2008年 · 第43卷第08期

辅助生殖技术(assisted reproductive technology,ART)是指对不孕或不育患者进行助孕或优生,使之妊娠并分娩正常婴儿的技术.广义的辅助生殖技术包括体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryotransfer,IVF-ET)及其衍生技术、人工授精、人类胚胎干细胞以及克隆技术等。

目的 探讨体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗不孕的临床效果及其影响因素.方法 回顾性分析北京大学第三医院2005至2007年间,12 491个胚胎移植周期(其中6832个周期为新鲜胚胎移植周期,5659个周期为冻融胚胎移植周期)的临床资料,对影响妊娠结局的因素进行单因素和多因素分析.结果 新鲜胚胎移植周期临床妊娠率为32.99%(2254/6832),活产率为25.75%(1394/5413),早期流产率为9.36%(211/2254),围产儿出生缺陷率为1.45%(25/1722).年轻(20～24岁)患者新鲜胚胎移植周期临床妊娠率高达42.25%(60/142).单纯男方因素不孕患者的临床妊娠率(40.10%,476/1187)明显高于单纯女性因素不孕患者(31.55%,1168/3702)和双方因素不孕患者(31.39%,610/1943);首次接受IVF-ET治疗者的临床妊娠率(34.63%,1831/5287)高于多次接受IVF-ET治疗者;常用的4种IVF-ET超促排卵(COH)治疗方案中,接受促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)超长方案和长方案治疗者临床妊娠率分别为51.72%(30/58)和36.88%(489/1326),明显高于GnRH-a短方案(32.05%,1703/5313)和促性腺激素释放激素拮抗剂(GnRH-ant)方案(22.12%,23/104),差异有统计学意义(P<0.05).多因素logistic分析证实,年龄、获卵数和COH治疗周期数对IVF-ET治疗后妊娠结局的影响有统计学意义,而年龄是最主要的影响因素.治疗过程中,中重度卵巢过度刺激综合征(OHSS)的发生率为3.68%(321/8720),异位妊娠率为6.12%(138/2254),早期流产率为9.36%(211/2254).冻融胚胎移植周期临床妊娠率(38.08%,2155/5659),高于新鲜胚胎移植周期(32.99%,2254/6832),两者比较,差异有统计学意义(P<0.001);多胎妊娠率为27.70%(597/2155),早期流产率为8.96%(193/2155),异位妊娠率为2.23%(48/2155).结论 IVF-ET用于不孕症治疗,临床妊娠率和活产率高,是一种安全、有效的助孕治疗方法;年龄、卵巢反应性是影响治疗结局的主要因素;冻融胚胎移植周期临床妊娠率与新鲜胚胎移植周期比较,无明显差异,并可有效提高单次促排卵周期的累计妊娠率。

目的 研究年龄及移植优质胚胎数对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)患者多胎妊娠发生率的影响.方法 回顾性分析2004年1月至2006年11月,在中南大学中信湘雅生殖与遗传专科医院行新鲜胚胎移植的不孕症患者共4395个周期,按患者年龄分为年龄<35岁组(3442个周期)和年龄≥35岁组(共953个周期).每个周期常规移植2～3枚胚胎,仅有1枚可移植胚胎者移植1枚胚胎,年龄≥135岁或第2次移植且只有2枚胚胎者移植2枚胚胎.统计各组所有周期的临床妊娠及多胎妊娠率.结果 (1)年龄<35岁组移植1枚胚胎者的临床妊娠率[29.64%(166/560)]低于移植2、3枚者[分别为51.63%(1315/2547)、52.84%(177/335)],差异均有统计学意义(P<0.01);移植2枚与3枚者比较,差异无统计学意义(P>0.05).3者的多胎妊娠率分别为21.08%(35/166)、31.41%(413/1315)和42.37%(75/177),两两比较,差异均有统计学意义(P<0.01).(2)年龄≥35岁组移植1枚胚胎者的临床妊娠率[19.07%(41/215)]低于移植2、3枚者[分别为33.70%(92/273)、39.14%(182/465)],差异均有统计学意义(P<0.01);移植2枚与3枚者比较,差异无统计学意义(P>0.05).移植1枚和2枚胚胎者的多胎妊娠率[分别为19.51%(8/41)和20.65%(19/92)]比较,差异无统计学意义(P>0.05);2者均低于移植3枚胚胎者[40.66%(74/182)],差异有统计学意义(P<0.01).(3)年龄<35岁组的临床妊娠率[48.17%(1658/3442)]高于年龄≥35岁组[33.05%(315/953)],差异有统计学意义(P<0.01);年龄<35岁组移植1、2和3枚胚胎者的临床妊娠率分别与年龄≥35岁组移植相应胚胎数者比较,差异均有统计学意义(P<0.01).两组的多胎妊娠率[分别为31.54%(523/1658)和32.06%(101/315)]比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 IVF-ET患者移植2枚优质胚胎与移植3枚优质胚胎的临床妊娠率相近,但多胎妊娠率降低.年龄对多胎妊娠率无影响。

