2020年 · 第43卷第01期

为了增进检验和临床的交流与合作，加强急诊检验和临床管理，推动急诊检验和临床发展，提高医疗机构救治急危重症患者的综合能力，实现分级诊疗下的急诊规范化建设。急诊临床专家与检验专家共同组成制定小组，通过多次会议、发放调查问卷等方式讨论如何了解临床医师的需求，规范急诊检验建设，提高急诊救治能力。检验人员与临床医师应有效沟通，依据急诊医师工作中常见疾病或急危重症，共同制定急诊检验项目种类，选择急诊检验危急值项目，确定危急值通报界限值。急诊检验应建立完善的质量管理体系并有效运行，持续改进，为临床提供准确及时的检验报告；急诊医师与检验人员共同努力，规范急诊检验建设，改善急诊检验服务能力，提升各级医疗机构救治急危重症患者的能力。

目的 通过分析比较生化免疫流水线安装前后，急诊检验样本检测流程及样本周转时间等变化，探讨生化免疫流水线在急诊检验中的应用价值。 方法 收集同济大学附属同济医院检验科2017年7至9月及2018年7至9月急诊生化和免疫检测项目的运行数据，开展回顾性研究。（1）比较流水线安装前后，急诊检验样本流转方式及其流程的变化。（2）统计分析流水线安装前后急诊检验的样本检测周转时间变化及分布情况。（3）统计比较安装前后仪器间样本检测量分配情况及故障发生情况。（4）分别对安装前后急诊检验样本检测过程进行生物安全风险评估，分析流水线安装对急诊检验生物安全控制的影响。 结果 （1）流水线的应用有效优化控制了样本检测流程，减少了人工参与。（2）安装后各报告的样本检测周转时间较安装前均有大幅度的缩短，急诊的干式生化及心肌酶谱报告的TAT由分别由安装前的39 min及48 min缩短到安装后的34 min及42 min，分别缩短12.82%和12.50%；住院急诊的干式生化及心肌酶谱报告的TAT由分别由安装前的37 min及43 min缩短到安装后的29 min及35 min，分别缩短21.62%和18.60%；分析比较各报告TAT的分布情况，处于0~30 min及31~45 min的报告比例较安装前有明显的提升。急诊和住院急诊的干式生化报告TAT处于0~45 min的比例分别由安装前的72.68%及80.30%提高到安装后的84.70%及86.56%；急诊和住院急诊的心肌酶谱报告TAT处于0~45 min的比例分别由安装前的57.91%及78.28%提高到安装后的74.58%及85.66%。（3）两台VITROS5600样本检测比例分别由安装前的30.29%和69.71%变为安装后的47.63%和52.37%；两台DXI800样本检测比例由安装前的28.77%和71.23%变为安装后的53.49%和46.51%，仪器间样本检测量的平衡趋于合理。各仪器故障发生次数显著减少，两台VITROS5600由安装前的平均每月3.5次/台下降为安装后的平均每月2次/台，两台DXI800由安装前的平均每月2.8次/台下降为安装后的平均每月1.8次/台。（4）流水线的安装降低了急诊检验样本检测过程中发生生物安全事件的风险，其中检测前意外接触样本管气溶胶和检测中生物标本倾翻溢出意外接触两个风险构成均由安装前的高水平降为安装后的低水平。 结论 生化免疫流水线的应用改进了急诊检验的流程，提高了检验科室的工作效率，缩短了样本检测的周转时间，降低了生物安全的风险。

目的 回顾2010年至2018年参加上海糖化血红蛋白（HbA1c）一致性计划的实验室比对结果，分析各实验室HbA1c检测质量的演变，为进一步提高全国糖化血红蛋白检测能力提供依据。 方法 回顾性分析。收集2010年至2018年所有参加上海糖化血红蛋白一致性比对计划的实验室比对结果。分析各实验室所在医院分布、检测方法分布的演变。对上海糖化血红蛋白一致性比对计划中各参加实验室历年的判断标准、季度及年度通过率、偏倚、变异系数（CV）进行回顾性分析，并与国家卫健委临检中心、上海市临检中心以及美国病理家协会（CAP）开展的室间质量评价计划结果进行比较。收集2019年第一季度的比对数据，计算各实验室比对结果与靶值的偏倚、变异系数和Sigma（σ）值，并绘制Sigma结合生物医学变异参数评估模型图。 结果 参加实验室从上海地区9家增长至全国192家，年平均增长率为76.6%；各季度比对判断标准从允许偏差百分比为±8%提高至±6%，各参加实验室通过率从39.1%提高至近90%；各仪器方法组内的最大CV从14.3%降低至4.8%。2019年第一季度，比对结果满足6σ的实验室均近60%，95%以上的实验室满足生物学变异参数模型中的合格及以上标准。 结论 上海糖化血红蛋白一致性计划使各参加实验室的HbA1c检测结果一致性明显得到了提高。

