中华检验医学杂志
2024年 · 第47卷第06期
出版日期 2024-06-19电子版 ¥23.00元¥45.00元
中华检验医学杂志
述评
多学科携手共克微生物耐药性
张雅薇 王辉
中华检验医学杂志2024年 47卷 06期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20240422-00206
摘要
抗微生物耐药是21世纪全球面临的重大公共卫生挑战。“超级细菌”和“超级真菌”引起的严重感染病死率高,使临床治疗陷入困境。多学科携手动态监测新发、高发耐药菌的耐药演化规律、快速检测和早期诊断技术、建立有效防控和遏制细菌耐药快速发展的综合防控策略迫在眉睫。
专家论坛
全球细菌真菌耐药状况及应对策略
余跃天 吴文娟
中华检验医学杂志2024年 47卷 06期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20240110-00018
摘要
21世纪以来,抗微生物药物耐药已成为全世界最重要的公共卫生威胁之一。2023年5月27日第七十六届世界卫生大会达成首个全球感染预防和控制战略,提出全球抗微生物耐药(AMR)行动计划的方向。本文概览全球微生物耐药现状和WHO抗微生物耐药全球研究议题要点,结合我国细菌耐药性变化趋势和耐药防控困境,探讨医疗机构临床与实验室的应对措施,提出多学科合作促进抗微生物药物合理应用是抗击耐药的必由之路。
指南与共识
侵袭性霉菌感染实验室诊断临床应用专家共识
中国初级卫生保健基金会检验医学研究与转化专业委员会 中国医院协会临床微生物实验室专业委员会 全国真菌病监测网侵袭性霉菌感染监测项目组
中华检验医学杂志2024年 47卷 06期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20240108-00012
摘要
侵袭性真菌病发病率在世界范围内逐渐增加,世界卫生组织和美国疾病预防控制中心相继发布了重要文件,呼吁提高对侵袭性真菌病的重视程度和认知水平,以应对侵袭性真菌病对全球造成的威胁。霉菌是侵袭性真菌病的重要病原菌之一,且发病率高、死亡率高,临床诊断和治疗面临极大挑战。中国初级卫生保健基金会检验医学研究与转化专业委员会、中国医院协会临床微生物实验室专业委员会和全国真菌病监测网侵袭性霉菌感染监测项目组组织专家制定该文件,对曲霉菌属、毛霉菌目、镰刀菌属、赛多孢菌属、节荚孢霉属、拟青霉属、暗色霉菌、双相真菌(马尔尼菲篮状菌和荚膜组织胞浆菌)共8种临床重要侵袭性霉菌的实验室诊断方法及要点形成共识,并对实验室诊断及与临床沟通过程中遇到的六大常见问题形成专家共识,旨在为提升侵袭性霉菌感染的实验室诊断能力提供借鉴和指导。
优先出版
血清丝氨酸蛋白酶Corin在慢性肾衰竭合并心力衰竭患者中的诊断价值
周鹏飞 刘诗语 方汶 陈瑞华 周子涵 侯小美 燕宇彤 胡亚会
中华检验医学杂志2024年 47卷 06期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20240313-00132
摘要
目的
探讨血清丝氨酸蛋白酶(Corin)在慢性肾衰竭(CRF)合并心力衰竭患者中的诊断价值。
方法
回顾性分析2023年1月1日至12月31日于郑州人民医院住院的CRF合并心力衰竭患者120例,(64.05±13.89)岁,男77例(64.17%),单纯CRF患者87例,60.59±8.78岁,男54例(62.07%)作为对照组。收集患者临床基本信息、实验室检测指标和超声心动图参数,并用酶联免疫吸附实验检测血清Corin的浓度。根据美国纽约心脏病学会心功能分级将试验组分为Ⅱ级(31例)、Ⅲ级(47例)、Ⅳ级(42例)。比较实验组和对照组患者以及不同心功能分级组间血清Corin水平。采用Spearman相关性分析血清Corin与脑钠肽(BNP)、D-二聚体的相关性。ROC曲线分析血清Corin对CRF合并心力衰竭以及不同心功能分级的预测价值;采用二元Logistic回归构建多指标联合预测模型,得出联合预测概率,绘制ROC曲线,比较血清Corin、BNP对CRF合并心力衰竭的诊断价值以及血清Corin联合D-二聚体、BNP对CRF合并心力衰竭的诊断价值。
结果
