2024年 · 第47卷第01期

我国检验医学实验室检测技术设备、质量管理能力、人才培养及学术水平等方面都取得了长足进步，基本实现了临床检测自动化、科室管理标准化、人才培养学术化。未来大数据、数字化、智能化检验新时代下，如何融合高新技术与前沿理念，以传承创新、开放合作赋能检验医学学科建设是检验工作者面临的重要课题。

电泳技术创建于20世纪50年代，经过这些年的发展，已经衍生出许多技术分支，在临床检验与科学研究中发挥着重要作用。自动化、智能化、微量化将推动电泳技术在辅助临床疾病诊疗与机制研究中不断发展前进。

毛细管电泳技术具有高灵敏度和高分离效率，质谱技术能够提供样品的结构信息，将毛细管电泳与质谱技术联用，可具有强大的定性和定量分析能力。毛细管电泳-质谱技术的出现，使得人们能在纳升级样品水平，甚至单细胞层面，进行生物活性成分的结构分析和分子量的准确测定，是生物样本分析不可或缺的技术平台。随着该技术的发展，毛细管电泳-质谱分析方法在临床检验领域的应用开始崭露头角。

目前，国内实验室自建检测（LDT）管理正处于探索阶段，亟需探讨适应国情发展的新方案和新思路。该文通过剖析遇到的问题，结合政府、医改和患者三方的实际需要，提出“促进LDT项目的良性发展，关注患者利益保护与创新支持的有机结合”是LDT管理的重要方向，并围绕这一方向提出了LDT项目管理的新思路，即以产品注册为目标的LDT管理模式。该管理模式的核心是以产品注册为目标，以低廉的患者服务费用和持续实时的数据监控为保障。利益和风险分析表明，该管理模式可较大程度兼顾患者、医疗机构、体外诊断企业和政府管理部门的现实诉求，有利于促进我国LDT项目的完善与发展。

随着蛋白质组学技术日趋成熟，近年来蛋白质组学在重大疾病的早期检测、疾病分型和药靶发现等领域不断取得重要成果。为深入探讨以蛋白质组学为主的前沿生命组学技术在推动精准检验医学发展中的重要作用和在创新成果临床转化过程中面临的机遇和挑战，国家蛋白质科学中心（北京）邀请来自检验医学、生命组学和精准医疗的知名专家学者，围绕检验医学与生命组学协同发展、临床检验新技术的未来趋势、生命组学对于检验医学的创新和发展、蛋白质组学技术在检验医学中的转化应用和蛋白质组学成果产业化的机遇和挑战等议题分享他们对生命组学技术和成果在检验医学中的经验和看法。大家一致认为蛋白质组学为疾病的精准诊疗提供了新的方向和机遇，但还需产学研紧密合作，同时要解决设备临床适用性、检测方法和数据标准化、成本和质量控制、人才培养和产业化路径等问题。

人副流感病毒（HPIV）是引起儿童下呼吸道感染的主要病原体之一，疾病负担严重。目前临床对HPIV感染儿童的危害存在认识不足，实验室也缺乏科学、合理的诊断流程，为此，国家儿童健康与疾病临床医学研究中心和中华医学会儿科学分会临床检验学组组织相关临床与检验专家，从HPIV生物学特性和致病机制、流行病学特征、临床表现、实验室检测、治疗和预防等多个方面进行阐述，提出儿童呼吸道HPIV感染的临床实验室诊断专家建议，旨在为各医院儿童HPIV感染的诊疗和预防提供参考。

基于患者数据的实时质量控制（PBRTQC）具有连续监控、低成本、无基质效应、分析前和中误差敏感、体现患者风险等优势，与传统室内质量控制联合应用，可及时有效地检测出系统误差，保证检验结果的准确性。由于PBRTQC算法、参数选择和程序建立的复杂性，目前国内尚缺乏PBRTQC程序建立的方法原则以及优化性能参数设置的共识和标准指南。该共识从PBRTQC项目选择、参数设置、程序建立、参数优化与验证、以及报警处理全流程的应用给出指导建议，以进一步提升实验室质量管理水平，减少患者风险。

