2022年 · 第45卷第10期

免疫治疗已成为肿瘤治疗领域最有前景的方法之一，包括免疫检查点抑制剂、双特异性抗体和CAR-T治疗等，在血液系统恶性肿瘤等领域取得重大突破，然而相关安全性管理问题日益突出，特别是出凝血异常诊治亟需临床及检验医师关注。通过流行病学、发病机制及实验室指标3个方面，免疫治疗相关出凝血功能障碍均有进展，为临床上早期识别、诊断和干预提供指导。

止血与血栓涉及临床所有学科，是临床患者常见死亡原因，对于临床各科疾病提供有效的解决方案，是提高临床诊疗水平的重要环节。由于出血与血栓性疾病，最重要的诊断就是实验室诊断，因此。加强实验室诊断能力建设，是协助临床有效诊疗的关键环节。未来止血与血栓发展主要方向是关注国际止血与血栓行业进步，加强专家共识和止血与血栓标准化建设，以疾病为中心，而不是以项目为中心，密切围绕临床需求和问题，提供实验诊断的整体、闭环解决方案。主动融合多学科共同发展，政、产、学、研、用协作共赢，共同打造中国止血与血栓发展的良好生态。

组织因子途径抑制物（TFPI）是组织因子介导的外源性凝血途径的主要抑制物，主要来源于微血管内皮细胞。近年研究发现，TFPI在血友病、脓毒症、抗磷脂综合征、静脉血栓栓塞等疾病中发挥作用，并且通过抗凝机制参与疾病的发生和发展。目前有多种方法检测TFPI的来源、含量及功能，有助于临床疾病的诊断和治疗。

凝血因子Ⅷ（FⅧ）活性检测在血友病A、获得性血友病A及血管性血友病的诊断、分型、疗效监测和抑制物滴度检测等各方面中起着至关重要的作用。然而由于检测系统多样化、试剂组分的差异及干扰物质的存在等影响因素，国内实验室的FⅧ活性检测仍有改进空间。

临床血脂检测是血脂异常防治的重要组成部分，检测结果准确是有效开展血脂异常管理工作的基础。该指南从临床血脂检测相关概述、检验前阶段、检验阶段、检验后阶段及血脂测定项目的合理选择与应用等方面进行了阐述，并以多学科角度提出了相应的意见，旨在促进我国临床血脂检测与应用的进一步规范化与标准化，保障血脂异常管理工作的有效开展。

血管性血友病（VWD）是最常见的遗传性出血性疾病，但其诊断实验和分型流程复杂，国内大部分实验室并未普遍开展，仅有极少数医院能够对VWD进行精准诊断和分型。为了改变这一现状，国内血栓与止血领域临床及实验室专家总结了国内所建立的VWD诊断和分型体系临床应用结果，并结合国际相关领域的研究进展，形成了本诊断共识。本共识详细介绍了VWD出血评分工具、筛查实验、诊断实验、分型实验和基因检测的原理及适用范围，对诊断过程可能遇到的关键问题加以评价和建议。冀在诊断VWD时，不同单位可根据自身条件和需求，合理选择相关诊断和分型实验，提高国内该病的诊断水平。

国家药品监督管理局（NMPA）制定了一系列体外诊断试剂（IVD）临床试验相关政策及指导原则，对IVD临床试验的科学性与规范性提出了更高的要求，有助于推动我国IVD产业的规范发展，提升临床试验能力。为进一步规范IVD临床试验样本管理，针对试验用样本来源、编号、保存、使用、留存、销毁等全流程关键环节，结合相关指导原则和最新政策要求，综合领域专家建议和意见，共同制定本共识，旨在为IVD临床试验研究人员提供参考和指导，为IVD临床试验用样本全流程管理提供操作规范。

