2005年 · 第28卷第06期

乙型肝炎病毒(HBV)感染引起的慢性肝脏疾病仍然是我国主要的传染病.1979年首次完成HBV DNA的克隆化之后,随着对更多的HBV DNA全基因或基因片段的克隆和序列分析,发现不同患者感染的HBV DNA序列存在差别,而且不同基因序列的HBV感染机体后产生的抗体应答的性质也存在显著的差别,因此,根据HBV感染之后抗体应答性质的差别,将HBV分成不同的血清型(serotype);根据HBV DNA基因序列的不同,将HBV分成不同的基因型(genotype).临床研究结果表明,不同血清型和基因型的HBV感染的流行病学特点、临床表现、预后、抗病毒治疗的应答等存在显著的不同.这仅仅是认识到不同患者感染的HBV存在异质性(heterogeneity),但是对同一患者血清中存在的不同拷贝的HBV的基因序列究竟是否存在差别及其意义如何,一直没有引起人们的广泛重视.实际上,每一个患者血清中都存在大量拷贝的HBV,每一拷贝的HBV DNA序列不尽相同,表现出准种(quasispecies)的特点[1,2]。

2004年在临床实验室标准化研究所/美国临床实验室标准化委员会(CLSI/NCCLS,CLSI)出版的抗生素敏感试验实施标准M100-S14手册的最后一章总结及答疑[1,2]中写道:"超广谱β内酰胺酶(ESBLs)确证试验阳性时,产ESBLs菌要报告含头孢吡肟在内的所有青霉素类、头孢菌素类及氨曲南耐药.M100-S14手册还强调当前仍然坚持3细菌,即大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌适用于ESBL确证试验规则,不能扩大到3细菌之外. 但正在讨论重新评估肠杆菌科菌对β内酰胺药的折点,例如:正考虑头孢噻肟的敏感折点由≤8 μg/ml降为≤1或≤2 μg/ml,但目前数据尚不足,CLSI改变一个折点费时3年,还需要大量经费."2005年CLSI 出版的M100-S15手册[3,4]中,的确增加了奇异变形杆菌作ESBL确证试验。

血液筛查质量的高低,直接关系到受血者的安全.目前,国内采供血机构针对感染性疾病病原体筛检的标志物共有4种,即乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、丙型肝炎病毒抗体(抗HCV)、人免疫缺陷病毒抗体(抗HIV)和梅毒抗体.主要采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测,方法模式有一步双抗体夹心法、间接法和一步或两步双抗原夹心法等.所使用的仪器设备主要有酶标仪、洗板机、全自动酶免疫分析系统和全自动加样系统等.尽管国内采供血机构的血液筛查检测质量在不断提高,但在不同层次的采供血机构,仍不同程度的存在一些时常困扰基层实验室工作人员的问题。

目的 分析丙型肝炎病毒抗体试剂检测结果的可信度.方法利用研制第5套抗HCV国家参考品过程中所搜集到的283份样品,用国内2家和国外4家公司生产的6种抗HCV试剂检测.6种试剂检测结果不一致的样品,用HCV RIBA试剂和HCV RNA PCR试剂作进一步确证,对结果进行综合分析.结果 6种抗HCV试剂阳性符合率均＞93%,阴性符合率、总符合率均＞96%.6种抗HCV试剂曾出现19份假阳性样品,国外的3种抗HCV EIA试剂(DS, M4,O3)所出现的4份假阳性样品其S/CO值均＜3.8,化学发光试剂(OF)所出现的8份假阳性样品除1份S/CO值为7.57以外,其余7份亦均小于3.8. 国内2种抗HCV EIA试剂假阳性样品S/CO值范围分布较广,9份样品S/CO值大于3.8,6份样品S/CO值在3.8和1.0之间.6种抗HCV试剂曾出现5份假阴性样品的S/CO值在0.42～0.98之间,大多数假阴性样品的S/CO值在0.50～0.98之间.结论美国CDC对美国市场所用抗HCV EIA试剂检测可信度的分析[1]适用于国内市场上进口的抗HCV EIA试剂.而国产抗HCV EIA试剂假阳性样品S/CO值范围分布较广,对于国产抗HCV试剂可信度的S/CO值界限不应机械的套用美国CDC规定.对于国内外抗HCV EIA试剂检测时S/CO值＞0.5,＜1.0的高值阴性样品应注意是否为漏检。