CRF合并心力衰竭组血清Corin[2 568.97±477.70 pg/ml比1 727.81±480.60 pg/ml,t=12.47,P<0.001]、BNP[700.00(256.00,2 089.75)pg/ml比88.00(43.00,230.00)pg/ml,Z=-9.00,P<0.001]、D-二聚体[1 150.00(643.00,1 874.75)μg/L比556.00(301.00,865.00)μg/L,Z=-6.57,P<0.001]高于单纯CRF组,差异有统计学意义。在CRF合并心力衰竭患者不同心功能分级三组间,血清Corin[2 231.74±311.39 pg/ml比2 562.09±365.30 pg/ml比2 825.57±536.83 pg/ml,F=74.33,P<0.001]、BNP[234.00(168.00,612.00)pg/ml比514.00(260.00,1 455.00)pg/ml比2 200.00(640.50,4 682.75)pg/ml,H=29.42,P<0.001]、D-二聚体[753.00(514.00,1 280.00)μg/L比1 187.00(590.00,1 840.00)μg/L比1 603.00(810.00,3 313.25)μg/L,H=14.98,P<0.001]随心功能分级递增而升高,且差异有统计学意义。根据Spearman相关分析结果,血清Corin与BNP(r=0.409)、D-二聚体(r=0.299)呈正相关(P<0.001)。经ROC曲线分析,血清Corin诊断CRF合并心力衰竭及心功能Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级的AUC分别为0.890(95%CI 0.846~0.935)、0.807(95%CI 0.728~0.885)、0.911(95%CI 0.864~0.959)、0.927(95%CI 0.882~0.972);BNP诊断CRF合并心力衰竭的AUC为0.867(95%CI 0.817~0.916),血清Corin联合D-二聚体、BNP联合D-二聚体、血清Corin与D-二聚体、BNP三者联合诊断CRF合并心力衰竭的AUC分别为0.930(95%CI 0.897~0.962)、0.892(95%CI 0.847~0.936)、0.952(95%CI 0.927~0.977)。
结论
血清Corin在CRF合并心力衰竭患者中的表达升高,升高的程度与心功能分级有关,血清Corin对于CRF是否合并心力衰竭及其严重程度的判断具有较好的诊断价值。血清Corin有望成为CRF合并心力衰竭疾病诊断的新型生物学标志物。
论著
2020—2021年中国10所教学医院院内感染常见病原菌分布和耐药监测
李曙光 鲁炳怀 褚云卓 张嵘 曾吉 苏丹虹 卓超 金炎 徐修礼 廖康 等
中华检验医学杂志2024年 47卷 06期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20240228-00101
摘要
目的
监测2020—2021年我国引起院内感染的主要病原菌的病原谱分布和对主要抗菌药物的敏感性。
方法
回顾性收集来自我国10家教学医院的引起院内血流感染(BSI,670株)、医院获得性肺炎(HAP,394株)和院内腹腔感染(IAI,247株)的病原菌1 311株。经中心实验室复核菌株后,对临床常见菌株进行抗菌药物药敏试验,采用琼脂稀释法或微量肉汤稀释法测定菌株的最低抑菌浓度(MIC),药敏折点采用美国临床和实验室标准协会2023年M100(第33版)标准。使用χ2检验进行率的比较。
结果
