智慧检验医学实验室的构建与应用价值王绵生 王妍乐 孙建波 但巧云 石亮 卢远彬
中华检验医学杂志2025年 48卷 02期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20240729-00411
目的
探索智慧化实验室建设在检验科工作中的应用价值。
方法
收集中山大学附属第八医院2018年1月至2024年6月全院各临床科室送往检验科检测的所有样本,通过物流传输系统、自动排样系统、自动质控系统、自动审核系统、智能监测系统、危急值监测系统及智慧化DxlabReport运营管理系统等方面的应用,实现检验全流程智慧化建设。正态分布资料采用独立样本t检验,偏态分布计量资料组间比较采用Mann-Whitney U检验进行统计分析。
结果
气动物流传输系统应用后,样本从传送到接收周转时间(TAT)由 51.5(37.7,73.0)min降至18.1(14.4,31.0)min(U=0,P<0.001);启用自动排样后,样本从接收到排样TAT由 41.0(38.0,45.0)min降至10.0(5.0,11.0)min(U=0,P<0.001)。引入自动质控后,在每日质控通过情况下,第一批样本进入流水线的中位数时间由9:03提前至8:27,3 h内报告率从27.71%±1.39%升至36.90%±2.30%(t=3.423,P<0.001);启用智能监测系统后,可实现各模块定位监测、样本周转时间提醒、仪器负荷率监测、试剂剩余量监测和基于患者数据的实时质量控制等,高效提升仪器运转效率并保障结果的准确性;引入自动审核功能后,总体自动审核通过率为28.19%(10 006/35 500),其中生化报告自动审核通过率为37.17%(7 738/20 818),化学发光为31.57%(1 251/3 963),生化免疫为9.49%(1 017/10 719),实验室内TAT时间由(207.3±6.0)min变为(169.8±5.9)min(t=4.426,P<0.001);启用危急值监测系统后,危急值通报及时率高达99.52%(99.32%,99.89%);启用质量数字化管理后,针对门诊生化免疫进行流程优化,其检验中TAT由222(201,233)min降至145(119,195)min(U=0,P=0.004),合格率从86.88%(85.91%,87.81%)升至96.32%(95.86%,96.96%)(U=0,P=0.004)。
结论
智慧检验医学实验室建设能优化工作流程并有效提升样本处理效率和准确性,减少人为差错。
甲状腺功能五项检验报告自动审核系统的建立与优化崔俊华 朱晶 邵文琦 杨静 潘柏申 王蓓丽 郭玮
中华检验医学杂志2025年 48卷 02期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20240809-00441
目的
建立并利用检验历史数据优化甲状腺功能5项检验报告自动审核系统。
方法
依据我国《临床实验室定量检测结果自动审核》文件和美国临床和实验室标准化协会 AUTO 10-A和AUTO 15指南,结合人工审核经验建立甲状腺功能5项检验报告自动审核系统。收集2021年193 860份甲状腺功能5项报告用于原有系统的评估。收集2022年210 097份甲状腺功能5项报告和2023年的299 198份甲状腺功能5项报告用于自动审核系统的优化。使用2024年上半年160 666份甲状腺功能5项报告进行优化后系统的人机比对验证。
结果
2021年基于原有甲状腺功能5项自动审核系统的通过率为69.56%(134 849/193 860)。利用2022年和2023年历史数据优化后的系统涵盖了21种模式规则,并根据不同模式建立对应的审核范围规则、差值校验规则和复检规则。2024年上半年数据以人工审核为标准,优化后系统的敏感度和特异度分别为100%(499/499)和81.57%(130 646/160 167),假阴性率为0,自动审核与人工审核的符合率为81.63%(131 145/160 666),通过率为81.32%(130 646/160 666)。
结论
建立并利用检验历史数据优化甲状腺功能5项自动审核系统,根据不同模式制定其对应的审核规则能应用于临床实践工作,保证检测报告准确性的同时进一步提高工作效率,使系统不断优化和完善。
结直肠癌早期筛查:基于SERS与机器学习的血清检测方法研究李利毛 黄永 王震光 林加湘 吴正 曹小卫 韦伟
中华检验医学杂志2025年 48卷 02期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20240930-00542