目的 对我国已批准上市的5种新型冠状病毒（2019-nCoV）核酸快速检测试剂进行多中心临床评价。 方法 2020年11月在浙江大学医学院附属第一医院、华中科技大学同济医学院附属同济医院和中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所3家机构选取共计57份确诊2019-nCoV感染者及15份非感染者的咽拭子样本，对获批上市的5种2019-nCoV核酸快速检测试剂进行检测，分析阳性符合率、阴性符合率、总符合率，并分析阳性强度与阳性符合率的关系，检测时间和复检率情况。 结果 5种试剂盒阳性符合率为92.59%（50/54）、83.64%（46/55）、98.25%（56/57）、94.44%（51/54）和98.18%（54/55）；阴性符合率为93.33%（14/15）、93.33%（14/15）、86.67%（13/15）、100%（14/14）和93.33%（14/15）；总符合率为92.75%（64/69）、85.71%（60/70）、95.83%（69/72）、94.20%（65/69）和97.14%（68/70）。5种试剂盒对强阳性和中阳性标本的检出率均为100%（90/90、84/84），对循环阈值33以上的弱阳性样本检出率为82.18%（83/101），2种试剂盒的复检率高于10%，分别为15.28%（11/72）和12.50%（9/72）。5种试剂盒从提取到扩增检测所需平均总时长在32.33~65.33 min。 结论 5种2019-nCoV核酸快速检测试剂盒性能均较好，可以作为常规核酸检测的补充。

目的 探讨血凝学指标对脊柱退行性疾病患者骨质疏松症的辅助诊断价值。 方法 回顾性研究。选取2018年11月至2020年4月就诊于北京积水潭医院脊柱外科的脊柱退行性疾病患者313例，依据定量CT（QCT）检测结果将其分为骨质疏松组（119例）、骨量减少组（101例）和骨量正常组（93例），3组患者均空腹采集静脉血测定凝血和骨代谢指标。单因素方差分析或Kruskal-Wallis H检验分析3组间的差异；从各血液指标中筛查与脊柱退行性病变患者骨质疏松症（OP）发病相关的独立危险因素；进一步将骨量减少组与骨量正常组合并为非骨质疏松组，与骨质疏松组进行二分类Logistic回归分析，受试者工作曲线（ROC）评价相关指标在脊柱退行性疾病患者骨质疏松诊断中的价值。 结果 3组在性别（χ2=13.555，P=0.001）、年龄（F=17.53，P<0.001）、体重指数（BMI）（F=4.068，P=0.018）、Ⅰ型胶原羧基端肽β特殊序列（β-CTx）（χ2=8.684，P=0.013）、25-羟基维生素D［25（OH）D］（χ2=6.155，P=0.046）、D-二聚体定量（D-dimer）（χ2=8.111，P=0.017）和血小板计数（platelet，PLT）（F=6.809，P=0.001）的差异有统计学意义，两两比较显示骨量正常组的年龄（P=0.006）、D-dimer（P=0.020）和PLT（P=0.002）低于骨质疏松组；骨量减少组的年龄（P<0.001）和PLT（P=0.006）低于骨质疏松组，而β-CTx（P=0.015）、BMI（P=0.014）高于骨质疏松组。非骨质疏松组与骨质疏松组间性别、年龄、BMI、β-CTx、D-dimer和PLT差异有统计学意义（P均<0.05）。二分类Logistic回归显示年龄（OR=1.164，95%CI 1.097~1.236）、性别（OR=0.495，95%CI 0.274~0.896）、BMI（OR=0.890，95%CI 0.816~0.971）、PLT（OR=1.008，95%CI 1.003~1.103）是骨质疏松症发病的危险因素，P均<0.05。ROC分析显示年龄的曲线下面积（AUC）=0.715（95%CI 0.647~0.783），性别AUC=0.612（95%CI 0.539~0.684），BMI AUC=0.694（95%CI 0.622~0.766），PLT AUC=0.610（95%CI 0.539~0.682），四者联合的AUC=0.768（95%CI 0.706~0.829），P均<0.05。 结论 基于QCT的结果，PLT计数在脊柱退行性疾病患者OP诊断中有一定价值，PLT联合年龄、性别和BMI可显著提高OP的诊断效能。

目的 探索解决APTT纠正试验Rosener指数“灰区”的方法，建立APTT纠正试验结果判断的临床应用路径。 方法 收录2018年1月1日至2019年12月31日就诊于四川大学华西医院的APTT单独延长的患者样本，借助ROC曲线探索不同方案的最佳判断界值，建立联合应用1∶1和4∶1混合解决“灰区”问题的方案和结果判断的临床应用路径；收录2020年1月1日至12月31日的同类样本验证该方案和路径的诊断效能。 结果 传统Rosener指数判断标准对因子缺乏和抑制物的区分效能较低，建立组和验证组共49例（15%）样本位于“灰区”；建立1∶1混合纠正试验Rosner指数判断因子缺乏的最佳界值为5.0%，判断抑制物的最佳界值为9.1%，对于5.0%~9.1%的样本进行4∶1混合纠正试验能明显提高低滴度抑制物的检出率；借鉴Rosner指数建立孵育后延长时间百分比-P（1∶1混合时>10.8%和4∶1混合时>13.5%）用于判断抑制物具有时间依赖性较共识推荐的2种方案诊断效能更高。联合1∶1和4∶1混合纠正试验对于因子缺乏和抑制物判断的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值均>90%，将抑制物误判为因子缺乏的比例从20.9%（9/43）下降到7.0%（3/43），将判断时间依赖性抑制物的特异性由54.2%提高至100%，准确度由63.3%提高至97.4%。 结论 1∶1和4∶1混合纠正试验联合应用可较好地解决“灰区”问题，建立的APTT纠正试验结果判断路径，有助于APTT纠正试验的进一步推广和临床应用。

