IFCC参考方法在五种糖化血红蛋白检测系统评价中的应用张天娇 蒲云罡 周慧娟 马嵘 张江涛 王大光 李传保 李淼 王玉飞 张传宝
中华检验医学杂志2018年 41卷 11期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2018.11.007
目的
以国际临床化学与检验医学联合会(IFCC)糖化血红蛋白参考方法为参比方法,对4个离子交换高效液相色谱法检测系统和1个毛细管电泳检测系统进行方法学评价研究。
方法
制备40个浓度水平的溶血液样本,分别用IFCC参考方法和待评价的5个糖化血红蛋白检测系统进行测定,按照美国临床实验室标准化协会(CLSI)EP9-A3文件的程序进行正确度验证。使用全血样本,对5种系统的精密度、线性和分析干扰进行评价。
结果
IFCC参考方法测定40个溶血液样本的平均变异系数(CV)为1.4%(范围0.2%~2.5%)。经统计,5个系统测定结果未检出离群值,回归方程的斜率范围为0.990 2~1.026 7,截距范围为-0.152 6 mmol/mol ~ +0.151 2 mmol/mol,决定系数的范围为0.996 2~0.997 1,两个医学决定水平处估计值的偏倚均小于0.3%HbA1c。各系统实验室内CV均小于2%(NGSP单位)。线性评价中所有系统测定结果与理论值的百分偏差均小于5%。高浓度葡萄糖对糖化血红蛋白检测存在一定的分析干扰。
结论
5个糖化血红蛋白检测系统测定结果与IFCC参考方法具有较好的可比性,精密度和线性评价的结果符合相关标准的要求。(中华检验医学杂志,2018, 41:821-826)
2017年全国糖化血红蛋白室间质量评价不及格原因调查与分析黄钰竹 李婷婷 赵海建 王薇 张传宝 杜雨轩 王治国
中华检验医学杂志2018年 41卷 11期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2018.11.008
目的
调查分析全国糖化血红蛋白室间质量评价(EQA)不及格的原因,改进实验室检测质量。
方法
2017年2月底以特快专递的形式将5个批号的糖化血红蛋白EQA样品发放给参评实验室,在参评实验室检验并上报结果后,统计分析并发放回报表,同时短信通知出现EQA结果不及格的实验室。利用基于Web的EQA系统调查糖化血红蛋白EQA不及格的原因,统计EQA不及格率,分析不及格原因,并将EQA不及格率与当月变异系数(CV)联合分析。
结果
糖化血红蛋白的EQA不及格率为11.2% (179/1 601),不及格原因回报率为70.4% (126/179)。不及格原因分析结果显示设备问题(27.8%,35/126)和技术问题(26.2%,33/126)为主要的原因大类;"设备功能故障"(12.7%,16/126)和"方法学缺陷"(10.3%,13/126)为主要的原因亚类,调查后无法解释占8.7%(11/126)。当月CV<2%组的100%及格率高于当月CV≥2%组,≤80%不及格率低于当月CV≥2%组。
结论
本次糖化血红蛋白EQA不及格原因调查结果总体上是满意的,实验室、厂商和EQA组织者都应通过EQA数据改进工作中的问题,提高检测质量。(中华检验医学杂志,2018, 41:827-831)
改良毛细管免疫分型技术在冷球蛋白分型鉴定中的应用秦绪珍 李鹏昌 曹欣欣 李剑 王亚静 刘荔 刘茜 李航 苏薇
中华检验医学杂志2018年 41卷 11期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2018.11.009
目的
改良毛细管免疫分型技术用于冷球蛋白鉴定的方法建立与临床应用。
方法
参考文献及工作经验,建立改良毛细管免疫分型技术用于冷球蛋白鉴定。严格按照冷球蛋白采样要求,收集2016年11月至2017年7月在北京协和医院检测冷球蛋白阳性的标本78份,其中39份分别采用改良的毛细管免疫分型和免疫固定电泳方法进行分型鉴定。
结果
采用改良毛细管免疫分型技术,78例冷球蛋白阳性标本中鉴定出Ⅲ型冷球蛋白最多,其次是Ⅱ型、Ⅰ型,不同类型冷球蛋白血症患者临床特点与既往报道相似。在检测速度、结果判读的清晰度和准确度上,改良毛细管免疫分型技术明显优于免疫固定电泳方法,两者可报告比例为1∶0.87。