目的
建立一种表面增强拉曼散射光谱(SERS)光谱技术结合机器学习的血清检测方法,用于结直肠癌(CRC)早期筛查的研究。
方法
收集在扬州大学附属江都人民医院确诊的CRC患者150例,以及37名健康受试者的血清样本。通过油水界面自组装制备金纳米六角板(AuNH)阵列,将5 μl血清滴加在AuNH阵列上。在室温条件下,使用雷尼绍inVia拉曼光谱仪,在激光波长为785 nm,曝光时间10 s,功率5 mW条件下,对血清样本进行无损、快速检测。使用Origin 2019软件对获得的原始SERS光谱进行Savitzky-Golay平滑、AsLS基线校正、Min-Max归一化预处理。接着在Python中用scikit-learn库,构建主成分分析(PCA)-支持向量机(SVM)模型,用留一法交叉验证(LOOCV)来评估模型的准确率、敏感度、特异度和曲线下面积(AUC)。
结果
AuNH阵列形貌均匀,1 080 cm-1处SERS强度的相对标准偏差(RSD)值为5.7%,1 340 cm-1处SERS强度的RSD值为6.2%,AuNH阵列的检测限(LOD)为9.4×10-12 mol/L。PCA-SVM模型准确率90.9%(170/187),敏感度96.8%(181/187),特异度99.5%(186/187),AUC 0.98。区分CRC不同分期最明显的特征峰包括747、940、1 000、1 447和1 612 cm-1。
结论
本研究建立的基于SERS和机器学习的血清检测方法,能够准确地筛查CRC,具有较高的准确率、敏感度和特异度,具有潜在的临床应用价值。
2023年全国临床输血相容性检测室间质量评价结果分析胡俊华 张芃 刘燕明 田胜辰 马婉茹 李祥 赵学彬 薛峰 王云田 林东 等
中华检验医学杂志2025年 48卷 02期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20240806-00433
目的
分析2023年全国临床输血相容性检测室间质量评价(EQA)开展情况,为临床输血相容性检测质量管理提供参考。
方法
国家卫生健康委临床检验中心(NCCL)2023年向全国31个省(自治区、直辖市)4 186家参评实验室(包括2 961家三级医院实验室、1 085家二级医院实验室、23家一级医院实验室、106家血站实验室和11家第三方医学检验实验室)共发放3次、每次22份EQA标本(包括1.5 ml/支的红细胞及血浆样本各11份),进行ABO正定型、ABO反定型、RhD血型、抗体筛检、交叉配血5项临床输血相容性检测,并收集回报结果数据。将上报结果数据按照地区分布、实验室分级、检测方法学、试剂及检测系统使用等方面进行统计分析并评价。
结果
2023年全国临床输血相容性检测中,ABO正定型、ABO反定型、RhD血型、抗体筛检、交叉配血项目的EQA合格率分别为96.68%(4 047/4 186)、95.10%(3 981/4 186)、96.46%(4 038/4 186)、95.32%(3 990/4 186)和91.04%(3 811/4 186);三级医院实验室EQA合格率为87.77%(2 599/2 961),高于二级医院实验室的77.79%(844/1 085)(P<0.05);不同地区的EQA合格率以及三级医院、二级医院参评实验室合格率差异有统计学意义(P均<0.05);微柱凝集法在ABO正定型、ABO反定型、RhD血型、抗体筛检、交叉配血项目中的使用率分别为80.81%(10 080/12 474)、75.06%(9 337/12 440)、81.38%(10 118/12 433)、89.59%(11 104/12 394)和76.25%(9 495/12 453);在ABO正定型检测项目中,微柱凝集法的合格率高于盐水玻片法(P<0.05);在抗体筛检项目中,微柱凝集法合格率高于聚凝胺法和抗人球试管法(P均<0.05);在ABO反定型、抗体筛检和交叉配血3个项目中7种试剂的合格率差异均有统计学意义(P均<0.05);除ABO反定型项目中试剂1单一体系的合格率高于混合体系(P<0.05),其他试剂的2种检测体系间的合格率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。
结论
不同地区和不同等级实验室的检测能力存在差异,微柱凝集法目前在输血相容性检测中应用最为广泛。实验室所用的主流检测试剂的整体性能较好,个别试剂的检测效能尚需进一步提高。开展临床输血相容性检测室间质量评价活动,可用于评估、监测和提高检测质量。
