2021年 · 第44卷第09期

即时检测（POCT）在临床实践中已经得到广泛应用。应该认真回顾总结，冷静思考有关检测速度与费用、检测质量等方面的问题，并尽快制定临床应用POCT的指南或规范性文件，有助于POCT检测结果的准确可靠以及POCT在临床实践中的准确应用。

即时检测（POCT）在医学健康、海关检疫、农牧业、林业、消防、环境和食品检测等多个领域得到高速发展，对传统检验模式形成巨大挑战，同时在技术水平、质量控制、组织管理及产学研合作等方面仍然存在诸多问题亟待解决。该项工作需要卫生行政部门、生产厂家以及医院共同合作建立相应的质量管理体系，落实保障制度，更需要针对POCT的特殊性建立独立的评价体系和应用先进的质量控制技术。本文结合上海市临床检验中心开展的POCT 项目的一系列质量管理措施，对上海地区 POCT质量管理的特点和应用现状进行分析，并针对存在的问题提出一些思考和建议。

伴随医学进步，操作简单、反应快速且无设备和专业技术人员依赖的即时检测（POCT）有望实现对患者进行连续监测、诊断、管理和筛查，是体外诊断行业的重要发展方向。结合新技术原理，在提高灵敏度、特异性的前提下进一步实现定性至精确定量的转变是POCT发展的必然。在POCT平台开发过程中，具有高效扩增特性及简单、快速且低成本特点的环介导等温扩增（LAMP）技术扮演着越来越重要的角色。本文概述了LAMP技术作用机制及基于LAMP技术开发POCT平台的研究进展和临床应用，总结了目前基于LAMP技术的POCT平台存在的不足及未来发展方向。

临床实验室即时检测（POCT）的快速发展对院内统一管理提出了挑战，如何保证POCT操作人员能力水平及资质、如何提升临床实验室开展POCT过程中在人、机、料、法、环等方面质量管理意识、如何帮助全院临床实验室开展院内POCT项目比对以及如何加强院内POCT信息化建设等诸多问题亟待解决。为此，本文针对院内POCT统一管理、POCT质量保证以及临床科室开展POCT中存在的问题，结合本院在POCT管理中的做法与体会，提出加强院内临床实验室POCT项目的统一管理，建立POCT的质量管理文件及提升质量意识，确认POCT操作人员的能力与资质、对POCT设备进行备案与校准、开展POCT室内质量控制、POCT检测系统进行院内比对等方面的管理建议及解决对策，指出POCT的信息化建设的必要性。希望能够通过本文，为医院管理者、医务部、护理部、质控科等职能科室对院内POCT 的质量管理提供参考，为临床实验室在POCT工作中的困惑找到有帮助的答案，以共同努力规范院内POCT质量管理，保证检验检测结果准确。

即时检测（POCT）是临床检验医学发展最快的学科之一，为临床提供了方便、快速检测的手段。随着POCT检测需求的不断增加，检测领域的不断拓展以及各临床科室的广泛使用，其质量管理迎来了许多新的挑战。本文主要介绍了目前POCT临床应用存在的问题，并提出了相应的质量控制措施，为规范POCT的临床管理提供思路。

血清降钙素原（PCT）是感染性标志物之一，应用广泛。即时检测（POCT）作为一种快速检测技术，在PCT检测中应用的比重逐年增加。本文就我国目前POCT技术在PCT检测中的应用现状及问题进行讨论，以期改善POCT的检测质量。

即时检测（POCT）具有携带方便、检测快速、操作便捷、对于检测条件和人员适用性高、可在患者旁开展等特点，近年来发展迅速，在急诊医学、临床一线、基层医疗、公卫防控、患者院外管理、消费者自测等场景下获得广泛应用和临床价值体现。在应用越来越广泛的同时，POCT也面临监督管理、产品质量和新场景需求等方面的挑战，但随着技术的进步与完善，移动智能设备、5G通信技术、可穿戴设备、分子和质谱检测技术、人工智能等新技术与POCT进一步融合，POCT有望在临床诊疗、公共卫生防控及大健康管理中获得更广阔的应用前景。

宏基因组测序（mNGS）在新发突发传染病以及常规检验阴性的感染性疾病诊断中发挥了重要作用。近期，国内相继发表了多个共识阐述了临床应用及实验室规范，但生物信息分析程序及方法也是mNGS重要环节，而目前学界尚未有一致的认识。为提高临床对mNGS结果的理解，本共识根据国内外的发展现状，结合国内测序实验室常规做法，阐述生物信息学分析的规范化管理内容。