结论
毛细管免疫分型技术是一种准确而简便易行的冷球蛋白鉴定方法,适于临床实验室使用。(中华检验医学杂志,2018, 41:832-836)
非粒细胞缺乏患者侵袭性肺曲霉菌感染的早期诊断价值周建林 曹颖平 张晓琍 张丽华 王梅华
中华检验医学杂志2018年 41卷 11期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2018.11.010
目的
探讨支气管肺泡灌洗液(BALF)半乳甘露聚糖(GM)试验对非粒细胞缺乏患者侵袭性肺曲霉菌感染(IPA)的早期诊断价值。
方法
收集2016年1月至2017年10月福建医科大学附属协和医院重症医学科与呼吸科怀疑IPA的患者199例,排除粒细胞缺乏。根据欧洲癌症研究和治疗组织/侵袭性真菌感染协作组和美国国立变态反应和感染病研究院真菌病研究组共识分为IPA组和非IPA组。分别采集两组患者的BALF和血清行GM试验。用SPSS 20.0统计学软件对IPA组和非IPA组结果进行统计分析。
结果
IPA组的BALF和血清GM指数(I)值分别为2.41±2.19和0.65±1.08,差异有统计学意义(u=8.27,P<0.000 5)。非IPA组的BALF和血清GMI值分别为0.37±0.33和0.2±0.15,与IPA组比较,差异均有统计学意义(u=11.18和7.07,P<0.000 5)。当I≥0.5为阳性阈值时,BALF GM检测的敏感度、阳性预测值和阴性预测值分别为86.36%、74.02%和92.62%,均高于血清GM试验(分别为31.8%、67.74%和73.21%)。BALF GM检测的特异性为84.96%,低于血清GM试验(92.48%);当I≥1.0为阳性阈值时,BALF GM检测的敏感度、阳性预测值和阴性预测值分别为66.66%、84.61%和85.03%,仍都高于血清GM试验(分别为24.24%、76.19%和71.9%),而特异度方面两者相近(95.98%和96.24%)。
结论
在非粒细胞缺乏的IPA患者中,BALF GM检测具有较高的敏感性和特异性,优于血清GM试验,在其早期诊断中具有重要价值。(中华检验医学杂志,2018, 41:837-840)
MiR-181a和miR-181b靶向调控FUT1对结直肠癌进展的影响周杰 郑远明 沈宗坤 马晓露 李艳菊
中华检验医学杂志2018年 41卷 11期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2018.11.011
目的
通过研究miR-181a及miR-181b与岩藻糖基转移酶FUT1的相关性,阐明miR-181a和miR-181b靶向调控FUT1在结直肠癌转移中的功能机制。
方法
收集2014年3月至2016年1月大连医科大学附属第一医院经手术切除的结直肠癌及其癌旁组织共32对组织标本,男性18例,女性14例;采用RT-PCR方法检测了32对结直肠癌患者癌组织、癌旁组织、结直肠癌患者和健康人血清及结直肠癌高转移细胞株SW620、低转移细胞株SW480中miR-181a和miR-181b的表达。通过皮尔森"Pearson"相关曲线得出FUT1与miR-181a、miR-181b表达相关趋势。通过生物信息学网站TargetScan、microRNA.org和Starbase v2.0预测及双荧光素酶实验报告验证miR-181a、miR-181b与FUT1的靶向关系;通过CCK8,划痕实验,transwell小室及血管形成进一步检测SW480、SW620细胞中miR-181a和miR-181b表达调控对肿瘤细胞增殖、迁移、侵袭及血管形成的影响。两独立样本间的比较采用t检验,多个样本间的比较采用单因素方差分析,相关分析采用Pearson相关系数分析。
结果
