2007年 · 第30卷第04期

本文从白细胞分类技术、扩展的功能设置和自动化分析水平等多方面阐述了近十年来血细胞分析技术的进展,介绍了红细胞体积分布宽度、网织血小板及网织红细胞分群等新参数的临床应用价值和笔者的实践工作体会,提出了国内血细胞分析仪应用存在的问题及相应对策。

在过去的3个多世纪中,自从Leeuwenhoek[1]使用一台简单的单片双凸显微镜第一次描述了红细胞形态之后,人血细胞的分析已经取得了长足的进步.Ehrlich[2]首先使用了苯胺染料对血细胞进行染色,从此人们开始将白细胞分为5种主要的细胞类型.1956年,Coulter[3]发明了第一台可自动进行血细胞计数并能检测细胞体积大小的分析仪器,给烦冗的、不精确的人工血细胞计数方法带来了一场革命.在20世纪60年代,多参数全血细胞计数仪得到了发展.到了20世纪80年代,人们将全血细胞计数和流动的白细胞分类方法整合到一个简单的工作平台之上,从而产生了第一台多参数、流动式全血细胞计数和分类仪器.现在,很多生产厂家都能生产出更为先进的计数和分类仪器,这些仪器同时具有异常提示功能,提示操作者存在有异常细胞形态和仪器无法计数的异常细胞,以及特定的样品特征,如血小板聚集,以上这些因素都可能导致错误的结果.

肾小球滤过率(GFR)是判断有无慢性肾脏病的重要指标.目前有多种GFR检验方法,包括放射性核素标记物检测、内生肌酐清除率检测、血清β2微球蛋白及胱蛋白酶抑制物检测等.近年,又提倡用公式估算GFR(eGFR)替代上述检验,国外成人常用的估算公式有Cockcroft-Gault公式及简化肾脏病膳食改良试验(MDRD)公式,它们并不完全适用于国人,所以国内也开发了几个国人eGFR估算公式.这么多GFR检测方法在临床上如何正确应用?在不同慢性肾脏病分期中它们的检测结果可能出现什么偏差?这些问题都非常值得研究。

由于全血细胞计数(CBC)和白细胞分类计数(DC)在临床诊疗中广泛应用,其复检(review)规则近年来已受到国内外业界的高度重视.为此,我们将国际血液学复检专家组和美国临床和实验室标准协会(CLSI)最新提出的自动血细胞计数和白细胞分类计数的复检规则予以介绍。

EB病毒(EBV)是从非洲儿童的恶性淋巴瘤细胞培养中发现的一种嗜人B淋巴细胞的疱疹病毒.该病毒在正常人群中的感染非常普遍,绝大部分感染者为健康携带状况[1-2].但国内外大量研究表明,EBV与Burkitt淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、鼻咽癌等多种肿瘤发生有关.然而,最新文献证实,最初用于霍奇金淋巴瘤免疫组化检测EBV核抗原(EBNA)抗体2B4与MAGE-4存在交叉反应,因而对基于该抗体免疫组化检出的EBV与某些肿瘤相关的结论产生质疑,提出EBV不是乳腺癌病因的观点.此外,EBV特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)治疗同种异体造血干细胞移植后发生淋巴组织增生性疾病效果明显,而在其他EBV相关肿瘤治疗方法和效果还有待研究.现对EBV的生物学特性、作用机制,EBV与各种肿瘤发生与治疗等方面的研究状况阐述如下.

心脏标志物在临床应用已经有50多年的历史.早在1954年,AST(旧称GOT)就作为第一种用于诊断心肌梗死(MI)的心脏标志物被应用于临床.半个多世纪以来,陆续又有许多心脏标志物先后应用于临床,在心脏疾病的诊断、危险性评估、疗效观察、预后估计等方面起了重要作用.

铜绿假单胞菌(Pa)是引起医院内感染最常见的条件致病菌之一,近年来Pa耐药率在不断增加,多重耐药菌株也逐渐增多,但产AmpC酶Pa株的报道较为鲜见[1],本研究对3株多重耐药Pa进行DHA基因扩增和序列分析.