目的 探讨中国广东人群δ珠蛋白（HBD）基因变异谱及δ地中海贫血血液学表型特征。 方法 采用回顾性病例分析研究，收集2020年7月至2022年12月参加广州市免费地中海贫血筛查的11 616对夫妇血液样本，进行血常规和血红蛋白（Hb）毛细管电泳分析，依据以上结果，共154例样本入组研究：（1）HbA2<2.0%且无HbF条带组35例；（2）HbA2<2.0%伴HbF条带组64例；（3）HbA2<2.0%伴可疑HbA2变异体组25例；（4）2.0%≤HbA2<3.5%伴HbF条带且血常规异常［红细胞平均体积（MCV）<82 fl和/或红细胞平均血红蛋白含量（MCH）<27 pg］组25例；（5）2.0%≤HbA2<3.0%伴β地中海贫血基因携带组5例。采用Sanger 测序检测δ珠蛋白基因的单核苷酸变异。 结果 （1）共检出22种HBD基因变异，包括6种新变异，前3位基因变异分别为c.-127T>C（57.02%，65/114）、c.-80T>C（9.65%，11/114）与c.349C>T（7.89%，9/114）。（2）HbA2<2.0%且无HbF条带组检出HBD基因变异22例（62.85%，22/35），其中7例MCV、MCH均低于正常参考值，4例合并α地中海贫血；13例未检出HBD基因变异，其中12例MCV、MCH均明显低于正常参考值。19例血常规异常样本中，HBD基因变异检出异常者（7例）HbA2水平低于未检出者（12例）（P<0.01）。（3）HbA2<2.0%伴HbF条带组检出HBD基因变异59例（92.18%，59/64），均为启动子区变异，59例样本HbF均<5.0%；5例HbF>5.0%样本均未检出HBD基因变异。（4）HbA2<2.0%伴可疑HbA2变异体组HBD基因变异检出率为100%（25/25），δ珠蛋白变异体值<1.0%。（5）2.0%≤HbA2<3.5%伴HbF条带且血常规异常组未检出HBD基因变异。（6）2.0%≤HbA2<3.0%伴β地中海贫血基因携带组5例全部检出HBD基因变异，HbA2值为（2.62±0.17）%，HbF值（3.62±2.22）%。 结论 HBD基因变异类型多样，c.-127T>C是中国广东人群最常见类型；启动子区突变可导致HbA2降低，HbF升高，但HbF值通常<5.0%，合并β地中海贫血可能>5.0%。本研究丰富了广东人群HBD基因突变谱。

目的 研究各神经系统疾病的寡克隆区带（OCB）阳性率及分型，提示OCB的临床意义及应用价值。 方法 回顾性分析2012年1月至2022年8月于北京大学第一医院行脑脊液及血清OCB检测的3 217例神经系统疾病患者的检测结果。根据出院诊断分为多发性硬化（479例）、视神经脊髓炎谱系疾病（935例）、自身免疫性脑炎（192例）、病毒性脑炎（94例）、造血干细胞移植后神经系统并发症（232例）、格林-巴利综合征（644例）及慢性炎性脱髓鞘性多发性神经根神经病（157例）等13组。使用等电聚焦电泳结合免疫固定法检测患者同期采集的脑脊液及血液样本中的OCB，依据形态学结果将其分为Ⅰ~Ⅴ型，分析各组患者脑脊液OCB阳性率及分型情况。计数资料采用χ2检验进行组间比较。 结果 多发性硬化、造血干细胞移植后神经系统并发症、自身免疫性脑炎、病毒性脑炎、视神经脊髓炎谱系疾病、格林-巴利综合征及慢性炎性脱髓鞘性多发性神经根神经病组的脑脊液OCB阳性率分别为66.8%（320/479）、48.7%（113/232）、46.4%（89/192）、19.1%（18/94）、17.6%（165/935）、9.9%（64/644）和5.1%（8/157）。其中，多发性硬化、自身免疫性脑炎、病毒性脑炎及视神经脊髓炎谱系疾病组脑脊液OCB阳性患者以Ⅱ型区带为主，分别占阳性患者的94.1%（301/320）、78.7%（70/89）、77.8%（14/18）和77.6%（128/165），提示存在IgG鞘内合成；造血干细胞移植后神经系统并发症、格林-巴利综合征及慢性炎性脱髓鞘性多发性神经根神经病组脑脊液OCB阳性患者以Ⅳ型区带为主，分别占阳性患者的94.7%（107/113）、82.8%（53/64）和8/8，反映无明显鞘内IgG合成。各组患者脑脊液OCB阳性率比较，差异有统计学意义（χ2=1 268.31，P<0.001）。 结论 各组神经系统疾病脑脊液OCB阳性率不同，其中多发性硬化的患者脑脊液OCB阳性率较高，且以Ⅱ型区带为主，提示脑脊液OCB检测及分型可对多种神经系统疾病，尤其是多发性硬化的诊断提供线索和帮助。

