2019年 · 第42卷第12期

补体系统是固有免疫系统的重要组成部分，目前许多证据表明，补体对机体的作用不仅仅限于清除病原微生物等危险因素，补体还可以通过不同的作用途径影响肿瘤免疫逃逸机制进而参与肿瘤的发生发展。鉴于补体在肿瘤中发挥着复杂且重要的作用，本文分别从补体固有成分、补体活化产物以及补体调节蛋白3个方面阐述补体系统参与肿瘤免疫逃逸的相关机制，并针对这些机制为补体在免疫检查点抑制剂治疗中的应用进行展望，旨在为肿瘤的免疫治疗提供新的方向。

血栓性微血管病（TMA）是一组急性临床-病理综合征，病因复杂。其中，妊娠相关TMA主要包括妊娠相关血栓性血小板减少性紫癜（TTP），产后溶血尿毒综合征（pHUS），重度子痫前期（SPE）以及溶血-肝酶升高-血小板减低综合征（HELLP syndrome）等，这类疾病起病凶险，严重威胁到母婴健康。近年的研究认为补体系统的异常活化在其发病中起到了重要的作用。虽然妊娠相关TMA临床表现类似，但其潜在的发病机制、诊断及治疗手段均不尽相同。本文将对补体系统相关成分的检测在妊娠相关TMA诊治中的价值进行介绍。

补体系统在系统性红斑狼疮（SLE）发病中发挥重要作用。目前在国际公认的SLE分类标准中，补体成分3（C3）、补体成分4（C4）作为SLE免疫学诊断指标之一。尽管补体C3和C4对系统性红斑狼疮的诊断有一定的价值，但它们并不是SLE非常特异的诊断指标。因而，需要发现更多有诊疗价值的指标。本文探讨了补体系统在系统性红斑狼疮研究的新进展，补体水平、细胞结合的补体激活产物及膜结合性补体调节蛋白均与SLE的发病有关，可有望成为SLE的诊断、预测转归的新型生物标志物。

脓毒症是一种生理学致病机制不明确的疾病综合征，严重威胁人类健康。最新定义指出脓毒症是指由感染诱发宿主反应失调造成危及生命的器官功能障碍。炎症反应过度伴随免疫抑制失衡会导致患者出现复杂的病理生理学变化。微小RNA（microRNA，miRNA）在脓毒症相关性炎症反应以及器官损伤过程中发挥重要的调控作用。脓毒症病程发展伴随有miRNA表达水平的变化，监测分析miRNA水平可以辅助诊断脓毒症，判断疾病预后。调控脓毒症相关miRNA表达水平能缓解疾病造成的器官损伤和功能障碍。

抗磷脂综合征（APS）是一种由抗磷脂抗体引起的非炎症性自身免疫性疾病。近年来研究发现，补体过度激活是导致APS血栓形成和病理妊娠的关键环节。随着人们对补体激活在APS发病机制认识的不断加深，针对补体的抑制治疗方法也相继涌现。因此，补体成分检测对APS的早期诊断、治疗及监测具有重要意义。

阿尔茨海默病（AD）是一种日益增长的全球性疾病，对个人和社会都有着巨大的影响。本文旨在阐述补体系统在AD不同发病机制中的最新研究进展，并对目前的临床实验室诊断方法进行了讨论。同时为寻求AD的生物标志物及疾病的早期干预提供理论依据及新思路。

血栓性微血管病（TMA），是一组具有共同病理特征的急性临床病理综合征，主要包括溶血尿毒综合征（HUS）和血栓性血小板减少性紫癜（TTP），两者在病因和临床表现方面有很多相似之处。补体旁路途径异常活化在HUS的发生发展过程中的作用已经得到公认。研究发现超过100多种补体调节因子或补体本身基因突变与HUS的发生有关，基因突变使得补体负性调节蛋白活性降低或补体激活蛋白功能增强，补体系统异常活化促使内皮损伤及血栓形成。血管性血友病因子裂解酶（ADAMTS）13活性缺失（<10%）是TTP最重要的发病机制，但越来越多的证据提示各种原因诱发补体旁路途径调节失控、过度激活参与了TTP的发生。目前寻找特异性的补体活化生物标志物对患有各种形式TMA的患者进行全面的补充检查，并开发针对该疾病新的靶向治疗药物，是目前国内外对TMA的研究热点。