布氏杆菌病是由布氏杆菌感染引起的,以长期发热、关节疼痛、肝脾肿大和慢性化为特征的传染病.布氏杆菌为细胞内寄生菌,可在单核巨噬细胞内长期生存,造成机体多脏器损伤,导致疾病的慢性化.布氏杆菌的这些特点决定了其临床表现的复杂性,在血液系统方面,除常见症状如肝、脾、淋巴结肿大外,还可有白细胞减少、贫血和血小板减少等表现.2005年以来,我们接触到一些在血液科初诊的患者,其中有12例进行了骨髓细胞学检查,通过细胞形态学的观察,我们发现该病在骨髓细胞学方面有一些较为特征性的变化,对该病的辅助诊断和血液系统疾病的鉴别诊断均具有一定的应用价值,现总结报告如下.

先天性白血病(congnnical leukemia,CL)是指从出生至生后8周诊断的白血病[1],我们遇到3例,现报告如下.

医学界曾经普遍认为成人胸腺不再具有功能,但随着近半世纪免疫学的进展,人们认识到胸腺在成年后仍具有活性[1],在人体免疫功能中起着重要作用.胸腺功能的异常与免疫缺陷、自身免疫性疾病、感染、肿瘤等疾病的发生甚至衰老均有一定的关系.

目前临床上用于酵母菌鉴定的方法主要有色原底物显色鉴定法、API 20C AUX和Vitek 2 Compact YBC方法.其中色原底物显色鉴定法操作最简单,但是能够鉴定的菌株范围有限,API 20C AUX方法菌株鉴定范围广但操作复杂,BBLMycotube方法操作比API 20C AUX方法简单,与色原底物显色鉴定法相比耗时相似,菌种鉴定范围更广.

目的 探讨内皮型一氧化氮合酶(NOS3)基因第4内含子27 bp重复序列、Y染色体HindⅢ酶切位点多态性与青年原发性高血压(EH)的关系.方法 入选青年EH患者345例,正常人281名.提取白细胞DNA,多聚酶链反应结合限制性内切酶(HindⅢ)方法检测多态性.结果 对照组和EH组HindⅢ(+)基因型分布分别为67.3%(107/159)和55.4%(102/184),两组间基因型差异有统计学意义(P=0.03),EH患者HindⅢ(-)基因型增多.对照组和EH组间NOS3 4a/b多态性各基因型和等位基因频率差异无统计学意义(P＞0.05).结论 Y染色体HindⅢ酶切位点多态性与青年EH有关。

目的 研究颗粒溶素(granulysin,GNLY)、颗粒酶B(granzyme B,GrB)及穿孔素(perforin,PF)三种免疫效应分子在原发性胆汁性肝硬化(primarybiliary cirrhosis,PBC)外周血中的表达并探讨其与PBC的关系.方法以正常健康人和肝炎后肝硬化患者为对照,用实时荧光定量RTPCR方法检测PBC患者PBMC中GNLY、GrB及PFmRNA的含量.用ELISA方法检测PBC患者血清中GNLY表达情况并分析其与肝功能的相关性.结果PBC组GNLY、GrB mRNA平均拷贝数显著高于健康对照组(P＜0.01)和疾病对照肝炎后肝硬化组(P＜0.001),而PFmRNA与对照组相比差异无统计学意义.PBC患者血清中的GNLY蛋白表达显著高于健康对照组(P＜0.01)和乙型肝炎后肝硬化组(P＜0.01).血清中GNLY浓度与血清GGT、ALP的浓度呈正相关(P＜0.01).结论PBC患者GNLY、GrB mRNA和含量显著高于对照组,同时ELISA方法检测出PBC患者血清中GNLY蛋白含量显著高于对照组,GNLY、GrB表达与PBC的发病存在一定的关联性,为临床PBC病情的监控提供可靠依据。

目的 深入了解引发医院感染的表皮葡萄球菌(简称"表葡菌")对大环内酯-林可酰胺-链阳菌素B(MLSB)类抗生素的耐药机制.方法 收集2003-2004年北京3家综合医院126株引发医院感染的表葡菌,检测其在红霉素(ERY)、克林霉素(CLI)、喹努普丁/达福普丁中的MIC;用D试验区分诱导型(iMLSB)和泵出型(MS)耐药菌株.采用PCR检测ermA、ermB、ermC、msrA和mecA耐药基因,并用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行同源性分析.结果 126株菌株对ERY和CLI耐药率高(分别为92.8%和84.1%);在结构型(cMLSB)中,耐甲氧西林表葡菌(MRSE)占78.5%,而iMLSB中甲氧西林敏感株(MSSE)较多,占69.2%;ermC不仅在MRSE和MSSE中是最常见的耐药基因(70.8%和56.8%),而且在iMLSB型和cMLSB型中也占多数(76.9%和90.3%);所有MS型菌株均检测出msrA;在ERY敏感菌株中未检测出相关耐药基因.PFGE分析显示,无特异的流行株;99.2%MLSs耐药表型相同的菌株分布于A～F型中,且无显著集中趋势.结论 导致医院感染的126株菌株对MLSB类抗生素耐药率高,ermC是其常见耐药基因,对MLSB抗生素使用需谨慎、合理。

