2004年 · 第24卷第08期

药物导致肝损伤是各种肝病少见但并非罕见的病因,很多药物有潜在的肝毒性且难以预测.其主要原因是各种药物性肝损伤发生率差异很大,很难在药物上市前的毒理学实验和临床试验中阐明。

目的 探讨康莱特注射液诱导人胰腺癌细胞(Patu-8988)凋亡过程中相关基因表达的变化.方法通过流式细胞仪Annexin V/PI双染法研究康莱特诱导Patu-8988细胞凋亡的过程,应用基因芯片技术分析加药前后凋亡相关基因的表达差异,并以Western印迹对部分基因蛋白产物表达进行验证.结果康莱特对Patu-8988细胞的凋亡诱导作用呈时间依赖性.康莱特作用24 h后,在96条有关凋亡的目的基因中共有17条基因表达发生大于3倍的显著变化,其中表达上调基因12条,下调基因5条.Western印迹表明P53、Bcl-2、Bax、Caspase-3等蛋白表达改变与基因芯片结果一致,同时Caspase-3底物多聚ADP核糖多聚酶被降解.结论康莱特可使Patu-8988细胞中多个凋亡相关基因的表达发生改变,进一步揭示了其诱导胰腺癌细胞凋亡的作用机制。

目的 探讨凝血栓蛋白1(THBS1)基因CpG岛异常甲基化与胃腺癌(GAC)发生的关联.方法应用甲基化特异性PCR检测技术,检测82例GAC患者肿瘤组织,30例十二指肠球部溃疡(对照组)、30例慢性胃炎伴肠上皮化生或异型增生患者胃窦黏膜组织中,THBS1基因启动子CpG岛甲基化分布情况.结果THBS1基因启动子CpG岛甲基化在对照组(6.7%)中的频率明显低于胃炎组(26.7%,χ2=4.32,P=0.038)和胃癌组(47.6%,χ2=16.2,P＜0.001),在胃炎组与胃癌组之间的频率差异也有显著性(χ2=4.14,P=0.042),老年胃癌患者(63.6%)中的频率明显高于非老年(36.7%,χ2=5.72,P=0.017),在TNMⅢ和Ⅳ期肿瘤(66.7%)组织中的频率明显高于Ⅰ期(36.8%)或Ⅱ期(36.4%,χ2=6.93,v=2,P=0.031),而肿瘤部位之间、Lauren分型肿瘤之间及不同分化程度肿瘤之间,THBS1基因甲基化率的差异无显著性.结论THBS1基因启动子CpG岛甲基化可能与胃腺癌的发生有关,且以老年患者及Ⅲ和Ⅳ期肿瘤多见。

目的 通过磁共振扫描(MR)、多层螺旋CT(MSCT)检查对贲门癌术前T分期进行前瞻性比较,并与病理结果对照,探讨MR与MSCT在贲门癌术前T分期中的价值.方法28例经活检证实的贲门癌患者,于术前1周内行MR和MSCT检查,术后将病理与两者结果相比较.MR扫描序列包括FSET1W,FSET2W,FSET1W加脂肪抑制以及动态FSPGR加脂肪抑制扫描,MSCT扫描为平扫后作动态三期增强.结果MR、MSCT对胃癌浸润深度(T)判断与手术病理比较的准确率分别为T188 8%和11.1%;T2 77.8%和22.2%;T3 83.3%和32.7%;T4 100.0%和50.0%.与MSCT相比较,MR动态增强加脂肪抑制以及延迟扫描对早期病变的显示、T2与T3、T3与T4的区分以及食管和主动脉侵犯方面均有优势(P＜0.05).在平扫序列中,T1W加脂肪抑制能较好地显示肿瘤特征、溃疡存在以及周围淋巴结肿大.统计分析显示,MR在贲门癌T分期的诊断准确性明显高于MSCT.结论MR在贲门癌T分期中有较大的优势,可用于指导选择正确的治疗方案,避免不必要的手术。

目的 观察加贝酯对Oddi括约肌运动功能的影响.方法对我院12例行内镜下逆行胰胆管造影(ERCP)患者于内镜下作Oddi括约肌测压术,记录Oddi括约肌的基础压、基础收缩幅度、收缩频率和运动指数(基础收缩幅度×收缩频率),并在静脉滴注加贝酯1、3 mg·kg-1·h-1前后,分别重复以上测压过程.以用药前后记录数据作自身对照配对t检验进行统计学处理.结果①静脉滴注加贝酯1、3 mg·-1·h-1不影响Oddi括约肌的基础压(P＞0.05)和基础收缩幅度(P＞0.05).②加贝酯能明显减少Oddi括约肌的收缩频率(P＜0.05),但用药剂量1、3 mg·kg-1·h-1之间差异无显著性(P＞0.05).③大剂量加贝酯可明显降低Oddi括约肌运动指数(P＜0.01),且3 mg·kg-1·h-1与1 mg·kg-1.h-1剂量间差异也有显著性(P＜0.05).结论加贝酯能减少人Oddi括约肌的收缩频率,3 mg·kg-1·h-1时还能降低运动指数.加贝酯对Oddi括约肌运动的影响可解释加贝酯减少ERCP后胰腺炎的发生。

