2018年 · 第41卷第10期

炎症性肠病(IBD)是病因不明的慢性肠道炎症性疾病，可能与环境、遗传和免疫等因素有关。IBD个体化或精准诊疗是目前IBD临床管理发展的新方向。生物标志物的检测在IBD的诊疗和临床管理中显得十分重要，除了传统生物标志物外，基于遗传学、miRNA及代谢组学等新型标志物在IBD的诊断和鉴别诊断；疾病活动性、严重程度及并发症的判定；治疗方案选择和治疗效果的预测等方面的有良好的应用前景，并将有助于临床IBD患者实现个体化管理。(中华检验医学杂志，2018, 41：703-707)

近期我国新版炎症性肠病诊断与治疗共识意见发布，其中ASCA、ANCA等血清学标志物检测对鉴别诊断的价值没有达成共识，不推荐作为常规检查项目。但在一些特殊病例，因症状和临床过程的不典型性，或不宜进行有创内镜检查，使具有较高特异性的血清学检测在鉴别诊断中仍具有临床意义。大部分国外研究支持ASCA、ANCA等血清学检测对预测IBD的发生、判定疾病生物学行为，预判生物制剂的疗效和手术后复发等都具有一定的意义。探讨不同血清学标志物联合检测方法的诊断价值，寻找敏感性高、特异性强的血清学标志物是这一领域今后研究的热点。"未达成共识"正是对我国血清学检测对IBD诊治的临床意义做多中心、大样本临床研究的期望。(中华检验医学杂志，2018, 41：708-711)

炎症性肠病(IBD)包括溃疡性结肠炎(UC)和克罗恩病(CD)，为累及结直肠的特发性炎症。近年来，IBD在我国发病率呈逐年上升趋势，成为影响我国人民群众健康的重要疾病之一。尽管传统诊断方法可对IBD患者进行肠道炎症评估，但存在检查创伤性、结果解释有赖于主观临床经验等局限；因此，临床亟待需要非侵入性、准确客观、更具实践性方法对IBD患者进行诊断、监测或预测复发。随着科学技术提高以及对IBD发病机制认识加深，遗传易感标记，肠道微生态及代谢标记，肠屏障及通透性标记等相关标志物不断涌现而出，开启了诊断IBD疾病新领域。(中华检验医学杂志，2018, 41：712－715)

炎症性肠病包括克罗恩病和溃疡性结肠炎，目前尚无诊断金标准。生物标志物是一种客观测定和评价生理、病理过程中某种特征性的生物指标，现已广泛应用于IBD患者的诊断及预后监测中。(中华检验医学杂志，2018, 41：716－719)

消化系统恶性肿瘤通常起病隐匿，发病率和死亡率均较高，目前仍缺乏有效的干预策略。白介素22(IL－22)是近年来发现的IL－10细胞因子家族中的一员，最初被称为IL－10相关的T细胞分化诱导因子(IL－TIF)。研究发现IL－22在多种消化系统恶性肿瘤中高表达，且IL－22表达增加与肿瘤进展及患者不良预后相关。机制研究初步表明，IL－22主要通过作用于IL－22受体启动一系列下游信号如JAK/STAT和MAPK，从而促进肿瘤的发生发展。IL－22有潜力成为消化系统恶性肿瘤诊断及治疗的新靶点。(中华检验医学杂志，2018, 41：720－723)

