2007年 · 第30卷第05期

监测多重耐药或泛耐药的菌株是临床微生物实验室的重要任务,如对青霉素或大环内酯类耐药的肺炎链球菌、甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌、3代头孢菌素或喹诺酮类耐药的肠杆菌科菌以及碳青霉烯耐药的铜绿假单胞菌或鲍曼不动杆菌等.我们要掌握这些菌株的耐药特征,并且指导临床医生经验治疗感染性疾病。

近年发生多起严重威胁人类健康的传染病流行,这是我们医学工作者共同面对的巨大挑战.由于全球人口增多、国际交流日益频繁、全球生态改变、贫穷以及公共健康监督的薄弱,使得新发传染病在任何时间、任何地方均有可能出现.本文着重阐述了我国传染病在实验室诊断检测中存在的一些问题,强调了监测的重要性,并提出相应建议.如何提高现有传染病的检验、防治水平,仍是医务工作者应该持续不懈努力去做的事。

心肌肌钙蛋白(cTn)在急性冠状动脉综合征(ACS)的诊断和危险分层等方面的重要作用已经得到了普遍认同.大量的临床资料表明,cTn增高的ACS患者属于高危险性,在今后一段时间内出现心脏事件(心肌梗死等)的临床可能性大大增加.临床应用时应注意选取合适的判断值(例如:参考范围上限的第99百分位值);应了解究竟选取cTn检测CV≤10%的最低检测值作为临界值还是根据操作者工作特性曲线(ROC曲线)选取临界值;应注意不同的cTnI检测系统检测值存在差异这一现象。

生物膜是微生物(细菌、真菌、原虫)及其细胞外多糖基质所形成的细菌群落,附着在有生命或无生命物体的表面.对细菌生物膜的形成及其分子机理、致病机制(耐药机制)、检测、控制等方面进行深入研究,可为防治细菌生物膜引起的难治性感染提供新途径。

类风湿关节炎(RA)是一种以慢性破坏性多关节炎为主要表现的全身性自身免疫病.以双手、腕、膝、踝和足关节的对称性多关节炎为主,可伴有发热、贫血、皮下结节及淋巴结肿大等关节外表现,血清中可出现多种自身抗体.RA的发病为抗原驱动、T淋巴细胞介导,且与遗传相关的过程.但迄今为止,RA病因和发病机制尚不完全明确,而且缺乏特异性诊断方法。

目的 评价心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)对非ST段抬高心肌梗死(NSTEMI)的诊断价值,并探讨其与非ST段抬高急性冠状动脉综合征(NSTEACS)近期和远期预后的关系.方法 cTnI测定采用新一代Beckman Coulter AccuTnI化学发光试剂盒;应用操作者工作特征曲线(ROC曲线)分析cTnI对NSTEMI的诊断的敏感度和特异度;同时应用ROC曲线比较不同生化标志物对NSTEMI诊断价值;将269例NSTEACS患者以cTnI水平0.04 μg/L为分界点进行分组,比较cTnI升高组和cTnI正常组30 d内和1年内急性心肌梗死和/或心源性死亡事件的发生情况.结果 ROC曲线分析结果显示诊断NSTEMI的最佳cut-off值为0.1 μg/L,此界值诊断的敏感度和特异度为91.4%和89.3%;肌酸激酶及其同工酶MB、乳酸脱氢酶和α-羟丁酸脱氢酶各指标的诊断敏感度和特异度均低于cTnI;单因素分析显示cTnI升高组30 d内和1年内复合心脏事件的发生率(3.61%和6.02%)较cTnI正常组(均为0)显著升高(P＜0.05);多因素分析显示校正高血压、糖尿病、高脂血症、陈旧心肌梗死、心电图改变等危险因素后,cTnI升高是30 d内发生复合心脏事件的独立危险因子,风险比值(OR)=8.175,95%可信区间(CI)为1.014～65.917,P=0.049;也是1年内发生复合心脏事件的独立预告因子,OR=2.612,95% CI为1.164～5.859,P=0.02.结论 Beckman公司出品的cTnI对NSTEMI的诊断具有较高的敏感度和特异度,对NSTEACS患者的预后判断具有重要价值。

