中华检验医学杂志
2023年 · 第46卷第10期
出版日期 2023-10-19电子版 ¥23.00元¥45.00元
中华检验医学杂志
述评
脓毒症实验诊断现状与问题
汪峰 唐宁 田磊 孙自镛
中华检验医学杂志2023年 46卷 10期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20230829-00097
摘要
脓毒症一直是临床和实验室研究的热点和难点。早期病原学诊断、宿主免疫状态评估、凝血功能异常,作为脓毒症实验诊断的三个关键问题,近年来不断取得突破,但也存在诸多挑战。对脓毒症的这些关键问题进行剖析,可以提高脓毒症实验诊断水平,为提高患者存活率提供帮助。
专家论坛
脓毒症性凝血功能紊乱的精准识别
宋景春
中华检验医学杂志2023年 46卷 10期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20230828-00093
摘要
凝血功能紊乱是脓毒症的常见危重并发症。新近研究发现,脓毒症时血管内皮细胞、血小板、白细胞和红细胞共同参与形成免疫血栓效应,临床可表现为以高凝血症为主的血栓形成和以低凝血症为主的出血。本文拟介绍脓毒症性凝血功能紊乱的发病机制、时相特征和实验室监测,以协助临床能够精准识别脓毒症性凝血功能紊乱。
评价脓毒症免疫抑制生物标志物的4个标准
裴飞 吴健锋
中华检验医学杂志2023年 46卷 10期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20230519-00249
摘要
免疫抑制是造成脓毒症患者不良预后的关键环节。免疫状态评估是识别免疫抑制患者和明确免疫治疗时机的先决条件。探索脓毒症免疫状态评估的生物标志物成为目前的研究热点。然而,近年来大量生物标志物的出现却给临床医生造成选择的困扰。脓毒症免疫抑制理想生物标志物有4个标准。
重症监护病房床旁病原学快速诊断-快速现场微生物学评价
王秀丽 王凯飞 解立新
中华检验医学杂志2023年 46卷 10期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20230824-00083
摘要
脓毒症相关死亡占全球总死亡人数比例超过50%,是威胁公共卫生健康的首要问题。血培养是临床常用确诊脓毒症的方法,然而其耗时长、易受抗菌药物影响,尚无法满足快速明确病原的需求。快速现场微生物学评价技术(M-ROSE)是有效快速诊断的方法之一。作为呼吸感染性疾病诊断的辅助手段,M-ROSE在评价标本质量、辅助诊断感染病原、动态监测疗效等方面具有显著优势,能够助力脓毒症患者的早期病原学诊断。在临床中应密切结合实际情况,实现M-ROSE效益最大化。
专题笔谈
检验门诊的建立与职能探讨
杨思敏 吴文娟
中华检验医学杂志2023年 46卷 10期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20230828-00092
摘要
随着检验医学的不断发展,检验门诊受到了医院管理部门及医学检验科的关注。该文参考国外检验医师培养要求及国内检验门诊开设的初步经验,从检验医师团队建立、检验门诊选址与设置、接诊范围、工作制度及检验门诊的价值和意义等方面进行了初步探讨。目前各医疗机构检验门诊仍处于积极探索阶段,规范合理的运行机制、多学科人才培养是检验门诊可持续发展的必要基础。
耐药监测
全国细菌耐药监测网点医院临床微生物实验室现状调查
全国细菌耐药监测网
中华检验医学杂志2023年 46卷 10期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20230828-00094
摘要
目的
全面调查和分析全国细菌耐药监测网点医院临床微生物实验室现状。
方法
基于全国细菌耐药监测网(CARSS)中参与调查的4 513家医院提供的微生物实验室建设及耐药监测能力数据信息,选取2021年新入网医院(3 096家)和2021年前已加入CARSS的原国网医院(1 417家)中同样规模床位数的1 051家和513家,对其微生物实验室检测空间、仪器设备配置及检测方法、微生物检验、培养及药敏试验开展和质量控制等情况进行数据统计和分析。
结果
