2003年 · 第23卷第10期

目的以减毒鼠伤寒沙门菌为载体,通过在UreB和HpaA间引入由3个甘氨酸残基组成的三肽柔韧接头,构建成UreB/HpaA双价抗幽门螺杆菌(Hp)活疫苗,并对照相应单价疫苗和空白载体研究其对C57BL/6小鼠的免疫保护效果.方法用序列重叠延伸聚合酶链反应扩增带3个甘氨酸残基柔韧接头的融合基因ureB/hpaA,进一步以减毒鼠伤寒沙门菌SL3261为载体构建UreB/HpaA双价活疫苗,观察其在小鼠体内的稳定性.用双价活疫苗株免疫Ⅱ级C57BL/6小鼠1次,对照单价活疫苗和空白载体观察其在体内诱导的特异抗体反应和对小鼠的免疫保护作用.结果测序结果显示,3个甘氨酸残基的编码序列GGTGGAGGC已成功地插入UreB/HpaA融合基因中.双价疫苗灌喂小鼠后,至少能在脾脏和回肠末段存留10 d.双价疫苗在小鼠体内诱导血清特异性IgG1和IgG2a水平明显升高.UreB/HpaA双价疫苗的免疫保护率为77.3%(17/22),而UreB疫苗和HpaA疫苗的免疫保护率分别为50.0%(12/24)和43.5%(10/23).结论引入柔韧接头,优化构建表达UreB和HpaA的双价抗Hp活疫苗.UreB/HpaA双价活疫苗对Ⅱ级C57BL/6小鼠有更好的免疫保护作用.

目的分析胰腺癌患者易感因素,以期能确认胰腺癌危险因素.方法采用回顾性分析的方法,分析1985年10月～1991年11月(78例)及1995年10月～2001年8月(194例)胰腺癌病例.结果胰腺癌的发病率有逐年增高趋势;患者发病年龄以中老年为主,男性多见,且发病人数呈上升趋势;胰腺癌的易感因素依次为吸烟(33.1%)、饮酒(21.7%)、糖尿病(11.8%)及慢性胰腺炎(4.8%)等.1995～2001年间患者有吸烟(36.6%)、饮酒(24.7%)、糖尿病(14.9%)等病史者较1985～1991年间有增加趋势,其中仅糖尿病(3.8%)增加比率差异有显著性;随着吸烟量及年限增加,胰腺癌发病率有增加趋势;糖尿病胰腺癌组和非糖尿病胰腺癌组相比,肿瘤大小、部位、肿瘤切除率差异无显著性,但糖尿病组以高中分化腺癌为主,非糖尿病组低分化腺癌患者较多,两组之间相比差异有显著性(P＜0.05).结论吸烟、吸烟量与时间的长短与胰腺癌发生直接相关,合并糖尿病的胰腺癌者高分化腺癌比例明显高于未合并糖尿病者.胰腺癌的易感因素近期较以往亦增加.

目的通过对不明原因小肠疾病患者行双气囊电子小肠镜检查,评价其安全性、检查范围、临床价值及耐受性.方法2003年4月至7月,30例多项常规检查阴性、疑患小肠疾病的患者接受检查,其中不明原因消化道出血20例、腹痛待查5例、腹泻待查3例及不完全性小肠梗阻2例.结果双气囊电子小肠镜抵达空回肠交界部、回肠中下段和末端回肠的分别为9、17和4例,检查所用平均时间分别为(40.5±12.3)、(64.3±18.6)和(78.8±11.5)min;绝大部分患者对检查的耐受性良好;25例患者检出阳性病灶,整体阳性率为83.3%;不明原因消化道出血的病因确诊率为80.0%,腹痛、腹泻阳性诊断分别为4/5例和1/3例,2例不完全小肠梗阻均获明确诊断;未见操作相关的严重不良反应和并发症.结论双气囊电子小肠镜是一种安全、可靠、有较高临床诊断价值的小肠疾病检查手段.