miR-181a、miR-181b在结直肠癌组织中的表达明显低于癌旁组织(3.12±1.88 vs 6.44±2.32,t=11.74; 3.16±1.77 vs 5.52±2.45, t=3.24,P均<0.05);miR-181a、miR-181b在结直肠癌患者血清的表达量明显低于健康人血清中的表达量(1.32±0.25,2.57±0.48,t=10.26;0.91±0.14,1.63±0.29,t=5.19;P均<0.05);在结直肠癌细胞株SW480和SW620中的表达明显低于正常结直肠上皮细胞株FHC[(0.65±0.10、0.50±0.09)vs 1.0, (0.60±0.12、0.42±0.03)vs 1.0; t=3.08,P均<0.05]; FUT1在结直肠癌组织及SW620中高表达(t=5.23,P<0.05)。TargetScan、microRNA.org和Starbase v2.0软件预测FUT1与miR-181a、miR-181b具有靶向结合位点,双荧光素酶实验验证FUT1为miR-181a、miR-181b的共同靶基因。特异性上调SW620细胞中miR-181a、miR-181b,细胞的增殖、迁移、侵袭、血管形成能力明显降低且FUT1的表达量显著下降。干扰SW480细胞中的miR-181a、miR-181b,细胞的增殖、迁移、侵袭、血管形成能力明显增加且FUT1的表达显著增强。干扰FUT1的表达逆转了miR-181a和miR-181b对SW480细胞侵袭能力的抑制作用。
结论
miR-181a、miR-181b通过靶向调控FUT1的表达抑制结直肠癌细胞的增殖、迁移、侵袭及血管形成。(中华检验医学杂志,2018, 41:841-846)
血清C1q和NGAL及CysC联合检测对早期糖尿病肾病辅助诊断的临床评价樊玲英 俸家富
中华检验医学杂志2018年 41卷 11期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2018.11.012
目的
探讨血清补体组分1q(C1q)、半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(CysC)、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、肌酸酐(SCr)和尿素(SUr)检测对早期糖尿病肾病(EDKD)的诊断价值。
方法
回顾性研究方法。收集2017年3至11月绵阳市中心医院就诊或体检的受试者530例,其中229例糖尿病(DM组)患者被分为单纯糖尿病组(SDM组,n=100例)和EDKD组(n=129例),301名体检者作为健康对照组(HC组)。测定受试者血清C1q、CysC、NGAL、SCr和SUr,评价这些指标单独检测和联合检测对EDKD的诊断性能。采用单因素方差分析比较各组间检测指标的差异,用受试者工作特征曲线评价所观察指标的诊断性能。
结果
受试者血清C1q、CysC、NGAL、SCr水平(中位数),早期糖尿病肾病组分别为:187.80 mg/L、1.02 mg/L、148.70 μg/L、72.00 μmol/L;单纯糖尿病组分别为:177.00 mg/L、0.80 mg/L、116.20 μg/L、55.35 μmol/L;健康对照组:163.60 mg/L、0.75 mg/L、104.20 μg/L、59.40 μmol/L。早期糖尿病肾病组血清C1q、CysC、NGAL、SCr和SUr水平均显著高于单纯糖尿病组(t1值分别为6.50、9.44、3.87、9.19和4.34,P<0.05)和健康对照组(t2值分别为7.26、12.54、5.86、6.16和6.49,P<0.05)。ROC曲线分析显示,单独检测时,CysC(AUC=0.837)对EDKD的诊断性能明显高于C1q(AUC=0.731)、NGAL(0.742)和SCr(AUC=0.720)(均P<0.05);两两联合检测时,C1q+CysC的诊断性能较好(AUC=0.890,Se=79.1%, Sp=86.5%, YI=0.656)。在此基础上,增加检测NGAL(z=1.817,P>0.05)或NGAL+SCr (z=1.806,P>0.05)未显著改善对EDKD的诊断性能。
结论
C1q、CysC和NGAL对EDKD的诊断优于SCr和SUr,其中C1q和CysC联合检测对EDKD具有更好的诊断性能。(中华检验医学杂志,2018, 41:847-852)
胸腔积液肝素结合蛋白检测对肺炎旁胸腔积液鉴别诊断的临床价值张莉 白永凤 蒋峻梅 祝进