中华医学会检验医学分会临床微生物学学组就如何根据临床微生物检验工作流程和性质，选择必要的生物安全防护措施，评估可能存在的生物安全风险，以及采取降低风险的针对性措施和有效性评价制定本共识。希望临床微生物实验室能参照执行，切实降低生物安全风险。

目的 对1株致下肢气性坏疽肺炎克雷伯菌（KPN）进行全基因组测序及毒力特性分析，为认识致社区获得性重症感染KPN分子毒力特征提供参考。 方法 患者于2018年3月13日进入急诊科治疗，主要临床症状为高热、左下肢气性坏疽及糖尿病酮症酸中毒。取患者脓液标本进行分离培养、菌株鉴定、高黏表型及药敏检测。对菌株进行全基因组测序并分析其多位点序列分型、荚膜分型、质粒分型、毒力及耐药基因。通过接合及消除试验分析质粒特征。血清杀菌试验及大蜡螟感染模型分析菌株毒力表型，双样本t检验比较待测菌株和对照菌株对大蜡螟幼虫半数致死率（LD50）差异。 结果 检出菌株KPN41053，仅对氨苄西林耐药，高黏表型阴性。KPN41053染色体总长5 377 071 bp，属于ST660型，荚膜型为K16；携带一个IncFIB（K）/HI1B型毒力质粒（207 506 bp），质粒包含多种毒力因子且序列与pLVPK高度相似，但其中rmpA和rmpA2均为假基因。该质粒接合试验阴性。通过质粒消除获得变异株KPN41053_PC。毒力表型分析显示，KPN41053为血清抗性（6级），而KPN41053_PC为血清中度敏感（3级），KPN41053对大蜡螟幼虫的lgLD50与高毒力对照株（ST23-K1型）差异无统计学意义（t=0.32，P=0.765），低于KPN41053_PC（t=5.97，P=0.004）。 结论 KPN41053为1株属于ST660型且高黏表型阴性的非典型高毒力KPN，毒力质粒为其关键毒力因子。KPN可导致糖尿病患者发生社区获得性气性坏疽。

目的 研究并评估适合临床实验室开展的食源性腹泻弯曲菌检测方法及抗菌药物敏感性试验。 方法 分为预实验和大样本验证。（1）预实验：收集2017年9月至2018年1月就诊于北京地区某三甲医院食源性腹泻患者粪便标本400份。采用双孔滤膜培养法及改良头孢哌酮-木炭-脱氧胆酸盐（CCD）琼脂培养法在微需氧环境中培养48 h，挑选可疑菌落进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）鉴定，同时进行实时荧光定量聚合酶链反应（qPCR）检测空肠弯曲菌及结肠弯曲菌。（2）大样本验证：收集2018年4月至2019年3月就诊于北京不同地区不同级别3家医院肠道门诊食源性腹泻患者粪便标本2 062份，进行qPCR检测及培养。阳性菌株按照美国临床与实验室标准化协会及美国国家肠道细菌耐药监测中心推荐的纸片扩散法及琼脂稀释法进行药物敏感性试验并进行结果判读。采用卡方检验比较3种检测方法的检测结果及2种抗菌药物敏感性试验的一致性。 结果 预实验中qPCR、双孔滤膜培养法及改良CCD琼脂培养法检测弯曲菌（空肠弯曲菌/结肠弯曲菌）的检出率分别是9.0%（36/400）、5.0%（20/400）和3.5%（14/400），差异有统计学意义（χ²=11.772，P<0.01）且qPCR阴性，培养法均为阴性。大样本验证中，qPCR的检出率为8.1%（168/2 062），其中空肠弯曲菌7.0%（144/2 062），结肠弯曲菌1.2%（24/2 062）。qPCR阳性标本进行双孔滤膜培养法培养，阳性率为61.9%（104/168），其中空肠弯曲菌为58.3%（84/144），结肠弯曲菌为83.3%（20/24），与预实验检出率差异无统计学意义（P>0.1）。空肠弯曲菌和结肠弯曲菌对环丙沙星耐药率分别为94.0%（94/100）和100.0%（24/24），对红霉素耐药率分别为6.0%（6/100）和33.3%（8/24），两种抗菌药物敏感性试验方法一致性较好（Kappa值>0.75）。 结论 qPCR快速、灵敏、操作简单，适合临床实验室常规开展。双孔滤膜培养法检出率显著高于改良CCD琼脂培养法，弯曲菌对喹诺酮类药物显示出极高的耐药率，已不适用于北京地区弯曲菌食源性腹泻的治疗，应选择大环内酯类抗菌药物。

