2023年 · 第46卷第11期

自身免疫病实验诊断在疾病预警、诊断、预后评估及疗效监测等方面面临着许多机遇和挑战。无论是经典的抗核抗体，还是新型的抗药物抗体、细胞因子、自身免疫病合并感染和肿瘤的新型自身抗体等标志物，都亟须规范化及标准化相关生物标志物的临床应用，不断扩展新型标志物的应用场景，进一步探究相关生物标志物的临床意义，以推进自身免疫病领域检验医学的高质量发展。

自身免疫病是机体免疫自稳状态破坏导致免疫病理损伤和功能障碍的疾病。生物标志物的发现和应用为临床早期诊断、疾病活动度监测及预后和治疗效果评估提供重要价值。蛋白质组学是寻找自身免疫病生物标志物的重要方法，其在该领域已经取得一定进展，随着技术的发展和研究的深入，未来蛋白质组学将发挥更大价值。

肿瘤相关自身抗体（TAAS）作为癌症生物标志物已引起人们的特别关注。近年来研究发现，其在癌症的早期阶段表现出升高的水平，并且在多种癌症中具有很好的预测价值。本文介绍了TAAS产生的机制及其临床应用，并对肿瘤自身抗体作为生物学标记的优势及面临的问题进行了阐述。

炎症性肠病是一种慢性复发的肠道自身免疫疾病，近年来，生物制剂广泛应用于炎症性肠病（IBD）的治疗，极大改善了IBD患者的症状，然而，药物免疫原性仍然是限制IBD生物制剂治疗的因素。合适的药物浓度对提高生物制剂的疗效，减少抗药抗体的产生，减少不良反应等具有重要意义，因此在治疗过程中，对生物制剂进行药物谷浓度和抗药抗体监测，可以最大限度地优化药物使用，更好地指导治疗策略调整。本文就抗药抗体产生的机制、产生的原因，同时对药物谷浓度和抗药抗体的监测意义、监测时机、监测效能和检测方法等进行阐述，从而论证药物浓度和抗药抗体监测对生物制剂在IBD治疗中价值。

自身免疫性疾病是指机体自身免疫耐受状态被打破或自身免疫性细胞调节异常，免疫系统产生自身抗体，造成自身组织损伤或功能异常而导致的临床病症。大多病因不明，容易反复，对患者的生活质量造成巨大的负担。感染性病原体在启动自身免疫过程和加剧疾病进展中都有潜在的作用，相反的是某些病原体还可以抑制自身免疫反应。本文总结了不同类型的感染与自身免疫性疾病之间的联系，其可能的作用机制包括病原体抗原的分子模拟、旁观者T细胞或B细胞活化、自身抗原的修饰以及表位扩散等。

细胞因子是免疫原、丝裂原或其他刺激剂诱导多种细胞产生的，能在细胞间传递信息、具有免疫调节和效应功能的低分子量可溶性蛋白质。目前常用的细胞因子检测方法包括生物活性检测法、免疫学检测法和分子生物学方法。细胞因子参与了众多自身免疫病的发生发展，不仅可以作为疾病重要的生物标志物，还能够用于不同自身免疫病的鉴别诊断，是疾病临床过程监测及预后的重要靶点。此外，针对细胞因子的抗体和小分子抑制剂被逐步应用于临床，也为自身免疫病提供了更安全有效的治疗策略。本文论述了不同细胞因子在自身免疫病中的作用。

神经系统副肿瘤综合征（PNS）是由肿瘤通过远隔效应引起的累及神经系统的自身免疫综合征。PNS诊断困难，PNS相关自身抗体对于疾病诊断、分层分型和个体化治疗有重要作用。PNS相关自身抗体根据其对肿瘤预测风险的能力分为高风险、中风险和低风险抗体，其实验室检测主要通过间接免疫荧光法、免疫组织化学分析、免疫印迹等方法。正确应用和解读抗体的检测结果对于PNS的诊疗至关重要。本文针对PNS相关自身抗体的临床应用现状及未来展望进行评述。