目的 对北京地区脑膜炎奈瑟菌进行耐药性监测.方法 采用临床及试验标准协会推荐的肉汤稀释法,测定12种抗菌药物的最低抑菌浓度.结果 2004年11月至2006年3月收集的67株菌株对头孢曲松、阿奇霉素、头孢噻肟、美洛培南和利福平敏感,对甲氧苄啶/磺胺耐药.全部菌株对青霉素、氨苄西林和氯霉素均不耐药,但是分别有41、7和11株耐药性介于中介值;对环丙沙星有5株敏感,19株介于中介,43株耐药(占64.2%);对左氧氟沙星有8株敏感,3株介于中介,56株耐药(占83.6%);对四环素有19株敏感,3株介于中介,45株耐药(占67.2%).结论 青霉素、氨苄西林、头孢曲松、氯霉素、头孢噻肟和美洛培南仍是治疗流行性脑脊髓膜炎(流脑)的有效抗生素,而利福平和阿奇霉素可作为密切接触者的预防性用药。

目的 选取登革病毒Ⅰ～Ⅳ外膜蛋白DⅢ区基因进行克隆、表达和纯化,以获得能应用于血清学诊断的纯化重组蛋白.方法 用RT-PCR法扩增登革病毒Ⅰ～Ⅳ毒株外膜蛋白DⅢ区基因,与表达载体pET-30a连接,构建重组表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,重组蛋白用电洗脱法进行纯化.纯化的重组蛋白用间接ELISA法、捕获ELISA法和夹心ELISA应用于血清学检测,检测结果与间接免疫荧光法进行比较.结果 重组表达质粒在大肠杆菌中表达高产量的重组蛋白,纯化的重组蛋白对登革热病毒感染者具有很高的检出率,与间接免疫荧光法检测结果基本相符.结论 登革病毒Ⅰ～Ⅳ外膜蛋白DⅢ区基因在大肠杆菌中成功表达,重组蛋白可应用于血清学检测。

目的 利用PML-RARα融合基因作为标志物,应用实时荧光定量PCR技术,监测急性早幼粒细胞白血病(APL)微小残留病(minimal residual disease,MRD)患者体内病毒的状态,探讨预测APL复发风险的方法.方法 利用本实验室建立的定量检测APL患者PML-RARα融合基因的方法,对25例处于初诊、完全缓解(complete remission,CR)、复发等不同阶段的APL患者进行了PML-RARα融合基因的定量检测,并对其中6例患者的MRD状态进行了动态监测.结果 应用荧光定量PCR技术分析患者初诊、CR和复发状态的PML-RARα基因对数值(lg)水平,结果 显示有统计学意义(x2=6.847,P＜0.05);随访期患者的PML-RARα对数值(lg)水平变化较大:初诊时较高(-0.61±0.79),CR时下降(-1.31±0.62),复发时又出现上升(-0.57±0.44),提示若该患者在CR时的对数值呈现上升趋势,患者复发的机率大.结论 应用实时荧光定量(RQ)-PCR技术定量检测PML-RARα融合基因,对监测APL患者MRD状态具有临床适用性,随访期的MRD动态追踪监测具有预后价值。