BSI最主要的致病菌是大肠埃希菌(21.2%,142/670)、肺炎克雷伯菌(14.9%,100/670)和金黄色葡萄球菌(11.5%,77/670);HAP最主要致病菌是肺炎克雷伯菌(27.7%,109/394)、鲍曼不动杆菌(22.1%,87/394)和铜绿假单胞菌(18.3%,72/394);IAI最主要的致病菌是大肠埃希菌(24.3%,60/247)、屎肠球菌和肺炎克雷伯菌(均为14.6%,36/247)。金黄色葡萄球菌对替加环素、利奈唑胺、达托霉素和糖肽类抗菌药物均表现为敏感。甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌(MRSA)和凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的检出率分别为36.5%(42/115)和74.5%(38/51)。屎肠球菌和粪肠球菌对万古霉素的耐药率分别为3.3%(3/90)和1.9%(1/53)。肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中超广谱β内酰胺酶的检出率分别为23.7%(58/245)和60.5%(130/215),碳青霉烯耐药株的检出率分别为29.8%(73/245)和4.2%(9/215),对替加环素的耐药率分别为1.6%(4/245)和0,对黏菌素的耐药率分别为1.6%(4/245)和2.8%(6/215),对头孢他啶/阿维巴坦的耐药率分别为2.0%(5/245)和2.3%(5/215)。鲍曼不动杆菌除对黏菌素(98.8%,161/163)和替加环素(89.6%,146/163)表现出较高的敏感性,对其他抗菌药物均表现出较高的耐药率,碳青霉烯耐药株的检出率达到76.7%(125/163)。碳青霉烯耐药的铜绿假单胞菌检出率为28.4%(33/116);黏菌素、阿米卡星和头孢他啶/阿维巴坦对铜绿假单胞菌表现出较强的抗菌活性,敏感率分别为99.1%(115/116)、94.0%(109/116)和83.6%(97/116)。
结论
引起院内感染的主要病原菌是肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌。替加环素、黏菌素和头孢他啶/阿维巴坦对大部分常见革兰阴性杆菌表现出较强的抗菌活性。鲍曼不动杆菌耐药问题依然严重。碳青霉烯耐药的肠杆菌目细菌检出率继续升高,需继续加强抗菌药物合理应用及医院感染防控。
全国碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌对抗菌药物的敏感性、耐药机制和分子特征研究
全国细菌耐药监测网
中华检验医学杂志2024年 47卷 06期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20231212-00350
摘要
目的
了解全国临床分离碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌对抗菌药物的敏感性、耐药机制和分子特征。
方法
收集自我国31个省、市和自治区151所医疗机构2021年1—6月临床分离的碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌,按区域统一运送至3个中心实验室。中心实验室按照统一的实验方案进行菌种复核鉴定,肉汤微量稀释法测定碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)对抗菌药物的敏感性,所有菌株进行全基因组测序,分析菌株产生的碳青霉烯酶基因和多位点序列分型。
结果
共收集CRKP菌株4 314株,CRKP57.7%(2 396/4 152)分离自呼吸道标本,其次为泌尿道标本(12.3%,510/4 152)和血液标本(10.40%,432/4 152)。药敏试验结果显示,氨曲南-阿维巴坦、黏菌素E、多黏菌素B和替加环素对CRKP具有高度抗菌活性(敏感率90.3%~96.4%)。头孢他啶-阿维巴坦及亚胺培南-瑞来巴坦在成人分离株中的敏感率高于儿童[分别为88.9%(3 399/3 822)和75.9%(2 902/3 822),51.4%(253/492)和50.4%(248/492)],而阿米卡星及复方磺胺甲基异噁唑在儿童分离株中的敏感率更高(65.2%,321/492和65.2%,321/492比25.5%,975/3 822和36.8%,1 407/3 822)。KPC-2基因(85.9%,3 705/4 314)仍是我国CRKP中主要流行的碳青霉烯酶基因类型,其次为NDM(7.8%,336/4 314)及OXA-48-like(1.3%,56/4 314)基因。此外,部分菌株携带KPC-3、KPC-12、KPC-21、KPC-33和 KPC-71等基因。虽然产KPC-2是成人与儿童分离CRKP的主要耐药机制,但检出率差别大,分别为90.2%(3 447/3 822)和52.2%(257/492),儿童患者中CRKP携带NDM基因的比例明显高于成人,分别为41.9%(206/492)和3.4%(130/3 822)。多位点序列分型结果显示,我国临床分离的CRKP仍以ST11克隆型流行为主。
