2004年 · 第27卷第08期

由病原微生物引起的感染仍然是人类健康的主要威胁.根据1998年世界卫生组织的统计资料,感染死亡人数占全部死亡人数的第二位.而在全球因感染死亡人数中,发展中国家几乎占到二分之一。

随着科学的发展,特别是基础医学和临床医学的飞速发展,大量现代高新技术不断应用于检验医学,这极大地促进了学科的快速发展.而且检验医学知识交叉的程度越来越广,知识更新的速度越来越快,检验与临床的联系越来越密不可分,成为医院诊疗工作中重要的组成部分.同时,医疗制度的改革、医疗市场的竞争、患者自我保护意识的增强又使检验科的发展面临着严峻的考验.如何提高检验诊断质量,改进服务态度,以人为本,发展学科,是值得每个检验工作者思考的问题。

目的 应用单链构象多态性/异源双链分析技术研究慢性乙型肝炎患者拉米夫定治疗前后乙肝病毒准种组成的改变.方法聚合酶链反应扩增6例患者治疗前后共12份血清标本中目的片段并逐一分析.结果拉米夫定治疗前患者体内乙肝病毒聚合酶基因序列准种组成较复杂,准种数在7～14(平均9.8),均高于治疗后准种数4～8(平均5.7),t=3.98,P＜0.05.6例患者治疗前的准种分布中有一种或两种优势准种,但比例较低(33.3%～81.8%);治疗后显著升高(78.8%～90.9%),t=3.24,P＜0.05.选择优势克隆测序,6例患者经拉米夫定治疗后2例在酪氨酸-蛋氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸(YMDD)序列出现M550V/L528M,3例为M550I变异,1例无变异.结论采用单链构象多态性/异源双链分析技术对人体内病毒作整体性的研究,可避免其他研究方法的片面性,为发现新的变异点提供机会,进一步解释拉米夫定的耐药机制。

目的 探讨血清对氧磷酯酶1(paraoxonase 1,PON1)活性的测定在肝移植术中的意义.方法对17例肝移植患者术前、术中及术后2d内血清各生化指标进行监测,分析血清PON1在肝移植术中的变化规律及与其他生化指标的关系.结果正常人血清PON1活性呈正态分布,参考值为45.5～265.8 U/ml.17例肝移植受者术前血清PON1活性比对照组低(P<0.001).在门静脉开放后5min始升高,开放后90 min[(47.1±2.4)U/ml]较术前明显增高(P<0.05),术后第1、2 d 继续升高.丙氨酸氨基转移酶(ALT)及天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平在开放后较术前明显升高,术后第2 d还较正常值高.结论血清PON1活性可作为判断植入肝脏存活的生化指标之一,协同其他生化指标用来监测肝移植患者的肝脏功能。

目的 建立毛细管胶束电泳测定人血清中血管紧张素转换酶 (ACE) 活性的方法.方法血清中ACE将底物马尿酸-组氨酸-亮氨酸(Hip-His-Leu HHL)水解成二肽(His-Leu)、马尿酸 (Hip).中止反应后,用毛细管胶束电泳直接分析反应液,测定Hip生成量,根据Hip生成量计算ACE活性.结果本方法的批内、批间精密度分别为2.7% 、5.2%,回收率96.4%,最低检测限0.2 IU/L,在2.4～72 IU/L范围内呈线性.结论本方法可以快速、准确地测定血清中ACE活性,可以作为临床测定ACE活性的方法之一。