间接免疫荧光法是检测抗核抗体的参考方法，然而检测过程标准化程度低、检测结果报告一致性差是临床实验室面临的主要挑战。随着抗核抗体荧光模型国际共识组织对各荧光模型进行标准化命名，以人喉癌上皮细胞为基质的间接免疫荧光法实验由手工操作逐步转向全自动仪器操作以及计算机辅助诊断系统的临床应用，实验室对该项目的规范化检测及结果报告提出了新的要求。本共识从检验项目开展前、检验过程和结果报告3个方面进行阐述并提出相应意见，旨在进一步推进该项目在我国实验室检测与报告的规范化与标准化。

高毒力肺炎克雷伯菌（hvKP）是较经典肺炎克雷伯菌（cKP）更易引发严重侵袭性和播散性感染的菌株。近年来世界范围内hvKP感染的报道不断增长，甚至还表现出广泛的耐药性。由高毒力和多重耐药性整合形成的碳青霉烯类耐药hvKP（CR-hvKP），已成为世界性的公共卫生挑战，但目前有关hvKP的检测流程和鉴定方法尚无统一标准。为了促进这一重要病原体的实验室筛查与鉴定、流行病学和临床特征的科学研究，在查阅大量相关文献的基础上，国内该领域的专家共同讨论达成共识，以规范hvKP的鉴定和鉴别方法，明确诊断hvKP感染。

目的 本研究旨在系统评价细胞因子在成人斯蒂尔病（AOSD）、大动脉炎（TA）等自身免疫疾病（AID）中的临床应用价值。本研究为一项回顾性的病例对照研究。 方法 调取北京协和医院检验科2019年1月至2022年8月的834例AID患者常规项目肿瘤坏死因子-α（TNF-α），白介素6（IL-6），IL-8、IL-10检测数据，同时检测30名健康对照（HC）血清中细胞因子4项水平。同时将AOSD、TA、系统性红斑狼疮（SLE）、白塞综合征（BS）疾病分为活动亚组和非活动亚组。另对SLE的两个重要的器官受累（肾脏、神经系统）进行亚组分析。统计分析使用GraphPad Prism 9和R 4.2.2软件。组间差异比较使用非参数检验（Kruskal-Wallis H检验，Mann-Whitney U检验），并使用Dunn法来校正多重检验可能带来的假阳性。 结果 比较IL-6在各组中的水平，除了BS组和抗磷脂综合征（APS）组，其余各个AID组和HC组相比，AID组血清IL-6水平均高于HC组［3.85（2.00，8.55）pg/ml］，其中 ANCA相关血管炎（AAV）组［3.85（2.00，8.55）pg/ml］，特发性炎性肌病（IIM）组［7.80（2.50，6.50）pg/ml］，IgG4相关性疾病（IgG4RD）组［3.65（2.08，12.83）pg/ml］，类风湿关节炎（RA）组［5.50（2.20，16.10）pg/ml］，SLE组［4.70（2.75，16.55）pg/ml］，干燥综合征（SS）组［3.20（2.00，8.90）pg/ml］，系统性硬化症（SSc）组［2.70（2.00，8.90）pg/ml］，TA组［3.40（2.00，6.50）pg/ml］，其他疾病组［4.40（2.00，11.10）pg/ml］，尤其是AOSD组［15.20（2.10，39.20）pg/ml］，校正后差异均具有统计学意义（Pc<0.05）。同时，AOSD组和HC组相比，血清TNF-α［7.40（5.60，10.95）pg/ml］、IL-10［5.00（5.00，7.58）pg/ml］水平高于HC组［（7.15（5.93，8.00）pg/ml，5.00（5.00，5.00）pg/ml］，校正后差异有统计学意义（Pc<0.05）。活动期的AOSD、BS、SLE、TA患者血清中IL-6、IL-8水平较非疾病活动组呈现升高趋势，且差异均有统计学意义（P均<0.05）。另外，狼疮肾炎亚组较非狼疮肾炎亚组，血清中IL-8水平显著升高，差异有统计学意义（P<0.05）。同时，神经精神狼疮亚组较非神经精神狼疮亚组血清中IL-6、IL-8、TNF-α的比较均具有统计学意义（P均<0.05），但是IL-10的差异无统计学意义（P=0.25）。 结论 AID与细胞因子之间存在密切的关系。当下临床常规实践中还是以血清IL-6水平变化最为经典和实用。