目的 比较不同性别、年龄人群间血清蛋白电泳（SPE）各区带分布差异，探讨血清蛋白电泳筛查单克隆丙种球蛋白（M蛋白）的临床应用。 方法 回顾性分析复旦大学附属中山医院2018年1月至2019年12月533 989例SPE结果，其中住院患者435 479例，为血液内科、肾病科、脊柱外科、内分泌科及风湿免疫科患者；表观健康人群98 510名，为体检健康人群。比较不同性别和年龄段（≤20、21~30、31~40、41~50、51~60、61~70、71~80、81~90、≥91岁）人群的白蛋白、α1球蛋白、α2球蛋白、β1球蛋白、β2球蛋白及γ球蛋白区带差异分布。筛选出10 014例同时完成SPE和免疫固定电泳（IFE）检测的标本，分析SPE各区带及IFE不同条带类型的阳性检出率，以IFE为金标准，评价SPE方法的敏感度和特异度。 结果 不同性别人群的SPE各区带占比差异均无统计学意义（P均>0.05）。表观健康人群、住院患者不同年龄段白蛋白区带占比差异均有统计学意义（表观健康人群：F=5.12，P<0.05；住院患者：F=4.18，P<0.05），且均随年龄的增长而下降；γ球蛋白区带占比随年龄的增长而上升（表观健康人群：F=1.34，P<0.05；住院患者：F=1.24，P<0.05）。SPE检测M蛋白的敏感度为69%（2 098/3 051），特异度97%（6 721/6 963），与IFE法比较，M蛋白阳性检出率差异有统计学意义（χ²=5 049.94，P<0.05）；γ球蛋白区M蛋白阳性检出率（21.11%，2 114/10 014）高于β球蛋白区（3.28%，328/10 014）（χ²=90.74，P<0.05）和β-γ球蛋白区（1.63%，163/10 014）（χ²=44.34，P<0.05）；γ球蛋白区常见IgG及IgM型条带，其中IgG-κ型占94.1%（995/1 058）、IgG-λ型占94.8%（690/728）、IgM-κ型占89.2%（222/249）、IgM-λ型占83.8%（62/74）；β球蛋白区常见IgA型条带，其中IgA-κ型占49.8%（103/207）、IgA-λ型占51.6%（149/289）；IgG-κ型在IFE各条带类型中M蛋白的阳性检出率［10.57%（1 058/10 014）］最高，IgM-λ型M蛋白的阳性检出率［0.74%（74/10 014）］最低。 结论 随着年龄增长，SPE的白蛋白区带占比下降，γ球蛋白区带占比上升。IgG、IgM型M蛋白大多聚集于γ球蛋白区带，其中IgG型M蛋白阳性检出率较高，IgA型大多聚集于β球蛋白区带，阳性检出率较低。