目的 应用两种互通性评价方案评价16种17-羟孕酮制备物的互通性。 方法 互通性研究，收集2018年2月至2019年6月之间北京医院检验科的新鲜人血清共52份。根据美国临床和实验室间标准化研究所文件（CLSI）EP14-A3和国际临床化学和检验医学联合会（IFCC）互通性评价工作组报告，以血清17-羟孕酮同位素稀释液相色谱串联质谱法（ID-LC/MS/MS）为比对方法，3种临床常规分析系统（1种放射免疫法，2种LC/MS分析法）为待评方法，一同测定52个人血清样本和16种制备物的17-羟孕酮浓度，评价制备物质的互通性。 结果 综合两种互通性评价结果，所有正确度验证材料和国家甾体激素标准物质在LC/MS分析系统中都显示出良好的互通性，6/9的EQA材料在三种常规分析系统中都显示出互通性。其中所有材料在偏倚差值法中所有材料的LC/MS分析系统中都显示出良好的互通性。 结论 两种互通性评价结果有所差异，使用新鲜冰冻人血清作为血清17-羟孕酮的质评材料均能满足互通性要求。

目的 对飞行时间质谱多基因检测平台的检测性能进行验证，建立基于飞行时间质谱多基因检测平台的性能验证研究方案。 方法 选择2017年9月至2018年10月来自中国医学科学院阜外医院已测部分心血管用药相关基因位点的DNA标本998例和全血标本20例，其中男性512例，女性506例。18~30岁280例，31~64岁442例，≥65岁296例。用飞行时间质谱法对998份DNA标本心血管用药相关11个基因进行检测，检测结果与已知结果进行比对，评价998例已测标本符合率；选择20例全血标本，对心血管用药相关11个基因分别进行飞行时间质谱检测和Sanger测序，对比两次结果，以Sanger测序为金标准进行准确度评价。从998例DNA标本中选择部分样本进行以下研究，选择10份包含所有位点为野生型的基因组DNA，用飞行时间质谱检测，进行特异性评价；选择4份包含所有位点杂合基因型标本，梯度稀释后检测，评价位点的测定下限；选择14份包含中国人群所有常见位点基因型标本，进行批间和批内精密度评价；选择2份包含代表性峰形的野生和纯合突变标本各1份，进行抗干扰研究。 结果 该方法单次检测的符合率高于99.5%，飞行时间质谱平台与Sanger测序法检测完全一致，测定下限为0.4 ngDNA，批间和批内精密度均为100%，UNG酶的降解能力为105拷贝/μl的气溶胶，反应体系对基因组和PCR各中间产物气溶胶有很强的抗干扰能力，点样及检测过程中芯片不同基质间无交叉污染。 结论 飞行时间质谱多基因检测系统检测性能良好，可应用于临床检测，并且本文建立了基于飞行时间质谱平台多基因检测系统的性能验证研究方案，为广大科研和检验工作者研究该平台打下基础。

目的 基于电感耦合等离子体质谱法（ICP-MS），建立一种检测血清钙离子的候选参考方法。 方法 方法学建立.将从医院收集到的血清标本以0.3%硝酸溶液直接稀释100倍，在血清标本基质溶液中添加不同浓度钙标准溶液，配制含血清基质的标准品溶液。以锗（Ge）为内标，采用标准加入法，计算血清钙离子浓度。对所建立的候选参考方法进行线性、精密度、正确度的性能评估和方法比对。 结果 血清钙离子浓度在0.000~20.400 mmol/L内（稀释后浓度为0.000~0.204 mmol/L）线性良好（R2>0.999 9）；批内不精密度为0.22%~0.47%，批间不精密度为0.64%~0.77%，总不精密度为0.98%~1.09%；检测3个浓度SRM 956d，结果均在证书要求的不确定度范围内，相对偏移分别为-0.16%，0.04%，0.23%；该方法参加2017年参考实验室外部质量评价计划（RELA），比对通过。与检验医学溯源联合委员会（JCTLM）所列参考方法进行比较，结果一致性良好。本研究所建立的候选参考方法与临床常规电极方法进行比较，具有良好的相关性。 结论 成功建立血清钙离子检测候选参考方法，线性范围宽、具有良好的精密度与准确度。