目的 研究动脉硬化闭塞症（ASO）患者血浆凝血酶-抗凝血酶复合物（TAT）水平在不同病情时的变化特征以及预测血运重建术后管腔再狭窄的临床价值。 方法 收集ASO患者386例，男209例，女177例，年龄70（44~97）岁，包括间歇性跛行组196例和严重下肢缺血组190例。有172例间歇性跛行患者和185例严重下肢缺血患者接受血运重建治疗，在30 d随访期内有23例间歇性跛行患者和49例严重下肢缺血患者在术后发生再狭窄。于术前、术后第3天和术后第7天采集静脉血样本，采用Shine i2900型全自动化学发光免疫分析仪测定血浆TAT水平。用Kruskal-Wallis H检验做多组间比较，用Mann-Whitney U检验做两组间数据比较，用Friedman秩和检验做同组内各时间节点数据比较，用Logistic回归进行多元相关性分析获得优势比（OR），用ROC做TAT诊断性能分析，用Kaplan-Meier曲线进行生存分析，用Cox比例风险回归模型获得风险比（HR）。 结果 与健康对照组［2.69（1.77，3.90）ng/ml］比较，ASO患者血浆TAT水平［10.24（5.89，19.92）ng/ml］较高，差异有统计学意义（P<0.001）；严重下肢缺血患者血浆TAT水平高于间歇性跛行患者（P<0.001）。Rutherford分级3级患者血浆TAT>2级、4级>3级、6级>5级（P值分别为0.038、<0.001和0.013）。间歇性跛行组中，血运重建术后第3天和第7天，再狭窄患者血浆TAT水平均高于血流通畅患者（P值分别为0.004和<0.001）；血流通畅患者术后第7天的血浆TAT水平低于术后第3天和术前（P均<0.001）；再狭窄患者术后第7天的血浆TAT水平低于术后第3天而高于术前（P均<0.001）。严重下肢缺血组中，在术前、术后第3天和第7天，再狭窄组患者的血浆TAT水平均高于血流通畅组患者（P值分别为0.001、0.013和<0.001）；血流通畅组患者术后第7天的血浆TAT水平低于术后第3天和术前（P值均<0.001）；再狭窄组患者术后第7天的血浆TAT水平低于术后第3天（P<0.001），而与术前差异无统计学意义。ROC分析显示，在全部患者、间歇性跛行患者和严重下肢缺血患者中，血运重建术后第7天的血浆TAT预测术后再狭窄的曲线下面积分别为0.839、0.783和0.853。生存分析显示，在严重下肢缺血患者组，术后第7天的血浆TAT水平高于临界值（≥7.66 ng/ml）的患者在术后30天内发生再狭窄事件的累积风险概率增高（Log-rank χ2=93.674，P<0.001）。Cox回归分析显示，在严重下肢缺血组，术后第7天的血浆TAT水平可作为术后30 d内的再狭窄事件发生的独立指标（HR=2.259，P<0.001）。 结论 血浆TAT能够反映ASO患者不同病情时的高凝状态，有助于病情严重程度分层。此外，TAT对血运重建术后发生管腔再狭窄有高度敏感性，能作为评估严重下肢缺血患者术后再狭窄事件的独立标志物。