2021年CARSS新入网同等规模床位的二、三级医院微生物实验室面积分别为(50.4±40.6)和(91.1±60.3)m2,原国网医院分别为(56.9±44.8)和(122.7±87.5)m2;新入网医院每百张床位人员配备数分别为3(3,5)人和4(3,6)人,原国网医院分别为3(2,4)人和5(4,7)人。仪器设备配置方面,原国网医院的质谱仪、CO2培养箱、低温冰箱的配备率分别为33.1%(170/513)、89.1%(457/513)和75.4%(387/513),高于新入网医院[分别为4.8%(50/1 051)、65.4%(687/1 051)和51.4%(540/1 051),P均<0.001];在室间质评参评率和室内质控开展率上,原国网医院分别为78.4%(402/513)和93.8%(481/513),均高于新入网医院的19.2%(202/1 051)和61.4%(645/1 051)(P<0.001)。
结论
在基础设施、人员配备、检测能力、质量控制等环节均显示已参与CARSS监测工作的原国网医院各方面均优于新入网医院,参加监测工作可在同一标准的推动下,不断改进实验室能力,促进微生物检验学科的发展。
论著
血小板-单核细胞聚集物表达水平在脓毒症临床诊断中的价值
朱义玲 赵卫峰 崔娟娟
中华检验医学杂志2023年 46卷 10期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20230508-00236
摘要
目的
探讨血小板-单核细胞聚集物(PMA)表达水平在脓毒症临床诊断中的价值。
方法
回顾性分析2022年1—12月苏州大学附属第一医院感染病科诊治的脓毒症患者41例(脓毒症组)、有感染但未诊断为脓毒症的患者41例(感染组)和同时期健康体检者25名(健康对照组)。脓毒症组根据临床症状进一步分为休克亚组(14例)和未休克亚组(27例)。采用Beckman Coulter公司Navios流式仪器分析所有研究对象的PMA水平,检测降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)及血小板。利用非参数检验比较不同组间两个指标的差异,用Spearman相关性分析PMA、PCT、CRP和血小板之间的相关性,通过绘制受试者工作特征曲线评价PMA对脓毒症的诊断价值,采用Kaplan-Meier生存曲线比较不同PMA表达水平脓毒症患者的生存差异。
结果
脓毒症组、感染组和健康对照组的PMA水平分别为52.66%(27.10%,81.09%)、37.22%(26.52%,54.56%)和15.94%(15.10%,17.02%),PCT水平分别为3.10(0.23,15.35)μg/L、0.15(0.08,0.79)μg/L和0.02(0.02,0.02)μg/L,CRP水平分别为106.6(35.87,175.60)mg/L、76.45(27.20,110.10)mg/L和1.26(0.94,2.42)mg/L,血小板计数分别为116.00(90.25,204.30)×109/L、192.00(147.30,333.00)×109/L和199.50(178.00,252.80)×109/L。脓毒症组的PMA、PCT和CRP显著高于健康对照组(U值分别为0.00、5.00、1.00,P均<0.001),而血小板计数低于健康对照组(U=47.00,P<0.05),与感染组相比PCT、血小板差异有统计学意义(U值分别为84.50、176.50,P均<0.05),而PMA和CRP差异无统计学意义(U值分别为255.00、210.00,P均>0.05)。PMA与PCT、CRP均呈正相关,相关系数分别为0.562和0.447(P均<0.001)。休克亚组和未休克亚组的PMA分别为83.54%(76.51%,86.82%)和43.75%(21.59%,62.83%),且休克亚组显著高于未休克亚组(U=12.00,P<0.05)。PMA诊断脓毒症的曲线下面积为0.750(95%CI 0.657~0.843),最佳截断值为37.99%。PMA≥37.99%的患者与PMA<37.99%的患者生存率差异有统计学意义(χ2=4.805,P<0.05)。
结论
PMA在脓毒症的诊断中有良好的临床参考价值,可能成为脓毒症诊断的生物标志物。
网织红细胞通道光学法红细胞参数在冷凝集素干扰识别及纠正中的应用价值
唐文佳 杨烁 朱捷 李和晞 顾梅秀 王蓓丽 潘柏申 郭玮
中华检验医学杂志2023年 46卷 10期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20230901-00106