目的 观察乙醇诱导脂肪肝过程中肝组织一氧化氮合酶(NOS)的表达,探讨不同亚型NOS表达与脂质过氧化的关系.方法在大鼠饮水中加入乙醇建立乙醇性脂肪肝模型,采用免疫组化和逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)的方法动态观察肝组织中NOS的蛋白及基因表达,同时检测肝组织中一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)含量.结果成功建立乙醇性脂肪肝大鼠模型.与正常对照组相比,造模大鼠肝组织在第4周时诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达已显著增加(P＜0.05),第12周达高峰,而后有所下降,第20周时又明显上升(P＜0.04).内皮型一氧化氮合酶(eNOS)在第4周时表达无明显改变(P＞0.05),随造模时间延长而逐渐降低(P＜0.05).肝组织中NO水平在第4周时无明显升高(P＞0.05),以后显著增加,第12周达高峰,而后有所下降,第20周时又明显上升(P＜0.01).肝组织中MDA含量在第4周已显著升高(P＜0.05),随饮用乙醇时间延长进行性增加.肝组织中NO、MDA含量与iNOS表达成正相关(P＜0.01),与eNOS表达成负相关(P＜0.01).结论乙醇诱导脂肪肝过程中肝组织NO水平升高主要与iNOS的活化有关,iNOS产生的NO可能与脂质过氧化损伤有关,而eNOS产生的NO可能起抗脂质过氧化损伤的保护作用。

目的 研究核因子-κB(NF-κB)在胃癌耐药形成中的作用.方法应用凝胶电泳迁移率分析研究长春新碱(VCR)对胃癌细胞SGC7901及耐药细胞SGC7901/VCR内NF-κB DNA结合活性的影响,细胞-ELISA法检测细胞内NF-κB抑制因子IκB-α蛋白的表达,免疫细胞化学法观测细胞内p65核转位,MTT法检测细胞对药物的敏感性.结果SGC7901/VCR耐药细胞中NF-κB的基础活性比敏感细胞高1.4倍.不同浓度VCR(5、10、20、50 μg/L)均可引起耐药细胞NF-κB DNA结合活性增强,同时伴有IκB-α蛋白表达下降和p65核转位,亲本敏感细胞产生的上述效应均不及耐药细胞明显.与敏感细胞相比,10 μg/L VCR作用不同时间时,SGC7901/VCR细胞中NF-κB活性上升速度慢但维持时间长.NF-κB抑制剂MG-132可抑制VCR诱导的NF-κB活化,IκB-α降解和p65核转位,并提高耐药细胞对VCR的敏感性.结论NF-κB活性增强参与胃癌细胞对VCR耐药。

目的 研究鼠慢性萎缩性胃炎(CAG)的病理变化和细胞增殖分子调控变化,探讨CAG发生的可能机制.方法综合采用60%乙醇或2%水杨酸钠、20 mmol/L去氧胆酸钠和0.1%氨水建立大鼠CAG模型.观察大鼠胃黏膜病理组织变化和黏液分泌功能.测定大鼠血清表皮生长因子(EGF)和前列腺素E2(PGE2)水平,免疫组化分析EGF受体(EGFR)、C-erbB2、P53、P16和Bcl-2蛋白的表达.结果鼠CAG胃窦黏膜的炎症改变明显,腺体数目和厚度显著降低,部分大鼠出现肠上皮化生.扫描电镜可见胃黏膜破溃、细胞脱落.鼠CAG胃黏膜氨基己糖和血清PGE2较正常组显著下降(P＜0.05).CAG大鼠血清EGF水平为(2.24±0.83)μg/L,较正常大鼠的(0.61±0.28)μg/L显著升高(P＜0.05).鼠CAG胃组织EGFR和C-erbB2阳性表达率分别为45%和70%,正常大鼠均无表达(P＜0.05).正常大鼠P16蛋白表达率为75%,显著高于模型大鼠的10%(P＜0.05),模型大鼠Bcl-2蛋白表达率为50%,高于正常大鼠的10%(P＜0.05).CAG和正常大鼠的P53蛋白表达率分别为30%和10%,差异无显著性(P＞0.05).结论鼠CAG的发生与多种致病因素破坏胃黏膜屏障,胃黏膜细胞增殖和凋亡失衡有关。