CLSI肠杆菌目及铜绿假单胞菌折点更新后对自动化药敏系统的影响及分析杨硕 王启 喻华 黄湘宁 廖康 王辉
中华检验医学杂志2025年 48卷 02期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20241219-00695
目的
评价环丙沙星、左氧氟沙星、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星、庆大霉素和妥布霉素在美国临床实验室标准化委员会折点更新前后不同自动化药敏系统的准确性。
方法
收集了2023年北京大学人民医院、四川省人民医院、中山大学附属第一医院3家医院65株肠杆菌目细菌(大肠埃希菌34株、肺炎克雷伯菌31株)及33株铜绿假单胞菌。以微量肉汤稀释法(BMD)为参考方法,评价我国目前主要在用的7种自动化药敏系统的10种药敏板卡(NMIC-413、GN09、N335、NMIC45、GN4F、NMIC-150、DL-120E、DL-120NE、ONE-96和NF-96)准确性。
结果
除了GN-09、N-335和NMIC-150卡,其他板卡报告的最低抑菌浓度在验证中存在未覆盖折点的情况。除折点未覆盖的情况,验证结果无极重大误差(VME)。所测的65株肠杆菌目细菌中,环丙沙星及左氧氟沙星基本一致率(EA%)超过92.3%(60/65),使用新折点环丙沙星分类一致率(CA%)由100%(65/65)至98.5%(64/65)降低到86.2%(56/65)至95.4%(62/65),N-335卡重大误差率(ME%)由1.5%(1/65)升高至4.6%(3/65);左氧氟沙星除GN-09和N-335卡以外,其余板卡新折点CA%≥96.9%(63/65),无ME;哌拉西林/他唑巴坦的EA%≥93.8%(61/65),新折点CA%≥92.3%(60/65),N-335卡ME%由1.5%(1/65)升高至4.6%(3/65);阿米卡星、庆大霉素及妥布霉素的EA%和新折点CA%都≥96.9%(63/65),且无ME。所测的33株铜绿假单胞菌中,环丙沙星EA%≥93.8%(30/32),应用新折点后环丙沙星CA%由90.6%(29/32)至100%(33/33)降低到84.4%(27/32)至100%(33/33),NMIC-413卡有2株菌出现ME;左氧氟沙星EA%均≥90.9%(30/33),新折点判读CA%由90.6%(29/32)至100%降低到69.7%(23/33)至93.8%(30/32),无ME;阿米卡星及妥布霉素EA%≥93.8%(30/32),大多数板卡阿米卡星及妥布霉素新折点CA%≥96.9%(31/32)。
结论
当前,我国较多自动化药敏系统中板卡无法覆盖更新折点;多数药敏系统中环丙沙星和左氧氟沙星对肠杆菌目和铜绿假单胞菌不满足验证要求。折点更新后对自动化药敏系统进行验证至关重要。
运用Hoffmann和refineR算法建立血清免疫球蛋白和补体参考区间及其可行性评估穆丹妮 马超超 马逸辰 高雨濛 程歆琦
中华检验医学杂志2025年 48卷 02期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20240621-00322
目的
采用Hoffmann和refineR两种间接法计算免疫球蛋白G(IgG)、IgA、IgM、补体3(C3)和C4的成年人参考区间,并将其与中华人民共和国卫生行业标准WS/T 645(以下简称行标)报告的参考区间进行比较,探索间接法的临床应用价值。
方法
横断面研究。收集2013年1月至2023年12月北京协和医院体检人群的IgG、IgA、IgM、C3和C4检测结果数据。采用Box-Cox将数据转化成正态分布,Tukey法剔除异常值。采用Mann-Whitney检验和Kruskal-Wallis检验分别比较性别和年龄的组间差异。采用分位数回归分析年龄和性别对各个指标的影响。采用Hoffmann法和refineR法分别计算5个项目的参考区间。
结果
IgG、IgA、IgM、C3和C4分别有82 251、82 483、49 236、20 027和19 942条检测结果被纳入。性别与IgG、IgA、IgM、C3和C4水平相关,年龄与IgA、IgM、C3和C4水平相关。根据Hoffmann和refineR法,IgG总参考区间分别为7.58~16.85 g/L和7.54~16.88 g/L;IgA总参考区间分别为0.97~4.26 g/L和0.97~4.34 g/L;IgM女性参考区间分别为0.44~2.57 g/L和0.44~2.62 g/L,男性参考区间为0.33~1.91 g/L和0.31~1.87 g/L;C3总参考区间分别为0.73~1.43 g/L和0.73~1.44 g/L;C4总参考区间均为0.11~0.32 g/L。根据偏倚比进一步计算性别、年龄特异的参考区间。Hoffmann法与refineR法计算的参考区间一致性较好。间接法计算的IgA和C3参考区间上下限、IgG参考区间下限、IgM和C3参考区间上限与行标报告的参考区间具有良好的可比性。