目的 比较血清肌酐(Scr)、肌酐清除率(Ccr)、半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cystatin C)及估算的肾小球滤过率(eGFR)在慢性肾病(CKD)患者各期中的符合率.方法 Scr和尿肌酐采用苦味酸动力学法测定,血清Cystatin C采用颗粒增强免疫散射比浊法测定,主要基于Scr估计的eGFR采用简化的肾病膳食改良试验(MDRD)方程进行计算,CKD患者根据1999年美国肾病基金会(NKF)公布的"改善肾病预后及生活质量的倡议"(Kidney Disease Outcome Quality Initiative,K/DOQI)所制定的指南,按照eGFR分为5期.结果 228例CKD患者,各期Scr、Cystatin C随eGFR的降低而逐渐升高,Ccr随eGFR的降低而逐渐降低,三者在各期间水平的差异均有统计学意义(P＜0.05).当eGFR≤29 ml/min时,Scr、Ccr及Cystatin C的异常率均为100%,Scr、Cystatin C平均水平是正常参考值上限的4～6倍和3.5～5.5倍,Ccr下降3.8～7.3倍,三者呈平行性改变;在eGFR 30～59 ml/min组,Scr、Ccr和Cystatin C的平均水平分别为129.2 μmol/L、44.3 ml/min和2.16 mg/L,异常率分别为84%、91%和98%,三者间异常率的差异无统计学意义(P＞0.05);在eGFR 60～89 ml/min组,血清肌酐的平均水平为83.3 μmol/L,异常率仅为6.8%,对于GFR下降的检出不敏感,Ccr、Cystatin C分别呈边缘性下降和上升,异常率为70%和86%,三者间异常率的差异有统计学意义(P＜0.05);在eGFR≥90 ml/min组,血清肌酐的异常率为0,Ccr、Cystatin C的异常率仍高达44%和59%.结论 eGFR＜60ml/min时,与Scr、Ccr及Cystatin C的总符合率高,此时可以基本诊断肾小球滤过功能中度下降;60 ml/min≤eGFR≤89 ml/min时,Scr不能反映肾脏滤过功能的下降,但Cystatin C和Ccr至少能检出2/3患者GFR的异常,Cystatin C较Ccr更敏感;在eGFR≥90 ml/min时,MDRD方程高估了实际GFR,对于Scr水平正常,特别是老年CKD患者,MDRD方程不适用,需联合检测Ccr和Cystattn C,以及时发现GFR的下降。

目的 建立和评价多重PCR-反向线点杂交方法(multiplex PCR/reverse line blot hybridization,mPCR/RLB)检测B族溶血性链球菌(GBS)9个耐药及耐药相关基因[erm(A/TR)、erm(B)、mef(A/E)、tet(M)、tet(O)、aphA-3、aad-6、int-Tn和mreA]的方法.方法 针对GBS的9个耐药及耐药相关基因分别设计9对引物及寡核苷酸探针.多重PCR同时扩增9个目的基因,获得生物素标记的PCR产物后,反向线点杂交同时检测上述9个基因.为明确mPCR/RLB方法的特异性和敏感性,对其中318株菌株的9个基因分别进行单个基因PCR扩增,比较两种检测方法结果.结果 用mPCR/RLB方法成功检测512株GBS分离株的9个耐药相关基因,除8株int-Tn和21株mef单个基因PCR阳性的菌株,RLB结果表现为单探针杂交外,其余菌株所有耐药基因RLB检测结果和单个基因PCR完全一致.结论 我们建立的多重PCR/RLB方法具有良好的敏感性和特异性,为GBS耐药基因的流行病学调查和监控提供了一个良好的检测工具。

目的 探讨冠心病患者外周血CD+4CDnull28 T淋巴细胞的数量以及其表达穿孔素情况.方法 空腹采肘静脉血,采用流式细胞分析仪测定68例急性冠脉综合征(ACS),56例稳定型心绞痛(SAP)患者和65名健康人循环CD+4CDnull28 T淋巴细胞亚群扩增情况.结果 ACS患者循环CD+4CDnull28 T淋巴细胞数量(11.6%)显著高于SAP患者(2.84%)和健康者(0.59%);CD+4 Perforin+ T淋巴细胞数量(12.0%)也明显高于SAP组(3.06%)和对照组(0.25%).结论 ACS患者CD+4CDnull28 T淋巴细胞显著增加且表达穿孔素,这些细胞浸润到斑块处,可能通过细胞毒功能破坏血管内皮细胞而导致斑块破裂,从而参与ACS的发生。