目的 研究替加色罗对大鼠内脏敏感性的作用.方法新生SD大鼠出生后第8至21天予醋酸灌肠,建立慢性内脏高敏模型为H组;生理盐水灌肠为C组.待大鼠成年后,将H组分为H病理、H盐水、H溶剂、HTeg0.1、HTeg0.3和HTeg1.0组;C组分为C病理、C盐水和CTeg1.0组.H病理和C病理组不扩张直肠行病理学检查和髓过氧化物酶活性测定;H盐水和C盐水组腹腔注射生理盐水,H溶剂组注射溶剂+蒸馏水,HTeg0.1、HTeg0.3和HTeg1.0组分别注射替加色罗0.1、0.3、1.0 mg/kg,CTeg1.0组注射替加色罗1.0 mg/kg,直肠球囊快速注水(0.4、0.8、1.2 ml)扩张观肠道,每次扩张持续20 s,间隔5 min,察腹部撤离反射(AWR)和脊髓(L6～S1)c-Fos表达.结果H盐水与H溶剂组AWR积分明显高于其他组(P＜0.05),腰骶髓c-Fos阳性细胞总数明显增加,两组间无明显差异.HTeg0.1、HTeg0.3和HTeg1.0组比H盐水组AWR积分明显降低,c-Fos阳性细胞减少(182±14,166±17,128±15比213±13;P＜0.05).结论替加色罗可明显降低内脏高敏大鼠的内脏敏感性,并剂量依赖性地减少脊髓c-Fos的表达。

目的 研究生存素各转录变异体表达及其与胃癌细胞增殖和凋亡的关系.方法采用实时荧光定量RT-PCR技术,对77例胃恶性肿瘤患者的肿瘤组织和正常胃黏膜的成对冰冻标本进行mRNA定量检测.对相同病例的石蜡标本,采用DNA缺口原位末端标记(TUNEL)技术检测肿瘤细胞凋亡,免疫组化(Ki-67)检测细胞增殖.结果与患者正常胃黏膜比较,肿瘤组中3个转录变异体表达水平显著上调(P＜0.0001).野生型生存素在胃癌中的表达率为100.0%(77/77),生存素-2B表达率是79.2%(61/77),并且高表达组为早期胃癌(P=0.001)、分化型胃癌(P=0.007)以及浸润浅的胃癌组织(P=0.031);生存素△Ex3在胃癌中的表达率为64.9%(50/77),并且高表达组的凋亡指数显著降低(P=0.019,r=0.267).本实验未发现生存素的3个转录变异体表达水平与肿瘤细胞增殖指数相关.结论生存素-2B的表达与肿瘤的分期、分化和肿瘤浸润深度相关,表明生存素-2B可能是野生型生存素和生存素-△Ex3的天然拮抗物;同时还发现生存素-△Ex3在胃癌组织中的表达与凋亡指数负相关。

目的 探讨广东省社区人群慢性便秘的患病情况及对生存质量的影响.方法用整群、分层、随机抽样的方法对广州市、惠州市和农村地区常住人口中18～80岁的居民进行问卷调查.结果共3931人接受便秘相关问题调查,其中男1795人,女2136人;平均年龄为(42.7±14.1)岁.共检出符合罗马Ⅱ标准的慢性便秘159名,患病率为4.0%,其中男性患病率为3.6%,女性为4.4%;按2000年第5次全国人口普查结果进行年龄、性别标准化后的患病率为3.6%;患病率有随着年龄的增加而升高的趋势.经多因素分析后发现,农村居民(OR=1.67)、体重指数低于18.5(OR=2.15)、诉工作压力大且难以承受者(OR=3.08)、文化程度低(OR=2.16)及合并有肠易激综合征者(OR=2.81)更倾向于发生慢性便秘.与非慢性便秘人群比较,慢性便秘人群的生存质量除情感职能(P=0.097)外,生理机能、生理职能、社会功能、躯体疼痛、精力、一般状况、精神健康和健康变化均有明显下降(P＜0.05).结论慢性便秘在广东省社区人群中是一种常见病,尤其多见于老年人,并对患者的生存质量有明显影响;工作压力大等为可能的危险因素。

大量研究表明,环氧合酶(COX)-2过度表达与消化系肿瘤的发生、发展密切相关.COX-2抑制剂已成功用于结肠癌的化学预防.近年来,COX-2抑制剂及其在消化系肿瘤防治中的应用以及其抗肿瘤作用的分子机制等方面的研究取得不少进展,现综述如下。