目的 探讨单克隆丙种球蛋白（M蛋白）在临床就诊患者中的特点与分布规律。 方法 选择2012年1月至2021年12月在复旦大学附属中山医院就诊并进行毛细管区带电泳的936 171例患者（男508 449例，女427 722例），筛选出异常条带的14 945例患者作为研究对象，男10 173例，女4 772例，年龄21~102（65±13）岁。按年龄分为21~30岁（168例）、31~40岁（405例）、41~50岁（1 326例）、51~60岁（3 068例）、61~70岁（4 985例）、71~80岁（3 288例）、81~90岁（1 519例）、≥91岁（186例）共8组。收集14 945例检出异常条带患者的诊断结果，按有无肿瘤分为肿瘤组（5 196例）和非肿瘤性组（9 749例）。回顾性分析不同性别、年龄和疾病组中异常条带分布情况。14 945例患者中，4 988例进行了免疫固定电泳试验，排除336例阴性和412例双克隆条带反应，以具有单克隆免疫球蛋白（M蛋白）反应的4 240例患者为研究对象，男2 794例，女1 446例，年龄21~102（67±12）岁。按年龄分为21~30岁（18例）、31~40岁（91例）、41~50岁（364例）、51~60岁（862例）、61~70岁（1 455例）、71~80岁（904例）、81~90岁（486例）、≥91岁（60例）共8组，收集患者的诊断结果与免疫球蛋白（Ig）分型（IgA-κ、IgA-λ、IgG-κ、IgG-λ、IgM-κ、IgM-λ、κ、λ）结果，回顾性分析M蛋白在不同性别、年龄和疾病组的分布情况。 结果 在936 171例患者中，电泳图谱表现出异常条带者为14 945例，检出率为1.60%；其中，男性和女性异常条带检出率分别为2.00%（10 173/508 449）和1.12%（4 772/427 722），差异有统计学意义（P<0.01）。不同年龄组间的异常条带检出率差异有统计学意义（P<0.01）；其中，≥91岁组异常条带检出率最高为5.98%，男女检出比1.67∶1。14 945例异常条带中，51~60、61~70、71~80岁患者分别占20.53%（3 068例）、33.36%（4 985例）和22.00%（3 288例），各年龄组间差异均有统计学意义（χ2=115.82，P<0.01）。肿瘤组中检出异常条带前3位者为浆细胞瘤1 123例，淋巴瘤289例，白血病49例，浆细胞瘤电泳图谱异常条带检出率为89.92%（1 123/1 249），高于淋巴瘤、白血病患者［分别为6.73%（289/4 296）和6.40%（49/766），P均<0.01］。4 240例M蛋白阳性患者中，51~60、61~70、71~80岁分别占20.33%（862/4 240）、34.32%（1 455/4 240）和21.32%（904/4 240），各年龄组间差异有统计学意义（P<0.01）；M蛋白分型结果在不同性别人群中均为IgG-κ型占比最高，男性32.28%（902/2 794），女性34.30%（496/1 446）；在21~30、31~40、41~50岁年龄组中，IgG-λ型占比最高，分别为38.89%（7/18）、36.26%（33/91）、34.07%（124/364）；而在51~60、61~70、71~80、81~90、≥91岁年龄组中，均为IgG-κ型占比最高，分别为33.87%（292/862）、34.16%（497/1 455）、31.53%（285/904）、34.57%（168/486）、28.33%（17/60），不同性别组及各年龄组比较差异均有统计学意义（P均<0.01）。M蛋白阳性的肿瘤患者中，浆细胞瘤占比最高14.22%（603/4 240），其次为淋巴瘤6.30%（267/4 240）；非肿瘤疾病中，M蛋白血症占比最高7.24%（307/4 240），其次是肺部感染5.47%（232/4 240）。 结论 毛细管区带电泳异常条带检出率会随年龄的增长而提高，且同年龄组中，男性异常条带检出率高于女性；不同的恶性肿瘤疾病在毛细管区带电泳中也会出现异常条带，但仍以血液系统的肿瘤为主。M蛋白阳性结果中，61~70岁年龄段人群占比最高；M蛋白类型以IgG型最多见；21~50岁年龄段中，IgG-λ型占比最高；>50岁年龄段中，IgG-κ型占比最高；M蛋白阳性的诊断中，排前3位的疾病均为血液系统疾病，分别为浆细胞瘤、M蛋白血症及淋巴瘤。

目的 分析冷球蛋白血症患者临床及实验室结果特征。 方法 横断面研究。收集2017年7月至2023年3月在北京协和医院确诊为冷球蛋白血症的202例患者的临床资料及实验室结果，包括年龄、性别、首诊临床表现、病因诊断、血清冷球蛋白定性和定量、补体3、补体4结果，以及25例患者的肾脏病理结果。根据冷球蛋白的种类，将冷球蛋白血症分为3型，比较不同类型冷球蛋白血症临床及实验室结果特征的差异。 结果 202例冷球蛋白血症患者中，Ⅰ型62例（30.7%），Ⅱ型58例（28.7%），Ⅲ型82例（40.6%）。按照病因分类：原发性冷球蛋白血症56例，继发于自身免疫性疾病76例，肿瘤相关疾病29例，感染性疾病52例。202例患者常见的首诊临床表现为皮肤损害（124例，61.4%）和肾脏损害（87例，43.1%）相关的临床症状，其次为关节痛和/或关节炎（50例，24.8%）、周围神经病变（33例，16.3%）、乏力（28例，13.9%）、发热（23例，11.4%）。不同类型冷球蛋白血症患者临床症状有一定差异，29.0%（18/62）Ⅰ型患者出现乏力症状，高于Ⅱ型（10.3%，6/58）和Ⅲ型（4.9%，4/82）（P均<0.05）；56.9%（33/58）Ⅱ型和52.4%（43/82）Ⅲ型患者出现肾脏损害，高于Ⅰ型患者（17.7%，11/62）（P均<0.05）；仅4例（4.9%，4/82）Ⅲ型患者出现周围神经病变症状，低于Ⅰ型（17.7%，11/62）和Ⅱ型（31.0%，18/58）（P均<0.05）。Ⅲ型冷球蛋白血症患者冷球蛋白定量为122（82，177）mg/L，低于Ⅰ型和Ⅱ型［分别为695（229，3499）、350（107，1874）mg/L，P均<0.001］。42.6%（86/202）的患者出现补体3下降，49.0%（99/202）的患者出现补体4下降。冷球蛋白肾损害的肾脏病理表现主要包括膜增生性肾小球肾炎（36.0%，9/25）和毛细管内增生性肾小球肾炎（32.0%，8/25）。 结论 皮肤和肾脏损害的相关症状是冷球蛋白血症最常见的临床表现。不同类型冷球蛋白血症患者其临床表现有一定差异，近半数的冷球蛋白血症患者出现血清补体下降。