目的 探讨重症急性胰腺炎（SAP）患者的结局预测模型。 方法 回顾性病例对照研究。收集温州医科大学附属台州医院2016年1月1日至2018年4月30日102例SAP患者，将入选者按照入院后90天转归情况分为生存组及死亡组，其中生存组88例，男性57例，女性31例，年龄55.5（40.3~69.8）岁；死亡组14例，男性5例，女性9例，年龄63.0（50.8~80.8）岁。通过比较2组间临床资料及实验室指标，筛选出具有统计学差异的指标，采用卡方自动交互检测法（CHAID）构建SAP患者的结局预测模型。收集2018年8月1日至2019年7月1日的50例SAP患者的临床资料及实验室指标结果对得出的结局预测模型进行验证。 结果 （1）通过卡方检验及Mann-Whitney U检验进行生存组及死亡组临床资料比较得出组间并发心脑血管系统疾病比例、机械通气、感染性休克比例、Charlson合并症指数（CCI）、Ranson评分及APACHEⅡ评分，死亡组均高于生存组，差异具有统计学意义（χ2=5.554，P=0.018；χ2=5.585，P=0.018；P=0.008，Z=-3.007，P=0.003；Z=-2.982，P=0.003；Z=-3.257，P=0.001）；（2）通过卡方检验及Mann-Whitney U检验进行实验室指标比较得出生存组及死亡组间MPV、CRP、MCHC、pH、PCO2及NRBC阳性率，差异具有统计学意义（Z=-2.466，P=0.014；Z=-2.689，P=0.007；Z=-2.238，P=0.025；Z=-1.977，P=0.048；Z=-2.239，P=0.025；P=0.000），死亡组NRBC阳性率较生存组高，其余指标均较生存组低；（3）决策树CHAID法得出预测方案：当SAP患者满足Ranson评分≤3分时判定存活；当满足Ranson评分>3分且外周血中NRBC呈阴性判定存活；当满足Ranson评分>3分、NRBC呈阳性且APACHEⅡ评分≤21分时判定存活；当满足Ranson评分>3分、NRBC呈阳性且APACHEⅡ评分>21分时，判定预后不良；（4）验证组共收集50例SAP患者，实际生存43例，死亡7例，用方案预测患者结局准确率为94.0%（47/50）。 结论 有核红细胞联合Ranson评分及APACHEⅡ评分可预测SAP患者的结局。

目的 分析中国汉族人群CYP2C9和VKORC1的基因多态性及其与华法林稳定维持剂量的相关性。 方法 回顾性研究。收集2017年10月至2018年4月在北京大学人民医院进行凝血分析检测的458例中国汉族患者，男性213例，女性245例，年龄范围26~94岁。采用PCR-荧光探针法检测CYP2C9*3位点和VKORC1-1639A>G位点基因多态性，458例患者中服用华法林进行抗凝治疗且凝血酶原时间国际标准化比值（INR）达标（在2.0~3.0范围内）的患者130例，记录患者基本信息、华法林用药剂量及凝血酶原时间国际标准化比值（INR），应用SPSS统计分析数据，与美国FDA推荐的不同基因型患者华法林推荐剂量的参考表格进行对比，并且对华法林预测剂量公式进行简单验证。 结果 458例抗凝患者中CYP2C9*1/*1（AA）基因型频率90.8%，CYP2C9*1/*3（AC）基因型频率8.5%，CYP2C9*3/*3（CC）基因型频率0.7%；VKORC1-1639GG基因型频率0.9%，VKORC1-1639AG基因型频率14.2%；VKORC1-1639AA基因型频率84.9%。在达到抗凝指标（国际标准化比值INR 2.0~3.0）后，结果显示CYP2C9*1/*3与*3/*3基因型患者平均每日剂量为（2.92±1.29）；3（2.75，3.375）mg，低于野生型CYP2C9*1/*1基因型患者所需的平均每日华法林剂量（3.91±1.63）；3（3，5）mg，差异有统计学意义（P=0.018）。VKORC1纯合突变基因型VKORC1-AA患者平均每日剂量为（3.68±1.64）；3（3，4.31）mg，低于杂合基因突变型的平均每日剂量（4.54±1.29）；4.5（3.28，6）mg，差异有统计学意义（P=0.001）。不同VKORC1+CYP2C9基因型患者的华法林应用剂量与美国FDA参考表格的推荐剂量具有一致性。Miao2007公式的预测准确度较IWPC公式低，且94.1%的患者华法林剂量被低估。 结论 携带CYP2C9*3突变基因或VKORC1-AA纯合突变基因型的患者所需华法林剂量较低，CYP2C9和VKORC1基因多态性与华法林稳定维持剂量具有一定的相关性。