患者男,39岁.间断黑便3个月余,伴头晕乏力入院.体检:中度贫血貌,剑突下深压痛.实验室检查:血红蛋白62g/L.胃镜:胃窦后壁"溃疡"出血.术中所见:胃浆膜面正常,大、小网膜未见肿大淋巴结,胃窦后壁可触及一小硬结.遂行毕Ⅱ式胃大部切除术.病理检查:大体检查见胃窦后壁黏膜下肿物0.5 cm×0.6 cm×0.8 cm,暗红色、实性,周围境界清楚,向黏膜面溃破.镜下检查:胃窦后壁黏膜下肿物表面有破损,光镜下瘤内可见较丰富血管,其周围有多层排列的上皮细胞围绕,细胞大小相近,呈圆形,胞质淡红,核圆形,瘤体周围有明显网状纤维包绕,病理诊断为血管瘤型血管球瘤.肿瘤免疫组化:Vementin阳性,Desmin和Ⅷ因子相关抗原阴性。

患者女,62岁,因腹胀、腹痛1周伴停止排便5 d入院.体检:一般情况尚可,全身浅表淋巴结无肿大,心肺未见异常,腹部稍隆,轻度压痛,无反跳痛及肌紧张,肝脾未扪及,未触及腹部包块,移动性浊音阴性,肠鸣音亢进,有高调肠鸣音及气过水声.实验室检查:白细胞10.5×109/L、中性粒细胞0.77、淋巴细胞0.23、血红蛋白65 g/L.低压气钡灌肠显示:乙状结肠近段梗阻.剖腹探查:肠管扩张充气明显,乙状结肠起始部有一环行狭窄.距回盲部60 cm处回肠壁有0.8cm×0.8 cm×0.6 cm肿块,质地中等.行乙状结肠癌根治术,回肠肿块切除.回肠肿块位于黏膜下,呈淡黄色,圆形,质地中等,表面有一凹陷,内有小口.病理检查:乙状结肠肿块为低分化腺癌;回肠肿块为异位胰腺,由胰腺腺泡、导管、胰岛组成,间质可见纤维结缔组织。

患者男,65岁.因肝区胀痛不适1个月余入院.体检:巩膜皮肤无黄染,浅表淋巴结未扪及肿大.上腹部较饱满,未扪及明显肿块,全腹无压痛,肝脾肋下未及.CT:肝左内叶及右前叶间可见囊性肿块,内壁有赘生物突出,增强可见不均匀强化,提示肝囊性肿瘤(图1).ERCP片示:肿瘤与胆管相通(图2).B超引导下穿刺抽出黏液样液体2 ml.CA19-9 462 U/ml (正常值0～37 U/ml),AFP(-),CEA(-)。

患者男,30岁,因发现乙型肝炎病毒(HBV)感染10年、反复乏力1个月余入院.患者10年前体检发现乙型肝炎病毒标志物阳性,为HBsAg(+),HBeAg(+),抗HBc(+).肝功能反复检查无异常.近1个月来,患者自觉乏力.外院查肝功能示:ALT 157 U/L,γ-GT 144 U/L,余未见明显异常.入院后体检:体温36.8℃,血压110/68 mm Hg(1 mm Hg=0.133kPa),发育正常,营养中等,皮肤巩膜无黄染,颈静脉不充盈,心肺无异常,腹平,未见腹壁静脉曲张,肝脾肋下未及,双下肢无水肿。

患者男,60岁.因反复浮肿6年,腹泻伴面色灰暗2年,乏力1年入院.10余年前B超体检发现肝脏门静脉右支与右肝静脉交通畸形,以往多次查肝功能均正常,直至2年前出现白蛋白降低,为33 g/L.无肝炎病史,无嗜酒史,无肝毒性药物服用史.入院体检:面色灰暗,未见肝掌及蜘蛛痣.巩膜轻度黄染,全身浅表淋巴结未及肿大.心肺无异常.腹平软,无压痛,肝脾未及,肝区无叩痛,移动性浊音阴性,双下肢轻度凹陷性浮肿.入院后查肝胆脾多普勒超声示:肝硬化,门静脉主干内径约1.1 cm,门静脉右支及右肝静脉迂曲扩张并相通,宽分别约为1.3 cm和2.1 cm。

