2004年 · 第27卷第06期

自身免疫性疾病(AID)泛指机体免疫效应细胞(细胞毒性T淋巴细胞、自然杀伤细胞、巨噬细胞等)或免疫效应分子(补体、抗体、细胞因子等),针对自身组织或细胞产生病理性免疫应答反应,导致自身组织损伤的一大类疾病.AID分类方法较多,但尚待统一.根据有无明确外因可分为原发性和继发性两类.常见的分类按自身抗原的分布范围,分为器官特异性AID和系统性AID。

目的 调查人群空腹血糖水平、血糖随增龄的上升幅度及高血糖检出率.方法研究对象为北京市政府机关和科教卫生单位工作人员(包括离退休者),共计29 365例.资料来源包括问卷调查、全面体检及血液生化检查,血糖检查一律用血清(葡萄糖氧化酶法).结果研究对象以5岁分组.25岁以上各组空腹血糖随年龄逐步上升,直至男性65岁组(4.53升至5.52 mmol/L)或女性70岁组(4.55升至5.48 mmol/L).高龄老人(≥80岁)仍保持较高水平(男≥5.46、女≥5.27mmol/L).20 ～74岁间血糖随年龄上升幅度约为每10年0.19 ～ 0.22 mmol/L.50岁以下各年龄组的血糖数据近似正态分布,20至39岁组血糖的第5至95百分位水平为3.8 ～ 5.8 mmol/L.但50岁以上各组呈明显正偏态,主要因为50岁以上组高血糖者较多.本次体检空腹高血糖(≥7.0 mmol/L)的检出率也随年龄上升,20至39岁组< 1 %,但≥ 60岁男性可达9.7 % ～ 10.6 %,女性较低为6.4 % ～ 7.3 %.年龄标化的高血糖检出率为3.42 %(男)和2.18 %(女).结论空腹血糖和高血糖检出率随年龄逐步上升.空腹血糖平均水平男5.10 mmol/L、女4.97 mmol/L.高血糖(≥7.0 mmol/L)的年龄标化检出率男女合计为2.9 %。

目的 对应用血液分析仪检测的中国人群成人静脉血中血小板及血小板平均体积(MPV)进行调查分析,为中国人群成人的参考范围的建立奠定基础.方法对我国15个城市(哈尔滨、长春、北京、天津、兰州、西安、南京、苏州、上海、成都、武汉、重庆、福州、昆明、广州)医院,使用不同型号血液分析仪(SF-3000、STKS、SE-9000、K-4500、ADVIA120、HYCELL-PLUS、SE-9500),检测各地1 749例(其中男927例,女822例, 年龄在18～60岁)正常人群静脉血血小板、MPV,并通过严格的质量控制措施以保证检测结果的准确性.结果血小板计数,男中位数为188×109/L,范围在85～303×109/L;女中位数为206×109/L,范围在101～320×109/L.MPV的检测值受仪器、试剂、样本采集方式的影响.结论各地血小板的参考范围基本一致,但存在一定的差异,有4个地区的血小板计数结果明显偏低。

目的 构建含有乙型肝炎病毒S基因的表达载体,在毕赤酵母中表达出高免疫反应性的重组乙型肝炎表面抗原(HBsAg)S蛋白,用以制备乙型肝炎表面抗体(HBsAb)酶免试剂盒.方法采用聚合酶链反应从含乙型肝炎病毒全基因序列(adw)的质粒PHBV1中扩增出S基因,并将其插入pPICZB质粒.携带有S片段的pPICZB质粒转化毕赤酵母菌株KM71H,甲醇诱导重组酵母细胞表达S蛋白.表达产物包被聚丙乙烯反应板,用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测HBsAb. 结果酶切电泳及DNA测序证实乙型肝炎病毒S基因已正确克隆到表达载体中;聚丙烯酰胺凝胶电泳显示HBsAg在毕赤酵母中表达;表达量约占总蛋白的25%～35%.表达产物用ELISA测定效价达1∶25 600;Western blot显示与正常人血清无交叉反应;用纯化产物作为包被抗原对卫生部临床检验中心HBsAb质控物及血清标本进行检测,灵敏度达10 mIu/ml,特异性达100%,重复性及线性良好,与国产商品试剂检测结果一致. 结论毕赤酵母表达系统高效表达出具有良好免疫反应性和特异性的HBsAg,可用于基因工程原材料的HBsAb酶免试剂盒的研制。