目的 探讨生长分化因子15（GDF15）和降钙素原（PCT）在脓毒症中的诊断与预后价值。 方法 选取2020年7月至2021年1月在武汉大学人民医院ICU就诊的脓毒症患者137例（脓毒症组）和有炎症感染但未诊断为脓毒症的患者59例（非脓毒症组），再选取同时期健康体检者62名（对照组）。脓毒症患者根据入院28 d生存情况分为死亡组（48例）和存活组（89例）。检测所有研究对象的血清GDF15、PCT、C反应蛋白（CRP）、白介素6（IL-6）和白介素10（IL-10）水平，并动态监测脓毒症患者入院第1、3、7天各个指标的水平，利用非参数检验比较不同分组之间两个指标的差异，用Spearman相关检验分析脓毒症患者GDF15与PCT之间的相关性，绘制受试者工作特征（ROC）曲线评价2个指标对脓毒症的诊断及预后价值。 结果 脓毒症组、非脓毒症组和对照组的GDF15水平分别为3.22（1.39，6.31）、0.84（0.21，1.66）和0.11（0.09，0.13）μg/L，PCT水平分别为13.10（1.99，50.25）、0.24（0.13，0.68）和0.05（0.03，0.10）μg/L，CRP水平分别为115.80（26.40，184.07）、24.20（11.30，53.20）和0.50（0.50，2.76）mg/L，IL-6水平分别为68.26（21.59，255.46）、33.20（10.81，89.27）和8.82（7.33，11.23）ng/L，IL-10水平分别为11.30（5.88，25.50）、9.34（5.65，16.90）和4.94（4.31，5.31）ng/L，脓毒症组的GDF15、PCT、CRP和IL-6显著高于非脓毒症组（U值分别为67.681、86.034、44.164和38.934，P均<0.05）和对照组（U值分别为136.475、138.667、120.701和100.886，P均<0.001），脓毒症组的IL-10与非脓毒症组比较差异无统计学意义，但高于对照组（U=80.221，P<0.001）。脓毒症患者的GDF15和PCT呈正相关，Spearman相关系数为0.234（P=0.006）。死亡组和生存组的GDF15分别为5.49（3.60，8.25）μg/L和2.03（1.06，3.69）μg/L，PCT水平分别为26.45（11.23，94.25）μg/L和9.08（1.33，22.75）μg/L，死亡组的GDF15和PCT均显著高于存活组（U值分别为3 305.500和3 060.000，P均<0.001）。第1、3、7天死亡组的GDF15与PCT水平均高于存活组（P<0.05），而CRP和IL-10水平差异无统计学意义（P>0.05）。死亡组第3和第7天的IL-6水平高于存活组（P<0.05）。GDF15、PCT、CRP、IL-6和IL-10单独及联合诊断脓毒症的曲线下面积（AUC）分别为0.899、0.938、0.874、0.789、0.698和0.962；GDF15、PCT、CRP、IL-6和IL-10单独及联合检测对脓毒症预后的AUC分别为0.774、0.716、0.522、0.623、0.520和0.839。 结论 GDF15和PCT在脓毒症的鉴别诊断和预后均有良好的临床参考价值，指标联合后临床价值更高，GDF15可能成为脓毒症的诊断和预后的生物标志物。