目的 HBeAg阴性的乙肝患者在逐年增加,识别这些HBeAg阴性的乙肝患者有无病毒的复制,对于判断病情与指导治疗都有重要的意义.本研究旨在分析前s1抗原在诊断慢性乙型病毒性肝炎患者病毒复制中的作用.方法收集本院门诊慢性乙型病毒性肝炎患者血清标本65例,均经肝活检病理检查证实.检测了血清乙肝标志物、Pre-S1Ag及HBV-DNA.免疫组化法检测了HBsAg、HBcAg与Pre-S1Ag在肝组织的表达.结果 HBsAg、Pre-S1Ag主要在胞质表达,HBcAg一部分在胞质内表达,一部分在胞核内表达.三者的表达阳性率分别为78.4%(51/65),69.2%(45/65)与67.6%(44/65).HBcAg与Pre-S1Ag的阳性表达率略低于HBsAg,Pre-S1Ag与HBeAg的表达几乎是平行的,经χ2检验,P=0.736,无统计学差异.以乙肝病毒HBV-DNA≥103拷贝/毫升为判断乙肝病毒存在复制的标准,HBV-DNA与Pre-S1Ag的阳性率无统计学差异(P=0.059),而HBV-DNA与HBeAg的阳性率有统计学差异(P=0.000).30名HBeAg阴性的患者,18名患者HBV-DNA阳性,14名患者Pre-S1抗原阳性.说明30名HBeAg阴性的患者有18名存在病毒复制,在此组患者中HBV-DNA与PreS1Ag的阳性率无统计学差异.4例发生前C区变异的患者HBV-DNA含量≥103拷贝/毫升,PreS1Ag均阳性,HBeAg均阴性.结论 Pre-SlAg是诊断乙肝病毒复制的非常有价值的血清学指标。

目的 分析急、慢性马兜铃酸肾病的临床与病理学特点,探讨其慢性化的病理学机制.方法回顾性分析26例明确诊断为马兜铃酸肾病患者的临床与病理资料,依照病理特点分为急、慢性组,应用免疫组织化学方法观察患者肾活检组织标本中III型胶原、I型纤溶酶原激活物抑制因子(PAI-1)、基质金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达.结果 26例马兜铃酸肾病患者,急性组11例,慢性组15例(其中女性12例,男性3例).慢性组用药时间[(142.3±52.7)个月]明显长于急性组[(4.5±2.7)个月],在临床指标上合并高血压的比例高、收缩压水平高[慢性组平均收缩压(156.7±32.4)mm Hg(1 mmHg=0.133 kPa),急性组平均收缩压(127.3±24.2 )mm Hg ]贫血重、尿蛋白少(P值均< 0.05);在病理改变上球性硬化、间质纤维化、肾小管萎缩、血管损伤的程度重(P值均< 0.05);间质、肾小管上皮细胞III型胶原、PAI-1 、TIMP-1表达明显增强(P值均<0.05).结论急、慢性组马兜铃酸肾病患者临床与病理特点不同;PAI-1 、TIMP-1在其慢性化进展中可能起重要作用。

目的 研究谷氨酸脱羧酶抗体(GAD-Ab)和蛋白酪氨酸磷酸酶-2抗体(IA-2A)检测的标准化,为合理选择检测方法及准确判定结果提供依据.方法应用国际糖尿病免疫学会(IDS)推荐的WHO单位制,采用放射配体法检测125名健康人的GAD-Ab和IA-2A以确定阳性判断标准,通过检测IDS第3次糖尿病自身抗体标准化检测方法评估(DASP 2003)工作组提供的100名健康对照及50例新发1型糖尿病患者血清,验证其灵敏度与特异性.并采用新一代的ELISA试剂盒检测41例已知抗体滴度的标本,对比ELISA与标化后放射配体法的一致性.结果 GAD-Ab的阳性阈值为18.5 U/ml,IA-2A为2.7 U/ml.DASP 2003反馈结果显示,本室GAD-Ab检测的灵敏度82 %,特异性98 %;IA-2A检测的灵敏度64 %,特异性100 %;受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,本室GAD-Ab曲线下面积(AUC)以及统一按95 %特异性标化后的灵敏度(AS95)分别为0.946%及86%,IA-2A分别为0.824%及68 %.在52个回报结果的实验室中综合排名第15位.ELISA试剂盒与标化后的放射配体法检测GAD-Ab的一致率82.9 %,Kappa值0.656;检测IA-2A的一致率75.6%,Kappa值0.514;结果判定不一致者多集中在阳性边缘水平的标本中.结论经标准化后的GAD-Ab和IA-2A放射配体法灵敏度和特异性明显提高;新一代ELISA试剂盒检测GAD-Ab和IA-2A可应用于临床,但对于检测结果阴性而临床可疑者,建议采用放射配体检测法核实。