目的 探讨多囊卵巢综合征(PCOS)不孕患者辅助生殖治疗的临床效果及方案选择.方法 回顾性分析2003年1月至2007年11月间,在山东大学附属省立医院生殖医学中心就诊的PCOS不孕患者的临床资料,根据治疗方案不同,分为药物治疗[分别用来曲唑(LE组,58个周期)或枸橼酸氯米芬(CC组,45个周期)]、体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗、经阴道B超未成熟卵泡穿刺治疗、未成熟卵体外成熟(IVM)治疗等方案,分析其临床效果.结果 (1)药物治疗者中,LE组排卵率为66%(38/58),Cc组为47%(21/45);人绒毛膜促性腺激素(hCG)注射日平均子宫内膜厚度,LE组为(0.89±0.13)cm,CC组为(0.78±0.08)cm;hCG注射日宫颈黏液评分,LE组为(11.9±1.8)分,CC组为(9.9±1.8)分;平均成熟卵泡数,LE组为(1.08±0.28)个,CC组为(1.73±0.59)个;hCG注射日平均雌二醇水平,LE组为(983±138)pmol/L,CC组为(1676±372)pmol/L,两组各项指标比较,差异均有统计学意义(P<0.05);LE组周期妊娠率为14%(8/58),CC组为13%(6/45),两组比较,差异无统计学意义(P>0.05).(2)IVF-ET治疗者中,1584例PCOS不孕患者(PCOS组)促性腺激素(Gn)总用量[(980±1192)IU]低于对照组[(1194±1389)IU,同期因输卵管因素行IVF-ET治疗者1615例],但两组使用Gn平均天数[分别为(9.6±1.8)、(9.5±1.8)d]、hCG注射日平均雌二醇水平[分别为(15 752±6206)、(9675±4818)pmol/L]、平均获卵数[分别为(21±6)、(9±3)个]、平均受精数[分别为(15±6)、(7±3)个]、平均卵裂数[分别为(12.9±5.7)、(5.7±2.8)个]和重度卵巢过度刺激综合征(OHSS)发生率(分别为4.86%、1.67%)比较,PCOS组均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).但两组临床妊娠率(分别为44.7%、45.0%)比较,差异无统计学意义(P>0.05).(3)109例经阴道B超未成熟卵泡穿刺治疗患者的睾酮和黄体生成素水平均较治疗前明显下降,卵巢基础窦卵泡计数随穿刺次数增加而减少.穿刺治疗后应用尿促性腺激素促排卵治疗时,OHSS发生率很低,穿刺治疗后妊娠率达50%以上.(4)IVM治疗的286例PCOS不孕患者,取卵周期304个,平均每周期取卵12.3个,有76例患者获得临床妊娠.结论 PCOS不孕患者治疗的选择方案较多,上述4种治疗方案均有效,应结合患者具体情况给予个体化处理。

目的 探讨荧光原位杂交(FISH)技术不同方案用于染色体易位携带者胚胎植入前遗传学诊断(PGD)的效率.方法 根据FISH检测方案的不同进行分组:采用全染色体涂抹探针对染色体易位携带者8个周期的109个卵母细胞第一极体进行诊断(A组),采用联合端粒和着丝粒探针对染色体易位携带者29个周期的357个卵裂球进行诊断(B组),比较两组的活检成功率、固定时细胞丢失率、无核细胞数等.结果 A组的109个卵母细胞中72个受精,受精率为66.1%(72/109),B组的357个卵裂球中304个受精,受精率为85.2%(304/357),A组的受精率显著低于B组,差异有统计学意义(P<0.05).固定时细胞丢失率A组为9.6%(12/104),B组为1.6%(4/252),两组比较,差异也有统计学意义(P<0.05).杂交后核的无信号率A组为11.2%(10/89),B组为3.0%(7/233),两组比较,差异有统计学意义(P<0.05).A组的诊断率为72.5%(79/109),显著低于B组的89.8%(230/256),差异有统计学意义(P<0.05).A组的临床妊娠率和胚胎植入率分别为3/7和22.2%(4/18),均高于B组的30.4%(7/23)和15.7%(8/51),但差异均无统计学意义(P>0.05).结论 FISH两种方案均可有效地进行染色体平衡易位的PGD,卵裂球PGD的诊断效率更高。