结论
不同省市之间分离CRKP的耐药机制和多位点序列分型有所差异。
2017—2022年华东地区新型隐球菌抗真菌药物流行病学折点的建立
王莉莉 周姿奕 王子文 田文杰 张燕 曾令兵 吴文娟
中华检验医学杂志2024年 47卷 06期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20240214-00076
摘要
目的
通过多中心体外药物敏感性试验,建立我国华东地区新型隐球菌对抗真菌药物的流行病学折点(ECV)。
方法
回顾性收集2017年1月1日至2022年12月31日华东地区侵袭性真菌感染监测协作组收集的临床分离新型隐球菌共479株,采用质谱和基因测序进行菌种鉴定;在上海、江西、江苏省3个分中心真菌实验室建立统一的药敏检测体系,并通过一致性评价后,分别独立完成新型隐球菌的药敏检测。依据美国临床实验室标准化委员会M57的原则和流程建立本地区新型隐球菌对氟康唑、伏立康唑、两性霉素B、5-氟胞嘧啶、艾沙康唑、泊沙康唑和伊曲康唑的流行病学折点。
结果
通过室间一致性评价,观察到每个中心的所有药物MIC值相差均≤1个稀释梯度,华东地区新型隐球菌ECV为:氟康唑16 mg/L,伏立康唑0.12 mg/L,两性霉素B 1 mg/L,5-氟胞嘧啶8 mg/L,艾沙康唑0.12 mg/L,泊沙康唑0.5 mg/L,伊曲康唑0.5 mg/L。
结论
初步揭示了华东地区临床隐球菌的药物敏感性特征,建立了华东地区新型隐球菌抗真菌药物的流行病学折点。
10株耳念珠菌的分离及耐药性分析
林丽 祖帅 肇恒瑞 王静宇 郑磊 胡秀梅
中华检验医学杂志2024年 47卷 06期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20240301-00103
摘要
目的
分析耳念珠菌的分离及对抗真菌药物的耐药性,为耳念珠菌感染的耐药性监测和院感防控提供参考。
方法
采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱系统,对南方医科大学南方医院2023年9—12月10例临床患者分离的10株耳念珠菌进行鉴定,并分析其对多种抗真菌药物的耐药性、标本来源及患者预后。
结果
分离的10株菌株质谱鉴定结果均为耳念珠菌,药敏试验提示10株耳念珠菌对氟康唑均耐药,3株对两性霉素B耐药,对棘白菌素类药物均敏感;样本来源多样;除2例状态良好、1例病情稳定出院、1例死亡外,其余6例患者因病情恶化主动出院。
结论
质谱能够准确鉴定耳念珠菌,耳念珠菌对氟康唑耐药性高,对棘白菌素无耐药性。
数字PCR在EB病毒核酸检测中的临床价值
黄金印 陈芊如 何晓静 欧子豪 蔡贞 司徒博 郭永 郑磊
中华检验医学杂志2024年 47卷 06期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20231219-00364
摘要
目的
评估EB病毒(EBV)多拷贝和单拷贝基因的数字PCR(dPCR)核酸检测方法在EBV核酸定量检测中的性能,并探讨其在临床应用中的适用性。
方法
对多拷贝BamHI-W基因及单拷贝EBNA1基因dPCR体系的灵敏度、特异性、精密度、检测下限(LoD)和线性进行性能验证比对,采用最小二乘线性回归分析评估其线性。同时,收集2022年1—7月就诊于南方医科大学南方医院疑似EBV感染相关疾病患者的血浆样本182例,使用dPCR和实时荧光定量PCR(qPCR)同步检测EBV DNA载量,采用最小二乘线性回归分析评估其定量相关性。
结果