目的 比较肌肉、血液和毛球线粒体DNA(mtDNA)的异质性多态水平,探讨毛球在线粒体相关疾病基因分析中的应用价值.方法收集50名无血缘关系汉族个体的肌肉、血液和毛发标本,采用聚合酶链反应(PCR)扩增mtDNA的高变区Ⅰ(HVⅠ)16033-16368bp片段并测序,比较3种不同组织的异质性多态水平.同时采用PCR-限制性长度多态性(RFLP)检测3例线粒体脑肌病合并乳酸血症及卒中发作综合征(MELAS)患者的mtDNA tRNAleu基因nt.3243(A→G)突变,比较不同组织的突变检测率.结果肌肉标本异质性检测率为18%(9/50),毛球为16%(8/50),两者较接近,但均明显高于血液的10%检测率(5/50).3例MELAS患者的肌肉和毛球标本均检出A3243G突变,仅两例患者的血液标本中检出此突变.结论毛球mtDNA的异质性多态水平接近肌肉,高于血液;毛球标本的线粒体点突变检测率高于血液,因此在线粒体相关疾病的基因分析中具有较高的临床应用价值。

目的 用我们研制的一种新人巨细胞病毒(HCMV)重组被膜磷蛋白pp65为抗原,建立快速、简便和特异的检测HCMV IgM 的间接酶联免疫吸附法(REC-ELISA).方法用自行设计、表达的新的HCMV pp65重组抗原,建立REC-ELISA,并检测100份临床疑似为HCMV感染者血清中HCMV-IgM,同时与全病毒为抗原的间接ELISA法(简称全病毒-ELISA法)和美国BioCheck试剂盒(简称BioCheck法)检测结果进行比较.结果 REC- ELISA法重组抗原最适量为3.5 μg/孔,HRP标记二抗为1∶ 800,血清稀释度为1∶ 100; 稳定性试验阳性变异系数(CV)为9.5%,重复性试验平均CV值:批内CV 4.5%,批间CV 9.6%.REC-ELISA法、全病毒-ELISA法和BioCheck法检测HCMV IgM的阳性率分别为44%、50%和45%;REC-ELISA法的敏感性为95.6%,其特异性(98.2%)高于全病毒-ELISA法(90.9%);正确指数为92.8%,与BioCheck法一致性为97.0%.结论用pp65重组抗原建立的REC-ELISA法具有高度特异性与敏感性,且操作简单、快速,重复性好;与全病毒抗原相比,重组抗原可规模化、标准化生产,且更安全、经济,具有良好的临床应用前景。

目的 与血清肌酐(SCr)、肌酐清除率(Ccr)比较,评价血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cystatin C)在2型糖尿病患者肾小球滤过功能改变中的临床应用价值.方法以99mTc-DTPA清除率测得的肾小球滤过率(GFR)作为诊断评价的金指标,比较Cystatin C、Scr、Ccr与GFR的相关性,用受试者工作特征曲线(ROC)评价上述指标检测肾小球滤过功能的准确性.结果 51例患者血Cystatin C、Scr 及Ccr与99mTc-DTPA清除率相关系数分别为-0.744、-0.658、0.625 (P值均 < 0.001).3项指标ROC曲线下的面积(AUC)分别为0.891、0.77、0.753,且Cystatin C 与Ccr两者间的AUC差异有统计学意义(P<0.05 ).ROC曲线阈值移动发现血清Cystatin C判定肾小球滤过功能减退的最佳诊断界值(cut off值)为1.02 mg/L,此时诊断的灵敏度和特异性分别为 92.3 %、68.4 %,而以SCr参考值上限(133 μmol/L)和Ccr的参考值下限(80 ml/min)为cut off值,则不能同时得到理想的诊断灵敏度和特异性.结论 Cystatin C是一较理想的反映GFR血清标志物, 建议在常规检测SCr、Ccr的基础上,联合应用Cystatin C可更早地发现2型糖尿患者GFR的改变。

目的 评价血细胞分析仪自动计数外周血有核红细胞(NRBC)的方法学特点,并探讨其临床应用价值.方法选择115例血液病及非血液病患者,用Sysmex XE-2100全自动血细胞分析仪及显微镜计数法计数其外周血中NRBC数量.结果 Sysmex XE-2100与显微镜计数法计数外周血中NRBC数量有极好的相关性(r>0.97),并且2种方法的计数结果差异无显著意义(P=0.201 8).高值、中值和低值NRBC标本绝对计数的批内CV平均<6.5%.在(0～15)×109/L范围内计数NRBC有极好的线性(r=0.999 8).Sysmex XE-2100自动计数外周血中NRBC的灵敏度和阴性预测值均为100%.外周血中NRBC增高时,WBC显著高于去除NRBC的计数结果(P=0.016 8).结论 Sysmex XE-2100血细胞分析仪可灵敏、准确、精密地自动计数外周血中NRBC,并且可在NRBC增高的标本中准确计数白细胞数量.除白血病、贫血等血液病患者外,非血液病(如肿瘤化疗)等患者外周血中也可出现NRBC.血细胞分析仪自动计数外周血中NRBC,有助于一些血液病及非血液病患者的筛查与诊断。

