2020年 · 第43卷第07期

在抗击本次新型冠状病毒肺炎疫情的过程中，医学检验部门发挥了重要作用。应有意识、有计划地建设一批适于应对大规模紧急公共卫生事件的平"战"结合的检验医学部门，以便今后在这类情况发生时，能快速准确地为临床诊治决策提供可靠的科学信息。本文探讨了应对大规模紧急公共卫生事件的检验医学部门的能力建设的基本要求。

急性呼吸道感染居我国各类感染性疾病首位，尤其是下呼吸道感染及其相关疾病是我国医疗和社会的沉重负担，特别是新型冠状病毒肺炎造成了极大的损失，因此急性呼吸道感染及时的诊断与鉴别诊断尤为重要。本文就呼吸道感染病原体临床检验诊断路径的规范化进行探讨，以便提高疾病的正确诊断与分流，有利于疾病的及时治疗。

随着全国新型冠状病毒肺炎（COVID-19）疫情防控工作的逐步推进，疫情防控进入了关键时期。核酸检测作为明确COVID-19病因的重要手段，其弊端逐渐显露。作为机体抵抗病毒感染的重要免疫应答产物，血清特异性抗体迅速被应用于2019新型冠状病毒的实验室检测中，与核酸检测结合用于COVID-19患者的快速诊断和筛查工作。本文从抗体产生规律、临床常用检测方法、抗体检测在临床的应用及抗体检测的局限性等方面进行探索讨论，有助于血清抗体检测在COVID-19诊断中的应用与发展。

遗传代谢性疾病（IMD）又称先天性代谢缺陷，从发病率来看IMD属于罕见病，虽单一病种发生率均较低，但作为一类疾病的群体患病率较高。迄今发现的IMD疾病有700多种，并随着分子诊断技术的提高而逐步增加。由于IMD受累基因多，临床症状复杂多样，且不具有特异性，对IMD的准确诊断存在很多困难和挑战。本文就IMD发生的分子基础、疾病诊断思路、检测手段及其在临床应用中存在的问题进行阐述。

细菌对抗菌药物的耐药问题严重困扰着抗感染治疗。分子技术能够快速、敏感、准确地检出细菌的耐药机制，提高抗感染治疗的疗效和感染控制的水平。质量保证体系的建设是分子诊断技术在细菌耐药性检测中有效应用的保证。但是，由于细菌耐药机制复杂，再加上基因突变等因素，依靠检测一种或数种耐药基因的分子方法存在假阴性、假阳性，以及机制与表型不一致等问题，对分子检测技术的应用有一定的限制。随着分子技术的发展及人们对细菌耐药机制的认识不断加深，分子诊断技术在细菌耐药性检测中的应用必将更加广泛。

核酸甲基化是基因表观遗传学修饰的一种重要方式，也是肿瘤最常见的驱动性分子事件。检测核酸甲基化游离形式不但能够对肿瘤进行早期辅助诊断及预后判断，而且可避免传统肿瘤组织活检方法侵入性和肿瘤异质性等问题。本文将回溯游离核酸甲基化检测在肿瘤诊断中的应用现状，剖析游离核酸甲基化检测面临的挑战，并对其临床应用前景进行展望。

携带污染是生化检测误差的明确来源之一，其带来的错误结果可能给患者医疗结局带来不良影响。几十年来，自动生化分析仪制造商通过改进系统设计、更新材料，不断尝试降低携带污染，但是挑战依然存在。中华医学会检验医学分会生化学组组织专家，制定了《生化分析仪携带污染的分析评估及处理方法专家共识》，总结了生化分析仪携带污染的来源和特点，提供了携带污染的评估程序和方法，并重点介绍了常用的携带污染的解决方案，用以指导实验室工作人员正确识别、评估携带污染，有效降低由于携带污染带来的结果偏差对患者诊疗的影响。