目的 观察冠心病(CHD)患者血浆大内皮素(Big endothelin-1,Big ET-1)含量变化并探讨其与N末端脑钠肽(NT-proBNP)及心功能的关系.方法 选择经冠状动脉造影确诊的CHD患者1 292例,健康对照者160名,用酶联免疫吸附分析(ELISA)法测定其血浆Big ET-1和NT-proBNP水平,并进行对比分析.结果 CHD患者组血浆Big ET-1和NT-proBNP水平[(2.82 fmol/ml)及(643.70 fmol/ml)]显著高于健康对照组[(2.06 fmol/ml)及(397.6 fmol/ml)],差异有统计学意义(P＜0.01);且冠心病心肌梗死(MI)组[(2.90 fmol/ml)及(801.55 fmol/ml)]＞心绞通(AP)组[(2.77 fmol/ml)及(539.95 fmol/ml)]＞健康对照组[(2.06 fmol/ml)及(397.6fmol/ml)],P＜0.01.方差分析显示CHD患者组血浆Big ET-1和NT-proBNP浓度都随着冠心病的严重程度加重(NYHA心功能分级升高)而显著上升,各组间差异均有统计学意义(P=0.024,P＜0.01);多因素相关分析表明血浆Big ET-1和NT-proBN浓度与美国纽约心脏病协会(NYHA)心功能分级之间具有良好的正相关性(r=0.359,P＜0.01及r=0.602,P＜0.01),Big ET-1和NT-proBNP也密切相关(r=0.315,P＜0.01).结论 Big ET-1和NT-proBNP可能参与了冠心病及心功能损伤的病理生理过程,血浆BigET-1升高与NT-proBNP升高呈正相关。

目的 通过检测健康查体者空腹血脂水平来了解北京地区人群血脂水平现状及其血脂异常患病率.方法 应用日立7 170全自动生化分析仪检测北京地区13 336例成人空腹血脂,血脂指标包括甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),比较不同性别和年龄组间血脂水平差别及血脂异常患病率的差异.结果 总体血脂异常患病率59.9%,男性71.6%,女性47.2%.男性TC平均(4.89±0.87)mmol/L、LDL-C平均(3.33±0.84)mmol/L、HDL-C平均(1.28±0.30)mmol/L、TG中位数1.32 mmol/L;女性TC平均(4.79±0.94)mmol/L、LDL-C平均(2.99±0.89)mmol/L、HDL-C平均(1.53±0.34)mmol/L、TG中位数0.9mmol/L.男性和女性4种血脂成分异常患病率均随年龄增加而增高(P＜0.01).TC、LDL-C、TG水平随年龄增加而增高(P＜0.01),HDL-C水平随年龄的增加有降低趋势(P＜0.01).TC在25～44岁间男性高于女性(P＜0.01),在55岁以上女性显著高于男性(P＜0.05).LDL-C在18～44岁间男性高于女性(P＜0.01),在45～74岁女性显著高于男性(P＜0.01).HDL-C水平各年龄组女性明显高于男性(P＜0.01).TG在18～54岁男性显著高于女性(P＜0.01),在55～64岁组两性间无差异,64岁以上女性高于男性(P＜0.05).结论 北京地区成人中血脂异常患病率较高,并且随年龄增大而增高,男女性别间血脂异常患病率差异有统计学意义。