目的从生化及形态学角度研究应激性溃疡(SU)发生发展过程中胃黏膜细胞的死亡形式及增殖功能的变化.方法原位末端标记(TUNEL)法检测水浸-束缚应激(WRS)结束前后不同时间点细胞凋亡的发生;透射电镜下观察细胞形态的变化;免疫组化ABC法原位检测增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白的表达.结果正常大鼠胃黏膜上皮散在TUNEL阳性细胞,PCNA蛋白主要在胃腺颈部近胃小凹处呈中等阳性表达.WRS 2 h～WRS结束后5 h TUNEL阳性细胞较对照组明显增多(P＜0.01)并逐渐达高峰,而PCNA表达较正常对照组显著减少(P＜0.01);WRS后8～12 h TUNEL阳性细胞逐渐减少,而PCNA表达达高峰;WRS后24 h TUNEL阳性细胞仍高于正常水平(P＜0.05),PCNA表达基本恢复至正常水平(P＞0.05).透射电镜下可见正常胃黏膜细胞形态规则,核形规整;而发生凋亡的细胞形态各异.结论应激期胃黏膜细胞凋亡明显增加,增殖能力下降,它们之间的失衡是溃疡发生的重要原因;在应激性损伤恢复的早期阶段,大量细胞发生凋亡可能是启动细胞增殖的必要条件.

目的构建人源性大肠癌cDNA噬菌体表达文库.方法从人大肠癌组织中提取总RNA,RT-PCR反转录合成cDNA第1链,用长距离PCR技术合成cDNA第2链,除去小于500 bp的小片段后与λTriplEx2噬菌体连接,体外包装,构建成cDNA噬菌体表达文库.转染E.coli XL1-Blue大肠杆菌,滴定文库的滴度,确定文库容量大小,测定重组率.用EX TagTM酶做PCR和SfiⅠ酶切鉴定插入的cDNA片段大小.结果构建成含2.39×106 pfu/ml重组子的人大肠癌cDNA噬菌体表达文库,重组率为97.5%.插入的外源cDNA片段大小为500 bp～4kb,平均长约1.4kb.结论成功构建高质量人源性大肠癌cDNA噬菌体表达文库,适合于免疫筛选cDNA克隆的人大肠癌相关抗原基因.

目的探讨校正计算机断层摄影(CT)测试管技术定量检测肝脏脂肪的可行性.方法11例健康志愿者、53例脂肪肝、10例慢性乙型肝炎及10例肝硬化患者用校正CT测试管方法定量检测肝脏脂肪含量.将与脂肪密度相似的Terbutyl乙醇加入模仿肝脏密度的18.5%葡萄糖溶液,按体积比配成10%、20%、30%、40%溶液,代表肝脏中不同脂肪含量,用于定量检测各组肝脏的脂肪含量.结果校正测试管的CT值与浓度递增的Terbut一乙醇溶液呈负线性关系(r=-0.982,P＜0.001).在10例行肝组织活检的脂肪肝患者中,肝组织病理测定的肝脏脂肪含量和校正CT方法测定的脂肪含量呈明显的正相关(r=0.94,P＜0.001).肝脏脂肪含量和肝/脾比值呈负线性关系(r=-0.88,P＜0.001).脂肪肝组肝脏CT值明显低于健康对照组(P＜0.01),肝脏脂肪含量明显高于健康对照组(P＜0.01),脂肪肝组肝/脾比值明显低于健康对照组和肝硬化组(P＜0.01).结论校正CT测试管能作为一种非创伤性精确定量诊断脂肪肝的方法,并为脂肪肝的自然病程和各种治疗措施的治疗效果提供比较可靠的观察方法.