目的 比较两种γ-干扰素释放试验结果的一致性，从而为实验室选择检测方法提供参考意见。 方法 同时收集北京大学民航总医院2018年7月至2019年12月住院的96例结核疑诊患者的双份全血标本，分别采用QIAGEN（凯杰）试剂盒和安图试剂盒内提供的样本管进行结核特异性抗原刺激试验，开展酶联免疫吸附试验（ELISA）法（凯杰）和免疫化学发光法（安图）检测γ-干扰素，并根据各自试剂盒内的说明书进行结果判定。以临床或细菌学证据诊断结核病为标准，比较两种试剂盒判定结果的一致性，并对结核病的诊断效能作出评价。同时选取60份经凯杰试剂盒内结核特异性抗原刺激后的血浆，分别进行ELISA法和化学发光法检测γ-干扰素，比较两种γ-干扰素检测系统之间的一致性。判定结果的一致性分析采用Kappa检验，γ-干扰素组间数据的差异采用简单线性回归分析和Bland-Altman图显示。 结果 96份样本中，凯杰诊断结核的敏感度为81.82%（18/22），特异度为74.32%（55/74）；安图诊断结核的敏感度为72.73%（16/22），特异度为70.27%（52/74）。两个系统γ-干扰素释放试验判定结果的一致性较好(Kappa值为0.847，P<0.05)。其中凯杰诊断结核病的受试者工作特征（ROC）曲线下面积为0.807（95%可信区间：0.702~0.911）；安图为0.765（95%可信区间：0.640~0.889），两者差异无统计学意义（Z=0.958，P>0.05）。比较两个系统检测同一份血浆γ干扰素的结果，相关回归分析显示一致性良好（R2=0.97，P<0.05）；但比较同一份患者样本在不同试剂盒刺激后的γ干扰素水平，结果相关性较差（R2=0.41，P<0.05）。 结论 安图系统与凯杰系统的γ干扰素释放试验判定结果的符合性较好，两系统检测γ-干扰素的结果一致性良好。抗原包被量、效价以及试验体系不同可能是导致γ-干扰素释放量不同的原因。

目的 通过研究壳多糖酶3样蛋白1（CHI3L1）在原发性肝细胞癌（HCC）外周血、肝癌及配对癌旁组织中的表达水平，探讨CHI3L1在辅助原发性HCC临床管理中的价值。 方法 回顾性研究。纳入2013至2017年在海军军医大学第三附属医院就诊的HCC患者405例，同时纳入肝硬化患者112例、正常体检（NC）者114例分别作为疾病和健康对照，酶联免疫法（ELISA）检测外周血CHI3L1蛋白水平。收集经病理确诊为原发性肝癌患者的肿瘤组织及配对癌旁组织90对，制成组织芯片，应用免疫组化染色分析HCC患者组织中CHI3L1的表达情况。采用Mann-Whitney U检验或Kruskal Wallis H检验比较各组差异，相关性分析采用Pearson双变量相关分析，癌组织和癌旁组织比较采用配对秩和检验。 结果 外周血中肝硬化组、HCC组、NC组CHI3L1蛋白中位数（四分位数）分别为195.8（103.3，330.4）、118.2（74.9，201.0）及46.8（30.7，66.4）μg/L，肝硬化组CHI3L1蛋白水平显著高于HCC组和正常对照组（Z=5.186、12.928，P均<0.001），HCC组CHI3L1蛋白水平显著高于正常对照组（Z=10.788，P<0.001），HCC组中CHI3L1水平与是否合并肝硬化无关（Z=-0.286，P=0.775）；血清CHI3L1水平与肝纤维化相关标志物[透明质酸（HA）、Ⅲ型前胶原N端肽（PⅢNP）、Ⅳ型胶原蛋白（Ⅳ-C）、FIB-4指数]呈正相关（r=0.202、0.159、0.299、0.221，P均<0.05），与白蛋白（ALB）呈负相关（r=-0.326，P<0.05），与丙氨酸氨基转移酶（AST）、凝血酶原时间（PT）呈正相关（r=0.138、0.160，P均<0.05），与肿瘤直径呈正相关（r=0.284，P<0.05），与中国肝癌的分期方案分期（CNLC）分期相关[晚期组CHI3L1水平为125.2（81.9，228.5）μg/L，高于早期组的112.0（70.2，169.2）μg/L（Z=-2.326，P=0.018）]，而与微血管侵犯（Z=-1.531）、肿瘤包膜（χ2=0.818）无明显相关关系（P均>0.05）。73对HCC组织标本中，癌组织CHI3L1表达阳性率为78%（57/73），癌旁组织CHI3L1表达阳性率为83%（61/73），配对分析比较癌组织中染色强度评分1.5（1.5，2.0）和癌旁组织染色强度评分1.5（1.5，2.5）发现癌旁组织染色强度高于癌组织（Z=-2.053，P=0.040）。 结论 原发性肝细胞癌CHI3L1蛋白的组织来源包括癌组织和癌旁组织，检测血清CHI3L1水平有助于肝癌患者肿瘤负荷评估和疾病分层管理。