目的 建立多重实时PCR检测志贺毒素(stx1、stχ2)基因和紧密素基因(eae)的方法.方法 优化多重实时PCR反应条件,检测系列稀释的阳性菌DNA提取物及纯化阳性质粒.检测42株携带已知毒力基因的大肠埃希菌株,并比较其阳性和阴性符合率.对比3种粪便样品处理和DNA提取方法,选出最适方法.同时用该方法对36份腹泻患者粪便标本进行直接检测且对阳性标本进行菌株分离和鉴定.结果 多重实时PCR方法最低可以检测到101拷贝/μl的毒力基因和102 CFU/μl的DEL933大肠埃希菌.检测42株携带已知毒力基因的大肠埃希菌的阳性和阴性符合率均为100%.粪便样品的DNA提取以BP肉汤增菌6 h后煮沸提取效果最好.36份腹泻患者粪便中2份eae阳性,均鉴定为大肠埃希菌.结论 建立的同时检测stx1、stx2、eae基因的多重实时PCR方法,具有较高的敏感性,可用于产志贺毒素大肠埃希菌(STEC)和肠致病性大肠埃希菌(EPEC)毒力基因鉴定及临床腹泻粪便标本的快速筛检。

目的 建立一种快速准确的实时荧光PCR方法检测HBV感染患者经拉米夫定治疗后YMDD变异情况.方法首先用PCR法筛选HBV DNA阳性血清157例,HBV DNA含量为2.0×103～8.0×108拷贝/ml,HBVDNA阴性血清30例,然后采用TaqMan探针技术和选择性引物的实时荧光PCR对其进行YMDD变异检测.通过变异株和对照管的循环阈值(cyclethreshold,Ct值)差来计算血清中总HBV中的YMDD变异株含量,并用PCR产物直接测序方法随机对69例HBVDNA阳性标本RT区进行基因序列分析,验证所建立方法的准确性.结果 187例接受拉米夫定治疗患者血清标本中,发生YMDD变异88例,其中YIDD变异39例,YVDD变异38例,YIDD与YVDD混合变异11例.突变株的含量为10%～100%.30例HBVDNA阴性血清的C管循环40次,69例测序结果显示68例两种方法检测结果完全相同,符合率为98.55%.结论采用选择性引物和TaqMan探针技术建立实时荧光PCR方法能快速准确地检测YMDD变异情况,并能检测患者变异株在HBV总量中的比例,为临床使用拉米夫定治疗乙型肝炎病毒感染监测耐药性提供一种有效方法。

目的 对双向侧流胶体金法检测丙型肝炎病毒抗体的性能进行评价.方法 选取经重组免疫印迹法(RIBA)检测的标本419例,临床确诊丙肝患者标本107例,临床非丙肝患者标本162例,正常对照人群标本150例,丙肝ELISA阳性参考品2例.对标本分别应用双向侧流胶体金法和化学发光微粒子法测定丙肝抗体,对结果进行统计学处理和分析.结果 对RIBA法确证阳性及阴性样本组测定的结果表明,双向侧流胶体金法敏感度为98.1%,特异度为99.7%;与对照方法(化学发光法)结果相比,总符合率99.0%,检测重复率为大于95%,与甲型肝炎、乙型肝炎、丁型肝炎、戊型肝炎、HIV-1/2阳性不存在交叉反应.结论 双向侧流胶体金法检测性能基本能满足临床常规检测HCV抗体的需要。

目的 探讨肿瘤型M2丙酮酸激酶(TuM2-PK)在肺癌患者血中的表达水平及其临床应用价值.方法 用ELISA法分别检测92例肺癌、77例良性肺部疾病患者和106名健康体检者血浆中的TuM2-PK表达水平,并进行比较分析.结果 TuM2-PK浓度和阳性率分别为肺癌组22.1 U/ml和71%,良性肺疾病组10.5 U/ml和4%,健康对照组8 U/ml和3%,肺癌组明显高于后两组(P＜0.01).Ⅲ、Ⅳ期肺癌患者TuM2-PK阳性率(分别为83%和88%)高于Ⅰ或Ⅱ期肺癌(分别为43%和56%,P均＜0.05);有淋巴结转移患者TuM2-PK阳性率(79%)高于未发现转移患者(35%,P＜0.05).TuM2-PK诊断肺癌的敏感度为71.0%,特异度为96.7%,阳性预测值91.5%,阴性预测值86.8%,准确性88.0%.结论 TuM2-PK对肺癌的辅助诊断有较高的临床价值,并对临床分期、判断淋巴结转移及临床治疗具有一定的指导意义。