多拷贝和单拷贝基因的dPCR体系均有良好的线性相关(R2分别为0.992、0.997,P均<0.001),BamHI-W基因dPCR体系LoD为188 IU/ml,EBNA1基因dPCR体系LoD为358 IU/ml;BamHI-W基因dPCR体系和EBNA1基因dPCR体系中高浓度样本(1 000 000 IU/ml)对数变异系数(CV)值分别为0.34%和0.21%,中低浓度样本(5 000 IU/ml)对数CV值分别为0.98%和0.64%;7种常见临床感染病原体和EB病毒阳性样本对照检测中,dPCR检测体系中只有EBV阳性样本产生阳性信号,与其他病原体无交叉反应。在182份样本检测中,BamHI-W基因dPCR阳性率为47.80%(87/182),EBNA1基因dPCR阳性率为35.16%(64/182),qPCR阳性率为43.41%(79/182)。定量相关性分析中,BamHI-W基因dPCR体系和EBNA1基因dPCR体系与qPCR检测浓度值线性拟合R2值分别为0.837和0.763(P均<0.001)。临床样本中的BamHI-W基因的拷贝数为3~18拷贝,不同患者感染的EBV的BamHI-W基因拷贝数不同。对于每例患者,多拷贝BamHI-W基因dPCR体系和单拷贝EBNA1基因dPCR体系检测的载量监测变化曲线趋势具有较高的一致性。
结论
基于dPCR技术的检测多拷贝BamHI-W基因和单拷贝EBNA1基因的EBV检测方法均具有较高的灵敏度和特异性,精密度和定量准确性均适用于临床样本检测。多拷贝BamHI-W基因dPCR方法在提高检测灵敏度方面具有较大的优势,可作为目前EBV DNA载量检测方法的补充,特别是在低浓度样本中;同一患者的EBV DNA检出和动态监测使用多拷贝基因效果更好,不同患者比较EBV载量需要用单拷贝基因或以同一标准品标化后比较。
基于CRISPR/Cas13a的新型冠状病毒核酸免扩增可视化快速检测研究
赵楠 齐永 李巍 毛颖清 刘文婧 韩一芳 张迩馨 徐应佳 吕瑞辰 蒋宇欣 等
中华检验医学杂志2024年 47卷 06期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20231225-00375
摘要
目的
基于规律成簇间隔短回文重复序列及其相关蛋白(CRISPR/Cas13a)的特异性识别切割与非特异性的“反式切割”活性,建立易操作、检测限低、特异性好的核酸免扩增可视化快速检测方法—基于CRISPR/Cas13a的新型冠状病毒核酸免扩增快速检测技术。
方法
参照新型冠状病毒的基因序列,利用生信技术筛选并设计合成多个新型冠状病毒特异的crRNA(CRISPR RNA),以体外转录的通用ssRNA(单链RNA)靶标建立检测技术并优化检测体系,以新型冠状病毒假病毒核酸标准物来评价方法检测限。收集临床样本,其中阳性样本应包含不同的新型冠状病毒变异株,阴性样本包括其他的常见呼吸道病原体(甲型流感病毒/乙型流感病毒、人类副流感病毒、肺炎克雷伯菌等)临床样本。分别用实时荧光定量PCR(qPCR)、数字PCR及本研究建立的免扩增可视化快速检测技术,对各种样本进行检测,分析评价新建立技术的灵敏度和特异度。采用四格表确切概率法针对荧光定量PCR、数字PCR与本技术检测结果进行统计学分析,采用双侧检验,P<0.01为差异有统计学意义。
结果
本研究设计合成了10条crRNA,用于基于CRISPR/Cas13a的新型冠状病毒核酸免扩增可视化快速检测技术的建立与优化,本技术可在最短6 min内检出新型冠状病毒的核酸。利用新型冠状病毒假病毒核酸标准物评价该技术的检测限,结果显示仪器辅助下本技术检测限为14拷贝/μl,肉眼下检测限为28拷贝/μl。以qPCR和数字PCR确认的113份临床样本对所建立的检测技术进行敏感度和特异度分析,利用相关公式及SPSS22软件计算分析,该检测技术的敏感度98.5%(66/67),特异度100%(46/46),本研究建立的基于CRISPR/Cas13a的新型冠状病毒免扩增可视化快速检测技术检测结果与金标准qPCR检测结果差异无统计学意义(P=1)。
结论
本研究成功建立了一种基于CRISPR/Cas13a的新型冠状病毒核酸免扩增可视化快速检测技术,该技术流程简单、操作便捷,对操作环境要求低,检测限接近qPCR,有较强的现场检测应用潜力。
建立一种磁微粒化学发光免疫分析法检测肌酸激酶MM型的方法
张淑 张春燕 周裕军 许秀丽 程昱璇 舒杨 吴士文 田亚平