目的 观察传染性非典型肺炎(严重急性呼吸综合征,SARS)患者在发病急性期和治愈后不同时期的凝血功能改变.方法检测在急性期和治愈后不同时期SARS患者血浆凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、血浆纤维蛋白原含量(FIB)和血浆D-二聚体含量(DD)的变化.结果与SARS恢复期相比,患者发病急性期的PT、APTT明显延长(P＜0.01),FIB极显著升高(P＜0.0001),DD含量显著升高(P＜0.01).急性期SARS患者血浆PT、APTT、FIB和DD异常的阳性率分别为31.8%、53.2%、80.9%和50%.结论在SARS发病急性期,大部分患者存在高纤维蛋白原血症,约1/2的患者有凝血功能障碍和轻度继发性纤溶亢进,重症患者可并发DIC.SARS患者治愈后,凝血功能可逐渐恢复正常。

目的 建立串联重复序列信号放大（TRSE）液相杂交系统检测HBV-DNA技术,并初步评价其效果.方法 在前期研究构建的含24个60 bp串联重复核酸片段的重组噬菌粒中,插入4个HBV DNA片段而构建成一级检测探针,并结合12个串联重复的二级放大探针和标记的三级探针,建立检测HBV DNA的TRSE液相杂交系统.采用含HBV全基因组的重组质粒DNA对355份肝炎患者或正常人群的血清样本进行检测,评价该系统的效果.结果 在检测探针的一侧插入HBV DNA片段后,建立了HBV DNA的TRSE液相杂交检测系统.检测含HBV全基因组的重组质粒DNA的敏感性为8.33×104拷贝/ml.检测血清样本时,可区分HBeAg阳性与阴性患者间的HBV DNA水平差异.结论 TRSE液相杂交检测HBV DNA系统具有较好的敏感性、特异性和实用性.串联重复核酸序列信号放大的模式具有进一步开发利用的价值。

目的 对肝硬化患者血清丁酰胆碱酯酶活性水平和血清白蛋白浓度同时进行检测,研究二者在肝硬化Child-Pugh分级中的相互关系及临床价值.方法血清丁酰胆碱酯酶(BuChE)以酶速率比色法,白蛋白(Alb)以溴甲酚绿法在全动自动生化分析仪上测定.结果肝硬化患者在严格按照Child-Pugh分级标准划分而成的A、B、C三级中,各级血清BuChE活性均明显下降,且结果差异有显著意义(F=43.54,P<0.001).各级中下降程度依次为Child-A<Child-B<Child-C;S-BuChE与Alb浓度总体成正相关(r=0.578 5,P<0.05),在Child-A中S-BuChE与Alb浓度成正相关,在Child-B、C级中,Alb浓度和S-BuChE活性不相关;以误诊率和漏诊率均最小时划分的S-BuChE截断值为3 130 U/L和1 813 U/L与Child-Pugh分级中Alb的截断值35 g/L和28 g/L比较时,在Child-Pugh各级中S-BuChE 与Alb在Child-Pugh分级中的符合率对比无显著意义(经χ2检验,P均>0.05).结论 S-BuChE与肝硬化患者肝脏实质性损害有关,可反映肝细胞损害的严重程度,与Alb有同样重要的价值,且有反映肝病病情变化及不受输白蛋白影响等优点。

目的 明确前白蛋白(PAB)、胆碱酯酶(CHE)及胆汁酸(TBA)判断慢性乙型病毒性肝炎患者肝脏炎症分级及纤维化分期的价值.方法检测72例经肝活检证实的慢性乙型病毒性肝炎患者血清PAB、CHE及TBA水平,并与肝活检组织炎症分级、纤维化分期进行对照研究.结果肝脏病理组织炎症分为G1-G4级,纤维化分为S1-S4期.炎症轻重两组间ALT、PAB及CHE有显著性差异(P<0.01),TBA无显著性差异(P>0.05).随着纤维化程度的加重,ALT变化无规律,PAB、CHE逐渐下降,TBA逐渐升高,且S4与S1、S2、S3比较有显著性差异(P<0.05).ALT、PAB及CHE与炎症分级均有良好的相关性(P<0.01);CHE、TBA与纤维化分期存在良好的相关性(P<0.01),PAB与纤维化分期存在较弱的相关性(P<0.05).结论 PAB、CHE较敏感反映慢性乙型病毒性肝炎患者肝脏的炎症程度,三个指标在一定程度上可以提示早期肝硬化。