患者女,68岁.1988年6月因慢性肾盂肾炎、尿毒症行同种异体肾移植术,术后一直服用泼尼松+硫唑嘌呤等免疫抑制剂.1991年始发生慢性排斥反应,于1997年再次行同种异体肾移植术,术后服用环孢素+霉酚酸酯+泼尼松等免疫抑制剂.2000年初右颞部及右腕部皮肤先后出现一肿物,无痛,缓慢增大.2003年4月初发现粪隐血阳性,血红蛋白降低,此后反复查粪隐血多数阳性,血红蛋白进行性下降,最低为54 g/L,呈小细胞低色素性贫血,无腹痛、腹胀,无腹泻及黑便,体重无明显减轻。

长期以来,就小肠钡餐造影或结肠灌肠两种检查方法而言,回盲部均位于最远端,当有较严重狭窄性病变时,单一方法很难良好地显示病变全程,故常于某一检查的基础上,再以另一种检查补充.以致延误诊断,且定量(累及范围的长度)分析欠准确.我们采用回盲部检查的新技术,经5年临床实践,确属高效优质、利于防护、经济实用。

应激是一种常见的机体对紧急事件的反应状态,常可加重胃运动障碍症状.目前关于应激对胃肠道内在肠神经系统影响的研究尚不多,本文对此进行了探讨。

5-羟色胺转运体(serotonin transporter,SERT)是一种对5-羟色胺(5-HT)有高度亲和力的跨膜转运蛋白.Lesch等[1]发现SERT基因有2个重要的多态性区域:第2内含子可变数目串联重复区(variable number tandem repeats,VNTR)和SERT基因相关多态性区(SERT gene-linked polymorphic re-gion,5-HTTLPR),由此产生的不同基因型可影响SERT基因的转录效率及其mRNA的稳定性.本文研究SERT基因多态性在功能性便秘(FC)和功能性腹泻(Fdi)中的特征,探寻其在FC和Fdi发病中的意义。

肠易激综合征(IBS)是最常见的消化疾病之一.目前认为IBS是一种功能性肠病,其对生活质量等各方面的影响不亚于溃疡性结肠炎等器质性病变[1,2].在我国,IBS患者生活质量及其与消化道症状的关系尚不清楚.本研究采用问卷调查方法研究IBS患者生活质量状况与症状分级,分析其生活质量状况及其与症状之间的关系,为了解我国IBS患者生活质量状况提供新的依据。

我们应用免疫组化方法检测胰腺癌组织中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、增殖细胞核抗原(PCNA)、bcl-2、血管内皮生长因子(VEGF)和CD34的表达,探讨HIF-1α表达与胰腺癌凋亡、增殖和新生血管形成的关系。

大肠癌是我国常见的恶性肿瘤之一,其发病率和死亡率有逐年增加的趋势.手术虽为治疗大肠癌最有效的方法之一,但根治术后仍有约30%的Dukes B期患者5年内死于局部复发或远处转移,提示即使是大肠癌早期也可能存在微转移.微转移虽小,但有发展成致命的显性转移灶的可能,因此,及早发现微转移显得尤为重要.我们用RT-PCR法检测了48例大肠癌患者外周血鸟苷酰环化酶C(GC-C)mRNA的表达情况,现将研究结果报道如下。

反流性食管炎(RE)与食管腺癌的发生有较为密切的联系,有研究表明,环氧合酶-2(COX-2)参与了肿瘤的发生和发展,在癌前病变及肿瘤组织中表达增加[1],增殖细胞核抗原(PCNA)是反映组织细胞增殖功能的指标之一.为探讨RE与食管腺癌的关系,我们检测了部分RE组织中COX-2和PCNA的表达情况,现报道如下。

胃肠道多发性淋巴瘤息肉病(multiple lymphomatosis polyposis,MLP)是一种罕见的非霍奇金淋巴瘤,自1961年第1例报道至今,资料完整的病例报道全世界不足70例[1]。

急性坏死性胰腺炎是一多种炎性介质和细胞因子参与的复杂病理过程[1].FK506是近年来广泛用于临床的抗器官移植排斥反应的免疫抑制剂,本实验利用FK506抑制免疫反应的作用,观察对大鼠急性坏死性胰腺炎的保护作用。

关于Ⅱ型磷脂酶A2(PLA2)的研究虽已有较长历史,但只是近几年发现它具有杀菌作用,并在宿主防御细菌感染的过程中扮演重要角色[1,2].最近还发现Ⅴ型和Ⅹ型PLA2也具有杀菌活性,与Ⅱ型PLA2有相似的抗菌特点[3].消化系统中胃肠道、肝脏、唾液腺等是机体防御细菌感染的重要场所,了解具有杀菌活性的PLA2在消化系统中的分布情况,有助于防治细菌感染。