目的 对广州市一个罕见的血红蛋白H病同时合并异常血红蛋白Q和E家系进行分析.方法 采用美国HELENA公司全自动快速电泳分析系统测定血红蛋白(Hb)各种区带定量;同时进行异常Hb各项测定,包括吸收光谱试验、C结晶试验、溶解度试验、异丙醇试验、连二硫酸钠过筛试验、血红蛋白肽链裂解试验.首证者做了骨髓检查;4例均做外周血红细胞形态检查、常规血液检查、红细胞温育脆性试验、高铁血红蛋白还原试验、G6PD/6PGD酶比值法(紫外法)测定;α-THAL基因检测:多重PCR检测α-THAL基因缺失;β-THAL基因检测:DNA芯片反向点杂交(RDB)检测中国人较常见的18种β-THAL基因,鉴定β-THAL基因突变类型.结果 父亲的α-THAL基因型:αQα4.2/αα;β-THAL基因型:βE/N;表现型:轻型β-THAL携带者合并异常HbQ和异常Hb E多重杂合子;母亲的α-THAL基因型:α/--SEA/;β-THAL基因型:βN/βN.根据综合分析,母亲的表现型:轻型α-THAL复合轻型β-THAL携带者同时合并异常Hb F持续增高症(HPFH).首证者的α-THAL基因型:αQα4.2/--SEA;表现型:缺失型Hb H-Q病;β-THAL基因型:βEM/βEM;表现型:βE纯合子.根据综合分析,为缺失型异常Hb H合并异常Hb Q和异常Hb E多重杂合子.其弟的α-THAL基因型:αQα4.2/--SEA;β-THAL基因:βN/βN;表现型:缺失型异常Hb H病.母亲及其小儿子均同时合并G6PD缺陷.结论 广东省是α-THAL和β-THAL、异常Hb E和异常Hb Q以及G6PD缺乏症的发高区,从地域异常Hb的高发率上,Hb E和Hb Q是可能存在某种关联性,但是在非同源染色体上两种类型的异常Hb同时合并Hb H病在一个个体上,实为罕见.本研究提示对其配偶的婚前检查尤为必要。

目的 应用双向电泳及质谱技术对野生型及变异型白细胞介素13(IL-13)刺激后的ASMC总蛋白进行差异比较研究,借此分析差异表达蛋白与支气管哮喘的关系,为哮喘的治疗提供新的靶标.方法 用固相pH双向电泳分离,分别给予野生型IL-13及变异型IL-13刺激的ASMC总蛋白组成分,找出异常IL-13处理后与野生型IL-13处理后有明显差别的蛋白斑点,用基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱(MALDI-TOF)进行鉴定部分差异蛋白质.结果 获得了分辨率高,重复性好的电泳图谱,在野生型IL-13刺激组和变异型IL-13刺激组分别平均有(840±21)个和(892±17)个蛋白点(n=3)被检测,匹配的点数为(685±19)个,选取5个未匹配点做质谱分析,鉴定其中3个分别为stathmin 1,Ribosomal protein p0,NADH dehydrogenase.结论 本研究结果显示不同处理组的ASMC总蛋白表达存在差异,这些差异蛋白有可能为阐明野生型IL-13及其变异体引发哮喘机制提供新的实验证据。

目的 建立一种简便、灵敏、稳定的直接光度法测定血清铜.方法 在非离子型表面活性剂聚氧乙烯失水山梨醇油酸单脂(Tween-80)及聚氧乙烯异辛基苯基醚(Triton X-100)存在下,用水溶性试剂2-(5-硝基-2-吡啶偶氮)-5-[N-正丙基-N-(3-磺酸丙基)氨基]苯酚二钠(Nitro-PAPS)作显色剂直接光度法测定血清铜.结果 该方法测定血清铜,显色络合物最大吸收波长为570 nm,线性范围达63.0μmol/L,表观摩尔吸光系数为7.95×104L/(mol·cm).回收率为98.6%～103.1%,批内CV为2.1%～3.3%,批间CV为2.7%～3.8%,与原子吸收分光光度法比较相关良好,Y=1.01X-0.27,r=0.998 2,P＞0.05,68名健康成年人血清铜含量为9.7～24.1 μmol/L((x)±2s).结论 该法血清用量少,不必去蛋白,具有操作快速、简便、结果灵敏可靠等优点,适用于血清铜的手工测定和自动分析。

目的 建立单引物二次PCR法对重组质粒中HBV前C-C基因进行4处点突变,并与传统环状突变法进行对比.方法 将变异点合成在一对互补引物中,先加入单条引物行PCR扩增,再以产物为模板,加入另一单条引物行PCR扩增.PCR产物加入Dpn Ⅰ酶,切除其中变异前的模板质粒,转化入大肠埃希菌DH5α,卡那霉素培养基筛选阳性菌落增菌测序.结果 对该质粒而言,采用单引物二次PCR法预期位点均发生变异,成功率高于传统环状突变法.4个变异后质粒与模板条带位置基本一致,4个质粒的拟变异位点均如预期变异成功,而其他氨基酸无变异.结论 单引物二次PCR法进行重组质粒基因突变较传统环状突变法成功率有所提高。