目的 分析英夫利西单抗（IFX）治疗克罗恩病（CD）的14周药物谷浓度和抗IFX抗体浓度（ATI）与内镜黏膜愈合和输液反应的关系。 方法 回顾性纳入2018年6月至2022年8月在南京大学医学院附属鼓楼医院启动IFX治疗的119例CD患者，收集一般资料、内镜评分、实验室检查、14周IFX谷浓度和ATI，以及随访过程中的内镜复查和临床应答情况。根据（32±4）周内镜复查情况分为黏膜愈合组和未黏膜愈合组，比较两组的14周IFX谷浓度和ATI情况，应用多元Logistic回归分析影响（32±4）周黏膜愈合的相关因素，以（32±4）周黏膜愈合为分类变量行受试者工作特征曲线（ROC），选择最佳的14周IFX谷浓度临界值。 结果 黏膜愈合组（n=70例）的14周IFX谷浓度和基线白蛋白均显著高于未黏膜愈合组（n=49例），分别是5.0（2.8，8.7）μg/ml比2.2（0.3，4.3）μg/ml，（38.7±3.5）g/L比（36.6±3.8）g/L。（32±4）周黏膜愈合的14周IFX有效谷浓度是2.9 μg/ml，AUC值为0.704。多变量Logistic回归分析得出14周IFX谷浓度≥2.9 μg/ml（OR=5.369，95%CI 2.42~11.92）和基线白蛋白≥35 g/L（OR=7.378，95%CI 2.18~24.99）与黏膜愈合显著相关。14周ATI阳性率为15.1%，中高浓度ATI患者（n=21例次）的IFX谷浓度均为<0.4 μg/ml。12例（10.1%）患者发生输液反应，53例（44.5%）患者已停用IFX。 结论 14周IFX谷浓度与（32±4）周内镜下黏膜愈合密切相关，极低的IFX谷浓度与急性输液反应和产生中高浓度ATI密切相关。

目的 基于AIE荧光探针6PD-DPAN可结合细菌并聚集发光，荧光强度可体现细菌数量的原理，建立一种快速、简便、准确的细菌药物敏感性试验新方法，为临床快速精准用药提供依据。 方法 评价类研究。收集东莞市厚街医院2022年1—12月临床样本分离菌共107株，其中46株用于新方法的建立，61株用于方法学验证。微量肉汤稀释法测定的最低抑菌浓度（MIC）为金标准，以庆大霉素，左氧氟沙星、头孢噻肟3种抗菌药物作为实验药物；计算第4 h荧光强度比值（R值），采用ROC曲线分析R值在判断细菌生长与否的效能并确定其截断值。新方法检测61株临床菌株的MIC，以微量肉汤稀释法为金标准，分析新方法的基本一致性、分类一致性、极重大错误和重大错误，采用Kappa检验确定两者的一致性。 结果 培养4 h R值的ROC曲线分析：截断值为3.0，其对细菌生长的判定敏感度和特异度均为100%；细菌生长受抑制R值为11.1（8.6，14.4）；细菌生长R值为1.1（1.0，1.2）。与金标准相比，新方法检测61株临床菌株MIC的基本一致性为100%（61/61），分类一致性为96.7%（59/61），未出现极重大错误和重大错误，Kappa值为0.94，新方法与微量肉汤稀释法结果一致性较好。 结论 本研究成功构建了一种基于AIE技术的细菌药物敏感性试验新方法，可在5 h内取得满意结果，为临床早期精准药物治疗提供依据。