结论
采用Hoffmann和refineR法建立了本医院人群IgG、IgA、IgM、C3和C4的总参考区间及性别和/或年龄特异参考区间,两种间接法建立的参考区间具有可比性。间接法参考区间与行标中采用直接抽样法建立的参考区间也具有较好的可比性。
应用多重实时荧光定量PCR技术联合筛查新生儿两种原发性免疫缺陷病及脊髓性肌萎缩症的研究张超 杨建滨 尚世强 陈迟 毛华庆 黄晓磊 洪芳 缪海霞 赵涵怡 杨茹莱
中华检验医学杂志2025年 48卷 02期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20241121-00638
目的
探讨应用多重实时荧光定量PCR技术联合筛查新生儿重症联合免疫缺陷病(SCID)、X连锁无丙种球蛋白血症(XLA)及脊髓性肌萎缩症(SMA)的可行性,为患儿的早期筛查和诊治提供依据。
方法
横断面研究。收集2021年7月至2023年1月经冷链递送至浙江省新生儿疾病筛查中心的滤纸干血片103 240份,采用多重实时荧光定量PCR方法联合检测干血片中T细胞受体切除环(TREC)、Kappa缺失重组切除环(KREC)浓度及运动神经元存活基因1(SMN1)外显子7缺失,以核糖核酸酶P/MRP 30 000亚基(RPP30)作为内参基因。筛查阳性的新生儿进一步经实验室其他相关项目检测以辅助诊断,基因测序结果作为确诊金标准。同时收集本院已确诊1例SCID、3例XLA及2例SMA患儿样本用于阳性验证。分析新生儿基本信息与TREC/KREC检测浓度的相关性,并进行各因素组间差异性分析。
结果
应用多重实时荧光定量PCR技术筛查并确诊新生儿1例SCID、2例XLA、9例SMA以及7例其他遗传性疾病(4例DiGeorge综合征、1例21-三体综合征、1例努南综合征和1例超雄综合征);筛查新生儿SCID、XLA及SMA的阳性预测值分别为2.44%(1/41)、2.78%(2/72)和9/9。已临床确诊的1例SCID、3例XLA和2例SMA样本作为阳性验证样本,经该方法全部检出。TREC/KREC检测结果与新生儿采血时间、性别、体重、胎龄、分娩方式的r值分别为0.162/0.187、0.066/0.032、0.045/0.042、‒0.015/‒0.088、0.014/0.068(P均<0.05),有相关关系。
结论
浙江省依托现行的新生儿疾病筛查平台,应用多重实时荧光定量PCR技术开展新生儿2种原发性免疫缺陷病及脊髓性肌萎缩症的联合筛查具有可行性。
牡丹皮乙醇提取物对热带念珠菌毒力因子的影响唐赟 阿祥仁 程鹏 周健武 马继登 马小亚
中华检验医学杂志2025年 48卷 02期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20240624-00323
目的
探究牡丹皮乙醇提取物(EAEMC)对热带念珠菌的体外抑菌效果,以及对毒力因子包括天冬氨酸蛋白酶、溶血素、磷脂酶、酯酶、脂肪酶的活性和生物膜的影响。
方法
通过超声提取、减压浓缩和冻干得到EAEMC粉末;以微量稀释法测定EAEMC对21株热带念珠菌临床菌株和1株标准菌株的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC);通过平板法检测热带念珠菌的5种胞外酶活性以及EAEMC对其影响,结果采用方差分析;体外构建热带念珠菌生物膜模型,噻唑蓝法评价EAEMC对热带念珠菌生物膜抑制率。
结果
EAEMC对热带念珠菌BNCC335988的MIC为12.5 g/L,MBC为25 g/L,对临床菌株的MIC为12.5~25 g/L,MBC为25~50 g/L;热带念珠菌的天冬氨酸蛋白酶、酯酶和溶血素活性均为阳性,磷脂酶和脂肪酶均为阴性;EAEMC浓度为1/2MIC时能完全抑制热带念珠菌的天冬氨酸蛋白酶和溶血素活性,为MIC时能完全抑制酯酶活性;EAEMC浓度为2MIC时对热带念珠菌BNCC335988生物膜的抑制率达到70%以上,浓度为4MIC时达到80%以上,浓度为8MIC时抑制率达90%以上。
结论