目的 探讨血浆凝血酶-抗凝血酶复合物（TAT）水平在脓毒症性心肌病患者中的临床意义。 方法 回顾性分析解放军联勤保障第九〇八医院重症医学科自2020年1月至2022年3月期间收治的107例脓毒症患者，根据入科时心脏超声显示射血分数是否<50%分为普通脓毒症组（n=79）和脓毒症性心肌病组（n=28），比较两组患者入科2 h内的急性生理与慢性健康评分（APACHE Ⅱ）、乳酸水平、血常规、肝肾功能、心肌钙蛋白I、N末端脑钠肽前体（NT-proBNP）、常规凝血指标和凝血分子标志物［组织型纤溶酶原激活剂-纤溶酶原激活剂抑制剂-1复合物（t-PAIC）、血栓调节蛋白（TM）、TAT、纤溶酶-α2抗纤溶酶复合物（PIC）］，用Logistic回归分析脓毒症性心肌病的危险因素，受试者工作特征曲线（ROC）分析危险因素对脓毒症性心肌病的诊断界值，并用Kaplan-Meier法分析低分子肝素抗凝治疗对脓毒症患者28 d生存率的影响。 结果 与普通脓毒症组入科时的心肌钙蛋白I［0.02（0.01，0.09）ng/ml］、NT-proBNP［1 118.09（333.25，2 687.00）pg/ml］、乳酸［1.35（0.90，2.60）mmol/L］、TAT［6.50（3.94，12.14）ng/ml］、PIC［1.256（0.668，2.045）μg/ml］及t-PAIC［10.50（6.70，21.30）ng/ml］比较，脓毒症性心肌病组入科时的心肌钙蛋白I［0.75（0.01，6.02）ng/ml］、NT-proBNP［12 125.14（4 185.89，33 611.62）pg/ml］、乳酸［2.35（1.43，4.34）mmol/L］、TAT［19.85（9.08，45.78）ng/ml］、PIC［2.115（0.878，4.114）μg/ml］及t-PAIC［22.03（15.61，33.20）ng/ml］水平均升高（P<0.05）。Logistic回归显示NT-proBNP阳性和TAT水平升高是脓毒症性心肌病发生的独立危险因素。ROC曲线分析显示血浆TAT水平预测脓毒症性心肌病的曲线下面积为0.78；取血浆TAT水平界值为8.26 ng/ml时，其敏感度和特异度依次为0.82和0.63。K-M分析结果显示针对TAT>8.26 ng/ml的脓毒症患者，接受低分子肝素抗凝者28 d生存率是未抗凝者的8.6倍。 结论 血浆TAT水平升高是脓毒症性心肌病发生的独立危险因素。TAT>8.26 ng/ml的脓毒症患者接受低分子肝素抗凝治疗可能改善预后。

目的 分析血栓性血小板减少性紫癜（TTP）患者的实验室指标及临床特征，为TTP的及时诊断和死亡风险评估提供参考。 方法 回顾2016年6月至2022年3月华中科技大学同济医学院附属同济医院诊治的TTP患者临床资料和入院时实验室检查结果。将患者分为存活组与死亡组，比较两组患者一般资料、临床症状和实验室指标之间差异。联合差异指标构建预后预测评分，计算相应死亡风险。 结果 本研究纳入83例TTP患者，分别有81.1%（60/74），91.1%（72/79）和86.2%（50/58）的患者入院时谷草转氨酶（AST），间接胆红素（IBIL）和肌钙蛋白（cTnI）结果增高，入院时检测了乳酸脱氢酶（LDH）的患者结果均增高（78/78）。97.5%（79/81）的患者血红蛋白减低，97.5%（79/81）患者PLT小于30×109/L。存活组（58例）和死亡组（25例）患者的性别、年龄、血型、是否存在发热症状、ADAMTS-13活性和PLASMIC评分差异无统计学意义，但死亡组出现神经症状者比例显著高于存活组，死亡组患者入院时AST、IBIL、cTnI和活化部分凝血活酶时间（APTT）显著高于存活组（P<0.05）。相对于低水平者，入院时AST、IBIL、APTT和cTnI高水平者的死亡风险比值比分别为4.86，9.74，3.71和5.33。纳入AST、IBIL、APTT、cTnI和神经症状构建积分模型，每增加1分，TTP患者的短期死亡风险比值比为3.24。 结论 多个实验室指标对TTP有较高的阴性排除价值。对入院时具有高水平AST、IBIL、cTnI、APTT以及存在神经症状的TTP患者，临床应多加关注、积极治疗以降低死亡率。