目的 探讨散发性特发甲状旁腺机能减退症患者体内是否存在自身免疫性抗体.方法 对散发性特发甲状旁腺机能减退症患者26例、其直系亲属112例以及健康对照者60例,采用间接免疫荧光技术检测抗甲状旁腺自身免疫性抗体,同时检测血清钙、磷、镁、甲状旁腺激素含量.结果 散发性特发甲状旁腺机能减退症患者血清中抗甲状旁腺自身抗体阳性10例,阳性率为38%,明显高于直系亲属的10%(χ2=13.42,P＜0.01)和健康对照者的7%(χ2=13.46,P＜0.01).患者以女性为主(19/26),抗体阴性患者平均病程0.5～7年(中位数为2.2年),较抗体阳性患者平均病程0.5～4.5年(中位数为1.75)有延长的趋势;血清甲状旁腺激素水平在抗体阴性患者中为(7.06±2.06)ng/L,较抗体阳性患者的(8.86±2.86)ng/L有降低的趋势,差异无统计学意义(P=0.74).结论 散发性特发甲状旁腺机能减退症患者体内有抗甲状旁腺的自身免疫性血清学证据,抗甲状旁腺抗体的出现提示该病与自身免疫有关。

目的 探讨ELISA法检测β淀粉样蛋白(Aβ)1-42自身抗体在诊断阿尔茨海默病(AD)中的临床应用价值.方法 用Aβ1-42蛋白片段包被PVC板,使AD患者血清与小鼠抗Aβ1-42IgG形成竞争,以辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠IgG作为二抗体,通过竞争ELISA法测定和比较健康人、高血压性脑栓塞患者及不同年龄的AD患者血清Aβ1-42抗体水平.结果 ELISA检测Aβ1-42自身抗体法的灵敏度约为1 ng/ml,回收率介于96.5%～104.7%之间;对Aβ1-42自身抗体被吸附去除后的人血清以及马血清的Aβ1-42抗体水平＜1 ng/ml.37例AD患者血清Aβ1-42自身抗体水平为(5.1±1.9)ng/ml,明显低于同龄健康人的(12.6±3.3)ng/ml和高血压性脑栓塞患者的(12.5±3.3)ng/ml,差异均有统计学意义(双样本成组等方差t值分别为:6.237、7.973、6.224,P均＜0.01).结论 AD患者可能清除Aβ能力不足,所以血清Aβ1-42自身抗体水平明显偏低。

目的 分析线粒体DNA(mitochondria DNA,mtDNA)变异与2型糖尿病(T2DM)及其并发症的关系,探讨mtDNA检测对于T2DM的诊断价值.方法采用PCR产物直接测序法对浙江籍汉族人群中无血缘关系的315例T2DM患者及158名正常对照个体的mtDNA片段(nt3153～nt3551)进行分析,同时对每例患者作常规生化检测.结果T2DM患者组和健康对照组与标准序列比对存在着大量的基因变异位点,具有中国汉族人的多态性.把患者检测到的变异位点结合临床资料分析发现T3183A、A3243G、T3290C、T3338C、T3398C、G3421A、C3435T等基因变异与糖尿病家族史或并发症有密切联系.比较有家族史和无家族史的有基因变异的T2DM患者,有家族史组发病年龄较无家族史组明显提前[(47.7±11.1)岁与(55.1±13.8)岁,t=2.489,P＜0.05],有家族史组的体重指数(BMI)显著低于无家族史组[(20.59±5.16)kg/m2与(23.82±2.32)kg/m2,t=3.234,P＜0.01],差异有统计学意义;而两组的甘油三酯(TG)[(1.32±0.60)mmol/L与(1.33±0.68)mmol/L,t=0.071,P＞0.05]、总胆固醇(TC)[(4.07±1.23)mmol/L与(4.13±0.72)mmol/L,t=0.277,P＞0.05]、空腹血糖(FBG)[(9.27±2.52)mmol/L与(9.49±3.36)mmol/L,t=0.308,P＞0.05]等差异无统计学意义.结论中国汉族人mtDNA存在多态性,T2DM患者mtDNA中存在着大量的变异位点,尽管mtDNA变异位点与糖尿病特征、家族史或并发症有一定关系,但目前尚不能作为诊断T2DM的独立指标。