目的 观察染色体平衡易位和罗伯逊(罗氏)易位基因携带者夫妇进行植入前遗传学诊断(PGD)后的胚胎染色体遗传特征和胚胎着床、妊娠情况,探讨PGD在染色体易位基因携带者夫妇实现正常生育中的意义.方法 用荧光原位杂交(FISH)技术对36对夫妇的胚胎进行PGD,其中14例为染色体平衡易位(平衡易位组),22例为染色体罗氏易位(罗氏易位组),并对诊断结果和胚胎着床、妊娠情况进行分析.结果 36例患者共活检胚胎253个,成功诊断胚胎225个,成功率为88.9%(225/253),获得可供移植的正常或平衡的胚胎共58个.平衡易位组和罗氏易位组PGD后胚胎着床率分别为36%(5/14)和14%(6/44),临床妊娠率分别为4/9和26%(5/19).结论 PGD可有效诊断胚胎染色体平衡易位和罗氏易位,避免反复流产和不必要的非意愿性终止妊娠,并获得理想的胚胎着床率和临床妊娠率。

目的 探讨神经激肽B(NKB)和内皮素1(ET-1)与妊娠期高血压疾病(HDCP)发病的关系.方法 选择2005年3-7月在华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科行产前检查的22例HDCP孕妇作为研究对象,其中,妊娠期高血压12例为妊娠期高血压组,子痫前期10例为子痫前期组;同期22例正常孕妇为对照组.分别采用酶联免疫吸附试验测定3组不同孕周孕妇血浆中NKB和ET-1的水平,采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法(SP)检测NKB在胎盘组织中的定位和表达,采用RT-PCR技术检测胎盘组织中的NKB mRNA和ET-1 mRNA表达.结果 (1)子痫前期组孕10～14周、孕20～24周、孕30～34周孕妇血浆中NKB和ET-1的水平分别为(35.6±5.2)、(17.9±4.3)μg/L,(39.5±4.3)、(22.7±3.6)μg/L,(47.1±3.3)、(27.5±3.5)μg/L;对照组分别为(22.9±3.3)、(10.7±5.3)μg/L,(30.2±3.4)、(13.2±4.1)μg/L,(34.6±4.3)、(16.6±4.8)μg/L,两组分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05);妊娠期高血压组与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05).(2)各组孕妇胎盘组织中的绒毛合体滋养细胞、绒毛血管内皮细胞及间质细胞的胞质内均可观察到NKB蛋白阳性染色颗粒,其中以合体滋养细胞的分布为主.子痫前期组胎盘组织中的NKB蛋白表达水平(0.244±0.020)显著高于对照组(0.160±0.012),两组比较,差异有统计学意义(P<0.05).而妊娠期高血压组NKB蛋白表达水平(0.162±0.019)与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).(3)子痫前期组孕妇胎盘组织中的NKB mRNA(0.97±0.36)和ET-1 mRNA(0.90±0.36)表达水平显著高于对照组(分别为0.78±0.54、0.65±0.47),两组比较,差异有统计学意义(P<0.05);而妊娠期高血压组(分别为0.80±0.40、0.70±0.32)与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).(4)子痫前期组孕妇血浆中NKB水平与ET-1水平呈正相关关系(r=0.79,P<0.05).结论 子痫前期患者在孕早期(孕10～14周)临床症状出现之前,其血浆中NKB和ET-1水平即已显著升高,胎盘组织中NKB和ET-1表达水平也明显升高.子痫前期患者体内NKB和ET-1水平变化与HDCP的发病密切相关。