目的 建立西安地区健康孕妇不同孕期血浆D-二聚体生物参考区间，为临床动态监测孕期微血栓风险提供正常参考界值。 方法 通过调查问卷，纳入2020年12月至2022年3月在西北妇女儿童医院常规产检的健康孕妇和体检的健康非孕育龄妇女（健康非孕对照组）共1 502例为研究对象，包括健康孕妇1 236例和健康非孕对照组266例，年龄范围为20~45岁；孕期范围为：5~42周。分为<30岁和≥30岁两个年龄段进行比较。健康孕妇组按照孕周，分为5组：≤13周、13+1~20周、20+1~27周、27+1~35周、≥35+1周分别纳入253例、243例、241例、249例、240例。采用STA-R Evolution全自动血凝仪及其配套试剂检测血浆D-二聚体浓度，Graph Prism9.0软件统计不同孕期、不同年龄段D-二聚体的浓度水平并进行组间比较。5个孕周组再分别收集各20份样本对建立的参考区间进行验证。 结果 比较<30岁和≥30岁两个年龄段不同孕周血浆D-二聚体水平，差异无统计学意义；健康孕妇组的血浆D-二聚体水平明显高于同龄健康非孕妇女组（P<0.05）。随着孕周增加，孕妇的血浆D-二聚体水平明显升高，孕周≤13周、13+1~20周、20+1~27周、27+1~35周、≥35+1周的血浆D-二聚体水平分别为：0.33（0.26，0.47）μg/ml、0.41（0.30，0.51）μg/ml、0.71（0.48，0.94）μg/ml、0.91（0.70，1.27）μg/ml，1.30（0.96，1.72）μg/ml，单侧参考区间分别为≤0.89 μg/ml、≤1.53 μg/ml、≤2.44 μg/ml、≤2.74 μg/ml、≤3.82 μg/ml。5个孕周组，各20份独立样本验证此研究建立的参考范围，结果可通过。 结论 本研究初步建立了西安地区健康孕妇不同孕周血浆D-二聚体参考区间，有助于孕期血栓疾病的辅助诊断。

目的 基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术（MALDI-TOF MS）技术建立一种无需抗体富集直接检测血清M蛋白的方法，并评估其检测效能。 方法 方法学建立。收集在首都医科大学附属北京朝阳医院申请M蛋白鉴定检测的患者检验后剩余血清标本712份。用TCEP还原剂处理IgG、IgA纯品获得免疫球蛋白轻链，初步确定检测方法。收集20名健康体检人群检验后剩余血清标本，确定κ和λ轻链离子峰质荷比范围。设置8个平行管和8个批次进行批内和批间重复性评价；选取23例M蛋白阳性标本进行10倍、100倍和200倍稀释，采用所建MALDI-TOF MS方法检测M蛋白，评价灵敏度；采用IFE、SPE和MALDI-TOF MS 3种方法同时检测M蛋白，计算MALDI-TOF MS方法与IFE和SPE的符合率。 结果 批内和批间重复性均为100%；对23份M蛋白阳性标本的原倍、10倍、100倍和200倍稀释标本进行测定，MALDI-TOF MS对M蛋白的检测限为0.06~0.18 g/L；在712份标本中，以IFE为金标准，SPE与MALDI-TOF MS总的符合率分别为85.9%和92.3%，SPE与MALDI-TOF MS的阳性符合率分别为72.8%和99.7%；在M蛋白的不同型别中，MALDI-TOF-MS在IgA、IgD、IgM、游离轻链型和双克隆组中对M蛋白的检出率为100%，而SPE对IgM、IgA和游离轻链型标本的检出率分别只有66.7%、58%和19.5%；IgG组有1份阳性标本MALDI-TOF MS未检出。对23份M蛋白阳性标本进行原倍、10倍、100倍和200倍稀释后，10倍稀释时MALDI-TOF MS的检出率为100%，IFE为96%；100倍和200倍稀释时，IFE的检出率分别为MALDI-TOF MS的28%和23%。 结论 本研究成功建立了血清M蛋白的MALDI-TOF MS检测方法，该法检测通量高、速度快，具有良好的灵敏度、特异性和符合率。

细胞外囊泡（EV）能够携带包括核酸、蛋白和小分子代谢物在内的多种生物活性成分，其在肿瘤诊断与治疗中的价值已得到广泛认可。然而目前对于EV内含物的研究主要集中在RNA和蛋白质上，对于最能直接反映细胞状态的小分子代谢物在EV中的作用尚不明确。近年来EV代谢组学在肿瘤研究中逐渐受到了关注，尽管由于前处理复杂且代谢物含量较低，EV代谢组学研究仍存在诸多挑战，但其在调控肿瘤进展及作为肿瘤标志物方面的价值已逐步显现，有望为肿瘤的诊断与治疗提供新的靶点。