摘要
目的
评估全自动血细胞分析仪网织红细胞(RET)通道中Delta-RBC参数对冷凝集素(CA)干扰的识别作用,并探讨RET通道光学法红细胞参数在纠正CA干扰中的应用价值。
方法
回顾性研究。收集复旦大学附属中山医院门诊2022年1月至2023年1月间,经镜检确认存在红细胞冷凝集的标本68份,无冷凝集对照组标本45份,室温下使用全血细胞计数(CBC)+RET通道检测冷凝集组及对照组所有标本,记录并计算阻抗法检测参数:红细胞(RBC-I)、血红蛋白(HGB)、血红蛋白红细胞比容(HCT-I)、红细胞平均血红蛋白含量(MCH-I)、红细胞平均体积(MCV-I)、红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC-I)及光学法检测参数:RBC-O、HCT-O、MCH-O、R-MFV、MCHC-O、Delta-RBC。对冷凝集组标本进行37 ℃ 2 h温育,温育后使用CBC通道检测,记录阻抗法参数:RBC-I37 ℃ 2 h、HGB 37 ℃ 2 h、HCT-I 37 ℃ 2 h、MCH-I 37 ℃ 2 h、MCV-I 37 ℃ 2 h、MCHC-I 37 ℃ 2 h。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析Delta-RBC对CA干扰的识别效能,使用Bland-Altman法分析冷凝集组室温下光学法RBC参数检测结果与温育后阻抗法检测结果间一致性情况,使用Pearson及Spearman相关性分析对冷凝集组标本温育前后血细胞检测结果进行相关性分析。
结果
若使用Delta-RBC作为诊断指标对CA干扰进行识别,最佳截断值为1.065,曲线下面积为0.998。冷凝集组标本RBC-O、HCT-O、R-MFV、MCH-O、MCHC-O与RBC-I37 ℃ 2 h、HCT-I 37 ℃ 2 h、MCV-I 37 ℃ 2 h、MCH-I 37 ℃ 2 h、MCHC-I 37 ℃ 2 h结果间相关系数分别为0.985、0.981、0.729、0.870、0.649;结果差异百分比在一致性界限内的比例分比为95.6%、92.6%、95.6%、94.1%、95.6%。
结论
全自动血细胞分析仪RET通道光学法检出的RBC参数Delta-RBC可作为判断指标有效辅助临床判断是否存在CA干扰。使用RET通道的光学法RBC参数进行结果报告可以在无须标本预处理的情况下纠正CA干扰,得到更为正确的全血细胞计数结果。
两种血清游离轻链检测方法在多发性骨髓瘤诊断中的性能和临床应用评估
徐雯 胡玉懿 邵文琦 朱晶 潘柏申 王蓓丽 郭玮
中华检验医学杂志2023年 46卷 10期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20230802-00037
摘要
目的
比较两种平台血清游离轻链(sFLC)的检测性能,评估多发性骨髓瘤(MM)患者血清游离轻链结果的可比性。
方法
基于多克隆抗体的sFLC的检测性能(重复性、正确性、线性范围、参考区间、抗干扰能力等)进行评估。使用Spearman相关性分析和Bland-Altman分析214例同时在两个检测平台上检测得到的sFLC结果,以评估用2种方法结果之间的相关性,分析方法学偏倚原因。纳入2020年3月至2021年3月在复旦大学附属中山医院血液科明确诊断活动性多发性骨髓瘤(aMM)初诊患者119例,原发性系统性淀粉样变性(AL)、华氏巨球蛋白血症(WM)、POEMS综合征、意义未明单克隆免疫球蛋白血症(MGUS)、弥漫大B细胞淋巴瘤共23例进行回顾分析,绘制受试者工作特征(ROC)曲线,计算曲线下面积(AUC),并得出单克隆抗体平台MM患者诊断的最佳敏感度和特异度切点。
结果
基于多克隆抗体的检测平台的重复性、正确性、线性范围、参考区间、抗干扰能力等均通过验证,满足临床需求。多克隆抗体与单克隆抗体所得sFLC检测结果(FLC/κ、FLC/λ和κ/λ比值)整体一致性分别为89.3%、84.1%和77.1%;但相关性结果异质性较大,FLC/κ的相关性良好,相关系数(R2)为0.922(P<0.001),而FLC/λ和κ/λ比值的R2仅为0.349和0.441(P<0.001)。分区段分析后发现,在FLC/λ线性范围内相关性有所提高,R2可升至0.784(P<0.001)。与单克隆抗体相比,Bland-Altman分析发现FLC/κ绝大多数点落在95%界限范围内,而FLC/λ结果存在显著正偏倚。自建单克隆抗体的MM诊断AUC为0.809(P=0.001),最佳临界值为24.67。