EAEMC可通过降低热带念珠菌的天冬氨酸蛋白酶、酯酶和溶血素的活性,以及抑制生物膜的形成来达到抑菌作用。
低温保存对鼻咽拭子标本中百日咳博德特菌核酸检测和细菌培养结果的影响刘志云 华春珍 周瑾思 杨颖 米芋枚 周明明 李建平 李伟 张学潮
中华检验医学杂志2025年 48卷 02期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20240607-00302
目的
了解鼻咽拭子标本低温保存对百日咳博德特菌培养和核酸检测结果的影响,为标本集中转运检测提供依据。
方法
本研究为横断面研究,对2022年1—8月浙江大学医学院附属儿童医院门诊百日咳博德特菌培养阳性的鼻咽拭子标本,采用随机数字表法分别置‒20 ℃和‒70 ℃,冻存(114.3±31.9)d后复温集中进行培养和百日咳DNA的PCR检测,根据冻存温度和初始标本菌量进行分组分层,采用χ2检验比较组间的阳性率。
结果
244份鼻咽拭子冻存后细菌培养阳性166例,阳性率较冻存前下降32%。其中冻存前菌量“少量”的84份鼻咽拭子冻存后培养阳性率下降了56%。但‒70 ℃ 和‒20 ℃冻存后培养阳性率差异无统计学意义(χ2=1.65,P=0.20)。冻存前DNA检测阳性217例,阳性率88.9%,冻存后阳性率较冻存前下降10.6%。‒70 ℃冻存组的阳性率高于‒20 ℃组(χ2=5.11,P=0.02)。菌量少量的标本‒70 ℃冻存后的阳性率高于‒20 ℃组(χ2=4.86,P=0.03)。菌量一个“+”以上的标本‒20 ℃和‒70 ℃冻存后DNA检测阳性率差异无统计学意义(χ2=1.25,P=0.26)。冻存后鼻咽拭子培养阳性率[68.0%(166/244)]低于DNA检测阳性率[78.3%(191/244),χ2=6.52,P=0.01]。
结论
低温冷冻保存的鼻咽拭子可用于百日咳博德特菌核酸检测和细菌培养,原始标本菌量影响低温保存后的阳性检出率,核酸检测结果受影响更小,‒70 ℃保存优于‒20 ℃。
三种分子诊断技术在常见肺外结核脓液样本中的结核分枝杆菌检测效果比较王卓 邹远妩 姜亚萍 李静 李春梅 王晓琳
中华检验医学杂志2025年 48卷 02期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20240607-00300
目的
评价GeneXpert MTB/RIF(简称“Xpert”)、DNA恒温扩增荧光检测法(简称“DNA恒温扩增”)、RNA恒温扩增实时荧光检测(简称“SAT-TB”)3种分子检测技术在浅表淋巴结结核和骨结核两类常见肺外结核的脓液样本中结核分枝杆菌检测效果。
方法
横断面研究。收集2022年1月至2023年12月陕西省结核病防治院收治的疑似浅表淋巴结结核和骨结核患者,并在病灶取脓液标本送检的242例患者,其中实验室确诊或临床诊断为结核病患者210例,浅表淋巴结结核患者108例、骨结核患者102例;非结核病患者32例;所有患者脓液标本均行结核培养、Xpert、DNA恒温扩增、SAT-TB检测,检测结果采用SPSS26.0和MedCalc软件进行统计分析,比较几种不同检测方法在脓液标本中的结核分枝杆菌检出效果,以P<0.05为差异有统计学意义。
结果
脓液样本结核培养、Xpert、DNA恒温扩增、SAT-TB在结核病患者中的检测敏感度分别为25.2%(53/210)、88.6%(186/210)、81.9%(172/210)、61.0%(128/210),4种检测方法在结核病诊断中的AUC值分别为0.626、0.943、0.910、0.805,结核培养在结核病诊断中的AUC值低于3种分子诊断技术的AUC值(P<0.05),除此之外,DNA恒温扩增的AUC值高于SAT-TB检测方法(P<0.05);以结核培养阳性为参考标准,Xpert、DNA恒温扩增、SAT-TB的敏感度分别为96.2%(51/53)、90.6%(48/53)、86.8%(46/53),3种分子诊断技术的敏感度差异无统计学意义(P>0.05);Xpert MTB阳性患者中,DNA恒温扩增的阳性检出率为90.3%(168/186),DNA恒温扩增与Xpert MTB检出结果一致性较好(Kappa=0.765,P<0.001);Xpert检测利福平耐药27例,耐药率为12.9%(27/210)。
结论
GeneXpert、DNA恒温扩增在肺外结核脓液样本中具有较高的敏感度和特异度,DNA恒温扩增与GeneXpert MTB/RIF检测效果一致性高,在结核病筛查中可应用DNA恒温扩增荧光检测法用于初筛,减少检测成本。