目的 识别不同地区炎症性肠病(IBD)患者肠道菌群生物标志物，建立预测模型，并探索其菌群功能变化特征。 方法 收集中国、美国(RISK)、美国(PRISM)、德国、印度和立陶宛6个队列1 510例IBD患者和496名健康对照(HC)16 srRNA基因序列。使用微生物组分析软件QIIME(v1.9.1)分析肠道菌群组成和多样性指标，使用微生物多样性分析软件LEfSe比较IBD患者与健康对照有统计学差异的肠菌标志物。随机森林法建立预测模型。PICRUSt预测菌群功能变化特征。 结果 IBD患者肠道菌群α多样性显著低于HC(Wilcoxon秩和检验，P<0.05)。中国、美国(RISK)、美国(PRISM)、立陶宛和德国队列IBD患者肠道菌群和HC菌差异具有统计学意义(Adonis，P<0.05)，而印度队列未发现统计学差异。LEfSe分析显示，中国和美国(RISK)队列IBD患者肠道菌群变化较为一致，而德国、立陶宛和印度IBD患者肠道菌群变化具有较强的本地化特征。肠球菌属(Enterococcus)在中国、美国(RISK)和德国队列IBD患者中显著增加，肠杆菌科(Enterobacteriaceae)在中国和美国(RISK)队列IBD患者肠道显著增加，瘤胃球菌属(Ruminococcus)在中国、美国(RISK)、美国(PRISM)和印度队列IBD患者肠道中显著减少。各国队列分别建模预测当地人群，受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)为(86.48±4.91)%。以其中任一队列模型预测其他队列，中国、美国(RISK)和美国(PRISM)相互间预测AUC较高，其他两者间预测AUC较低。全样本整体建模预测中国、美国(RISK)、美国(PRISM)、德国、立陶宛和印度队列，AUC依次为90.1%、82.3%、79.6%、61.9%、65.5%和54.2%。功能分析显示，中国、美国(RISK)、美国(PRISM)和印度队列IBD患者肠道菌群谷胱甘肽代谢水平明显升高，醌类在中国、美国(RISK)、美国(PRISM)和印度队列IBD患者肠道中合成增加，而细菌的鞭毛组装，运动蛋白等功能在中国、德国和立陶宛队列IBD患者的肠道中明显下降。 结论 不同地区IBD患者肠道菌群具有较为一致的特征，但是地理因素依然对菌群产生很大的影响，后续研究需要对该问题进行探索。(中华检验医学杂志，2018, 41：734－741)

目的 探讨C反应蛋白(CRP)正确度验证物质进行多系统定值，并在北京地区进行CRP正确度验证调查。 方法 在首都医科大学附属北京朝阳医院和首都医科大学附属北京潞河医院检验科组合成10个目前国内最常用CRP检测系统，对已研制的两个浓度的CRP正确度验证物质进行联合定值，采用CRP国际标准物质ERM－DA474/IFCC进行量值传递。首先将ERM－DA474/IFCC稀释成4个浓度水平，用以上10个系统分别测量ERM－DA474/IFCC稀释各水平CRP的浓度值；然后，用认证浓度和测量的浓度值拟合成直线，分别为高、低两个浓度水平的正确度验证物质定值，并评估其定值的不确定度。然后利用此物质在北京地区的42家实验室开展CRP正确度验证调查：将正确度验证物质作为室间质评品，按北京市临检中心室间质评标准程序发放样品，将回报结果采用Excel 2007和SPSS17.0软件进行统计学分析，采用效能函数En，判定定值结果与所有参加实验室的总体均值有无显著差异。 结果 最终，CRP两个浓度水平正确度验证物质定值及扩展不确定度分别为(109.9±9.4)mg/L和(27.1±2.4)mg/L。北京市正确度验证计划中，定值结果与所有参加实验室的均值无显著差异，效能函数En均小于1。 结论 本研究采用多个系统联合定值方法为研制的CRP正确度验证物质定值，其定值准确，不确定度小。对于没有公认参考测量方法的CRP，是一种准确可行的方法，适用于北京市正确度验证计划。(中华检验医学杂志，2018, 41：742－748)

目的 通过构建体外质粒DNA作为质控样本开展MTHFR677基因检测室间质量评价计划(简称室间质评)，评估参评实验室检测能力及存在的问题，提高临床实验室MTHFR基因检测质量。 方法 利用基因工程技术体外构建含有MTHFR677位点野生型(C)上下游序列的重组质粒，并采用定点突变技术得到该位点的突变型(T)，分别作为野生型和突变型样本，两者等比例混合后作为杂合突变型样本，并制备质控样本盘开展室间质量评价。2016年和2017年室间质评计划为一年两次，样本盘包含5支样本，覆盖MTHFR 677位点各种基因型别。要求参评实验室收到样本后在规定时间内检测样本并网上上报位点基因型检测结果。4次室间质评分别收到26份、28份、52份和56份有效汇报结果。依据回报结果计算各实验室成绩，使用Microsoft Excel软件进行统计分析，汇总各样本的总体符合率，并分析不同检测方法的符合率和检测错误类型。 结果 体外构建的重组质粒经Sanger测序验证分别含有MTHFR 677位点野生型(C)和突变型(T)序列，作为质控品在4次室间质评中并无出现检测失败的样本。2016年和2017年4次室间质评中成绩满分的实验室分别为96.15%(25/26)，100%(28/28)，96.15%(50/52)和98.21%(55/56)。4次室间质评中，样本检测的总体符合率分别为99.23%(129/130)，100%(140/140)，96.92%(252/260)和98.93%(277/280)。荧光分子杂交和芯片杂交法检测的样本符合率均为100%；荧光PCR法检测的样本符合率为97.5%(39/40)，100%(45/45)，94.29%(66/70)和100%(95/95)；Sanger测序法样本符合率为100%(20/20)，100%(15/15)，90%(36/40)和92.5%(37/40)。 结论 本研究所制备的质控样本能够有效监测试剂检测性能，具有良好的适用性。各实验室在MTHFR 677基因位点检测总体准确率很高，但个别实验室检测能力有待提高。临床实验室的质量控制对于保证检测结果准确性具有十分重要的作用。(中华检验医学杂志，2018, 41：749-754)