目的 评价胎儿先天性心脏病产前超声筛查诊断模式.方法 收集2004年2月-2007年5月复旦大学附属妇产科医院产科在孕24周前行产前诊断的11 410例孕妇,应用超声筛查其11 544例胎儿的先天性心脏病发生情况.超声筛查切面包括四腔心切面、流出道切面(包括左室流出道+三血管切面),计算不同切面诊断先天性心脏病的敏感性及特异性,并随访胎儿预后.结果 (1)11 544例胎儿中,筛查出先天性心脏病48例,漏诊6例,先天性心脏病发生率为0.47%(54/11 544).(2)四腔心切面发现胎儿先天性心脏病33例,主要为室间隔缺损18例(其中9例合并锥干异常)、房室瓣膜异常6例及左、右心不对称9例.四腔心切面诊断先天性心脏病的敏感性为61.11%(33/54),特异性为99.98%(11 488/11 490).流出道切面诊断胎儿先天性心脏病15例,包括肺动脉闭锁1例,肺动脉瓣狭窄3例,大血管错位2例,肺动脉狭窄及大血管错位1例,法洛四联症6例,肺动脉狭窄2例.四腔心切面+流出道切面诊断胎儿先天性心脏病的敏感性为B8.89%(48/54),特异性99.98%(11 488/11 490).(3)48例先天性心脏病胎儿中,有11例合并其他器官系统异常,另有11例行羊膜腔穿刺检查胎儿染色体,其中5例为21三体.结论 四腔心切面+流出道切面对胎儿先天性心脏病的产前超声筛查有较高的检出率,此产前超声筛查诊断模式在临床上诊断胎儿先天性心脏病切实可行。

目的 探讨胎盘早剥并发子宫胎盘卒中的发病危险因素、临床特征及母儿结局.方法 收集2002年1月至2006年12月上海交通大学医学院附属国际和平妇幼保健院住院分娩的52例胎盘早剥产妇的临床资料,按是否并发子宫胎盘卒中分为两组:胎盘早剥并发子宫胎盘卒中17例为观察组,未并发子宫胎盘卒中的35例为对照组.采用回顾性研究方法对观察组子宫胎盘卒中的发病危险因素、临床特征及母儿结局进行分析,并与对照组进行比较.结果 (1)发生率:2002年1月至2006年12月共分娩35 049人次,胎盘早剥发生率为0.15%(52/35 049),胎盘早剥并发子宫胎盘卒中的发生率为0.05%(17/35 049),其中胎盘早剥产妇中子宫胎盘卒中的发生率为33%(17/52).(2)一般情况及分娩方式、分娩孕周:两组产妇的平均年龄、体重指数比较,差异无统计学意义(P>0.05).观察组产妇均以剖宫产结束分娩,而对照组产妇经阴道及剖宫产分娩为14及21例,比较两组分娩方式及分娩孕周,差异有统计学意义(P<0.01).观察组产妇早产发生率为88%(15/17),而对照组为49%(17/35),两组比较,差异有统计学意义(P<0.01).(3)发病危险因素:观察组产妇子痫前期发生率及发病持续时间分别为71%(12/17)及6.4 h,对照组分别为20%(7/35)及4.2 h,两组比较,差异均有统计学意义(P<0.01);两组产妇胎膜早破、羊水过多及其他因素比较,差异均无统计学意义(P>0.05).(4)临床特征:观察组产妇血性羊水、胎儿窘迫、宫腔积血及产后出血的发生率分别为82%(14/17)、65%(11/17)、35%(6/17)及59%(10/17),对照组分别为26%(9/35)、29%(10/35)、6%(2/35)及11%(4/35),两组比较,差异均有统计学意义(P<0.01).而两组产妇在主诉腹痛、阴道流血及腹肌张力高的发生率比较,差异均无统计学意义(P>0.05).(5)胎盘附着部位、剥离面积比较:观察组胎盘附着部位在子宫的前、后壁5例(5/17),宫底宫角12例(12/17);对照组胎盘附着部位在子宫的前、后壁24例(24/35),宫底宫角11例(11/35),两组胎盘附着宫底宫角部位发生例数比较,差异有统计学意义(P<0.01).观察组胎盘剥离面积均超过1/3,其中有9例患者剥离面积≥2/3;而对照组胎盘剥离面积≤1/3者27例,剥离面积在1/3～2/3者8例,两组比较,差异均有统计学意义(P<0.01).(6)母儿并发症及预后比较:观察组产妇发生失血性休克3例、DIC3例、子宫切除1例、死胎3例、新生儿窒息8例及新生儿死亡1例,而对照组除新生儿窒息5例及死胎2例外,其余指标均为0,两组比较,差异有统计学意义(P<0.01).结论 胎盘早剥并发子宫胎盘卒中发病的危险因素主要是子痫前期、发病持续时间长和胎盘附着宫角宫底部.胎盘早剥并发子宫胎盘卒中患者的母儿结局不良。