目的 探讨血栓分子标志物在恶性肿瘤患者血栓形成的早期诊断价值，并对恶性肿瘤患者形成血栓危险因素进行评价。 方法 诊断性研究。选取2017年9月至2019年2月牡丹江医学院附属红旗医院及牡丹江市肿瘤医院的恶性肿瘤患者，共1 366例[包括肺癌、乳腺癌及结直肠癌，男562例，女804例，年龄（59.45±15.10）岁]，对照组为70名健康体检人群[男35名，女35名，年龄（50.41±18.90）岁]，其中形成静脉血栓69例，男32例，女37例，平均年龄（61.20±15.71）岁。采用化学发光免疫分析法检测其静脉血浆中的血栓调节蛋白（TM）、凝血酶-抗凝血酶复合物（TAT）、组织型纤溶酶原激活物/抑制剂-1复合物（t-PAIC）、纤溶酶-抗纤溶酶复合物（PIC）。根据各项标志物的敏感度及特异度，采用受试者工作特征曲线评价各项标志物的诊断性能，采用Cox回归分析进行单因素及多因素风险分析。 结果 不同类型的恶性肿瘤患者静脉血栓栓塞（VTE）发生率具有统计学差异，肺癌最高，其次为结直肠癌及乳腺癌（P<0.05）；肺癌、乳腺癌及结直肠癌血栓组的TM、TAT、t-PAIC及PIC水平高于对照组，非血栓组的TAT、t-PAIC及PIC水平均高于对照组，差异均具有统计学意义（均P<0.05）。TM的最佳截断水平为10.57 IU/ml（敏感度为50.30%，特异度75.50%，AUC=0.671），TAT的最佳截断水平为4.16 ng/ml（敏感度为80.30%，特异度为62.80%，AUC=0.757），t-PAIC的最佳截断水平为11.44 ng/ml （敏感度为52.50%，特异度为84.00%，AUC=0.682），PIC的最佳截断水平为1.18 μg/ml（敏感度为67.20%，特异度为79.50%，AUC=0.790），四项分子标志物联合检测敏感度最佳，诊断性能最好（86.90%，AUC=0.807）。年龄、分期、转移、手术、肿瘤直径及PIC水平是影响恶性肿瘤VTE发生的独立影响因素（均P<0.05）。 结论 不同类型的恶性肿瘤血栓发生率不同，TM、TAT、t-PAIC及PIC联合检测诊断性能最好，可作为恶性肿瘤发生VTE的新型筛查方法。年龄、分期、转移、手术及肿瘤直径是恶性肿瘤发生VTE的高危因素，PIC水平可作为恶性肿瘤患者6个月内并发VTE风险的可靠标志物。