目的 探讨PDCA［计划（P）、执行（D）、检查（C）和处理（A）］循环理论在临床医学八年制《实验诊断学》课程教学中的应用。 方法 以2021年9月至2022年11月在北京协和医学院进行《实验诊断学》课程学习的2017级和2018级临床医学八年制学生作为研究对象，按照PDCA循环理论的4个阶段对2018级学生的《实验诊断学》课程进行教学改革，通过对学生的期末考试成绩和问卷调查结果评估该方法的指导意义。 结果 2018级八年制学生的理论考核成绩为（86.7±4.68）分，高于2017级的（83.3±3.89）分，差异有统计学意义（P<0.05）；2组学生的《实验诊断学》课程问卷调查结果显示，学生实验课的评分均高于理论课的评分（P<0.05），且在进行PDCA循环理论教学改革后，2018级学生的理论课［（3.83±0.25）分比（2.94±0.28）分］和实验课［（4.13±0.09）分比（3.32±0.12）分］问卷调查评分均高于2017级（P<0.001）。 结论 PDCA循环理论给教学管理提供新的方法和思路，有助于临床医学八年制学生成绩的提高和对课程的认可。

患者中年男性，因“左足踇趾磨损破溃10余天，逐渐出现左足肿胀、发黑，伴嗜睡1 d”于2020年9月5日入住南方医科大学珠江医院。伤口分泌物病原学检查提示为污蝇解壳杆菌、粪肠球菌混合感染。病情发展迅速，经抗感染治疗后患者仍死于感染性休克。污蝇解壳杆菌感染少见，与卫生条件差、慢性开放性伤口相关，需使用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱或16S核糖体RNA基因测序进行菌种鉴定。建议选用头孢菌素类或碳青霉烯类抗生素作为一线用药，血流感染预后不佳。

回顾性分析2020年5月至2021年12月来武汉儿童医院就诊的2例LIG4综合征患者的临床资料并进行遗传学分析。2例患者均为男性，年龄分别为5个月和3岁。临床表现为全身散在皮疹，反复感染（细菌感染、EB病毒、巨细胞病毒等）；实验室检测发现患者中性粒细胞、淋巴细胞计数降低。免疫分析发现CD4+T、CD8+T以及CD19+B淋巴细胞以及NK细胞数量显著降低。全外显子测序及Sanger测序验证发现患者1 LIG4基因存在c.833G>T（p.R278L）以及c.1271_1275delAAAGA（p.K424RfsX20）复合杂合突变，分别来源于患者父母。患者2的LIG4基因存在母源c.980T>G（p.I327S）以及父源c.2585_2586del（p.H862fsX7）复合杂合突变。本研究发现了2个LIG4基因新变异，增加了该基因的变异谱。

自身免疫性心肌病是一类由自身免疫介导的异质性心肌疾病，其具体发病机制尚未明确。多种自身抗体已在自身免疫性心肌病患者的血清中检出，相关自身抗体谱的研究有助于了解疾病的发病机制，提高疾病筛查和诊断效能、监测疾病进展、评估预后和治疗效果等。本文将总结自身免疫性心肌病中相关自身抗体谱的研究进展及临床应用，以为临床诊治提供参考。

传染性病原体对世界卫生和社会经济的严重影响受到持续关注。现有检测方法存在敏感度和特异性不足、过程繁琐等局限。CRISPR/Cas技术凭借其高特异性、高灵敏度以及可编程性，近年来在感染性病原体的快速检测研究中展现出重要潜力。本文概述了CRISPR/Cas体系中常用的Cas蛋白的功能机制，着重总结了基于CRISPR/Cas系统的新型生物传感技术，及在感染性疾病检测领域中的最新研究进展，并展望了亟待解决的技术问题以及未来发展方向。随着研究的不断深入，基于CRISPR/Cas体系有望实现多样化发展，为POCT在病原体快检领域的应用提供强大的技术支持。