中华检验医学杂志2018年 41卷 11期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2018.11.013
目的
探讨胸腔积液肝素结合蛋白(HBP)检测在胸腔积液患者中对肺炎旁胸腔积液(PPE)鉴别诊断的应用价值。
方法
病例对照研究。收集2018年2至7月在衢州市人民医院住院的189例胸腔积液患者的胸腔积液标本,其中肺炎旁胸腔积液(肺炎组)72例,结核性胸腔积液(结核组)24例,恶性胸腔积液(恶性组)46例,其他原因引起的漏出液(漏出液组)47例。对所有胸腔积液进行常规分析和胸腔积液乳酸脱氢酶(LDH)、胸腔积液腺苷脱氨酶(ADA)、胸腔积液总蛋白(TP)检测,并采用酶联免疫吸附法测定胸腔积液HBP水平。各组总体水平差异采用Kruskal-Wallis H检验,方差齐性多组比较采用单因素方差分析,方差不齐多组比较采用LSD检验,计数资料比较采用卡方检验。绘制ROC曲线评价胸腔积液中HBP、LDH、ADA、TP水平在PPE鉴别诊断中的应用。
结果
胸腔积液HBP浓度在肺炎组为316.1(99.5,399.8)ng/ml,结核组为64.7(18.6,96.8)ng/ml,恶性组15.2(8.4,33.3)ng/ml,漏出液组14.1(6.5,23.0)ng/ml。肺炎组胸腔积液HBP水平与其他3组之间比较,差异有统计学意义(H=120.3,P<0.05)。当cut-off值为64.2 ng/ml时受试者工作特征(ROC)曲线下面积为0.953,灵敏度为88.9%(64/72),特异度为89.7%(105/117),阳性预测值为84.2%(64/76),阴性预测值为92.9%(105/113),总符合率为89.4%(169/189)。
结论
胸腔积液HBP水平诊断效能高,能较好区分胸腔积液患者的PPE,可能是PPE鉴别诊断的生物标志物。(中华检验医学杂志,2018, 41:853-857)
尿液BK病毒监测在造血干细胞移植术后出血性膀胱炎中的临床意义彭灿辉 伍勇 潘坤 陈辉
中华检验医学杂志2018年 41卷 11期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2018.11.014
目的
探讨尿液BK病毒(BKV)与造血干细胞移植(HSCT)术后迟发性出血性膀胱炎(HC)的关系。
方法
回顾性分析2015年6月至2018年4月在中南大学湘雅三医院行HSCT且每周规律进行尿液BKV监测的80例血液病患者,其中女35例,男45例,年龄(20~40)岁,中位年龄30岁,急性髓系白血病(AML)31例,急性淋巴细胞白血病(ALL) 24例,再生障碍性贫血(AA)15例,慢性粒细胞白血病(CML)4例,骨髓增生异常综合征(MDS)等其他疾病6例。分析HSCT后的尿液BKV的阳性率和HC的发生率。根据是否发生HC将尿液BKV阳性的HSCT患者分为HC亚组和非HC亚组。对HC亚组和非HC亚组的尿液BKV载量进行比较和统计学分析。将尿液BKV载量进行对数值转换,符合正态分布的数据以均值±标准差表示,采用t检验、方差分析及ROC曲线等方法进行统计分析,偏态数据以中位数(四分位间距)表示,非正态分布参数比较用Wilcoxon检验。
结果
80例HSCT患者有43例(53.75%)尿液BKV阳性,其中19例发生HC(23.75%),HC患者均为持续多次尿液BKV阳性患者;37例尿液BKV阴性患者无1例发生HC; HC亚组首次尿液BKV载量、高峰时尿液BKV载量分别为:(7.59±2.46)lg拷贝/ml、(10.56±1.71)lg拷贝/ml,非HC亚组首次尿液BKV载量、高峰时尿液BKV载量分别为(5.75±2.10)lg拷贝/ml、(7.31±2.29)lg拷贝/ml,HC亚组的首次尿液BKV载量、高峰时尿液BKV载量均高于非HC亚组首次尿液BKV载量(t=2.642,P=0.012)、高峰时尿液BKV载量(t=5.147,P=0.000)。对HC亚组和非HC亚组的首次尿液BKV阳性载量对数值进行ROC曲线分析时,ROC曲线下面积为0.728(95% CI 0.575~0.881),最佳截断点为5.23 lg拷贝/ml(1.68×105拷贝/ml),敏感度为84.20%,特异度为54.17%;对HC亚组和非HC亚组的高峰尿液BKV载量对数值进行ROC曲线分析时,ROC曲线下面积为0.875(95% CI 0.769~0.981),最佳截断点为9.75 lg拷贝/ml(5.62×109拷贝/ml),敏感度为84.20%,特异度为83.33%。
