首次证实STZ糖尿病大鼠胰腺NPY及其mRNA含量升高，NPY阳性细胞在胰岛中的分布由外周向整个胰岛改变。胰岛素治疗未改变胰岛NPY及其mRNA的含量和分布。

下丘脑中NPY增加导致食欲不振和烦渴，而糖尿病大鼠胰腺中NPY增加的含义尚不清楚。115(5)：690-695

探讨单转基因和双转基因小鼠微血管反应性变化的机制。

使用非转基因小鼠、表达人APP-C100（TGC100.WT或TGC100.V717F）的单转基因小鼠和共表达人APP-C100和人SOD的双转基因小鼠研究了后足垫灌注微血管系统上对血管扩张剂乙酰胆碱和硝普钠的外周血管反应性₁（G93A）基因。

单TgC100和双Tg小鼠C100/SOD₁与非转基因对照小鼠相比，2-3个月大的（G93A）显示血流量统计学上减少28%。此外，与对照小鼠相比，8-9月龄TgC100小鼠的血管舒张反应性显著降低至34%。TgC100之间的血管舒张反应特征没有显著差异。WT和TgC100.V717F小鼠。TgC100和双Tg小鼠血浆中的A β肽水平也高于非转基因小鼠（P<0.01).

本研究表明，微血管系统反应性的改变可能是由循环可溶性A β肽介导的。TgC100和双Tg小鼠中循环A β的血管活性的潜在机制可能涉及内皮和非内皮。115(5)：696-701