目的 探讨EBV DNA检测中标本的合理选择。 方法 收集2017年1月至6月在北京友谊医院确诊为EB病毒感染的患者，共117例，其中传染性单核粒细胞增多症(IM)44例，EB病毒相关噬血细胞综合征(HLH)36例，移植后淋巴细胞增殖性异常(PTLD)37例，年龄在6个月至28岁。采用实时荧光定量PCR法，定量检测外周血PBMC中和血浆中EBV DNA载量(中位数，四分位数表示)，不同标本类型间病毒载量比较采用非参数秩和检验(Mann－Whitney检验)，相关性分析采用Spearman相关性分析。 结果 IM和PTLD患者PBMC中EBV DNA载量分别为53 600(7 875，626 500)拷贝/ml和114 000(3 396，590 500)拷贝/ml，显著高于血浆中的载量4 500(675，8 600)拷贝/ml和0(0，0)拷贝/ml，M－W值分别为372.5和30.5，P均<0.001，差异有统计学意义，而HLH患者PBMC和血浆中EBV DNA载量分别为5 100(1 425，170 000)拷贝/ml和13 500(1 303，152 500)拷贝/ml，M－W值为646.5，P＝0.991，差异无统计学差异。Spearman相关性分析显示IM和HLH患者中PBMC和血浆EBV DNA载量有较好的相关性，r值分别为0.548和0.400，P均<0.05，而PTLD患者中PBMC和血浆EBV DNA载量无相关性，r值为0.308，P>0.05。 结论 对于EBV感染的诊断与监测，不同疾病推荐的标本类型有所差异，IM和HLH中EBV DNA定量检测推荐采用血浆或血清标本，而PTLD则推荐同时检测PBMC和血浆标本，临床上应根据疾病的种类合理选择标本类型。(中华检验医学杂志，2018, 41：755－758)