目的探讨肝硬化患者血浆β-胡萝卜素(P-β-CAR)含量及其临床意义.方法测定63例肝硬化患者和63例年龄及性别配对的正常人P-β-CAR和血浆过氧化脂质(P-LPO)、红细胞超氧化物歧化酶(E-SOD)、红细胞过氧化脂质(E-LPO)和血清C-反应蛋白(CRP)的含量,并对肝硬化患者的多个因素进行Pearson相关和多元线性回归统计分析.结果与正常对照组比较,肝硬化组P-β-CAR和E-SOD含量明显降低(P值均＜0.01),而P-LPO、E-LPO和CRP含量明显升高(P值均＜0.01).在血吸虫病性肝纤维化、肝炎后肝硬化和酒精性肝硬化中P-β-CAR和E-SOD依次降低,而P-LPO、E-LPO和CRP依次升高,三组间差异有显著性(P值均＜0.01).相关分析提示肝硬化患者P-β-CAR与年龄、E-SOD、P-LPO、E-LPO和CRP含量相关(P值均＜0.01),而与患者Child-Pugh积分无关(P＞0.05).进一步的多元线性回归分析提示肝硬化患者P-β-CAR含量与E-SOD和CRP的关系最密切.结论肝硬化患者P-β-CAR含量显著下降,与肝硬化病因和体内氧化抗氧化系统密切相关.

目的评价奥利司他结合低热卡饮食在治疗肥胖伴非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)中的作用.方法选择体重指数(BMI)在27和40之间,伴有肝功能异常的NAFLD患者60例,给予奥利司他120 mg,每日3次,进食时服用,结合低热卡饮食,共治疗24周.结果①治疗后所有患者的体重和BMI均有下降,下降率均达治疗前的(10.76±4.52)%.②治疗12周后常规肝功能中天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)及总胆红素与治疗前比较有显著改善,并维持至整个24周(P值均＜0.05).③治疗后肝CT密度值[分别为(37.29±13.17)Hu和(49.20±12.24)Hu]及肝/脾密度比值(分别为0.70±0.23和0.94±0.25)均显著增加(P值均＜0.01).④58例中50例(86.2%)肝功能改善,其中47例(94%)同时伴有CT肝/脾密度比值的增加,8例治疗后肝功能未改善,但其中5例肝/脾CT密度比值增加;52例(90%)肝/脾CT密度比值较治疗前增加,且其中41.4%患者肝/脾CT密度比值增至≥1,仅6例肝/脾CT密度比值下降,然而其中仍有3例肝功能有改善.⑤高胆固醇血症和高三酰甘油血症患者,治疗前后也有显著改善(治疗前分别为36.67%和61.67%,治疗后分别为23.33%和26.67%,P值均＜0.01).⑥不良反应发生率为96.67%,均与排便有关,表现为油性排便等.结论奥利司他结合低热量饮食可减少NAFLD肝内脂肪沉积,改善常规肝功能和相关代谢综合征,可以作为肥胖伴NAFLD的药物治疗选择.

目的评价内镜下注射止血和应用奥曲肽序贯治疗Dieulafoy病变的疗效.方法在内镜诊断为Dieulafoy病变所致出血后,先以高渗盐水-肾上腺素(HSE)液注射止血,再连续应用奥曲肽7 d(0.1 mg,皮下注射,1次/6～8 h);未用奥曲肽或仅用1～2 d者为对照组.结果治疗组的再出血率和转手术率(12.5%,6.3%)均显著低于对照组(53.8%,46.2%;P＜0.05).结论内镜下注射止血和应用奥曲肽的序贯疗法可明显减低Dieulafoy病变的再出血率和转手术率.

目的比较天然蒙脱石粉剂(商品名:思密达)及双歧三联活菌胶囊(商品名:培菲康)对慢性功能性腹泻患者日均排便次数及大便形态Bristol分型的影响.方法采用多中心、前瞻性、开放、随机、阳性药物对照方法,对慢性功能性腹泻患者随机分成2组,治疗组予天然蒙脱石粉剂3 g,每日3次;对照组予双歧三联活菌胶囊420 mg,每日3次.疗程28 d.结果本研究共纳入410例患者,其中治疗组208例对照组202例.两组在28 d疗程中日均大便次数分别为(2.02±0.81)次及(2.22±0.82)次,差异有显著性(P=0.007).两组停药后2周内大便日均(1.82±0.85)次及(1.97±0.89)次,差异有显著性(P=0.032).治疗组在28 d疗程中Bristol分型均值为4.64±0.83,对照组为4.89±0.83,差异有显著性(P=0.001).治疗组停药后2周内Bristol分型均值为4.34±1.20,对照组为4.63±1.23,差异无显著性.结论天然蒙脱石粉剂是治疗慢性功能性腹泻有效而安全的药物.