目的 探讨血清补体与脂代谢水平检测对老年性骨质疏松症的辅助诊断价值。 方法 回顾性分析2016年1至6月在北京积水潭医院体检并进行骨密度检测的老年人群215例，根据骨密度T值分级，将研究对象分为骨质疏松组74例与非骨质疏松组141例。分析入组人群血清补体C3、补体C4、低密度脂蛋白胆固醇（LDL）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL）、三酰甘油（TG）、总胆固醇（CHO）与骨密度的关系，并采用t检验、非参数检验、二元Logistic回归和受试者工作特征（ROC）曲线分析数据。 结果 骨质疏松组的年龄、CHO、LDL、HDL、补体C3、C4[分别为（80.6±8.2）岁、（4.43±1.25）mmol/L、（2.27±0.73）mmol/L、（1.33±0.39）mmol/L、（1.12±0.22）g/L和（0.29±0.09）g/L]均显著高于非骨质疏松组[分别为（77.5±8.3）岁、（4.04±1.02）mmol/L、（1.97±0.59）mmol/L、（1.19±0.32）mmol/L、（0.86±0.25）g/L和（0.21±0.06）g/L，t值分别为2.571、-3.848、-4.483、-3.951、-1.249和-1.185，P<0.05]，BMI和双能X射线法（DXA）测定骨密度T值和BMI显著低于非骨质疏松组[两组结果分别为（22.33±3.8）kg/m2、－2.74±0.78和（25.03±4.2）kg/m2，0.14±0.9，t值分别为4.624和6.151，P<0.05]。骨质疏松组TG水平显著低于非骨质疏松组[中位数（四分位数）分别为1.21（0.67，1.44）mmol/L和1.37（0.86，1.67）mmol/L，Z=-2.51，P<0.05]。性别与血清HDL、LDL、C3和C4水平是预测老年性骨质疏松的独立危险因素（OR=2.476，P=0.004；OR=1.305，P=0.038；OR=1.564，P=0.028；OR=1.018，P=0.025；OR=1.023，P=0.015），女性患病风险是相同年龄男性的2.476倍，HDL、LDL、C3、C4每增加一个单位，相应的骨质疏松风险提高了1.305、1.564、1.018和1.023倍。HDL、LDL、C3和C4单独检测的ROC曲线下面积分别为0.623、0.595、0.673、0.731，四项联合检测的ROC曲线下面积为0.864。 结论 血脂与补体水平与骨密度显著相关，联合检测血脂代谢与补体可以提高老年性骨质疏松的诊断效能。

目的 探讨脑脊液循环游离DNA（cfDNA）在非小细胞肺癌（NSCLC）脑膜转移诊疗中的应用价值。 方法 收集2017年9月至2018年11月间来自复旦大学附属华山医院北院的25例NSCLC脑膜转移患者，25例患者均经脑脊液肿瘤细胞学镜检并细胞角蛋白7（CK7）、癌胚抗原（CEA）、甲状腺转录因子-1（TTF-1）以及Ki67免疫细胞化学染色确诊为脑膜转移。提取脑脊液cfDNA，采用二代测序[鹍远基因PlasAim TM肺癌基因无创检测（12基因）试剂盒]的方法，检测脑脊液中包括表皮生长因子受体（EGFR）、TP53、间变性淋巴瘤激酶（ALK）等12个基因的变异情况；最终综合分析以评估脑脊液cfDNA在NSCLC脑膜转移诊疗中的应用价值。 结果 25例患者的脑脊液均查见典型肿瘤细胞，广谱CK、CK7和CEA均为阳性，由此确诊为NSCLC脑膜转移。脑脊液cfDNA二代测序中，96%（24/25）患者至少存在1种单核苷酸变异（SNV）或拷贝数变异（CNV），其中EGFR和TP53的突变率分别高达80%（20/25）和48%（12/25）。此外，合并骨转移的患者相对无骨转移的患者来说，发生EGFR的突变率更高（100%比64%，P<0.05）。在辅助治疗方面，脑脊液EGFR和TP53突变频率的变化与患者病情进展（神经系统症状、影像学及生化指标的综合评估）相一致，且EGFR T790M的检出有助于指导患者进行靶向治疗。 结论 脑脊液cfDNA准确揭示了NSCLC脑膜转移的独特基因表型，在脑膜转移的诊疗中具有重要的应用价值。