目的 探讨粪肠球菌特异的转录调控基因(Ef 0027)在快速准确鉴定粪肠球菌的重要价值.方法经Phoenix 100全自动细菌鉴定系统和API鉴定系统鉴定为粪肠球菌、屎肠球菌、坚韧肠球菌、海氏肠球菌、鸟肠球菌、棉子糖肠球菌、肺炎链球菌、化脓链球菌、金黄色葡萄球菌等110株革兰阳性球菌及大肠埃希菌、绿脓假单胞菌、肺炎克雷伯菌等30株革兰阴性细菌,采用PCR技术分别检测粪肠球菌特异转录调控基因(Ef0027).结果 39株粪肠球菌特异转录调控基因(Ef 0027)为阳性,而其他肠球菌属及其他细菌特异转录调控基因(Ef0027)全部为阴性.结论 聚合酶链反应检测粪肠球菌转录调控基因(Ef0027)为临床快速准确鉴定粪肠球菌提供了一种有效的手段。

目的 研究携带Panton-Valentine杀白细胞素(Panton-Valentine leukocidin,PVL)基因金黄色葡萄球菌所致感染类型.方法 利用多重PCR检测金黄色葡萄球菌临床分离株的PVL基因,应用多位点基因序列分型(multilocus sequence typing,MLST)技术对PVL基因阳性的菌株进行序列分型,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)的SCCmec基因分型采用多重PCR.结果 26株携带PVL基因的金黄色葡萄球菌有13株为ST88,5株为ST239,5株为ST398,ST25、ST30和ST59各1株.20株为医院获得株,主要引起肺部感染和术后伤口化脓性感染;6株为社区感染株,主要引起软组织化脓性感染.7株MSSA全部为ST88,主要引起化脓性感染.而19株MRSA分布在6种ST型中,主要有ST88-SCCmec Ⅲ A、ST239-SCCmec Ⅲ、ST398-SCCmec Ⅳ和ST398-SCCmec Ⅲ.26株菌株分布于14个病区,在产科发生过携带PVL基因的ST88-SCCmec Ⅲ AMRSA克隆株的播散.结论 本院分离的携带PVL基因的金黄色葡萄球菌的序列型主要为ST88、ST239和ST398,既可造成医院感染也可造成社区感染且可能引起克隆株的播散。

目的 利用谷胱甘肽S转移酶(GST)融合基因表达系统表达、纯化及鉴定HEV pb166-GST融合蛋白,为研制戊型肝炎诊断抗原探索新的途径.方法 由本室制备的重组大肠杆菌(E.coli)BL21株,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导HEV pb166-GST融合蛋白表达,用BD Biosience GST蛋白纯化系统对重组蛋白进行纯化,采用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)和Western blot对纯化的蛋白进行鉴定,并对实验条件和结果进行分析.结果 在LB培养液中的E.coli BL21株能稳定、高效表达HEV pb166-GST融合蛋白;纯化后的成分单一,仅在43 000处有表达,该蛋白能被GST特异性抗体识别.结论 我们的方法可获得高效的重组HEV pb166-GST融合蛋白,为进一步研制戊型肝炎诊断性抗原奠定了基础。

猪链球菌2型是一种重要的人兽共患传染病,该病已成为严重影响各国养猪业发展的一种重要疫病,同时也是公共卫生防疫的重点[1-2].不同猪链球菌2型菌株的致病力不同,可分为高致病性毒株、低致病性毒株、不致病性毒株3种,这种致病力差异与各菌株的毒力因子直接相关,猪链球菌的毒力因子较为复杂,已知的毒力因子有溶菌酶释放蛋白(MRP)、细胞外蛋白因子(EF)、溶血素(SLY)、荚膜多糖(CPS)、IgG结合蛋白、毒力相关序列、黏着素等,不同地区分离的猪链球菌菌株,其毒力因子出现的概率也不一样,尚缺乏统一的评价标准[3-7]。