目的 探讨雌激素对其受体阳性人卵巢癌HO8910细胞中组织激肽释放酶6(KLK6)基因mRNA和蛋白表达的调控.方法 取对数生长期的HO8910细胞,在试验组分别加10-10、10-9、10-8、10-7mol/L的17-β雌二醇(17-βE2),对照组加无水乙醇,培养72 h.用实时荧光定量逆转录PCR检测各试验组和对照组中KLK6 mRNA表达.用流式细胞术检测KLK6编码的组织激肽释放酶6(hK6)蛋白表达.用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法和流式细胞术检测细胞增殖活力及增殖周期的变化.结果 17-βE2作用72 h后,各试验组(10-10、10-9、10-8、10-7mol/L)HO8910细胞KLK6mRNA水平(3.83±0.41、4.14±0.49、6.26±0.38、7.28±1.82)和蛋白水平(10.62±0.35、10.89±0.12、11.88±0.28、12.07±0.15)均高于乙醇对照组(P＜0.01).经MTT检测各试验组HO8910细胞光吸收度A值(0.771±0.015、0.849 ±0.022、0.858±0.016、0.895±0.031),与乙醇对照组(0.459±0.064)相比明显增加(P＜0.01),细胞增殖活力明显增强;同时,经流式细胞技术检测,各试验组与乙醇对照组相比,其HO8910细胞G0/G1期百分率(67.72%、66.98%、66.31%、65.19%)呈下降趋势,S期(17.70%、18.27%、18.55%、19.11%)和G2/M期百分率(14.58%、14.75%、15.14%、15.70%)呈上升趋势.结论 17-βE2对KLK6 mRNA和蛋白的表达具有上调作用,同时能促进卵巢癌HO8910细胞的增殖。

目的 建立一种荧光多聚酶链反应测定线粒体乙醛脱氢酶-2 Glu504Lys多态性的方法.方法 以水解探针技术(TaqMan)为基础,设计相应的引物和荧光探针,PCR反应的Mg2+浓度和探针浓度进行优化,同时对本方法的灵敏度和精密度进行了研究,通过PCR产物直接测序对准确度进行评价.结果 优化后的Mg2+和探针浓度分别为2.5 mmol/L和1.0 μmol/L,批内循环阈值(Ct)值的变异系数为1.38%(n=20),批间Ct值的变异系数为1.48%(n=20);在25 μl反应体系中,人基因组DNA在5.0×102～5.0×106 pg浓度范围内可以得到满意的结果.本法确定150份标本的基因型与PCR产物直接测序法比较,结果完全一致.结论 本方法快速、灵敏、可靠,适合于临床实验室和大规模测定线粒体乙醛脱氢酶-2Glu504Lys多态性。

患者,女,16岁,因"多饮、多尿、多食1月余,伴恶心、呕吐3 d",于2006年9月15日入住本院.

一、概述 　　临床检验结果准确,具有跨时空的可比性,是防病治病的需要,也一直是临床检验领域的工作目标.目前临床检验普遍采用商品常规方法,方法原理、品种多种多样.不可能也不应该要求所有实验室使用同一方法进行临床检验,实现检验结果准确可比的有效手段是建立和保证不同方法结果的计量学溯源性,其过程简单理解,就是使常规检验与参考系统相联系的过程.

目的 制定血细胞分析仪血涂片复检的标准并加以评价,以求准确、合理、有效使用血细胞分析仪.方法 根据医院及XE-2100血细胞分析仪特点制定血涂片复检的标准,通过对1 368份标本血涂片进行显微镜检查,评价仪器提示与手工检查的一致性和标准执行的可行性.结果 仪器提示血小板减少与血涂片显微镜镜检结果相比较Kappa值0.95,U=35.19,P＜0.01,显示两者一致性满意;提示未成熟粒细胞、异常淋巴细胞、核左移、血小板聚集的仪器结果与镜检结果比较,Kappa值分别为0.64、0.60、0.52、0.60,U值分别为24.9、22.2、21.98、17.65,P＜0.01,提示两者一致性尚可;而提示原始粒细胞、有核红细胞的仪器结果与镜检结果比较,Kappa值分别为0.39、0.36,U值分别为13.54、8.24,P＜0.01,显示两者一致性尚不够理想.依据标准复检血涂片,敏感度为81.9%,特异度为100%,准确性为95.5%.结论 本复检标准敏感度高、特异性强,表明符合本复检标准的标本均需要严格按照操作规程进行显微镜镜检,以免造成漏诊、误诊现象。