结论
HSCT患者中尿液BKV载量与HC之间存在显著相关性,以首次尿液BKV水平为1.68×105拷贝/ml或者尿液BKV高峰水平为5.62×109拷贝/ml为阈值可以用来预测或辅助诊断HC的发生。(中华检验医学杂志,2018, 41:858-862)
环状RNA hsa_circ_0031739与2型糖尿病关系的初步研究房远 王晓霞 潘琦 李文卿 金军华 张恩毅 邹丽辉 肖飞
中华检验医学杂志2018年 41卷 11期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2018.11.015
目的
筛选高糖处理人脐静脉内皮细胞中差异表达环状RNA,分别在细胞模型中和2型糖尿患者外周血中进行验证,为探索2型糖尿病的生物学诊断标志物奠定基础。
方法
以脐静脉内皮细胞作为实验模型,设置对照组(n=3)与高糖组(n=3),分别使用正糖(5.5 mmol/L)及高糖(30.0 mmol/L)条件进行处理,运用高通量测序技术初步筛选差异表达环状RNA。通过PCR和实时定量PCR(q-PCR)技术,在内皮细胞模型中对差异表达环状RNA进行验证。随后,在2型糖尿患者外周血(n=32)及正常人外周血(n=28)中,进一步验证上述差异表达环状RNA。运用t-检验、相关性分析和ROC曲线,对实验结果进行分析。
结果
高通量测序共筛选出1 087个差异表达环状RNA,其中554个上调,533个下调。从中挑选出6个上调环状RNA在脐静脉内皮细胞模型中初步验证,发现,PCR结果及q-PCR结果与测序结果基本一致。再从中挑选出3个上调最为明显的环状RNA在外周血中进一步验证。本研究发现,环状hsa_circ_0031739在外周血样本中的差异表达也具有统计学意义(0.015±0.002 5 vs. 0.006±0.001 3,P=0.005 9<0.05),ROC曲线下面积为0.730,并且与血糖和糖化血红蛋白水平正相关(r=0.317,P=0.013 7<0.05;r=0.348,P=0.006 4<0.05)。
结论
人脐静脉内皮细胞作为糖尿病研究中常用的细胞模型,高糖处理后存在差异表达环状RNA谱。环状RNA hsa_circ_0031739在细胞模型和2型糖尿病外周血样本中的差异表达均具有统计学意义,与血糖及糖化血红蛋白相关,具有一定的诊断意义。因此,环状RNA hsa_circ_0031739有望成为糖尿病新型生物学诊断标志物,有助于2型糖尿病的综合诊断和疾病机理研究。(中华检验医学杂志,2018, 41:863-869)
ID-LC-MS检测血清载脂蛋白A-I和B载脂蛋白的多肽释放研究李卿 居漪 孙贺伟 金中淦
中华检验医学杂志2018年 41卷 11期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2018.11.016
目的
研究质谱技术检测载脂蛋白A-I和载脂蛋白B的多肽释放情况,为准确定量蛋白提供依据。
方法
方法学研究。确定载脂蛋白A-I和B的目标肽段。以目标肽段为检测对象,用同位素稀释液相色谱串联质谱法测定5份市售人血清样本中的载脂蛋白A-I和B,浓度范围分别为0.90~2.54 g/L和0.54~1.39 g/L。计算不同时间点的多个肽段释放量和速率,并绘制散点图。计算不同样本间,肽段释放量的相关系数R2。
结果
多数肽段在4 h内即达释放峰值。Apo A-Ⅰ的肽段VQ、DY和VS,以及Apo B的肽段TE和FP生成速度相对较慢。达到峰值后,TEV/SIL-TEV、AK/SIL-AK和VQ/SIL-VQ的比值相对稳定。对于Apo A-I,不同肽段之间的相关性较高,R2在0.904~0.999之间;对于Apo B,部分肽段之间的相关性较低,如TG-SV的R2=0.543(3 h)。
结论
Apo A-I和Apo B不同肽段的酶解释放情况不同,合适的选择代表性肽段和酶解条件将有助于准确定量目标蛋白。(中华检验医学杂志,2018, 41:870-874)