目的 建立人乳腺癌相关基因组织型激肽释放酶基因家族成员Kallikrein6 (klk6)mRNA荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-PCR)检测方法,以检测正常乳腺和乳腺癌组织中klk6基因表达水平.方法以GAPDH作参照,用SYBR Green I荧光定量技术,建立检测klk6 mRNA的FQ-PCR方法;并检测32份正常乳腺和乳腺癌组织标本的循环阈值(Ct),然后,通过REST软件分析klk6 mRNA的表达水平.结果 FQ-PCR方法对GAPDH和klk6 mRNA的扩增效率分别为0.90和0.95,批内变异系数(CV)分别为1.0%～2.1%和0.8%～1.2%,批间CV分别为3.2%和3.9%.正常乳腺和乳腺癌组织的klk6对GAPDH的相对表达量分别为0.017±0.009和0.040±0.017.用REST软件分析,提示乳腺癌组织klk6表达水平上调.结论建立的klk6 mRNA FQ-PCR检测方法简便,特异,重复性好,可信度高,可用于klk6基因表达水平与肿瘤相关性研究。

目的 了解临床常见毛孢子菌的生物学特征,为临床鉴定菌种以及诊治疾病提供依据.方法对临床分离的毛孢子菌以及已知的标准菌株进行形态学以及生理学的分类鉴定;扩增rDNA基因内转录间隔区(ITS1区以及ITS2区),序列测定,鉴定菌种;测定常见抗真菌药物对毛孢子菌的最低抑菌浓度,了解毛孢子菌对药物的敏感性.结果 16株菌中的6株最终鉴定为阿萨希毛孢子,其余皮瘤毛孢子、皮毛孢子、真皮毛孢子各1株,头状地霉菌5株,另有2株无法鉴定到种.药物敏感性试验结果显示,大部分受试菌株,包括阿萨希毛孢子菌、头状地霉菌、皮毛孢子菌以及皮瘤毛孢子标准株对于伊曲康唑、特比萘芬及两性霉素B均不敏感.结论临床毛孢子菌株以阿萨希毛孢子最为常见.形态学是区别毛孢子菌属的基础;对于临床实验室而言,rDNA ITS区序列测定是一种较好的鉴定方法.临床上治疗严重深部毛孢子菌感染患者时,最好采用大剂量联合治疗方案,尤其是联合使用不同作用机制的抗真菌药物,有利于提高患者免疫力。

目的 应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS)从肝癌患者血清中筛选标志蛋白,找出最佳的标志蛋白组合模式作为临床诊断指标.方法采用WCX2芯片及SELDI-TOF-MS技术对34例肝癌患者及34例健康对照组血清进行蛋白质指纹图谱检测分析,所得到的结果采用Biomarker Wizard和Biomarker Patterns System软件分析.结果发现肝癌患者和健康对照组血清蛋白质指纹图谱之间有17个稳定的标志蛋白,其中有6个标志蛋白在肝癌患者血清中高表达,11个标志蛋白在肝癌患者血清中低表达.分析系统筛选出13 752Da及11 472Da标志蛋白建立起一个肝癌的诊断模型,对肝癌的诊断特异性为97.06%,敏感度为91.18%,及阳性预测率为96.88%.结论 SELDI-TOF-MS技术的特异性及敏感度远远高于目前所采用的某一单独的标志物的血清学诊断,其结果对进一步研究肝癌的蛋白质组学改变及其临床应用可能具有重要意义。

目的 探讨用氢化可的松(HC)和环孢菌素A(CsA)处理异基因骨髓后移植的检测及是否能减轻移植物抗宿主病(GVHD)的发生率与严重程度.方法 C57BL/6(H-2b)小鼠,移植当天接受60Coγ射线全身照射(TBI 8.5Gy),实验组移植物为经HC和CsA处理供鼠BALB/C(H-2d)小鼠的骨髓细胞(5×107)和脾细胞(2×107),移植后2 d腹腔注射环磷酰胺(200 mg/kg),观察小鼠的存活及GVHD的发生情况.结果未移植的对照组小鼠在12 d内死亡,生存时间(8.9±1.7)d;接受未经药物处理移植物的小鼠均在移植后18 d内死亡,生存时间(16.1±1.8)d,均死于GVHD;接受药物处理的骨髓细胞和脾细胞组小鼠生存时间(45.1±12.8)d,30 d存活率90%,50 d存活率60%,未观察到GVHD表现.结论采用HC和CsA两药联合处理异基因骨髓和脾细胞后再输注,可有效的减轻GVHD,同时避免了其毒副作用,为临床提供了可供借鉴的实验依据。