目的 探讨假性缺陷等位基因携带情况对荧光法检测干血滤纸片酸性α-葡萄糖苷酶（GAA）活性进行新生儿糖原贮积病Ⅱ型（GSDⅡ）筛查的影响。 方法 对2017年5至12月上海交通大学医学院附属新华医院新生儿疾病筛查中心的30 507份新生儿干血滤纸片（dried blood spot, DBS）通过荧光法检测其酸性α-葡萄糖苷酶（GAA）活性进行GSDⅡ筛查，对筛查疑似阳性新生儿原DBS经GAA基因分析确认其基因突变及假性缺陷等位基因的携带情况。回顾性分析3 172例非GSDⅡ人群和36例GSDⅡ患者中假性缺陷等位基因携带情况，采用卡方检验或Fisher确切概率法对假性缺陷等位基因携带频率进行数据统计分析。 结果 30 507份新生儿DBS标本GAA酶活性呈正偏态分布，初次和二级筛查检出29例新生儿疑似阳性，GAA基因分析未发现GSDⅡ患者，但该29例中24例携带纯合假性缺陷等位基因c.[1726A/A; 2065A/A]，5例携带杂合假性缺陷等位基因c.[1726G/A; 2065G/A]。3 172例非GSDⅡ人群中假性缺陷等位基因c.1726G>A纯合子频率为2.08%（66/3 172），当c.1726 G>A纯合突变时，同时发生c.2065 G>A纯合突变频率为100%（66/66），c.[1726A; 2065A]单倍体型频率为3.2%（206/6 344）。36例GSDⅡ患者中6例（16.67%，6/36）携带纯合假性缺陷等位基因c.[1726A/A; 2065A/A]，显著高于非GSDⅡ人群（2.08%，66/3 172）（P<0.001, χ2=34.517）。 结论 假性缺陷等位基因在中国人群中携带率较高，可导致荧光法检测GAA酶活性进行新生儿GSDⅡ筛查的假阳性率升高，新生儿筛查后对原干血滤纸片的基因检测可降低其对新生儿筛查的影响。

目的 探讨GALAD模型[包括性别（gender）、年龄（age）、甲胎蛋白（AFP）、甲胎蛋白异质体（AFP-L3）、异常凝血酶原（DCP）]对原发性肝细胞癌诊断以及预测微血管侵犯（MVI）的价值。 方法 采用回顾性研究方法，选择2015年1月至2018年12月在东方肝胆外科医院接受根治性手术治疗的原发性肝细胞癌（HCC）患者5 919例为研究组，选取同期良性肝脏疾病（BLDs）1 745例为对照组，采用LUMIPULSE G1200全自动免疫分析仪检测DCP浓度，罗氏Cobas e601全自动免疫分析仪检测血清AFP浓度，通过亲和吸附离心法检测AFP-L3，两组间比较采用非参数Mann-Whitney检验，率的比较采用卡方检验，分析单个血清学标志物与GALAD模型对原发性肝细胞癌的诊断价值，同时评价GALAD模型对原发性肝细胞癌发生MVI的预测效能。 结果 与单个血清标志物相比，GALAD模型对原发性肝细胞癌的诊断价值更高，在截断值为－0.33时，诊断敏感度、特异度和准确性分别为91.9%(5 440/5 919)、86.8%(1 515/1 745）和90.7%(6 955/7 664)，曲线下面积可达0.960[95%CI（0.955~0.964）]。与未发现MVI（MO）相比，MVI低危组（M1）、MVI高危组（M2）、发现MVI（M1+2）的GALAD模型值均显著升高（Z值分别为－12.517、-22.883、-21.655，P<0.05）, GALAD模型预测高危组MVI（M2）曲线下面积为0.717[95%CI (0.701~0.733)]（M0比M2）。 结论 GALAD模型用于原发性肝细胞癌的诊断性能更优，并对MVI具有一定的预测价值。