中华检验医学杂志2024年 47卷 06期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20230921-00157
摘要
目的
自主建立一种快速、高灵敏度,高通量、自动化测定肌酸激酶MM型(CK-MM)同工酶的方法。
方法
收集2022年1—12月解放军总医院正常新生儿干血斑样本998份,同期就诊的经基因和临床确诊Duchenne型肌营养不良(DMD)患者干血斑样本75份,采用双抗体夹心磁微粒化学发光免疫分析法,测定CK-MM含量。分析该检测方法空白限、交叉反应率、回收率、精密度、钩状效应等性能,并评价其临床符合性。
结果
该方法空白检测限和检测限分别为17.4和39.3 ng/ml,对肌酸肌酶MB型同工酶(CK-MB)和肌酸激酶BB型同工酶(CK-BB)的交叉反应率分别为0.2%和0.02%。批内和批间变异系数均<1%,回收率为100.32%(95.4%~103.5%),在<50 000 ng/ml的范围内无钩状效应出现。新生儿干血斑CK-MM为(27.1±1.0)ng/ml,DMD干血斑CK-MM为(3 720.0±300.5)ng/ml。DMD干血斑CK-MM和血清样本CK活性相关性良好(r=0.91,P<0.001),临床符合性好。
结论
成功建立了一种特异性高、稳定性好的定量测定CK-MM的方法,可满足临床需求,具有较好的应用价值。
细小病毒B19感染患者临床特征及预后分析
马帅 尹玉瑶 郭一凡 殷冠坤 陈宏斌 王辉
中华检验医学杂志2024年 47卷 06期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20231204-00325
摘要
目的
探究感染细小病毒B19(B19V)的住院患者特征及B19V对患者疾病进展和临床结局的潜在影响。
方法
本研究为一项观察性回顾性研究。研究对象为2022年4月1日至2023年8月31日于北京大学人民医院就诊,并进行病原体宏基因组测序技术(mNGS)的3 129例住院患者中检测为B19V阳性的62例患者。收集了这些患者的病原检测数据及相关的临床特征与临床结局并结合其他实验室检测结果对患者的住院时间、住院期间的混合感染情况及30 d内的临床结局进行综合评估。并使用χ2检验对患者病死率与其他相关因素间的差异进行统计分析。
结果
B19V感染最常见于血液病患者和实体器官移植患者(79.03%,49/62)。且B19V与其他病原体混合感染40例,其中混合感染频率较高的是细环病毒20例,巨细胞病毒9例和EB病毒8例。B19V最常见的检出部位是外周血(χ2=0.000 3,P<0.001),但在体液样本中也有部分检出。B19V感染30 d内患者病死率为19.35%(12/62),10/12的死亡患者同时伴随其他病原混合感染,且B19V混合感染比仅B19V感染的患者死亡率更高(χ2=4.546,P<0.05)。对多次进行mNGS检测的24例患者结果对比分析显示,相比一过性B19V感染患者(12例),长期B19V感染患者(12例)病死率更高(χ2=12,P<0.001)。
结论
B19V感染在血液病患者和实体器官移植患者中较为常见,且通常与其他病原体混合感染。患者感染B19V后30 d内的病死率较高,尤其是伴随其他病原混合感染的情况下,病死率更高,且长期持续感染B19V的患者生存风险增加。
PD-1/PDL-1在原因不明复发性流产患者T细胞、Tregs和Bregs细胞中的表达及意义
陈葆国 干军 郑瑞 章卫国 俞依妮
中华检验医学杂志2024年 47卷 06期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20230912-00135
摘要
目的
探讨程序性死亡因子1(PD-1)/程序性死亡因子配体1(PDL-1)在原因不明复发性流产(URSA)患者T细胞、调节性T细胞(Tregs)、调节性B细胞(Bregs)中的表达及意义。
方法