目的 分析孕产妇和新生儿梅毒抗体分布的现状以及探讨如何通过设置检测灰区优化现有的孕产妇和新生儿梅毒筛查流程。 方法 对2015至2018年就诊于西北妇女儿童医院的119 531例孕产妇和21 275例新生儿的血清标本采用化学发光法检测梅毒特异性抗体（TPAb）的初筛结果及采用梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA）和梅毒快速血浆反应素诊断试验（RPR）的复检结果进行回顾性分析。数据分析采用χ²检验、Fisher精确概率法和趋势χ²检验。 结果 孕产妇和新生儿TPAb初筛阳性率分别为0.69%（825/119 531）和1.24%（264/21 275），总体复检阳性率分别为0.32%（380/119 531）和0.90%（191/21 275），总体可疑梅毒现患率分别为0.13%（161/119 531）和0.31%（67/21 275）；2015至2018年孕产妇和新生儿总体可疑梅毒现患率均呈逐年增高的趋势（χ2=9.860，P=0.002；χ2=5.311，P=0.021）。孕产妇和新生儿TPPA和TPAb阳性符合率均随S/CO值的升高而增高（χ2=614.833，P<0.001；P<0.001）；若新生儿TPAb S/CO≥7.00或孕产妇TPAb S/CO≥15.00，TPAb结果有效性等同于TPPA。孕产妇和新生儿可疑梅毒现患率也随S/CO值的升高而升高（χ2=323.059，P<0.001；P<0.001）；孕产妇TPAb S/CO为3.00或新生儿TPAb S/CO为5.00，可疑梅毒现患率均为0，可初步排除梅毒感染。 结论 本地区孕产妇可疑梅毒现患率呈逐年增高的趋势，应进一步加强孕早期梅毒筛查和干预治疗，提高优生优育率。全自动化学发光分析法作为孕产妇和新生儿梅毒初筛方法假阳性高，可根据本研究建立的检测灰区优化梅毒筛查流程，以期防止漏检，同时降低假阳性率，避免临床误诊。

目的 通过比较6种新型冠状病毒（2019-nCoV）核酸检测试剂的最低检出限、扩增效率、特异性、准确度以及与6种核酸提取试剂匹配性分析，为选择核酸提取试剂、扩增试剂以及临床诊疗提供科学依据。 方法 将国家标准物质进行浓度梯度稀释得到6个浓度梯度，用广州达安、北京金豪、武汉明德、四川迈克、江苏硕世和上海之江6种2019-nCoV核酸检测试剂（分别简写为DA、JH、MD、MK、SS、ZJ）检测靶基因，评价其最低检出限、扩增效率、准确度、特异性等性能。阳性质控品水平1、2（低中浓度）分别用6种核酸提取试剂提取（编号a~f）搭配6种2019-nCoV核酸检测试剂检测靶基因，比较不同核酸提取试剂和不同核酸检测试剂之间匹配情况，采用双因素方差分析。 结果 DA、JH、MD、SS试剂核衣壳蛋白（N）基因最低检出限为7.0×102拷贝数/ml；JH、MD、SS、MK试剂开放阅读框架1ab（ORF1ab）基因最低检出限为9.39×102拷贝数/ml；MK、ZJ试剂包膜蛋白（E）基因最低检出限为5.03×102拷贝数/ml；SS试剂N基因扩增效率89%，ORF1ab基因扩增效率为90%，扩增效率最高。6种2019-nCoV核酸检测试剂特异性均100%；a、b、c、d提取试剂与6种核酸检测试剂匹配性好，但a提取试剂更适合搭配SS、MK和ZJ核酸检测试剂（P<0.05），d提取试剂更适合搭配MD、SS、DA、JH和MK核酸检测试剂（P<0.05），e提取试剂更适合搭配SS核酸检测试剂（P<0.05），f提取试剂更适合搭配DA、JH核酸检测试剂（P<0.05），e和f试剂不适合搭配MK和ZJ。 结论 6种核酸检测试剂性能良好，实验室根据实际情况选择合适的提取试剂和检测试剂搭配使用。

目的 以微量肉汤稀释法为金标准，评价4种不同药敏方法检测多黏菌素敏感性的性能，为实验室选择可常规开展的药敏方法及临床合理用药提供参考。 方法 收集福建医科大学附属第一医院2019年1—12月临床标本分离的88株非重复肠杆菌科细菌（其中6株携带mcr-1基因），分别用微量肉汤稀释法、黏菌素肉汤纸片洗脱法（CBDE）、Vitek-2™药敏分析系统、BD PhoenixTM药敏分析系统、商品化微量肉汤稀释法检测多黏菌素的MIC值。以微量肉汤稀释法为金标准，分析不同方法的基本一致性、分类一致性、极重大错误和重大错误；采用Kappa一致性检验、配对χ²检验及Spearman秩相关法对4种药敏方法与金标准之间的一致性进行统计分析。 结果 与金标准相比，CBDE、Vitek-2™药敏分析系统、BD PhoenixTM药敏分析系统和商品化微量肉汤稀释法的基本一致性分别为94.32%（83/88）、92.05%（81/88）、90.90%（80/88）和96.59%（85/88），分类一致性均为100%（88/88），未出现极重大错误和重大错误；4种药敏方法与金标准的检测结果差异无统计学意义（McNemer检验P=1），检测多黏菌素敏感性的一致性较强（Kappa=1，P<0.001）；4种药敏方法测定的MIC值与微量肉汤稀释法均呈正相关，一致性较好（r均>0.5，P均<0.05）。 结论 多黏菌素4种药敏方法在本实验室均达到了临床和实验室标准协会及欧洲抗菌药物敏感性试验委员会联合推荐的性能标准，其中商品化微量肉汤稀释法、CBDE检测性能表现最佳，目前可应用于本院临床微生物实验室日常工作中。