目的 探讨国内研制的心肌型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)在急性心肌梗死(AMI)早期诊断中的应用价值.方法应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对53例AMI患者,分别于梗死后2、4 h进行血清心肌型脂肪酸结合蛋白H-FABP、肌红蛋白(MYO)、心肌型肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白I(cTnI)检测,并同时检测126名健康体检者作对照,描绘各自的受试者特征(ROC)曲线并进行ROC曲线分析.结果 AMI后H-FABP、cTnI、CK-MB、MYO 2 h和4 h的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.28、0.821、0.687、0.559和0.951、0.880、0.797、0.759;2、4 h各心肌标志物的ROC曲线下AUC大小依次为H-FABP＞cTnI＞CK-MB＞MYO.其2、4 h的最佳截断点时灵敏度分别为87.76%、80.26%、61.80%、61.80%和88.12%、83.08%、81.2%、75.00%;特异度分别为83.08%、84.12%、62.50%、47.12%和91.54%、96.24%、72.86%、68.54%.结论 H-FABP较cTnI、CK-MB、MYO对早期AMI具有更好的诊断价值,有望成为新的AMI早期诊断标志物。

目的 探讨血清神经元特异性烯醇化酶 (NSE)和乳酸检测对局部亚低温脑保护作用评价的意义.方法将40例脑出血患者按1∶1配对分为治疗组(20例)和对照组(20例),观察两组间神经功能缺损差异,检测和比较两组血清NSE和乳酸水平差异.结果入院时两组之间欧洲卒中评分、血清NSE和乳酸检测水平比较,差异均无显著意义(P>0.05);治疗1周、2周时欧洲卒中评分治疗组为62.1±10.8分和70.3±10.7分,对照组为52.8±10.9分和60.5±10.9分(P<0.05);治疗3 、7 d时血清NSE治疗组为19.5±3.8 μg/L和11.9±3.4μg/L,对照组为23.6±3.7μg/L和18.8±5.5 μg/L(P<0.05);治疗3、7 d时两组之间血清乳酸水平差异无显著性意义(P>0.05).结论血清NSE检测对评价局部亚低温脑保护作用具有重要意义,血清乳酸对亚低温脑保护作用评价意义不明确。

目的 建立纤溶酶-α2抗纤溶酶复合物(PAP)的检测方法.方法从血浆中纯化PAP作为免疫原制备单克隆抗体(单抗),建立双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA),并对该法进行评价.结果获取了特异针对PAP新抗原的单抗LW3C10,和针对PAP及纤溶酶原(Plg)的单抗LW2B9.对PAP的亲和常数分别为4.69×10-10 mol/L、5.62×10-9 mol/L.以它们建立的夹心ELISA检测PAP在0 ～ 150 μg/L范围内线性良好,批内、批间CV分别为4.0 % ～ 5.2 %、11.2 % ～ 13.6 %,回收率为85 % ～ 105 % ,加入α2抗纤溶酶(α2AP)及纤溶酶-α2巨球蛋白复合物(P-α2M)不干扰测定,与美国ADI公司PAP试剂盒相关良好(r=0.962 9).急性髓细胞白血病组、急性心肌梗死组、肝病组、健康老年人组的血浆PAP水平显著高于正常对照组(P<0.001).结论该法可用于评估纤溶系统激活。

当前,各医学实验室越来越重视实验室的建设问题,尤其关注实验室质量和能力的建设.随着ISO15189<医学实验室-质量和能力的具体要求>国际标准的发布,许多医学实验室开始探讨使用该标准作为其建立质量管理体系的依据,以提高实验室的质量管理水平,确保实验室检验的质量,并根据市场和政府的需求,寻求获得公正、权威的机构的承认,来向社会证明其具有了保证出具有效数据的质量管理体系和技术能力,然而,面对众多的认证、认可活动,寻找哪个机构、获得什么样的认证、认可才能最为有效和最能满足实验室的需求,成为了众多医学实验室需正确决策的问题。

医院的经营应该适应市场经济的发展,随着医疗技术、信息技术、通讯、交通等设施的进步和完善,医疗市场的竞争开始显现出来.作为医院而言,在技术水平、服务质量、价格相同的条件下,谁在时间上抢占了先机,以最快速度满足患者需求,谁就获得了医疗市场赢利的更大空间。