目的 调查北京、广州地区不动杆菌属对碳青霉烯类的耐药性,确定其耐药株产生的碳青霉烯酶的基因型.方法用WHONET-5软件分析1999-2002年北京、广州两地不动杆菌的耐药性;从北京、广州4家医院收集对亚胺培南耐药且具有多重耐药性的不动杆菌39株;等电聚焦电泳测定酶的等电点;碱裂解法提取质粒;脉冲场凝胶电泳(PFGE)确定耐药株的亲缘关系;对TEM、SHV型基因及碳青霉烯酶基因OXA-、IMP-、VIM-进行聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)及序列分析.结果近4年北京协和医院分离的鲍曼不动杆菌对亚胺培南的耐药性在1.8%～8.5%之间.多重耐药(即3种以上的抗生素耐药)的菌株从1995年的5%升至2002年的67%,最常见的多重耐药模式为同时对头孢他啶、庆大霉素、哌拉西林/三唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦及环丙沙星耐药的菌株(占44%).广州中山医科大学附属第一医院多重耐药株从1998年的20%升至2002年的57%,同时对上述4～5个药耐药的达35%.39株亚胺培南耐药株均不含质粒,接合试验证实亚胺培南的耐药基因不能转移.所有测定菌产多种β内酰胺酶:TEM-1酶、高产AmpC酶、SHV型酶及pI为6.7, 6.0的2个酶.PCR及序列分析证实35株菌产生OXA-23型碳青霉烯酶(pI为6.7),有3株携带PER-1型酶.PFGE发现在4家医院均有耐药株的克隆传播,并且常见于医院呼吸机相关肺炎及外科术后感染.结论北京、广州两地对亚胺培南耐药的不动杆菌,绝大多数产生OXA-23型碳青霉烯酶,亚胺培南耐药株的增加主要由耐药克隆株播散所致。

目的 研究多重耐药阴沟肠杆菌017对β内酰胺类抗菌药物耐药的机制 .方法使用双纸片扩散法和改良三相试验对阴沟肠杆菌017进行β内酰胺酶的表型检测,并用聚合酶链反应(PCR)扩增β内酰胺酶基因,对PCR产物进行测序确定基因型别.结果阴沟肠杆菌017经双纸片扩散法证实产超广谱β内酰胺酶(ESBLs),经三相试验证实该菌除了产ESBLs外,还同时产AmpC酶.PCR产物经测序长度为579 bp,与GENEBANK的PAPER1A基因序列100%符合,确定为PER-1基因.结论阴沟肠杆菌017耐β内酰胺类抗菌药物的主要原因是PER-1型 ESBLs和AmpC酶所致。

目的 对卡他莫拉菌BROβ内酰胺酶进行分型分析,并对其与抗菌药物耐药的关系进行探讨.方法采用BSAC(british society for antimicrobial chemotherapy, BSAC)琼脂稀释法对本院呼吸道感染患儿鼻咽部分离的80株卡他莫拉菌株进行8种药敏试验,用Nitrocefin纸片检测β内酰胺酶,采用限制性内切酶分析方法进行bro 基因分型,同时将bro-1基因阳性和bro-2基因阳性菌株对β内酰胺类抗菌药物的耐药性进行比较.结果 (1) 80株卡他莫拉菌β内酰胺酶阳性率为95.0%.对氨苄西林MIC90为32 μg/ml,对头孢呋辛、头孢克洛和头孢噻肟的MIC90分别为4、8、1 μg/ml,对四环素的MIC90为16 μg/ml;环丙沙星为最敏感的抗菌药.(2)80株卡他莫拉菌bro基因分型结果:6株(7.5%)bro阴性,55株(68.8%)bro-1阳性,19株(23.8%)bro-2阳性.其中有2株bro基因阴性经Nitrocefin纸片法检测,β内酰胺酶结果为阳性,其他菌株基因检测与产酶结果一致.(3)bro-1阳性菌株对氨苄西林、头孢克洛的MIC90值与bro-2阳性菌株相比,有不同程度的升高.结论我国儿童携带的卡他莫拉菌产酶率高,对氨苄西林高度耐药.目前应加强该菌对头孢类和四环素的耐药监测.限制性内切酶分析方法在检测bro基因、筛选卡他莫拉菌对β内酰胺类抗生素的耐药及分子流行病学调查方面有一定的应用价值。

目的 探讨利用孕妇血浆中游离胎儿DNA进行非创伤性产前诊断胎儿RhCcEe血型的方法.方法采用QIAamp DNA Kit抽提孕妇血浆DNA,利用SRY基因确认胎儿DNA的存在,通过PCR方法扩增30例孕妇血浆中胎儿DNA以检测胎儿RhCcEe基因,并对产前孕妇外周血和产后婴儿外周血进行RhCcEe血清学表型分析,回顾性评价胎儿基因分型结果的准确性.结果 30例样本中,13例母子表型完全相同,17例存在区别.当母亲表型为RhCC、cc、EE、ee纯合子时,均成功扩增出母亲所缺少的c、C、e、E基因.结论本研究建立的非创伤性产前诊断胎儿RhCcEe基因型的方法是可行的,当母亲为纯合子时,血浆中胎儿RhCcEe基因分型具有临床意义,可用于新生儿溶血病的预防和诊断.