目的 探讨胆胰液脱落细胞DNA倍体分析对胆道腺胰良恶性疾病的诊断价值.方法用流式细胞术对42例胆道或胰腺癌患者和30例良性胆道或胰腺良性疾病患者的胆胰液中脱落细胞行DNA倍体分析,同时将DNA倍体分析、B超、计算机断层扫描(CT)、内镜逆行胰胆管造影(ERCP)结果分别与胆胰疾病手术和病理确诊结果进行对比.结果术前B超、CT、ERCP、DNA倍体分析对胆胰良恶性疾病的诊断正确性分别为56.9%、61.1%、69.4%和84.7%,阳性预测值分别为72.0%、76.9%、77.8%和91.9%,阴性预测值分别为48.9%、52.1%、61.1%和77.1%.DNA倍体分析对胆胰良恶性疾病诊断的敏感性和特异性分别为80.9%和90.0%.结论 DNA倍体分析对胆道胰腺疾病的良恶性诊断价值显著优于B超、CT和ERCP,可能是一项有价值的临床诊断指标。

严重急性呼吸综合征(SARS)可从SARS病人分泌物中分离出SARS冠状病毒(SARS-CoV).目前检测SARS-CoV方法有三类[1]:分子生物学检测、免疫学检测(抗体检测)和细胞分离培养.本研究用克隆表达的SARS-CoV的各种蛋白,以重组抗原片段检测病人血清中对应抗体,并通过试验筛选出SARS-CoV表面有效性多肽抗原,进行临床研究。

20世纪初发现的梅毒非特异性抗体可与多种磷脂成分反应.人体内的磷脂主要是含甘油醇的甘油磷脂[1].应用ELISA法对82名正常人、76例梅毒病人和另外11例病人治疗前后抗心磷脂抗体(aCL)、抗磷脂酸抗体(aPA)、抗磷脂酰丝氨酸抗体(aPS)、抗磷脂酰乙醇胺抗体(aPE)、抗磷脂酰胆碱抗体(aPC)、抗磷脂酰肌醇(aPI)抗体进行检测。

目的 用杂交瘤技术制备抗多囊蛋白-1 LRR-WSC区单克隆抗体,检测多囊蛋白-1在肾组织和肾细胞株中的分布和定位.方法用多囊蛋白-1 LRR-WSC区融合蛋白PC1-e免疫BALB/c小鼠,将其脾细胞与骨髓瘤细胞株SP2/0进行细胞融合,间接酶联免疫吸附试验(ELISA)筛选出阳性克隆,有限稀释法将杂交瘤细胞株单克隆化,间接ELISA法和免疫印迹法(WB)鉴定抗体的特异性.用制备的抗多囊蛋白-1 LRR-WSC区单克隆抗体,免疫组织化学和免疫细胞化学法检测多囊蛋白-1在不同肾组织和肾细胞株中的分布.结果细胞融合后经筛选和克隆得到的杂交瘤细胞株经WB分析表明,该细胞株分泌的单克隆抗体能特异地与多囊蛋白-1 LRR-WSC区结合.免疫组织化学显示,多囊蛋白-1主要分布于正常肾组织的远端肾小管和集合管,在胎肾囊肿组织中表达于近端肾小管,在人常染色体显性多囊肾病(ADPKD)肾囊肿组织中,表达于囊肿衬里上皮细胞,同时在ADPKD肾囊肿衬里上皮细胞系和猪近端肾小管细胞株(LLC-PK1)中也发现了多囊蛋白-1的表达.结论本实验成功制备了抗多囊蛋白-1 LRR-WSC区的单克隆抗体,该抗体对深入研究ADPKD的发病机制具有重要意义.多囊蛋白-1在肾组织中的表达模式对肾小管的形态发生、维持肾小管结构的完整性非常重要。