收集2020年2月至2022年2月在温州医科大学附属台州医院就诊的42例URSA患者为患者组,34名健康孕妇(正常妊娠组)和30名未孕健康体检者(对照组),进行回顾性分析。采用流式细胞术检测外周血PD-1/PDL-1在Tregs细胞、Bregs细胞和[T细胞、B细胞和自然杀伤细胞(TBNK)]淋巴细胞亚群中的表达,以及血清辅助T细胞1[γ干扰素(IFN-γ)、α肿瘤坏死因子(TNF-α)]Th1/辅助T细胞2[白介素4(IL-4)、IL-6和IL-10]Th2/辅助T细胞17(IL-17)Th17细胞因子表达水平。对患者进行淋巴细胞免疫治疗,治疗结束检测患者PD-1/PD-L1水平变化及随访记录妊娠结局。多组间比较用方差分析,URSA患者治疗前后比较用配对t检验,各检测指标相关性用双变量相关分析法。
结果
PD-1/PDL-1在URSA患者组外周血Tregs、Bregs细胞和T淋巴细胞亚群中的表达显著低于正常妊娠组,差异有统计学意义(均P<0.01)。PD-1/PDL-1在白细胞分化抗原4(CD4+)T细胞中的表达与血清Th1细胞因子IFN-γ、TNF-α表达水平呈负相关(r=‒0.44、‒0.85、‒0.33、‒0.94,均P<0.01);PD-1/PDL-1在CD4+T细胞中的表达与血清Th2细胞因子白细胞介素4(IL-4)、IL-6和IL-10表达水平呈正相关(r=0.55、0.47、0.41、0.33、0.46、0.69,均P<0.01)。Bregs细胞比例、Tregs细胞比例与血清IL-10表达水平呈正相关(r=0.97、0.95,均P<0.01)。Tregs细胞比例与IL-17表达水平呈负相关(r=‒0.95,P<0.01)。PD-1/PDL-1在Bregs细胞及Tregs细胞中的表达与血清IL-10表达水平呈正相关(r=0.95、0.36、0.96、0.95,均P<0.01)。血清IL-10表达水平与IL-17表达水平呈负相关(r=‒0.58,P<0.01)。URSA治疗后妊娠成功23例,失败19例。USRA治疗成功组PD-1/PD-L1在CD4、CD8、Tregs细胞和Bregs细胞上的表达高于治疗前,差异有统计学意义(P<0.01);治疗失败组无明显变化(P>0.05)。
结论
PD-1/PDL-1在URSA患者外周血Tregs、Bregs细胞和T细胞亚群中低表达,造成Th1/Th2、Tregs/Th17平衡失调,母胎免疫耐受损害而导致妊娠失败,其可能是潜在的治疗靶点。
基于重组酶介导的等温扩增和CRISPR-Cas13a检测幽门螺杆菌的方法的建立
王雅轩 刘晓川 朱子潇 胡继红
中华检验医学杂志2024年 47卷 06期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20240102-00001
摘要
目的
开发一种基于重组酶介导的等温扩增(RAA)和成簇的规律间隔短回文重复序列(CRISPR)及其相关蛋白(Cas13a)系统的幽门螺杆菌核酸检测体系。
方法
选取2021—2022年于应急总医院收集的30株幽门螺杆菌以及大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、阴沟肠杆菌和肺炎克雷伯菌各2株。针对幽门螺杆菌UreC基因保守区序列,设计RAA-Cas13a 核酸检测体系所需的特异性引物及CRISPR RNA(crRNA)。再通过琼脂糖凝胶电泳筛选出产生非特异性产物最少的引物对,并应用Cas13a切割荧光探针产生的荧光强度筛选出切割效率最高的crRNA序列,构建了RAA-Cas13a核酸检测体系,通过检测梯度浓度稀释的幽门螺杆菌ATCC 43504基因组DNA以及5种不同的临床常见病原体基因组DNA,评价基于RAA-Cas13a核酸检测体系的最低检测限及特异性。通过RAA-Cas13a核酸检测体系与已建立的荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)方法同时检测临床菌株,得到该方法与qPCR方法的一致性。采用双侧配对t检验对两组间的荧光值进行比较,P<0.05为差异有统计学意义。
结果
建立的RAA-Cas13a核酸检测系统可以在1 h内检测出低至10拷贝/μl的靶标DNA(t=11.05,P<0.01),且与其他5种临床常见菌株无交叉反应。RAA-Cas13a方法与传统的qPCR方法具有良好的一致性,Kappa系数为1。
结论
建立了一种将RAA与CRISPR-Cas13a结合进行幽门螺杆菌检测的方法,可用于快速且灵敏的识别幽门螺杆菌感染。
病例报告
儿童福氏耐格里阿米巴脑膜脑炎1例