目的 基于液相芯片技术，建立一种可同时、快速检测细胞色素P450 2C9（cytochrome P450 2C9, CYP2C9）、CYP2C19、CYP4F2、维生素K环氧化物还原酶（vitamin K epoxide reductase, VKORC1）及ATP结合盒亚家族B成员1（ATP-binding cassette subfamily B member1, ABCB1）等与华法林和氯吡格雷相关药物基因多态性的方法。 方法 方法学的建立。从Genbank中查找与华法林和氯吡格雷药物相关的8个靶位点附近基因序列，设计特异性引物和探针；通过多重PCR扩增，等位基因特异性引物延伸（allele specific primer extension, ASPE），MagPlex-Tag微球杂交，经液相芯片系统Luminex 200检测荧光信号，确定基因型；优化反应体系并进行方法学评价。收集2017年6月至2018年12月东莞市厚街医院抗血栓治疗患者血液样本，共260例，采用建立的方法检测其8个靶位点，并与测序结果比较。 结果 本方法检测260例样本结果显示：纯合子荧光强度中位值（median fluorescence intensity, MFI）比率均>0.9或<0.1，杂合子MFI比率均在0.3~0.6之间；各基因型批内和批间变异系数分别低于6.4%和10.9%；所需DNA最低检测限为0.75 ng；260例样本的检测结果与测序结果完全一致。 结论 本研究采用液相芯片技术，成功建立了快速检测华法林和氯吡格雷相关药物基因型的方法。

目的 建立用于腐食酪螨过敏原特异性IgE抗体检测的纳米磁微粒化学发光法。 方法 依据化学发光常规操作步骤，设置条件建立腐食酪螨过敏原特异性IgE检测的化学发光反应体系和合适的免疫反应条件，并以美国Phadia方法为标准，评估所建立化学发光方法的检验性能。应用SPSS 21.0软件对两种方法的阳性率χ2进行检验，以Phadia为标准，评价化学发光方法的检测性能。 结果 化学发光反应体系中，发光底物A液中鲁米诺浓度为0.4 mg/ml、发光底物B液中过氧化氢脲浓度为0.2 mg/ml，此发光反应体系对辣根过氧化物酶（horseradish peroxidase，HRP）的敏感性很髙，可检测到HRP的最小量为0.01 ng/ml，在免疫反应中，加入底物A液和B液后室温避光反应5 min检测，在5~30 min内检测数值均有效，37 ℃为最佳发光反应温度；选择0.35~100 IU/ml范围作为标准曲线；以Phadia方法为标准，本研究建立的化学发光法敏感度为80.95%、特异度为100%、漏诊率为19%，用于检查腐食酪螨有显著意义。 结论 本研究成功建立纳米磁微粒化学发光法检测腐食酪螨过敏原特异性IgE抗体。