目的 探讨血清细胞因子水平对评价托珠单抗治疗幼年特发性关节炎全身型（systemic-onset juvenile idiopathic arthritis，SoJIA）疗效的意义。 方法 选取2016年6月至2018年10月在首都儿科研究所附属儿童医院住院的SoJIA患儿30例，其中男20例（67%），女10例（33%），诊断时年龄为0.84至13岁。使用白细胞介素-6受体拮抗剂（托珠单抗注射液）治疗，观察治疗前、用药2周后、用药6周后及用药22周后的血白细胞（WBC）、C反应蛋白（CRP）、动态红细胞沉降率（AESR）、血清白细胞介素（IL-6、IL-2R、IL-8、IL-10、IL-1β）及肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平。采用Mann-Whitney非参数检验以及卡方检验分析用药后不同时间上述细胞因子水平的差异。 结果 30例患儿，用药前均有发热，其中28例患儿应用托珠单抗后体温降至正常，治疗期间未再出现发热，1例患儿用药后出现过敏反应后停药，1例用药后疗效不佳停药。在用药后体温正常的28例患儿中，其关节炎及皮疹表现均有明显改善，且WBC、AESR及CRP均较用药前下降。28例SoJIA患儿，血清IL-6水平在第2周为107.50（28.03~281.50）pg/mL，与治疗前[168.50（67.40~589.25）pg/mL]相比差异无统计学意义（Z值为-1.754，P>0.05），用药6周后为64.05（19.90~130.75）pg/mL，用药22周后为24.80（3.45~95.40）pg/mL，浓度均低于治疗前，差异有统计学意义（Z值分别为-2.942、-3.334，P值均为<0.01）；血清IL-2R水平第2周为740.50（510.00~1 161.00）U/mL，第6周为796.50（534.00~1 008.00）U/mL，第22周为688.00（527.00~889.50）U/mL，分别与治疗前[1 322.50（812.00~1 659.00）U/mL]相比，均低于治疗前水平，差异有统计学意义（Z值分别为-2.818、-3.130、-3.466，P值均<0.01）；TNF-α浓度在用药2周后为23.70（20.30~41.23）pg/ml，6周后为26.75（16.83~47.03）pg/ml，22周后为18.60（13.10~34.90）pg/ml，分别与治疗前的26.50（20.55~37.43）pg/ml比较差异无统计学意义（Z值分别为0、-0.560、-1.954，P值均>0.05）；IL-8浓度在用药2周后为200.85（95.43~364.00）pg/ml，6周后为194.50（50.75~433.00）pg/ml，22周后为161.50（38.98~308.00）pg/ml，分别与治疗前的96.20（59.75~371.75）pg/ml比较差异无统计学意义（Z值分别为-0.86、-0.131、-0.186，P值均>0.05）；IL-10水平在用药2周后与用药前比较差异无统计学意义（χ2值为2.33，P>0.05），用药6周后及22周后分别与用药前比较差异有统计学意义（χ2值分别为4.08、4.08，P值均<0.05）；IL-1β水平用药2周后、6周后及22周后分别与用药前比较差异无统计学意义（χ2值分别为0.084、2.504、3.818，P值均>0.05）。 结论 应用托珠单抗治疗后，血清细胞因子IL-6和IL-2R水平有助于监测SoJIA病情活动及药物疗效。

肺纤维化为许多肺部疾病的终末期病变，以成纤维细胞异常增殖，细胞外基质过度沉积，组织疤痕形成和肺组织重塑为病理特征。近年研究表明，DNA甲基化参与了多个器官的纤维化过程，包括肺纤维化、肝纤维化和肾纤维化等。在临床诊断和治疗中，DNA甲基化的重要性也愈发明显。本文对DNA甲基化在肺纤维化中的研究进展做一综述，旨在探究肺纤维化的发病机制及抗纤维化治疗新思路。

目前核酸检测技术已被广泛应用于临床实验室诊断，常规检测技术如实时荧光定量PCR技术耗时长且依赖特定的仪器设备。成簇规律间隔短回文重复序列（CRISPR）/CRISPR相关蛋白（Cas）系统是细菌和古细菌在与病毒斗争过程中获得的适应性免疫防御机制，已被发展成强大的基因组编辑技术。最近CRISPR领域的先驱团队基于Cas13a、Cas12a和新发现的Cas14蛋白开发出SHERLOCK、DETECTR等新型核酸检测工具，在传染性疾病的快速诊断、癌症中基因突变的检测和基因分型等方面意义重大，其灵敏度高、特异性强且快速经济，在临床分子诊断领域具有巨大潜力。本文综述了CRISPR/Cas系统的作用机制及新型诊断平台的原理和应用进展，总结了新型检测技术的优缺点并对其发展前景进行展望。