段勇威 李东旭 赵瑾 沈辉 叶光明 李一荣 谢文
中华检验医学杂志2024年 47卷 06期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20231018-00222
摘要
患儿男,14岁,无明显诱因持续高热3 d,昏迷伴抽搐,临床初诊中枢神经系统感染,病原体不明。患儿脑脊液细胞学湿片直接镜检发现形态各异活跃阿米巴样运动滋养体;经瑞氏姬姆萨染色,高倍镜下见阿米巴滋养体。根据患儿脑脊液实验室细胞形态学结果、影像资料及临床症状,诊断为儿童原发性阿米巴脑膜脑炎。经感染病原靶向高通量基因检测和阿米巴原虫种特异性PCR验证,明确为福氏耐格里阿米巴原虫感染。给予及时抗阿米巴原虫等相关治疗,50 d后死亡。
腹泻患者粪便分离出厄班纳沙门菌ST512型1例
曹健 刘玥 王熙 庄海武 肖建伟 许学斌
中华检验医学杂志2024年 47卷 06期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20231018-00215
摘要
患者男,19岁,2023年9月因连续腹泻3 d就诊上海市杨浦区某社区医院,发病前1天夜晚有烧烤店就餐史,病例符合腹泻病监测定义、采集患者粪便拭子运送公共卫生实验室分离病原为“非A~F群沙门菌”,菌株经参比实验室血清分型、耐药表型、全基因组测序和中国沙门菌区域血清型数据库比对鉴定为厄班纳沙门菌ST512型。患者口服左氧氟沙星3 d后康复。
精析教学
积分管理制度在检验医学精益化教学中的应用
邸玉玮 麦华欣 李正康 黄锦维 林乘龙 罗盈 杨玉静 袁凯旋 黄革 黄蔚 等
中华检验医学杂志2024年 47卷 06期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20230811-00055-1
摘要
目的
评价检验医学教学积分管理制度实施效果。
方法
将高校精细化教学管理与企业关键绩效指标相结合,建立基于积分的精益化教学管理制度,创新应用于检验医学教学。选取广东省人民医院检验科2021年1月至2022年12月参与教学工作的106名教师为研究对象,分为8个专业组,将其教学工作进行量化赋分:教学工作量按学时量化;教学成果按国家、省、校、院级赋分,参加者按照排名赋分,对2021、2022年整体教学积分及各专业组教学积分进行分析。收集教学管理者、教师、同专业人员对教学积分管理制度的各项目进行评价,比较教学积分制度实施前后的结果。
结果
106名教师2022年教学积分为3.8(2.3,6.0)分,高于2021年的1.0(0.2,2.7)分(Z=8.1,P<0.01);2022年临床分子、临检凝血、临床免疫、临床微生物、惠福检验、临床生化组教学积分高于2021年教学积分(P均<0.05);2022年与2021年相比,新增教改课题立项3项、教学文章投稿2篇,新增竞赛获奖数量3人次、优秀教师7人次、优秀学生5人次。教学管理者、教师、同专业人员对教学积分制实施后的教学工作评价分数均高于实施前(P均<0.05)。
结论
教学积分制度可提高教师工作主动性,提高团队教学工作效能及教学成果产出,促进教学质量改善,可达到精益化管理的目的。
综述
脲支原体属感染的影响因素与诊治现状
陈荣丹 张莹轩 卿维 莫雯驭 周宏伟 陈慕璇
中华检验医学杂志2024年 47卷 06期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20230907-00123
摘要
脲支原体属是一种人体生殖道常见的病原体,包含两个生物群:生物群1和生物群2,2002年,根据生物群间的差异,将生物群1独立成为新物种,命名为微小脲原体(Up),生物群2称为解脲脲原体(Uu)。Uu感染与多种泌尿生殖系统疾病相关,如不孕不育、早产、尿道炎等,而Up的致病作用仍存在争议。研究表明,不同血清型在不同疾病和人群中的致病性和耐药性方面存在差异,提示临床对脲支原体属进行分型、分群检测的重要性。本文就脲支原体属感染的影响因素与相关诊治现状进行综述,以期为脲支原体属检测阳性的临床意义和分型分群检测的必要性提供思考,为相关疾病的临床诊治工作提供参考。
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