Rh血型系统抗-D所致新生儿溶血病,患儿红细胞做直接抗人球蛋白试验时呈阳性,这时如果用IgM抗-D(盐水法)检查患儿的Rh血型,可能得到假阴性结果,称为遮断现象[1-2].遮断现象致患儿Rh定型假阴性的报道甚少,最近笔者遇到2例,现报道如下。

患者,女,41岁,因反复双侧腮腺肿大6年,口干、眼干4年,外院诊断为"慢性腮腺炎",于2006年8月2日人住本院。

在临床检验工作中,从事某一检验测定或操作某一仪器设备时,都必须遵循一定的操作步骤和要求,才能成功地完成检测并保证质量.将这些必须遵循的操作步骤和要求编写成的书面文件,即通常所说的操作规程.操作规程是检验人员进行正确操作的依据,也是保证检验质量必不可少的技术文件,它和检测仪器、试剂、校准品、质控品一样,是检测系统重要的一个组成部分。

临床实验室检验操作经历了手工操作、半自动分析和自动分析过程.目前,自动生化分析仪以高新技术为基础,以高准确性、精密度、灵活性和高效率为特点,在现代临床实验室中承担大部分的常规工作,成为实验室特别是大、中型实验室必备的检验仪器。

目的 建立一种简单、快速的比色芯片可同时目视化检测HBV DNA和HCV RNA.方法 利用多重PCR方法扩增HBsAg阳性合并抗HCV阳性的患者血清中提取的HBV DNA和HCV cDNA.制备Au纳米颗粒基因探针,检测探针与固定在尼龙膜上的捕捉探针构成双探针,用斑点杂交法检测HBV DNA、HCV cDNA的多重PCR产物,加入银离子(Ag+)-对苯二酚液染色观察结果.结果 多重PCR可同时扩增HBV DNA和HCV cDNA,出现预期的431bp和323bp特异性条带.纳米金比色芯片可以同步目视化检出乙型、丙型肝炎合并感染患者血清中HBV DNA和HCV RNA的PCR产物.结论 目视化HBV、HCV纳米金比色芯片诊断方法操作简单、特异性好、成本低廉、结果判定指标客观,此类基因芯片在病毒基因检测领域将会有广泛用途。

目的 对比BACTEC Plus需氧、厌氧血培养瓶和BacT/ALERT FA需氧瓶、FN厌氧瓶对模拟菌血症标本的检测能力.方法 采用健康献血者的5 ml无菌新鲜血液和定量菌液组成模拟菌血症标本202组,其中112组标本中加入定量抗菌药物以模拟患者接受抗菌药物治疗的情况.比较需氧瓶检测需氧菌、厌氧瓶检测专性厌氧菌和兼性厌氧菌,以及需氧瓶检测含有抗菌药物的需氧菌标本的平均检测时间(time-to-detect,TTD)和阳性率.结果 两种需氧瓶对需氧菌检测阳性率均为100%,对于102、103 CFU/ml两种浓度菌液,BACTEC Plus需氧瓶平均TTD分别为(13.69±3.74)h、(11.54±2.87)h,快于BacT/ALERT FA瓶平均TTD的(16.76±5.62)h、(14.47±4.30)h,两者比较差异有统计学意义(t=-5.674、-7.294,P＜0.01).对于专性厌氧菌,BACTEC Plus氧瓶和BacT/ALERT FN瓶阳性率分别为92%和100%,BacT/ALERT FN瓶的平均TTD分别为(22.60±9.16)h、(22.10±13.46)h,快于BACTEC Plus厌氧瓶平均TTD的(40.24±35.07)h、(34.88±17.34)h,两者比较差异有统计学意义(t=2.389、2.712,P＜0.05).对于兼性厌氧菌,BACTEC Plus厌氧瓶和BacT/ALERT FN瓶阳性率分别为100%和60%,BACTEC Plus厌氧的平均TTD为(13.24±7.82)h、(11.33±7.61)h,明显快于BacT/ALERT FN瓶平均TTD的(16.79±8.00)h、(19.27±14.71)h,两者比较差异有统计学意义(t=-3.440、-2.604,P＜0.05).对含有抗菌药物的需氧菌标本,BACTEC Plus需氧瓶和BacT/ALERT FA瓶阳性率分别为100%和57%,BACTEC Plus需氧瓶TTD多快于BacT/ALERT FA瓶.加人抗菌药物会延长TTD,且延长时间和两种培养的TTD时间差随抗菌药物浓度的增加而延长.结论 应根据患者的情况选择不同的血培养系统和培养瓶.对怀疑需氧菌或兼性厌氧菌感染,以及在进行血培养时已接受抗菌药物治疗的患者,选用BACTEC Plus需氧、厌氧血培养瓶;对怀疑厌氧菌感染的患者选用BacT/ALERT FN厌氧血培养瓶,能够更快地检出病原菌,并提高血培养阳性率。