近几年来,经常发现临床病人反复感染,但是找不到病原菌.最近我室会诊了1例老年病人,因反复下呼吸道感染,3次住院、出院,均未治愈.原就诊医院在痰标本中,始终未发现致病菌,仅凭经验使用多种抗菌药物,效果不佳。

条形码技术自美国N.J.Woodland于1949年申请专利至今,以其准确、惟一和高效性在商业、工业及医院等行业的信息管理中得到广泛应用及全面发展[1].UPC码在1973年由美国超市工会推行,是世界上第一套商用的条形码系统,主要应用在超市与百货业.90年代开始将条形码信息管理技术应用于实验室,由于此项技术的应用使标本在分析前出现误输误读的几率减少至零,这对医院的信息化管理无疑是一项新的创举.目前国内一些医院开始采用条形码技术,大多采用预制条码标签和打印黑白条码标签的方式[2].我院结合检验科的实际情况,采用上海科华公司最新研制,并已申请国家专利保护的实验室彩色条码管理信息系统(2004年9月13日受理,专利受理号:200420082770.7)实现检验无纸化流程。

为了解我院从临床标本中分离的念珠菌对常用抗真菌药物的敏感性情况,以期为临床正确选择抗真菌药物和有效控制念珠菌感染提供依据,测定了4种常用抗真菌药物对从临床标本分离的226株念珠菌的最低抑菌浓度(MIC)。

朗格罕组织细胞增生症(LCH)是介于良恶性之间,由Langerhans细胞的异常增生所致的一组病变,是一种非典型的细胞增殖性疾病[1].文献报道极少.我院收治1例成人LCH.现就骨髓形态诊断分析如下。

随着人们对肝炎病毒感染疾病意义的认识不断加深,临床抗病毒药物研发也在不断发展,同时快速发展的分子生物学及相关技术促进了对乙型肝炎病毒(HBV)和丙型肝炎病毒(HCV)临床检测的发展。

实验室反映肝功能的酶学指标在肝病诊断治疗中一直都起着重要的作用,其中有一些已成为临床不可缺少的常规指标,随着它们的广泛开展和使用,促进了对它们的认识;还有一些指标由于在一段时期内受检测方法限制,未能得到普及.近年来随着检测方法的改进,使得它们在临床上的应用成为可能,也使得临床和实验室工作者对这些指标的临床价值有了新的认识.现将近几年来国内外对肝病实验室酶学指标临床应用研究进展综述如下:

如何实现致病菌的快速有效检测,是长期困扰临床的问题,有的细菌极难培养,如嗜肺军团菌,有的细菌生长缓慢,如结核分枝杆菌,还有麻风杆菌、炭疽杆菌等少数无法培养或者致病力很强的菌种.常见细菌用传统培养方法的检测时间大约为3～5 d,临床亟待更加快速准确的检测方法.基于聚合酶链反应(PCR)扩增的基因诊断技术备受青睐,尤其是基于细菌核糖体16S小亚基(16SrRNA)的基因(16SrDNA)的分类鉴定引起了广大科研工作者的重视。

B淋巴细胞刺激因子(BLys)是肿瘤坏死因子(TNF)超家族的新成员,属Ⅱ型跨膜蛋白,其通过与细胞表面的3个受体--B细胞成熟抗原(BCMA)、穿膜蛋白活化物(TACI)和B细胞活化因子受体(BAFF-R)结合而广泛参与B、T淋巴细胞增殖和功能调节.BLys缺乏可导致免疫功能低下,在体外其过量表达能促进多种B系肿瘤细胞的生长,在BLys转基因小鼠中可出现严重的红斑狼疮样症状[1,2].现综述介绍BLys及其受体的分子结构、生物学活性以及与自身免疫性疾病和肿瘤等发生与发展的研究进展。

一、传统的单克隆抗体及其应用 　　1975年德国学者Kohler和美国学者Milstein将小鼠骨髓瘤细胞和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞在体外进行两种细胞融合,形成的部分杂交瘤细胞(hybridoma),既具有大量无限生长的特性,又具有合成和分泌抗体的能力.它们是由识别一种抗原决定簇的细胞克隆所产生的均一性抗体,称为单克隆抗体(monoclonal antibodies,McAb),从而开创了抗体技术的新纪元,被称为第二代抗体.它的特点是特异性针对单一抗原决定簇,理化性状高度均一、生物活性单一,与抗原结合的特异性强,便于人为处理和质量控制,并且来源容易.这些优点使它一问世便受到高度重视,并广泛应用于生物学和医学研究领域.