目的 研究冻干的定值系列血清及其在乙型肝炎病毒脱氧核糖核苷酸(HBV DNA)荧光定量聚合酶链反应测定中的应用价值.方法制备系列冻干血清,用罗氏的内标定量方法进行定量.将定量系列血清和106拷贝/ml的样本寄发给不同试剂厂家,令其按要求稀释并检测.将定值系列血清的罗氏定量结果与各试剂检测的CT值做标准曲线,比较其定值结果与试剂盒中工作标准曲线的定值结果.结果采用冻干定值系列血清作为荧光定量试剂盒定量测定的标准,标准曲线的线性回归系数均小于-0.99,斜率和截距与原试剂标准相近,使用该标准系列各试剂的检测结果间的变异 (CV)大大降低.结论该冻干定值系列血清可有效地用于临床HBV DNA的定量测定。

目的 研究LoxP序列小片段重组阳性克隆的筛选和鉴定方法.方法采用合成的LoxP为上游引物,载体互补的序列为下游引物,直接以菌落为模板进行聚合酶链反应(PCR),电泳分离出784 bp的条带者为阳性;PCR阳性克隆再用酶切法进行对比鉴定及DNA测序分析确证.结果用菌落PCR法随机筛选的6个菌落中3个为阳性,随机取1个阳性克隆进行DNA序列分析,证实含有LoxP插入序列.用酶切法对此3个阳性克隆进行鉴定,3个克隆和未进行酶切的对照均出现100 bp以下模糊带,结果不能判断.结论自身引物菌落PCR法用于筛选和鉴定LoxP序列重组阳性克隆是一种快速、简便、经济、高效的方法。

胃癌是我国常见的恶性肿瘤之一,占消化道恶性肿瘤的第一位,癌细胞侵袭和转移是影响其疗效的主要原因.据统计约有80%以上的肿瘤患者死于癌细胞的侵袭与转移[1].现以证明,基质金属蛋白酶可以促进恶性肿瘤的侵袭与转移,其表达和活性与肿瘤转移密切相关.奥沙利铂为第三代铂类化合物,体外研究发现奥沙利铂诱发DNA一级和次级损伤,从而引起人类肿瘤细胞凋亡[2],其对多种肿瘤细胞株具有抗增殖作用[3],故临床上用于某些肿瘤的治疗,而且与氟脲嘧啶联合用药收到了良好的效果,但其对胃癌的治疗报道较少,并且奥沙利铂是否具有抑制肿瘤细胞的侵袭与转移作用,目前未见报道,该试验对其进行了初步研究。

为分析传染性非典型肺炎（严重急性呼吸综合征,SARS）的临床变化特点,我们对天津市卫生局病案室提供的141例天津地区确诊的SARS病例进行回顾性分析,旨在通过研究患者外周血象随病程的变化特点,为该病的诊断和治疗及恢复期的判断提供依据。

临床实验室及时、可靠的检测结果,除了靠实验室严格的质量控制外,还与医护人员正确采集检测标本有很大关系.一份送检标本合格与否,往往是影响急诊检验结果质量重要的环节.本文就急诊标本分析前的质量控制和白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(Hb)、血小板(PLT)检测的各项结果之间的关系进行了分析,旨在与临床医护人员一起做好分析前质量控制,共同努力为临床诊疗提供最及时、可靠的检验报告。

白念珠菌是真菌感染中分离率最高的菌种之一,因其侵犯部位及病人状态不同而表现不同[1-3].我们采用浓度梯度法(E test)测定由临床标本分离的302株白念珠菌对抗真菌药物两性霉素B、伊曲康唑、酮康唑、氟胞嘧啶和氟康唑的敏感性。