目的 比较MRSA ID产色琼脂培养基及其他3种方法检测和鉴定甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA).方法 选择临床118株葡萄球菌用(118株葡萄球菌中金黄色葡萄球菌108株,凝固酶阴性葡萄球菌10株)细菌鉴定仪鉴定到种,用MRSA ID琼脂筛选法、苯唑西林平板筛选法、头孢西丁纸片法比较MRSA的检测情况,同时检测金黄色葡萄球菌的mecA基因作为金标准,同时用大肠埃希菌ATCC25922,金黄色葡萄球菌ATCC25923,铜绿假单胞菌ATCC27853和粪肠球菌ATCC29212做干扰试验.结果 金黄色葡萄球菌用PCR检测其mecA基因,共检测到80株阳性菌株;用MRSA ID琼脂筛选法符合率为100%,苯唑西林平板筛选法符合率为97.5%,头孢西丁纸片法符合率为100%;有1株甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)和1株凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)对MRSA ID琼脂的显色有干扰,出现了浅绿色的细小菌落.用标准菌株做对照均没有生长.结论 MRSA ID琼脂平板可以对MRSA进行主动快速监测。

沈霞 《中华检验医学杂志》第七届编辑委员会资深编委.主任技师,硕士生导师.自1958-2005年在上海第二医科大学附属新华医院检验科工作.1960-1964年就读于上海第二医科大学高级检验专业,1979-1981年随中国援外医疗队赴摩洛哥哈桑Ⅱ世医院检验科工作;1986-1988年在法国里昂大学进修免疫生化.于1990年经上海第二医科大学自荐答辩破格晋升为主任技师.同年10月被派遣支援汕头大学医学院附属医院检验科.1991年任新华医院和上海儿童医学中心检验科主任,还兼任上海第二医科大学检验系副主任和临床免疫教研主任.曾与美国HOPE基金会、法国马赛大学和法国南雪预防医学中心进行多次合作交流.

由中华医学会检验分会全国血液学复检专家小组、中华检验医学杂志编辑委员会于2006年9月10日在北京举行了工作会议.中华医学会检验医学分会主任委员、中华检验医学杂志总编辑丛玉隆教授主持了会议,中华医学会杂志社袁桂清副社长,中华检验医学杂志编辑部史红主任,北京大学深圳医院检验科彭黎明教授,卫生部临床检验中心血液室彭明婷研究员,北京协和医院张时民副主任技师,上海同济大学附属第十人民医院李智主任医师,华中科技大学附属荆州医院王昌富教授,解放军第二○二医院邱广斌副主任技师等参加了本次会议.

焦磷酸测序(Pyrosequecing)技术为近年新一代短片段DNA序列分析技术.国外主要用于分子流行病学的单个核苷酸多态性位点大容量快速检测[1]和临床微生物菌种鉴定与分型[2-3],但国内尚未开展.本研究用该技术对针对不同细菌的独特分子标志,设计基于PCR技术的快速菌种鉴定方法,以提供从分子水平快速鉴定菌种的新的可靠方法.

基因芯片技术具有快速、高效、高通量的特点,非常适合于对病毒性感染进行分子诊断及鉴别诊断.本研究采用Tem-PCR技术结合多功能悬浮阵列检测平台,检测了80例下呼吸道感染患儿的7种RNA病毒,探讨其在儿童急性下呼吸道病毒感染中的诊断价值.

葡萄糖石-磷酸脱氢酶（G-6-PD）检测在诊断蚕豆病、溶血性疾病及婚前健康检查、产前检查、优生优育方面有重要临床意义。目前的G-6-PD检测主要为手工初筛法，操作不便、重复性与准确性欠佳，漏检率高。由广州市科方医疗器械有限公司生产的G-6-PD定量检测试剂盒是酶速率法液体双试剂，克服了上述缺点，可用于全自动生化分析仪上机定量检测。且具操作简便、试剂稳定、结果准确，杂合子检出率高的特点，适合临床检验及优生优育科研工作使用。