我院2004年和2005年先后收治2例转诊患儿,其中1例患儿7岁;另1例患儿4岁.两例患儿均有发热(不规则发热,体温达40.30℃),咳嗽,X线胸片示:两肺感染.在当地医院诊断为:支气管肺炎.采用头孢噻肟、头孢唑啉、庆大霉素、环丙沙星等抗生素治疗无效,转入我院小儿科.复查X胸片显示:肺部感染.心率94～98/min,白细胞:18.0～25.0×109/L.临床应用去甲万古霉素治疗无效果.检验科加做血培养(BACTEC9050,美国BD公司,儿童树脂培养瓶),分离出真菌,墨汁染色:镜下可见胶状宽厚荚膜(图1).同化试验:葡萄糖(+)、麦芽糖(+)、蔗糖(+)、乳糖(-)、半乳糖(+)、蜜二糖(-)、木糖(+)、棉子糖(+)、蕈糖(+);发酵试验:葡萄糖(-)、麦芽糖(-)、蔗糖(-)、乳糖(-)、半乳糖(-)、蕈糖(-);尿素分解试验(+);生芽试验(-);37℃生长.临床确诊:新型隐球菌败血症、肺炎.其中1例患儿因失去了治疗机会,于发病1个月后死亡.另1患儿,因治疗及时,病情得以控制,治愈出院。

美国BD(Becton Dickinson and Company)公司是一家著名的专业医疗设备及医疗技术公司,成立于1897年,总部设于美国的新泽西州,在全球98个国家和地区设有办事处和分支机构,全球雇员二万四千人,2003年营业额为48亿美元,投入新技术研究的经费为近3亿美元,位居美国<财富>周刊五百强。

葛兰素史克公司,由葛兰素威康和史克必成强强联合组成,于2000年12月成立.两家公司的历史均可追溯至19世纪中叶,各自在1个多世纪的不断创新和数次合并中,在医药领域都处于世界级领先地位.两个制药巨人的成功合并,为21世纪的葛兰素史克成为行业中无可争议的领导者奠定了坚实的基础.公司总部设在英国,以美国为业务营运中心.公司在世界37个国家拥有85个生产基地,拥有1 400多个产品,28 000多种剂型,产品远销160个国家和地区,在全球117个国家拥有10万余名即掌握专业技能又有奉献精神的出色员工。

尿有形成分检查又称尿沉渣检查(examination of urinary sediments),是将新鲜尿离心后,经显微镜检查尿沉淀物中各种有形成分的检查方法[1].由于仪器分析进展,现代的尿有形成分检查可采用不离心法,用激光荧光染色及流式分析的分析方法,(Sysmex UF50,UF100)或使用计算机图像自动识别系统(Iris IQ200)来计数尿中各种颗粒,因而又可称为尿中颗粒计数法(particle analysis)[2].目前国内大多数医院实验室仍习惯于传统的普通显微镜检查法,由于在尿中可存在多种有形成分如细胞类、管型类、微生物类、结晶类等,为了进一步识别及鉴别这些成分除用普通光学显微镜外还有相差显微镜、偏光显微镜、荧光显微镜、干涉显微镜及电子显微镜等检查,而在普通显微镜检查又可分为染色法及非染色法。

由中华医学会中华检验医学杂志编辑委员会主办的"全国肝病实验室诊断与临床专题学术会议"于2004年11月12～14日在广西北海召开.会议共收到论文180多篇.来自全国各地的检验医学和肝病学专业的100多位代表出席会议.中华医学会副会长、中华传染病分会副主任委员、浙江省卫生厅厅长李兰娟教授,中华医学会检验分会主任委员、本刊总编辑丛玉隆教授,本刊顾问、北京大学人民医院肝病研究所陶其敏教授,中华医学会传染病分会副主任委员、北京地坛医院院长助理成军教授,解放军302医院杨守纯教授,卫生部临床检验中心李金明教授,首都医科大学附属北京佑安医院临床检验中心闵福援教授,浙江大学附属第一医院感染科阮冰教授,北京地坛医院肝病科谢尧教授,贵阳医学院附属医院副院长程明亮教授,广西医科大学附属第一医院临床医学实验中心秦雪教授,解放军302医院临床检验中心毛远丽主任以及浙江大学附属第一医院陈瑜博士等出席会议并作专题报告。

受卫生部医政司委托,由卫生部临床检验中心主办的糖化血红蛋白测定标准化工作研讨会于2005年3月31日在北京举行,来自北京、上海等地的检验和临床专家32人参加了会议.卫生部临床检验中心申子瑜主任致开幕词,对此次会议的意义做了说明.北京大学人民医院内分泌科主任纪立农教授发言阐述了糖化血红蛋白的生理和病理,及其测定结果的临床意义;卫生部北京医院检验科主任、卫生部临床检验中心副主任郭健研究员介绍了我国糖化血红蛋白检测的现状、检验结果质量评价的情况,及开展标准化工作的设想和进程;来自美国Baylor医学院儿童医院病理科的Ching-Nan Ou博士介绍了糖化血红蛋白测定方法中存在的问题和国际上进行糖化血红蛋白测定标准化工作的情况.大会报告后,与会代表进行了认真、热烈地讨论,一致认为,糖尿病患者在我国人数众多,他们的医疗和生活质量应当受到社会的高度关心.由于糖化血红蛋白测定在糖尿病诊治过程中有着重要的作用,进行标准化工作是检验结果质量和溯源性的重要保证,也可为我国社会医疗保障事业做出贡献.大家认为,我国进行糖化血红蛋白测定标准化工作,应该采用国际临床化学学会(IFCC)推荐的模式,应在卫生部临床检验中心建立国家级标准(参考)测量方法,并在全国范围内组成标准(参考)实验室网络.代表们建议:

答：获得性血友病A是指非先天性的血友病的患者体内产生了抗因子Ⅷ的抗体，使因子Ⅷ的水平严重降低而引起的一种罕见的出血性疾病。患者合成因子Ⅷ的能力正常，但测定因子Ⅷ：C常常很低。多见于老年人和青年人，可发生在女性。临床出血症状与血友病相似，常表现为肌肉等软组织血肿，但一般不出现关节出血。实验室检查活化部分凝血活酶时间(APTT)明显延长，且不能被正常血浆纠正，

答：淋巴瘤病情进展侵犯骨髓及外周血时称白血性淋巴瘤，此时其临床及实验室特点与急性淋巴细胞白血病(ALL)极其相似，可从以下几点加以鉴别：(1)白血性淋巴瘤在病程初期未侵犯血液系统时可表现淋巴瘤典型临床特征，而骨髓及外周血象基本正常；ALL的贫血及血小板减少则更为明显。(2)从形态上白血性淋巴瘤的肿瘤细胞聚集成堆分布或散在分布，

答：为保证输血安全，我国采取了以下提高输血安全的措施：(1)建立国家协调的采供血机构和质量体系；(2)从低危人群的无偿献血者中采血，即控制血源的质量；(3)严格筛检血液；(4)根据只给需要输血患者输他需要的血液成分的合理用血原则，合理用血，减少不必要的输血。

问：什么是粒细胞、红细胞爰巨核细胞的“病态造血”？

第三届亚洲大洋洲免疫学联盟学术会议于2005年4月18日至22日在杭州召开,25个国家和地区的近900名代表出席了这届规模盛大的国际免疫学学术交流会议.此次会议学术交流内容丰富,形式多样,两位诺贝尔奖获得者Rolf M.Zinkernagel博士和Peter Doherty博士作大会主报告,各大洲23个国家的103名国际免疫学界的著名专家学者参会作专题和分会报告,每天还有百余篇墙报进行交流。

编辑同志：您好!我是《中华检验医学杂志》忠实的读者，毕业于解放军第三军医大学医学检验专业，现在北京工作。首先，非常感谢编辑老师能够提供这样优秀的杂志服务于我们读者。

为提高临床免疫学检验诊断技术及实验室质量管理水平，促进临床免疫学检验诊断新技术的普及和应用，使我国临床免疫学检验诊断领域尽快与国际先进水平接轨。由中华医学会中华检验医学杂志编辑委员会与中国医学院中国协和医科大学北京协和医院主办，定于2005年10月15日至20日在北京举办“第二届全国临床免疫学检验诊断新技术临床应用进展高级培训班”(2005年中华医学会继续医学教育项目，授予中华医学会Ⅰ类继续医学教育学分10分)。有关培训班具体事项通知如下：

为了促进基础生物医学与分子生物学研究成果在临床医学中的应用，使基因组和蛋白组研究能够迅速应用于临床重大疾病的防治，为人类健康服务。中国生物化学与分子生物学会根据生物医学与临床医学领域多位知名专家教授的建议，根据中国生物化学与分子生物学会设立分支机构的规定，经第八届常务理事会第五次会议讨论，决定成立“临床应用生物化学与分子生物学分会”，该分会挂靠在解放军总医院。

近日，美国贝克曼库尔特有限公司向卫生部临床检验中心捐赠血细胞分析标准仪在北京举行。卫生部北京医院王建业院长、卫生部医政司官员李大川、美国贝克曼库尔特有限公司亚太地区副总裁Leland Mcanhy先生、卫生部临床检验中心申子瑜主任、美国贝克曼库尔特有限公司中国区总经理曾宇奎先生、中国临床检验标准委员会主任委员杨振华教授出席捐赠仪式并讲话。

2005年4月29日由国家人类基因组北方中心与解放军总医院联合组建的“临床功能蛋白组实验室”正式成立，强伯勤院士、沈岩院士和解放军总医院陈晓红副院长等数10人参加了揭牌仪式。本实验室将向全国开放，其主要任务是利用当前基因组和蛋白组学的最新研究成果和国家人类基因组北方中心的国际先进仪器设备和实验室条件，将基础生物医学研究成果与临床实验室的辅助诊断工作相结合，

中华医学会: 值此中华医学会成立90周年暨第23次全国会员代表大会召开之际,谨向中华医学会表示热烈祝贺,向全国广大医学科技工作者表示亲切慰问!