目的 探讨常规内参基因U6和Cel-miR-39用于结核性脑膜炎患者脑脊液微小核糖核酸（miRNA）定量检测的可行性，并初步用于脑脊液miRNA定量检测分析。 方法 本研究选取首都医科大学附属北京胸科医院常规脑脊液检测后保存的标本，根据最终诊断依据纳入结核性脑膜炎患者36例、病毒性脑膜炎患者34例。提取其脑脊液标本miRNA，采用TaqMan探针法检测miRNA的表达水平。采用GeNorm、NormFinder和Bestkeeper软件分析内参基因miRNA的稳定性，采用2-ΔCt方法计算靶标miRNA的相对表达量。标本重复检测的一致性分析采用Pearson检验。靶标基因在两组间的表达差异比较采用t检验。 结果 70份脑脊液标本中，U6检测的循环阈值（Ct）为（30.40±3.30）个循环，表达丰度较低，Cel-miR-39检测的Ct值为（21.49±0.70）个循环，表达丰度适中。内参和靶标基因miRNA在重复样本检测中一致性均较好（r>0.931,P<0.001）。根据3种软件分析结果，Cel-miR-39在70份脑脊液标本中表达稳定性更高，更适合作为脑脊液miRNA检测的内参基因。以Cel-miR-39为内参，靶标基因miR-126-3p（1.13±0.41比3.34±0.82,t=2.452, P=0.016）、miR-130a-3p（0.56±0.10比2.59±0.70, t=2.960, P=0.004）和miR-151a-3p（0.64±0.25比2.11±0.33, t=3.536, P=0.001）在结核性脑膜炎组脑脊液中的相对表达量均显著低于病毒性脑膜炎组。 结论 Cel-miR-39可作为结核性脑膜炎患者脑脊液中miRNA定量检测的标准内参，脑脊液中miR-126-3p、miR-130a-3p和miR-151a-3p的相对表达量在结核性脑膜炎患者和病毒性脑膜炎患者之间存在差异。

目的 评估痰潘多拉菌生化反应、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）和基因测序的鉴定结果，为临床微生物鉴定痰潘多拉菌提供更佳方案。 方法 方法性能评价。收集2018年7至10月武汉大学中南医院住院患者血培养中分离的10株痰潘多拉菌，对其培养特性、菌落形态和染色特征进行研究和记录。然后分别通过手工生化鉴定（API 20NE）、全自动微生物鉴定分析系统（梅里埃VITEK 2 Compact、BD Phoenix-100、赛默飞世尔ARIS 2X）、MALDI-TOF MS（梅里埃VITEK MS和布鲁克MALDI Biotyper）和16S核糖体核糖核酸（rRNA）基因测序对痰潘多拉菌进行鉴定，并评估各方法的鉴定性能。 结果 痰潘多拉菌是一种动力阴性、氧化酶阳性、触酶阳性的非发酵革兰阴性杆菌。10株痰潘多拉菌的API 20NE鉴定结果为反硝化无色杆菌、粪产碱菌或少见嗜铜菌，种属鉴定准确率0；VITEK 2 Compact鉴定结果显示其中6株为潘多拉菌属，3株为其他种属细菌（洋葱伯克霍尔德菌群、少动鞘氨醇单胞菌、皮氏罗尔斯顿菌），1株为Low Discrim（低分辨率），属鉴定准确率6/10；Phoenix-100鉴定结果显示10株均为无鉴定结果，种属鉴定准确率0；ARIS 2X鉴定结果显示其中7株为其他种属细菌（嗜麦芽窄食单胞菌、鲁氏不动杆菌、少动鞘氨醇单胞菌、浅黄假单胞菌、鲍曼不动杆菌复合体/溶血不动杆菌），3株为极罕见生物类型，种属鉴定准确率0；VITEK MS和MALDI Biotyper鉴定结果均为痰潘多拉菌，种属鉴定准确率10/10；16S rRNA基因测序结果与痰潘多拉菌相似度为100%。 结论 目前基于生化反应的临床微生物学检验方法很难将痰潘多拉菌准确鉴定到种的水平，MALDL-TOF MS和16S rRNA基因测序技术是目前鉴定痰潘多拉菌快速准确的方法。