目的 探讨动脉血和静脉血之间电解质、总蛋白和尿素等生化项目的检测结果是否存在差异。 方法 采用自身配对设计，对不同标本类型的生化结果进行比对研究。收集2017年6至9月在北京协和医院检验科同时进行了动脉血气分析和静脉血生化项目检测的患者标本70例，其中男性患者36例，女性患者34例。使用全自动生化分析仪同步检测动静脉血浆中的电解质等18项生化项目。采用SPSS 18.00进行统计分析。使用国家卫生行业标准(WS/T 403-2012)和澳大利亚皇家病理学会的允许总误差判断偏差是否具有临床意义。使用MedCalc软件进行Passing-Bablok回归分析。绘制Bland-Altman图了解不同标本类型之间结果的差异。 结果 Ca、Cl、K、Na、P、TP、ALB 、ALT、AST、LDH、Glu、Cr、Urea、TG、CHO、UA、CHE、TBA在动脉血浆标本中的检测结果分别为2.46(2.25～2.56) mmol/L、(105.68±7.29)mmol/L、3.81(3.54～4.03) mmol/L、140.45(137.08～144.20) mmol/L、0.97(0.77～1.11) mmol/L、(60.39±9.40)g/L、(31.23±6.81)g/L、17.4(11.95～30.05)U/L、20.85(14.9～34.03) U/L、210.1(163.15～342.60) U/L、7.58(5.95～10.04) mmol/L、76.35(51.05～110.7) μmol/L、6.94(3.98～11.08) mmol/L、1.15(0.84～1.89) mmol/L、3.31(2.73～4.35) mmol/L、271.55(187.78～423.30) μmol/L、(4.71±2.17)KU/L、2.19(1.09～4.19) μmol/L，在静脉血浆标本中的检测结果分别为2.24(2.05～2.35) mmol/L、(103.98±7.32)mmol/L、3.84(3.58～4.19) mmol/L、139.30(136.08～142.33) mmol/L、0.99(0.78～1.14) mmol/L、(60.37±9.67)g/L、(32.62±6.89)g/L、17.6(12.75～31.2) U/L、20.6(15.28～36.6) U/L、233.95(176.48～363.75) U/L、7.55(5.62～9.52) mmol/L、77.15(56.08～111.98) μmol/L、6.94(3.97～10.53) mmol/L、1.13(0.83～1.93) mmol/L、3.23(2.71～4.37) mmol/L、273.4(187.30～401.55) μmol/L、(4.74±2.21)KU/L、2.29(1.02～4.23) μmol/L。TP、Glu、Cr、TG、CHE、TBA检测结果在两样本中的差异无统计学意义(t或Z值分别为0.121、－0.054、－0.269、－0.480、－1.730和－1.843，P均大于0.05)，其中Glu的差异具有显著的临床意义(大于1/2 TE百分比：50%)。Ca、Cl、K、Na、P、ALB 、ALT、AST、LDH、Urea、CHO、UA检测结果在两样本中的差异有统计学意义(t或Z值分别为－7.115、6.794、－2.119、－4.996、－3.483、－8.839、－2.419、－2.742、－3.833、－5.010、－2.060和－2.467，P均小于0.05)，其中Urea、CHO、UA、Na、P和ALT的差异不具有显著的临床意义(大于总TE百分比分别为：0%、2.86%、0%、2.9%、4.3%、1.43%)，Ca、Cl、K、ALB、AST和LDH的检测结果在两种样本中的差异具有临床意义(大于总TE百分比分别为：90%、10%、14.3%、32.9%、10.00%、32.9%)。 结论 动脉血和静脉血之间部分生化项目检测结果的差异具有临床意义，在选择动脉血标本检测相关生化项目时应予以关注，必要时建议设立动脉血相关生化项目的参考区间。(中华检验医学杂志，2018, 41：759-764)

目的 评价常见的7种异常血红蛋白对4种离子交换高效液相色谱法检测糖化血红蛋白的影响。 方法 收集2017年1月至2018年2月北京大学深圳医院检验科糖化血红蛋白检测过程中发现的异常血红蛋白全血样本95份。采用毛细管电泳法(Sebia Capillary 2 Flex Piercing)和4种离子交换高效液相色谱法(Bio－Rad D－10，Arkray HA8180V，Tosoh G8，以及MQ6000 Plus)测定全血样本，检测常见的7种异常血红蛋白(Hb E、Hb New York、Hb J－Bangkok、Hb G－Coushatta、Hb G－Taipei、Hb Q－Thailand、以及Hb G－Honolulu)，以毛细管电泳法作为参比方法，分析7种异常血红蛋白对4种离子交换高效液相色谱法检测糖化血红蛋白结果的影响。统计分析采用SPSS 19.0软件，计算异常血红蛋白样本的平均偏倚，并用箱式图来显示偏倚分布。 结果 4种离子交换高效液相色谱法都不能分离异常血红蛋白Hb New York，但对糖化血红蛋白检测结果的影响均在临床可接受范围内。D－10能够识别6种异常血红蛋白，Hb J－Bangkok、Hb G－Coushatta和Hb G－Taipei干扰D－10的糖化血红蛋白结果。HA8180V快速模式未给出Hb J－Bangkok、Hb G－Coushatta、Hb G－Taipei的结果，Hb E、Hb Q－Thailand和Hb G－Honolulu的结果出现显著负偏。G8标准模式识别1种异常血红蛋白，6种异常血红蛋白结果出现显著负偏。MQ6000 Plus能够分离6种异常血红蛋白，Hb G－Coushatta、Hb G－Taipei的结果出现显著负偏。 结论 常见异常血红蛋白对某些离子交换高效液相色谱法产生干扰，可导致糖化血红蛋白结果错误。(中华检验医学杂志，2018, 41：765－769)