目的 评估全自动流水线自动检测室内质控（自动质控）的适用性。 方法 利用自动质控实施方法评估北京协和医院检验科于2019年1月至2022年7月18个生化项目、5个免疫比浊项目、11个化学发光项目的自动质控稳定性、检测效率和实施成本。具体方法：将生化、免疫比浊以及化学发光项目的质控品存储在流水线冰箱中，由中间体软件控制流水线，按设置时间自动调取质控品上机测定并归档保存。生化项目的质控设置为每日和每周更换质控品2种模式，共同运行3个月，通过比较2种模式质控结果的变异系数（CV）评估质控品在线存储稳定性。分析自动质控和手动质控结果变异、质控失控率、质控品消耗量、员工工作量、首个样本检测时间和自动质控故障率6个指标，评估自动质控应用效果。 结果 （1）质控品在线存储稳定性：每周更换生化在线质控品模式下，总二氧化碳（TCO2）高低两水平质控的CV分别为20.24%和21.82%，大于实验室设定的允许变异；丙氨酸转氨酶（ALT）等其他16个项目变异均小于允许变异。（2）自动和手动质控模式下质控结果变异：每日更换生化在线质控品、每周更换免疫比浊和化学发光在线质控品的模式下，硫酸脱氢表雄酮、雌二醇、卵泡刺激素、促黄体生成素、铁蛋白、叶酸、维生素B12和睾酮 8个化学发光项目，补体3、C反应蛋白和免疫球蛋白G 3个免疫比浊项目和碱性磷酸酶、葡萄糖、钙、氯、钾、乳酸脱氢酶、钠、尿素、低密度脂蛋白胆固醇和腺苷脱氨酶 10个生化项目的低、高水平质控自动质控检测结果的CV均低于手动质控结果的CV。2种质控模式的生化、免疫比浊和化学发光项目的失控率均符合临床常规工作需求。（3）质控品消耗量比较：自动质控与手动质控比较，化学发光质控品每周使用量减少37.5%（由8 ml减至5 ml）；免疫比浊质控品每周使用量减少33.3%（由3 ml减至2 ml）。（4）员工工作量和首个样本进样时间比较：自动质控与手动质控比较，员工每周减少手工操作步骤约156步，每日首个样本检测时间平均提前15 min。自动质控开始运行的前期故障率为54.5%（37/64），后期降至10.2%（13/128）。 结论 通过流水线系统自动检测室内质控结果满足实验室质量指标要求，应用自动质控可提高质控水平，节约成本，减轻工作量、提高工作效率。

培养医工结合型检验医学研究生对于重新定位检验学科发展，大力促进人才建设和提高行业人员素质具有重要意义。本文介绍了我科室在医工结合型检验医学研究生培养过程中的一系列探索实践。通过采取多种研究生特色培养措施，包括特色理念构建、研究生导师团队建设、针对性课程设置以及与工学院所交流学习等，在人才培养和科研产出方面取得了显著教学成效，对探索新型检验医学专业人才培养模式具有重要价值。

通过总结结核分枝杆菌胞外囊泡的生物形成、成分功能，探讨结核分枝杆菌胞外囊泡在诊断、预防和治疗结核病方面的潜力，得出结核分枝杆菌膜囊泡和宿主分泌的外泌体均含有结核分枝杆菌的成分参与免疫调节，在结核病诊断、预防和治疗中发挥不同的作用。结核分枝杆菌胞外囊泡含有丰富的生物标志物，拥有天然的免疫原性，有望成为结核病诊断、预防和治疗的新靶点应用于临床。