对海南医学院第二附属医院2016年1例不孕症患者及其家系成员进行系谱分析及细胞遗传学等检查。先证者染色体核型为：46，XX，inv（9）（p12q13）dn，inv（20）（p13q13.1），1qh+mat/46，XX，inv（20）（p13q13.1），1qh+mat（数据库编号：4516）。先证者患有不孕症和多囊卵巢综合征。先证者二姐核型：46，XX，inv（20）（p13q13.1）mat，患有多囊卵巢综合征。先证者母亲核型：46，XX，inv（20）（p13q13.1），1qh；先证者父亲核型：46，XY，？inv（9）（q32q34），inv（20）（p13p11.2）。20号染色体倒位发生在一个家族的两代，先证者及二姐都继承了母亲的核型，而不是父亲的核型。但异常的核型可能干扰妊娠，导致不孕6年，在遗传咨询中应综合考虑并为携带者提供更准确的遗传咨询指导，为临床医生提供诊断依据。

分析比较临床1例重症肺炎患者痰标本培养出的平滑型脓肿分枝杆菌（MabS）和粗糙型脓肿分枝杆菌（MabR），并进行药敏试验研究，为临床诊断治疗提供科学依据。对MabS和MabR进行菌体形态观察、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）和16S rRNA基因序列测序比对，构建系统发育进化树进行同源性分析，并采用比例法和肉汤法进行体外药敏试验。MabS和MabR菌落形态不同，MALDI-TOF MS分析MabR有223个蛋白峰，MabS有147个蛋白峰。16s RNA基因测序MabS为1 397 bp，MabR为1 402 bp，药敏试验显示二者对抗结核药几乎耐药，对绝大部分抗菌药物敏感。MabS和MabR对抗结核治疗药物普遍耐药，而对抗菌药物几乎敏感，联合使用抗菌药物治疗有较好的疗效，可供临床参考。

鉴于目前核酸分子检测技术逐步从临床实验室向现场检测转移的发展趋势，急需建立一种高灵敏、高特异、高效和便捷的新型核酸诊断工具来满足临床即时检测（POCT）的需要。基于规律间隔成簇短回文重复序列（CRISPR）/CRISPR相关蛋白（Cas）的检测方法是一种有前景的新型核酸检测方法。该方法中Cas效应蛋白能够识别高度特异的核酸序列，通过联合高灵敏小型生物传感器运用于POCT，在满足高灵敏性和高特异性的同时具备了检测的高效、便捷的特点。本文综述了近几年基于CRISPR/Cas技术集成小型现场分析传感器相关领域的进展，并讨论了POCT相关检测的研究前景及挑战。

糖基化是蛋白质生物合成过程中最重要的翻译后修饰之一，免疫球蛋白糖基化可通过调节抗体稳定性和影响其与不同FcγRs的相互作用，发挥抗炎和促炎活性。近年来，大量研究证实免疫球蛋白异常糖基化在自身免疫性疾病的发病中起到关键作用。其产物如糖链结构和/或糖基化蛋白，利用凝集素微阵列等技术进行检测，有望成为自身免疫性疾病新型血清标志物，在疾病的诊断、病情监测、预后评估以及治疗等方面具有广阔的应用前景。

免疫紊乱是目前公认的导致新型冠状病毒肺炎（COVID-19）患者临床症状加重的主要原因。本文从疾病进展中淋巴细胞亚群如自然杀伤（NK）细胞和T细胞亚群数量减少和细胞因子大量聚集等异常动态表现总结了COVID-19的免疫反应特点，阐明关键淋巴细胞亚群以及细胞因子动态变化发生的可能机制，为临床治疗提供新策略，为发现新药物提供了潜在靶点。