目的 通过采用RNA恒温扩增(SAT)技术，对肺炎患儿的肺泡灌洗液标本进行检测，并结合体外培养实验，评估该技术检测活菌的能力，为SAT技术在肺炎支原体(MP)肺炎诊疗中的应用提供理论支持。 方法 收集天津市儿童医院2015年10月至2017年12月临床确诊为社区获得性肺炎的572例患儿的肺泡灌洗液，利用MP核酸定量和SAT技术检测MP感染情况，并对161份肺泡灌洗液进行分离培养，培养阳性菌液中持续加入高浓度抗生素，同时进行MP核酸定量和SAT技术检测。 结果 MP核酸定量和SAT技术的MP阳性检出率分别为74.7%(427/572)和71.9%(411/572)，两种检测方法具有很高的一致性(χ2＝1.142，P＝0.285)。根据SAT技术的检测结果，572例肺炎患儿中男性患儿阳性率为72.7%(224/308)，女性患儿阳性率为70.8%(187/264)，不同性别患儿阳性率差异无统计学意义(χ2＝0.252，P＝0.616)。不同年龄患儿MP检出阳性率不同，婴幼儿(≤3岁)阳性率为56.6%(94/166)，学龄前期和学龄期儿童(4～14岁)阳性率为78.1%(317/406)，学龄前期和学龄期儿童的阳性率明显高于婴幼儿，差异有统计学意义(χ2＝26.811，P＝0.000)。通过SAT技术检测活菌的能力的实验发现，MP阳性培养液中连续5 d加入5 MIC阿奇霉素后，MP核酸定量检测阳性，SAT技术检测则为阴性。 结论 SAT技术具有高灵敏度和高特异性，并且可以鉴别"死菌""活菌"，可以快速准确检测MP感染情况，并能有效评估临床治疗效果。(中华检验医学杂志，2018, 41：770－774)

炎症性肠病(IBD)包括溃疡性结肠炎和克罗恩病，目前尚缺乏诊断的金标准，两者的鉴别诊断需综合临床表现、实验室和放射学检查、内镜及病理学检查等。实验室检查具有方便、无创、快速、廉价等优点，尤其是抗微生物相关成分抗体的研究取得了较大的进展，在IBD的诊断、鉴别诊断、疗效评估和预后判断方面具有很高的应用价值。(中华检验医学杂志，2018, 41：778－780)

炎症性肠病(IBD)是一组主要累及消化道的自身免疫性疾病，调节和抑制免疫反应是治疗的主要内容。目前治疗IBD的药物主要包括氨基水杨酸类药物、糖皮质激素、免疫抑制剂和生物制剂，为评估疗效和监测药物不良反应，治疗中需定期监测相关实验室指标。(中华检验医学杂志，2018, 41：781－783)

伴随诊断(CD)与特定的治疗产品(包括药品和生物制品)密切关联，它可以确定可能从这一治疗中获益的患者以及哪些患者针对这一治疗发生严重不良反应的风险明显增加等。随着2014年美国食品药品监督管理局(FDA)《体外伴随诊断设备》指南的发布，伴随诊断的概念、范围及使用规范等愈发清晰，而随着精准医学及个体化治疗快速发展的需求，伴随诊断也正从传统的肿瘤治疗，不断向其他疾病的治疗和预防领域发展；同时伴随诊断的检测技术也不再仅限于分子生物学检测，更多不同类型的生物标志物检测正在逐渐被关注，有望发展为伴随诊断产品。(中华检验医学杂志，2018, 41：784-789)

快速准确鉴定血流感染病原菌对优化抗菌药物治疗和改善患者预后至关重要。传统的鉴定方法至少需要48 h。近年来，基于卷积神经网络的智能化的革兰染色阅片技术可自动判断阳性涂片中的病原菌种类，基质辅助激光解析电离飞行时间质谱可大大提高病原菌的鉴定速度。肽核酸探针荧光原位杂交技术也适用于阳性菌液中病原菌的快速鉴定。结合荧光原位杂交技术与细胞形态动力学分析技术的Accelerate Pheno系统既可直接鉴定阳性血培养中的病原菌，也可检测病原菌对抗生素的最低抑菌浓度。上述方法均可不经次代培养，直接、快速、准确地鉴定阳性血培养瓶中的病原菌。(中华检验医学杂志，2018, 41：790-793)

目前，检验医学已成为医学领域发展最快的学科之一。检验医学学科的发展直接带动了临床检验水平的提高和检验手段的增加。本文对2014至2017年度国家自然科学基金"检验医学"领域项目的申请和资助情况进行回顾分析与总结，并进行展望，希望可以为相关科研人员提供参考。(中华检验医学杂志，2018, 41：794－796)