脓毒症是重症监护病房(ICU)面临的一个棘手难题,特别是同时并发感染性休克和多器官功能障碍综合征(MODS),已成为ICU危重病人死亡的主要原因之一.因此,对脓毒症及其并发症进行早期诊断和治疗尤其重要。

幽门螺杆菌(helicobacter pylori, HP)感染是一个严重的世界性问题.由于抗生素的滥用和首次治疗方案选择不当,导致HP耐药菌株增加,根治率下降,因而正确、简便地检测HP药敏试验的重要性日益突出。

目前在临床性病检验中,对最常见的3种病原体淋病奈瑟菌(淋菌)、沙眼衣原体和解脲脲原体的检验效率较低,一次只能检测一种病原体,花费时间轼长,急需研制一种快速、简便、准确的检测方法。

随着现代医学的发展,医院感染的重要性日益突出.许多从事医院感染管理的工作者都在寻求科学实用的该管量的监控网络软件。

血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)是最常用肝功能检测项目,在肝病防治中起了积极的作用.其测定方法和正常参考值曾作为一个专门课题进行研究。

白血病是造血组织的原发恶性疾病,一般根据临床表现、血象与骨髓象诊断.但由于白血病细胞具有生物学的异质性、分化程度的差异性和细胞形态的多形性等特点,因此,必须对白血病进行明确的分型和分类。

如果考虑到微生物物种的复杂性和生理生态学特点,目前使用的表型分类方法并非最有效.2002年<自然遗传学>杂志发表一项调查报告认为,在未来5～10年中,对人类健康做出贡献的最关键生物技术是传染病的分子诊断技术。

[编者按] 目前,肿瘤标志物的研究与应用已成为肿瘤防治的重点和热点.但当前肿瘤标志物检测能否达到早期诊断的效果?有无在人群中进行普查或筛查的价值?其临床意义如何解释?怎样规范与合理应用?尚存在诸多争议。

目的 探讨kinectin蛋白在真核细胞的定位,并建立kinectin抗体免疫荧光检测方法(IFA).方法从人喉癌上皮细胞(HepG2)抽提RNA,用逆转录聚合酶链反应扩增kinectin编码区序列,并连接到真核表达载体pEGFP-C2中;将构建的pEGFP-kinectin载体导入HepG2细胞中,在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白(GFP)的荧光及其细胞定位.然后,用此转染细胞制成的底片,建立检测kinectin抗体的IFA.同时用IFA对51名正常人及46例白塞病(BD)患者血清进行初步检测.结果经EcoRI单酶切和测序证实,成功地构建了表达kinectin的真核表达载体; pEGFP-kinectin载体转染的细胞经3次克隆筛选后,100%的细胞胞浆内发出特征性荧光.用kinectin抗体阳性血清染色,也得到类似特征的荧光.IFA检测显示,BD患者kinectin抗体的阳性率为32.7%(15/46),正常人均为阴性.结论构建kinectin表达的载体可在HepG2细胞中进行表达,并成功地用pEGFP-kinectin转染的HepG2细胞建立了检测kinectin抗体的IFA。

目的 探讨白细胞介素-12(IL-12)、IL-18及γ-干扰素(IFN-γ)在活动性狼疮性肾炎(LN)发病中的作用与相互关系.方法用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定16例活动性LN患者和10名正常人血浆IL-12、IL-18和IFN-γ水平;分析其相互关系和与系统性红斑狼疮活动指标(SLEDAI)的关系.结果活动性LN患者血浆IL-12、IL-18及IFN-γ水平均显著高于正常人(IFN-γ:1.76±2.05 vs 0.07±0.25, P<0.05;IL-12:182.0±131.8 vs 21.2±10.3,P<0.001;IL-18:844.5±334.5 vs 21.7±86.3,P<0.001),且三者呈密切正相关(均P<0.05),3种细胞因子水平均与SLEDAI相关(均P<0.05). 结论 IL-12、IL-18及IFN-γ可能参与LN的发病,并与系统性红斑狼疮活动性有关。