结论
两种平台间整体一致性尚佳,但结果间存在明显差异,因此不具有可比性,无法互换使用。对于多发性骨髓瘤患者的预后监测,应该选择同一平台的检测系统进行检测。
CFU-GM对异基因造血干细胞移植治疗血液病的预后价值
王淼 邱丽媛 胡志英 李龙威 王东出 王卉
中华检验医学杂志2023年 46卷 10期
DOI: 10.3760/cma.i.cn114452-20230802-00039
摘要
目的
探讨粒细胞-巨噬细胞集落形成单位(CFU-GM)水平对异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)患者的预后价值。
方法
选择2015年2月至2017年1月在河北燕达陆道培医院allo-HSCT的患者73例,根据移植时接受查体骨髓培养CFU-GM水平将患者分为高CFU-GM组和低CFU-GM组,随访37.0(12.5,50.5)个月,采用χ²检验比较移植后患者的总体生存率(OS)和无复发死亡率(NRM)。采用Kaplan-Meier法对不同CFU-GM水平患者OS和无复发生存(EFS)情况进行生存分析比较。应用Logistic回归模型进行预后影响因素分析。应用Cox回归模型对患者进一步进行预后风险多因素分析。
结果
与低CFU-GM组比较,高CFU-GM组OS较高(分别为81.40%和60.00%,χ²=4.067,P=0.044),NRM较低(分别为11.63%和36.67%,χ²=6.474,P=0.011)。与低CFU-GM组比较,高CFU-GM组OS生存分析时间平均值(分别为57.6和37.1个月,P=0.039)和EFS生存分析时间平均值(分别为61.7和38.5个月,P=0.011)均较高。Logistic回归分析表明,CFU-GM水平和骨髓MNC均为移植患者OS(分别为OR=2.917,95%CI 1.011~8.418,P=0.048和OR=1.510,95%CI 1.058~2.154,P=0.023)和EFS(分别为OR=4.400,95%CI 1.336~14.492,P=0.015和OR=1.447,95%CI 1.002~2.090,P=0.049)的影响因素。CFU-GM水平是评估EFS的独立风险因素(HR=0.279,95%CI 0.097~0.805,P=0.018)。骨髓MNC是评估OS的独立风险因素(HR=1.345,95%CI 1.052~1.720,P=0.018)。
结论
CFU-GM水平和骨髓MNC与allo-HSCT预后相关,高CFU-GM组患者具有更高的EFS。
慢性髓细胞性白血病BCR::ABL1基因p210转录本实验室自建荧光定量PCR检测方法的性能确认
韩聪 宋鸽 马娇 徐世才 孙琦 王慧君 肖志坚 姚瑶
中华检验医学杂志2023年 46卷 10期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20230828-00091
摘要
目的
建立BCR::ABL1 p210转录本荧光定量PCR(RQ-PCR)实验室自建检测方法和分析性能确认。
方法
本研究采用欧洲抗癌计划(EAC)公布的BCR::ABL1 p210转录本RQ-PCR检测的引物和探针序列建立了BCR::ABL1 p210转录本RQ-PCR实验室自建检测(LDT)方法,通过WHO国际参考品获得转换系数(CF),并使用K562和HL60细胞系混合物构建两个不同水平的实验室内部质控品。回顾性分析慢性髓细胞性白细胞(CML)患者阳性标本,参考CLSI MM01-A3等指南评价实验室自建BCR::ABL1 p210 RQ-PCR 方法的精密度、正确度、线性范围、分析灵敏度和分析特异性等参数。采用Bland-Altman法对LDT方法与美国FDA批准的BCR::ABL1 p210转录本定量检测体外诊断(IVD)试剂盒检测结果进行一致性分析。
结果