目的 探讨样本保存时间和温度对流式细胞术检测淋巴细胞亚群结果的影响。 方法 采用流式细胞术检测青海省人民医院2018年10月26日至2019年3月30日住院和门诊患者共53例全血样本的淋巴细胞亚群。于样本采集后4 h内完成检测（对照组）、4 h内完成细胞染色，将已染色样本室温保存（处理组A）24 h、36 h后再上机检测、样本室温保存（处理组B）24 h、48 h、72 h后、样本4 ℃保存（处理组C）24 h、48 h、72 h后，分别进行淋巴细胞亚群的检测与分析。实验数据采用SPSS 19.0统计软件进分析。 结果 处理组A中，保存24 h检测的淋巴细胞亚群结果与对照组相比均无显著差异（P>0.05），保存36 h之后检测CD3+及CD3+CD8+T淋巴细胞百分数显著增高[（74.28±11.31）%比（73.78±11.33）%，（32.15±14.82）%比（31.00±14.79）%；P值均<0.05]，CD19+细胞百分数明显降低[（15.60±12.23）%比（16.11±12.38）%；P<0.05]；处理组B中，保存24 h检测的淋巴细胞亚群结果与对照组相比差异无统计学意义（P>0.05），保存48 h后检测CD19+细胞百分数明显下降[（15.60±12.09）%比（16.11±12.38）%；P<0.05]，其他结果无明显改变（P>0.05），保存72 h后检测CD3+及CD3+CD8+T细胞百分数明显升高[（75.78±11.18）%比（73.78±11.33）%，（32.57±14.90）%比（31.00±14.79）%；P值均<0.05]，CD19+细胞百分数显著减少[（14.89±11.92）%比（16.11±12.38）%；P<0.05]；处理组C中，保存24 h检测的淋巴细胞亚群结果与对照组相比差异无统计学意义（P>0.05），保存48 h后检测CD3+CD8+T细胞百分数显著升高[（32.03±14.95）%比（31.00±14.79）%；P<0.05]，CD19+细胞百分数明显减少[（15.32±11.97）%比（16.11±12.38）%；P<0.05]，保存72 h后检测CD3+及CD3+CD8+T细胞百分数升高明显[（75.63±11.08）%比（73.78±11.33）%，（32.62±14.98）%比（31.00±14.79）%；P值均<0.05]，CD56+及CD19+细胞百分数显著降低[（8.21±6.52）%比（9.02±6.80）%，（14.83±11.79）%比（16.11±12.38）%；P值均<0.05]。 结论 流式细胞术检测淋巴细胞亚群时，若不能及时完成检测，可将血液样本在室温环境下保存，并于48 h内完成检测；已经过预处理的样本，可在染色后室温保存24 h再进行检测，以上处理方式对检验结果均无显著影响。

在医疗领域大数据迅速发展的背景下，深度学习（Deep Learning，DL）作为一种机器学习算法，为图像识别、语音识别和自然语言处理中许多问题提供了更灵活的解决方案，具有从医学大数据中提取重要信息并转化为有价值知识的能力，在许多现实任务中受到前所未有的关注。本文阐述深度学习常见网络结构，浅谈其在检验医学领域的最新研究进展，并对影响医学领域深度学习的一些固有挑战和前瞻性研究方向进行了探讨。

沙眼衣原体（CT）是临床上引起沙眼和性传播疾病的主要病原体。本文阐述了CT分子生物学检测技术的进展与应用，主要包括荧光定量PCR技术、核酸恒温扩增技术、PCR-杂交技术、测序技术，并比较不同方法的优缺点，同时介绍了CT的即时检验方法。

醛固酮是一种类固醇激素，通过作用于肾脏来维持机体的水钠平衡。原发性醛固酮增多症（简称原醛）是最常见的引起内分泌性高血压的疾病，其临床表现隐匿，具有较高的死亡率。肾素-醛固酮比值（ARR）、血/尿醛固酮的检测是最有效筛查和确诊原醛的方法。人体内醛固酮含量低且存有类似结构的干扰物质，因此对其准确定量具有一定的挑战性。醛固酮检测方法有放射免疫法、酶联免疫吸附法、化学发光法和质谱。每种方法具有各自的优缺点，且不同检测方法诊断原醛的ARR比值也不完全一致。因此本文对醛固酮检测方法及临床应用的研究进展进行综述。

临床生化检验是医学检验的重要亚专业之一，也是各级各类考试的重点与难点。但临床生化检验的带教也最容易走入"只教仪器操作，其他靠学员自学"的误区，甚至出现教师不知该教什么，学员不知该学什么的迷茫情绪。在此，阐述检验科临床生化室的带教经验，制订的版块式培训方案，采用的导师负责制与日常带教相结合模式，灵活运用操作演示、专题小讲座、案例教学等多种教学手段，辅以面试、笔试、演讲汇报等过程性考核形式，显著提高了临床生化检验的教学质量。