目的 研究我国多家中心耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)葡萄球菌染色体mec盒(SCCmec)分型,调查金黄色葡萄球菌(SA)中杀白细胞毒素(PVL)、肠毒素SEC、SEH的分布.方法 收集5家教学医院分离的483株SA,琼脂稀释法测定15种抗菌药物MIC,PCR法检测毒素PVL、SEC、SEH,并进一步对MRSA用多重PCR方法进行SCCmec分型.结果 MRSA的平均分离率是53.9%,上海为79.5%、北京为56.4%、沈阳为50.0%、浙江为35.0%、武汉为31.6%,上海与其他医院相比差异有统计学意义(χ2=506.96,P＜0.05).SCCmec分型以Ⅲ型为主(66.7%,范围64.3%～90.3%),但沈阳以Ⅱ型为主(85%),沈阳与其他4家医院分型差异有统计学意义(χ2=335.95,P＜0.05).未检测到Ⅰ、Ⅳ、Ⅴ型.PVL+菌株的平均分离率是6.8%,武汉为15.8%、北京为7.1%、沈阳为5%、上海为2.6%、浙江为2.5%,武汉检出率与其他医院相比差异有统计学意义(χ2=487.24,P＜0.05);PVL+菌株在MRSA中的分离率为5.0%,高于MSSA的9.0%,但差异无统计学意义(χ2=3.01,P＞0.05);门诊分离率为8.9%,高于住院的6.6%,差异有统计学意义(χ2=3.89,P＜0.05).未检测到SEC、SEH.结论 5家教学医院MRSA分离率、SCCmec分型及毒素PVL检出率存在差别.PVL+菌株在病房与门诊的分布存在显著差异,而在MRSA与MSSA中的分布无明显差别。

目的 研究全国7家教学医院临床分离的美罗培南敏感与非敏感鲍曼不动杆菌中碳青霉烯酶类型及其分布特点.方法 收集2005年北京协和医院、北京朝阳医院、解放军第三○四医院和大连、浙江、南京医院临床分离存活的非重复的美罗培南非敏感不动杆菌126株,并分别从北京协和医院、北京医院、浙江、大连、南京5家医院选取美罗培南敏感的19株菌作为对照,采用琼脂稀释法测定这些菌株对美罗培南、亚胺培南等抗菌药物的MIC;用多重PCR、测序等方法分析鲍曼不动杆菌中OXA-23-like、OXA-24-like和OXA-58-like及OXA-51-like 4个亚组的碳青霉烯酶分布特点.结果 收集145株临床非重复的鲍曼不动杆菌,采用多重PCR方法检测出blaOXA-51-like基因127株(87.6%),美罗培南非敏感126株菌中,blaOXA-23-like基因8株,blaOXA-23-like与blaOXA-51-like基因同时存在的65株(51.6%)blaOXA-24-like基因1株、blaOXA-58-like基因3株.以不同医院为单位,依据药敏谱型挑选4种酶型阳性代表株,分别进行全长引物测定,序列分析blaOXA-24-like确定为OXA-72;3株blaOXA-58-like确定为OXA-58;15株blaOXA-23-like确定为OXA-23;13株blaOXA-51-like测序结果12株为OXA-51等位基因OXA-66,1株为OXA-68.结论 研究结果表明OXA-66/OXA-51样碳青霉烯酶以最普遍存在的方式广泛分布于鲍曼不动杆菌中。