目的 建立人血清脂蛋白(a)[Lp(a)]循环免疫复合物(CIC)酶联免疫吸附试验(ELISA)检测法,探讨人体内是否存在Lp(a)-CIC及其临床价值.方法分别建立抗人IgG为包被抗体,酶标抗载脂蛋白(a)和抗载脂蛋白B为检测抗体的Lp(a)-CIC、低密度脂蛋白(LDL)-CIC ELISA检测法,并对160例冠心病患者和290名对照人群进行分析.结果两组相比,冠心病患者Lp(a)-CIC (2.24±1.71AU vs 1.62±1.50AU)、LDL-CIC (2.77±1.29AU vs 1.40±0.92AU)水平均显著升高(P<0.000 1).LDL-CIC 水平分别与血浆LDL、胆固醇 (r=0.549)、载脂蛋白B (r=0.478)、总胆固醇 (r=0.413)、甘油三酯 (r=0.248) 和Lp(a) (r=0.239) 浓度正相关 (均P<0.000 1),与高密度脂蛋白、胆固醇 (r=-0.308) 和载脂蛋白A1 (r=-0.209) 浓度负相关(P<0.000 1).Lp(a)-CIC水平分别与血浆 Lp(a) (r=0.577, P<0.000 1)、LDL胆固醇 (r=0.207, P<0.000 1)、载脂蛋白B (r=0.128, P<0.01) 和总胆固醇 (r=0.145, P<0.01) 浓度正相关,与高密度脂蛋白、胆固醇 (r=-0.126, P<0.01) 和载脂蛋白A1(r=-0.096, P<0.05)浓度负相关.LDL-CIC与Lp(a)-CIC 水平亦相关 (r=0.313, P<0.000 1).结论人体内存在Lp(a)-CIC,冠心病患者Lp(a)-CIC水平显著升高。

目的 寻找特应性皮炎(AD)患者易感的人白细胞抗原(HLA)基因型,分析该易感基因的单链构象多态性与正常人的差别.方法用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)检测122例AD患者和80名健康献血员的HLA-DRB等位基因型,并分析该易感基因的单链构象多态性.结果外源性AD组和AD合并哮喘及变应性鼻炎组HLA-DR3与正常对照组比较,基因频率升高(RR＝5.27和3.59,均P<0.05),而HLA-DR6基因频率降低(RR＝0.10和0,均P<0.05),而HLA-DR3阳性的16例AD患者中,仅1例的单链构象多态性与正常人不同.结论HLA-DR6是AD的抗性基因,携带有HLA-DR6的个体较不易患AD,而HLA-DR3是易感基因,携带有HLA-DR3的个体,较易患AD,而携带HLA-DR3基因的个体与正常人比较无碱基差别。

系统性红斑狼疮(SLE)发病过程中存在T细胞亚群功能失衡和细胞因子网络失调,但各细胞亚群在SLE发病机制中的作用,尚无统一认识.本研究利用荧光标记流式细胞术,检测SLE患者不同时期外周血辅助T细胞(Th)1/Th2、细胞毒T细胞(Tc)1/Tc2,以探讨SLE患者外周血Th1/Th2、Tc1/Tc2的变化及与SLE活动性的关系。

类风湿关节炎(RA)患者IgG分子糖链末端2个半乳糖缺失(称为IgG0)[1],缺失后,N-乙酰葡萄糖(GlcNAc)暴露.本研究用特异性识别GlcNAc的蘑菇凝集素(PVL),建立一种检测IgG0的双抗体夹心酶联免疫吸附试剂(ELISA)检测法,并对正常人和RA患者进行检测。

陈民钧教授是我国著名临床微生物学专家及实验诊断学专家.陈教授1933年出生于湖南长沙,1950～1956年就读于哈尔滨医科大学,毕业后分配在军事医学科学院微生物及流行病学研究所工作,先后任实习研究员和助理研究员。

胡必杰 <中华检验医学杂志>编辑委员会委员,1963年生,浙江籍.1984年毕业于上海医科大学医学系,1987年获医学硕士学位.现任复旦大学呼吸病研究所肺部感染研究室主任、中山医院临床微生物与医院感染监控中心主任、中山医院呼吸科主任医师、教授,硕士研究生导师。

由中华医学会检验学会分子生物学专业委员会和江苏省医学会主办的第二届全国临床分子生物学会议,2004年4月8～11日在江苏省无锡市召开。