本中心通过WHO国际参考品校准获得的BCR::ABL1国际标准值(BCR::ABL1IS)的CF为0.535。本研究建立的LDT方法在4个分子学反应(MR)水平(0.5、1.5、2.5、3.5)的BCR::ABL1IS 的重复性变异系数(CV)分别为7.44%、5.33%、9.12%、18.06%,室内总不精密度CV分别为7.99%、5.49%、10.95%、17.99%。2020至2022年本实验室所有美国病理学家协会(CAP)能力验证(PT)样本的MR值均在CAP允许的变异范围内,MR结果与CAP-PT MR平均值强相关(r=0.999,P<0.01),所有差值均在一致性界限范围内。本研究建立的LDT方法与Qiagen IVD试剂盒检测结果相关性高(r=0.997,P<0.01)。e13a2转录本的BCR::ABL1IS线性范围为0.001%~7.454%,最大CV值为64.09%。e14a2转录本的BCR::ABL1IS线性范围为0.002%~12.398%,最大CV值为43.37%。e13a2转录本和e14a2转录本的最低检测限(LoD)分别为MR5.0(0.001% IS)和MR4.8(0.002% IS);e13a2和e14a2转录本定量检测限(LoQ)均为MR4.7(0.002% IS)。该方法分析特异性为100%,与BCR::ABL1 p190转录本检测无交叉反应性。
结论
本实验室自建的BCR::ABL1 p210转录本RQ-PCR定量检测体系分析性能良好,可满足CML患者BCR::ABL1融合基因的临床检测需求。
性染色体嵌合胎儿的产前诊断与遗传咨询
胡爽 朱若男 孔祥东
中华检验医学杂志2023年 46卷 10期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20230821-00067
摘要
目的
探讨联合应用产前细胞与分子遗传学方法在胎儿性染色体嵌合诊断中的临床意义。
方法
回顾性收集2017年5月1日至2020年1月31日来郑州大学第一附属医院遗传与产前诊断中心进行胎儿羊水染色体G显带核型分析的14 034例孕妇资料,其年龄为20~46(27±3)岁,孕17~32周,无近亲婚配。筛选出诊断为性染色体嵌合者,分析其产前诊断指征。比较全基因组拷贝数变异分析(CNV-seq)/单核苷酸多态性微阵列检测(SNP-array)/荧光原位杂交技术(FISH)结果,结合超声表现,并查阅本院电子病历记录系统或电话随访所有孕妇的妊娠结局。
结果
共检出胎儿性染色体嵌合46例,两种核型嵌合体43例(93.48%),3种核型的嵌合3例(6.52%)。核型与CNV-seq/SNP-array/FISH结果对比发现,4例结果一致,9例结果一致嵌合比例不一致,10例结果不一致。综合其细胞/分子遗传学分析和/或超声结果,孕妇将决定继续或终止妊娠。
结论
产前细胞与分子遗传学方法联合应用有助于快速诊断胎儿性染色体嵌合,为孕妇妊娠选择提供科学的依据。
12 619例新生儿ATP7B基因筛查结果分析
管贤伟 王欣 孙云 张菁菁 蒋涛
中华检验医学杂志2023年 46卷 10期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20230822-00071
摘要
目的
分析新生儿ATP7B基因筛查结果并探讨不同变异位点间的连锁不平衡,为肝豆状核变性的临床诊断和遗传咨询提供依据。
方法
回顾性收集2022年3月18日至12月30日于南京医科大学附属妇产医院出生的12 619名新生儿,男新生儿6 605名,女新生儿6 014名,出生体重(3.44±0.56)kg。统计所有新生儿ATP7B基因筛查结果。应用芯片捕获二代测序技术对ATP7B基因的致病位点进行检测,检出位点采用Sanger测序进行家系验证。采用PLINK 1.9软件进行不同变异位点的连锁不平衡分析。
结果
12 619名新生儿中22例检出ATP7B基因2~3个致病性变异(可疑阳性),其中20例召回家系验证,2例拒绝召回。3例新生儿2个位点变异分别来自父母,初步诊断肝豆状核变性,其余17例新生儿均为父源或母源顺式排列的c.3316G>A/c.588C>A或c.1708-1G>C/c.1168A>G变异位点的携带者。共检出249例ATP7B基因携带者(232例携带1个致病性变异,17例携带2个致病性变异),人群携带率为1/51,其中携带频率最高的变异为c.2333G>T(1/207),其余依次为c.2975C>T(1/421)、c.2621C>T(1/742)、c.2755C>G(1/971)和c.2605G>A(1/971)等。对c.3316G>A/c.588C>A、c.1708-1G>C/c.1168A>G两组变异进行连锁不平衡分析,均得D'=1,呈完全连锁不平衡。
结论