目的 为探讨相似序列高分辨熔解曲线（SD-HRM）技术在21三体、18三体和13三体产前诊断中的临床应用价值。 方法 于2014年9月至2016年8月从南京市妇幼保健院、浙江大学附属妇产科医院、四川大学华西第二医院/华西妇产儿童医院和厦门市妇幼保健院共采集1 152例进行产前诊断孕妇的羊水细胞，同时采用SD-HRM技术和染色体核型分析技术进行平行检测，计算SD-HRM技术的敏感度、特异度，并分析两项技术检测结果的一致性，计算Kappa值。 结果 1 152例孕妇经SD-HRM技术检测出21三体161例，18三体60例，13三体5例，敏感度和特异度均为100%，与染色体核型分析结果一致（Kappa＝1）。 结论 在常见染色体三体的产前诊断中，SD-HRM技术与染色体核型分析的准确率相当，作为快速产前诊断的一种新方法具有较好的应用前景。

目的 探讨微小RNA155（miR-155）和细胞因子信号抑制分子6（SOCS6）在结核感染鉴别诊断中的价值。 方法 病例对照研究。回顾性纳入2017年1至6月来第三军医大学第三附属医院就诊的60例患者，分为活动性肺结核组、潜伏性结核组和其他肺部感染性疾病组，每组各20例。采用荧光定量PCR法检测miR-155与SOCS6基因在不同结核感染状态人群外周血单个核细胞中的表达水平。采用Logistic回归分析获得miR-155与SOCS6联合应用指标（Co-index）。研究miR-155、SOCS6以及Co-index在鉴别结核感染中的价值。绘制受试者工作特征（ROC）曲线，计算ROC曲线下面积（AUC）。统计分析和制图通过MedCalc和GraphPad Prism 8.0软件实现。 结果 鉴别结核感染与未感染时，miR-155（AUC=0.663，P=0.031），SOCS6（AUC=0.708，P=0.002）和Co-index（AUC=0.718，P=0.001）鉴别力均不佳。在鉴别活动性感染和潜伏性感染时，miR-155（AUC=0.867，P<0.001）和Co-index（AUC=0.875，P<0.001）鉴别效能高，但两组间差异无统计学意义（Z=0.142，P=0.887）；SOCS6（AUC=0.570，P=0.459）鉴别效能低。在鉴别活动性结核感染与非结核其他肺部感染时，Co-index（AUC=0.923，P<0.001）优于SOCS6（AUC=0.723，P=0.007）（Z=2.586，P=0.010），与miR-155（AUC=0.835，P<0.001）比较，差异无统计学意义（Z=1.585，P=0.113）。 结论 miR-155是鉴别潜伏性结核感染和活动性结核感染的潜在生物标志物。miR-155联合SOCS6有助于鉴别活动性结核感染与非结核其他肺部感染。

环状RNA(circRNA）是共价闭合环状单链RNA，具有相对丰富、保守、稳定、特异等特征。研究表明circRNA在基因表达过程中发挥重要调控作用，并在癌症、心血管疾病、神经系统疾病和自身免疫病等发病过程中参与多种信号通路调控。近年有报道circRNA在病毒感染性疾病中表达异常，circRNA有望成为病毒感染性疾病的潜在生物标志物，还可能作为潜在的靶点为疾病治疗提供依据。本文简要介绍了circRNA与病毒感染性疾病的研究进展，包括circRNA的差异性表达及其转录调控翻译的机制等，为今后的研究提供参考。