目的 了解细菌产碳青霉烯酶及其对亚胺培南、美罗培南等碳青霉烯类抗生素耐药性之间的关系.方法 应用改良Hodge Test和乙二胺四乙酸(EDTA)协同试验法对2003.6～2004.5收集自复旦大学华山医院的耐亚胺培南革兰阴性杆菌进行碳青霉烯酶筛选.blaVIM-1、blaVIM-2、blaIMP-1、blaIMP-2、blaSPM、blaOXA-23为引物进行PCR扩增,并对PCR扩增阳性产物进行DNA测序分析.结果 在75株耐亚胺培南的铜绿假单胞菌中,共检出产VIM-2型金属β内酰胺酶菌株2株(2/75),在10株耐亚胺培南的假单胞菌属细菌中检出2株产VIM-2型金属β内酰胺酶(2/10),均为恶臭假单胞菌;耐亚胺培南的8株弗劳地柠檬酸杆菌和6株不动杆菌中全部分别检出IMP金属酶新亚型和OXA-23型碳青霉烯酶.结论 细菌产碳青霉烯酶是不动杆菌和弗劳地柠檬酸杆菌对亚胺培南和美罗培南等碳青霉烯类抗生素耐药的主要原因之一,但对铜绿假单胞菌而言,产碳青霉烯酶不是导致其对亚胺培南耐药的主要原因。

吴建民 曾任中华检验医学杂志第4届编辑委员会委员.教授、主任医师,博士研究生导师.1943年生,江苏籍.1966年苏州医学院毕业,1981年武汉医学院儿科研究生毕业,获硕士学位,留校任儿科医师,1987-2004年6月任华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科主任;1994年在瑞士苏黎世大学医院临床化学研究所和变态反应哮喘研究所任高级访问学者;2002年底起兼任华中科技大学同济医学院免疫研究所副所长。

编辑同志: 　　收到编辑部转发肖国辉同志的"商榷"一文,我首先表示感谢,我完全同意肖国辉同志的观点并接受批评.我将就谈到的主要内容解释如下。

编辑同志: 　　<中华检验医学杂志>2005年第28卷第5期刊登了<恩施自治州病原菌耐药分析>一文…,对于该文表2中肠球菌的药敏试验药物选择及耐药率,笔者存在不同观点,愿与该文作者商榷。

在临床免疫学和分子生物学技术研究与科技成果加速向临床应用转换的大趋势推动下，各医疗和科研机构实验室的检测技术和检测项目也正面临提高与改进、调整与更新的挑战。为加强学科合作，适时进行临床免疫学和分子生物学技术交流，促进临床工作开展。由中华检验医学杂志编辑委员会、中华医学会检验分会及卫生部临床检验中心共同举办的“全国免疫学与分子生物学技术新进展研讨会暨新技术培训班”拟于2007年6月17日至22日在桂林召开。

为促进我国检验医学（实验诊断学）学术交流与发展，更好地为中青年学者提供展示和交流不同学术观点的平台，发现和培育优秀中青年学术带头人，在广州阳普医疗用品有限公司的鼎立支持下，中华医学会中华检验医学杂志编辑委员会、中华医学会检验分会联合于2005年6月在广州举办了“首届中国检验医学中青年论坛暨中国检验医学阳普杯优秀论文奖评选活动”，论坛达到了预期目的，一批检验界中青年人才脱颖而出。