通过分析新生儿ATP7B基因筛查结果发现,ATP7B基因致病性变异携带率较高,且致病变异位点c.3316G>A/c.588C>A及c.1708-1G>C/c.1168A>G存在连锁不平衡,易呈顺式排列,为临床诊断与遗传咨询提供了新的参考依据。
建立一种预测中晚期鼻咽癌患者复发转移的模型
李想 仲瑷玲 卢仁泉 郭林
中华检验医学杂志2023年 46卷 10期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20230820-00066
摘要
目的
建立中晚期鼻咽癌患者复发转移风险评估模型。
方法
收集2012年3月1日至2020年8月31日在复旦大学附属肿瘤医院进行首次治疗的中晚期鼻咽癌患者242例,年龄(48.33±11.13)岁,男性178例,女性64例,生存期(3.39±1.42)年。根据随机数字表法将入组对象分成2组,其中建模组192例,验证组50例。采集患者治疗前、首次治疗后以及治疗后随访期的静脉血,分析其血细胞分类、血生化指标,利用t检验与χ2检验,以是否发生复发转移为研究结局,分析指标在患者预后中的差异。采用多因素Cox回归分析,筛选出影响鼻咽癌患者复发转移的独立预后因素,构建患者2、4、6年复发转移风险Nomogram模型,计算建模组和验证组模型C指数评价预测模型的效能。
结果
白细胞(P=0.028)、淋巴细胞计数(P<0.001)、中性粒细胞(P=0.001)、血小板(P=0.046)、白蛋白(P<0.001)、中性粒细胞/淋巴细胞比值(P<0.001)、血小板/淋巴细胞比值(P<0.001)、淋巴细胞/单核细胞比值(P<0.001)、全身免疫性炎症反应指数(P<0.001)、全身炎症反应指数(P<0.001)、预后营养指数(P=0.004)在患者疗效监测中差异有统计学意义;多因素Cox回归分析显示,血小板/淋巴细胞比值(HR=2.537,95%CI 1.439~4.473)和预后营养指数(HR=0.462,95%CI 0.236~0.903)是预测患者复发转移风险的重要因素,结合以上指标建立Nomogram风险评估模型,建模组C指数为0.698,验证组C指数为0.739,两组校准曲线一致性良好。
结论
建立的Nomogram评估模型可准确地预测鼻咽癌患者的复发转移风险,为临床治疗预后评价提供理论依据。
建立一种宏基因组二代测序 DNA流程检测BALF标本的性能确认方法
宋慧娟 鲁艳军 田磊 陈中举 汪玥 刘为勇 毛莉妍 孙自镛 彭静
中华检验医学杂志2023年 46卷 10期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20230828-00095
摘要
目的
建立一种宏基因组二代测序(mNGS)DNA流程检测BALF标本的性能确认方法。
方法
以Hela细胞代表宿主细胞,向无菌生理盐水中加入不同浓度Hela细胞、7种病原体(肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、肺炎克雷伯菌、白色念珠菌、新型隐球菌、烟曲霉和腺病毒)和干扰物质制备模拟BALF标本,同时收集临床BALF标本,以传统检测方法为参比方法,评价mNGS检测结果,确定mNGS的最低检出限、精密度、抗干扰能力、稳定性和准确度。
结果
模拟标本中,肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、肺炎克雷伯菌、白色念珠菌、新型隐球菌、烟曲霉和腺病毒7种病原体的最低检出限分别为150、262、102、67、96、83 CFU/ml和439 拷贝/ml。模拟阳性标本中所有病原体重复检测结果符合率均为100%。抗干扰试验结果显示,人源核酸浓度越高,mNGS检出病原体序列数越少。以大肠埃希菌和宋内志贺菌评价mNGS对近源物种分辨能力,结果显示,当宋内志贺菌浓度为4 000 CFU/ml时,该系统能稳定分辨大肠埃希菌和宋内志贺菌。稳定性试验结果显示,标本进行1、2、3次冻融或在4 ℃、-20 ℃、-80 ℃放置36 h后病原体序列数无明显变化。与传统检测方法相比,17份临床标本的初步准确度为82.4%(14/17)。2021年10月25日至2022年9月14日同济医院同时进行mNGS和传统方法检测的临床BALF标本的持续评估结果显示,mNGS相对细菌培养、真菌培养、分枝杆菌培养、结核分枝杆菌培养和常规PCR技术的准确度分别为67.5%(472/699)、81.5%(570/699)、92.3%(335/363)、96.4%(350/363)和86.8%(132/152)。与常规PCR技术比较,mNGS检测耶氏肺孢子菌、腺病毒、肺炎支原体的准确度分别为89.4%(84/94)、93.3%(56/60)和87.1%(61/70)。