目的 利用条形码技术,研制适合中国国情的条形码检验信息管理流程,杜绝标本采集和数据传递过程中的人为差错.方法设计与制作不同颜色的条形码检验信息标签,各种标签的条形码号码为流水号且两位前缀代表不同专业组别或项目并与标签颜色相对应.以Windows 2000为服务器平台、Microsoft SQL Server 2000为数据库、Power Builder8.0为前台开发工具,用网卡将仪器联接成网,实现双向通讯,并入检验服务器与全院HIS系统连接.结果通过连接电脑的条码扫描器读取标本容器上标签的条码号与来自医院信息系统的患者检验项目逐条对应,并共存于系统中.根据标本标签上的颜色将其分发到不同的检验工作站,各检验工作站将根据条码所带的检测信息给仪器发送相应的检测指令,最后将测定结果与该患者的基本信息对应形成检验报告单.结论通过条形码检验信息标签建立的检验信息管理系统,实现了自动化仪器的双向控制;过程中无需配备条码打印机和粘贴标签,省时、省力、方便快捷,杜绝了信息采集与传递过程中的差错,提高了检验质量与管理水平。

冠心病(CHD)仍然是目前发达国家的首位死亡原因,在我国其发病率迅速增高,严重危害着人们的身体健康.冠心病的危险因素除已知的高血脂、高血压、吸烟、糖尿病、家族史、肥胖和缺乏运动等之外,目前越来越多的研究证实动脉粥样硬化不是简单的脂质沉积过程,局部或全身慢性炎症在粥样硬化斑块的发生、发展中也起到重要作用.单核细胞、巨噬细胞、T淋巴细胞等炎性细胞在斑块成分中占据重要比例,而且在斑块解体部位可见大量炎性细胞浸润,即使在没有心肌梗死的急性冠脉综合征发生时,炎性细胞因子也大量产生,包括IL-6、TNF-α等,进一步导致肝细胞产生大量急性时相反应物,如C-反应蛋白(c-reactive protein,CRP),因此,CRP常被用来更好地了解炎症在动脉粥样硬化中的作用。

单核苷酸多态性(SNP) 是人类基因组中单个碱基的变异和备受关注的第三代多态性遗传标记,其最低基因频率不低于1% ,在复杂疾病、遗传病研究及法医个体识别和亲权鉴定方面都有重要作用.在器官移植和骨髓移植方面,高产量的SNP分析使较大规模、设有较好对照的完整研究得以进行;而通过详细分析移植物预后显著变异性的复杂基因决定因素,则将更有可能获得个体化治疗和改革治疗概念的机会,如细胞因子家族,包括白细胞介素6(IL6)、IL10与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等的基因变异性与器官移植的关系的广泛研究[1]。

随着社会主义民主法制建设的不断完善,人们的法制意识越来越强,患者为了维护自身的医疗权力,应用法律维权的事例日益增多,为切实体现医患双方的平等权利,2002年9月1日<医疗事故处理条例>正式执行.此条例较1987年6月29日国务院发布的<医疗事故处理办法>更能公开、公平、公正地依据医疗事故鉴定结论,运用法律效应来操作,使医疗事故有法可依.作为医患纠纷处理的重要证据,对医患双方的利益同等重要.因此,我科自<条例>发布起,不断完善,在预防医疗纠纷方面取得了明显成效。

王淑娟教授是我国著名的实验诊断学和医学教育家，曾任中华医学会检验学会副主任委员、中华医学会北京分会理事、中华医学会北京分会检验学会主任委员、全国医学院校教材编审委员会委员、《诊断学》教材编写组副组长、卫生部医药科技成果评审委员会委员，《中华检验医学杂志》、《临床检验杂志》、《中级医刊》、《中国农村医学》、《医学检验进修杂志》、《实用医学检验杂志》等学术期刊编委，卫生部卫生专业技术资格考试委员会委员、北京大学第一医院学术委员会委员、北京大学第一医院检验科主任、检验专业教学委员会顾问等职务。