结论
通过制备模拟BALF标本以及以传统检测方法为参比方法,可以初步评价mNGS检测BALF标本的性能特征。
高效液相色谱检测血液CD38酶活性方法的建立
赵香慧 步霄霄 朱涵誉 李红霞 史济华 王思明 牟洪娜 李姿芸 吴铸 董军 等
中华检验医学杂志2023年 46卷 10期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20230815-00058
摘要
目的
建立高效液相色谱(HPLC)测定血液烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)主要消耗酶CD38酶活性的方法,检测CD38酶活性在不同年龄和健康状态人群中的差异。
方法
选择50 μl全血作为检测样本、150 μl 浓度为500 μmol/L 的β-NAD为酶反应底物,全血预孵育消耗掉内源性β-NAD后,加入底物,在37 ℃温育40 min,高氯酸(PCA)终止反应,HPLC测定酶促反应前后产物烟酰胺(NAM)变化量并计算CD38酶活性。评价方法的线性、检测限、定量限、精密度、回收率和稳定性等。用所建方法检测60名健康体检者和30名结直肠癌患者血液CD38活性。
结果
37 ℃ 预孵育20 min可消除内源性β-NAD的影响。NAM在浓度为0.1~3.2 μmol/L的范围内线性良好,r=0.999,检测限为0.5 nmol/L,定量限为2.1 nmol/L。平均批内精密度(CV)和总CV分别为3.22%~4.03%、2.91%~4.70%。加样回收率在94.82%~96.81%。全血在4 ℃放置48 h、室温放置8 h、冻存全血融化后室温放置2 h以及反复冻融3次均不影响CD38酶活性。NAM、β-NAD标准品和前处理后的样本在4 ℃放置48 h、室温放置8 h均可保持稳定。CD38活性随加入的CD38抑制剂4-氨基喹啉衍生物78c的浓度升高而逐渐降低。60例健康体检者结果显示,老年组CD38酶活性高于青年组(t=-2.776,P=0.007),30例结直肠癌患者CD38酶活性高于健康体检者(t=-2.572,P=0.012)。
结论
本研究建立的HPLC测定CD38酶活性的方法简单高效、准确性高、重复性好,为衰老及衰老相关疾病的研究提供了技术手段。
病例报告
以胸腔积液首诊的原发性肺弥漫大B细胞淋巴瘤1例
赵嘉豪 张云平 吴艳 葛继元 毛旭华 乔国洪 孙瑶湘
中华检验医学杂志2023年 46卷 10期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20230824-00082
摘要
患者女,69岁,以咳嗽、咳痰、胸闷气急10 d伴左侧胸腔积液收治入院。入院后最初通过胸腔积液常规细胞形态学检查发现大量可疑恶性淋巴瘤细胞,为临床下一步诊疗指引了方向。结合影像学、骨髓及肺穿刺活检病理等检查,患者被诊断为原发性肺弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)。采用R-CHOP方案对患者进行了有效的治疗,因在第六个化疗周期结束后,患者未进行定期复查及治疗,于9周后死于呼吸衰竭。原发性肺DLBCL是一种极其罕见的结外淋巴瘤,临床表现缺乏特异性,易被漏诊和误诊,伴有大量恶性胸腔积液的DLBCL进展迅速,预后不良。胸腔积液常规细胞形态学检查操作简单、形态直观,可以在最短的时间内捕获关键信息,初步为临床提供诊疗思路,并为疾病诊断提供精准的依据。
综述
新兴分子诊断技术在即时检验中的应用与展望
黄群芳 荀振 欧启水
中华检验医学杂志2023年 46卷 10期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20230830-00099
摘要
分子诊断技术是临床实验中的重要诊断手段。即时检验便携、快速、准确、低成本,有助于及时发现传染源,控制传染病蔓延。本文介绍了可用于即时检验的新兴分子诊断技术,包含数字环介导等温扩增技术和规律成簇的间隔短回文重复序列及其相关蛋白系统的相关进展,同时对其未来前景进行了展望。
本期目次

下载本期封面 下载本期目录