目的 探讨妊娠和阴道分娩对肛提肌形态学及阴道黏膜神经分布的影响.方法 选取2006年6月至12月在北京协和医院妇产科阴道分娩的正常初产妇64例为阴道分娩组,选择同期行阴式手术的非妊娠期未产妇8例为对照组,取两组患者阴道前、后壁黏膜组织和肛提肌组织.对肛提肌组织进行组织学染色,观察肌肉形态学变化、测量肌纤维直径并进行分型.分别对阴道黏膜组织中蛋白基因产物9.5(PGP9.5)、血管活性肠肽(VIP)和神经肽Y(NPY)3种神经纤维进行免疫组化染色,分别计数阴道黏膜上皮层和固有层内每高倍视野(HPF)下3种抗体阳性神经纤维末梢的数量.结果 阴道分娩组产妇肛提肌中Ⅰ型肌纤维占79%.Ⅰ型肌纤维平均直径(86±9)μm,Ⅱ型肌纤维平均直径(79±15)μm.两组阴道黏膜标本中神经纤维数量比较,阴道分娩组阴道前壁黏膜上皮层内PGP 9.5、VIP和NPY染色阳性的神经纤维数量分别为(5.9±3.3)、(7.6±3.1)和(8.2±3.2)条/HPF,均高于同组阴道后壁黏膜上皮层[分别为(3.8±2.9)、(5.9±3.1)和(6.0±3.0)条/HPF],差异均有统计学意义(P<0.05);阴道分娩组阴道前壁黏膜固有层内PGP 9.5和VIP染色阳性的神经纤维的数量[分别为(6.9±3.2)和(4.9±2.1)条/HPF]均高于正常对照组阴道前壁黏膜固有层[分别为(3.9±3.6)和(3.1±1.2)条/HPF],差异也均有统计学意义(P<0.05).结论 妊娠和阴道分娩会对肛提肌和盆底神经造成病理损伤.肛提肌适应妊娠期生理变化,肌纤维肥大.阴道前壁固有层内PGP 9.5和VIP能神经纤维较丰富,有利于阴道壁内血管和平滑肌的扩张,为分娩做准备。

目的 探讨原因不明复发性流产(URSA)患者外周血及蜕膜组织中CD+4CD+25调节性T(Tr)细胞比例的变化.方法 采用双荧光标记流式细胞分析技术检测25例URSA患者(流产组)、34例正常早孕妇女(正常妊娠组)和22例正常非孕妇女(正常非孕组)外周血及蜕膜组织中CD+4CD+25Tr细胞的比例.结果 (1)流产组和正常妊娠组妇女外周血CD+4 CDbright25T细胞的比例[分别为(1.55±0.77)%、(2.65±1.10)%]均显著高于正常非孕组妇女[(0.39±0.14)%],分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05);流产组妇女外周血CD+4 CDbright25T细胞的比例显著低于正常妊娠组妇女,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05).(2)流产组妇女蜕膜组织中CD+4 CDbright25T细胞比例[(0.59±0.23)%]显著低于正常妊娠组妇女[(1.24±0.55)%],两组比较,差异有统计学意义(P<0.01).流产组妇女蜕膜组织中CD+4CDdim25T细胞比例[(4.23±1.52)%]与正常妊娠组[(3.75±1.88)%]比较,差异无统计学意义(P>0.05).(3)正常妊娠组妇女蜕膜组织中CD+4CDbright25T细胞占CD+4T细胞的比例(CD+4CDbright25/CD+4)为(13.10±10.25)%,显著高于外周血[(5.59±2.62)%],两者比较,差异有统计学意义(P<0.05);流产组患者蜕膜组织中CD+4CDbright25/CD+4比例[(5.16±2.83)%]与外周血[(4.64±2.07)%]比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 CD+4CD+25Tr细胞数量在早孕期显著升高,参与了正常妊娠的维持,有可能是调控母-胎界面局部免疫耐受形成的一个重要因素;CD+4 CD+25Tr细胞数量的减少可能与URSA的发生有关。

目的 探讨保留盆腔植物神经的广泛性子宫切除术(NSRH)治疗宫颈癌的可行性,并评估其改善术后膀胱功能的效果.方法 选择接受手术治疗的临床分期为Ⅰ b1～Ⅱa期的宫颈癌患者44例,分为两组.研究组22例患者接受NSRH手术,术中在处理主韧带、宫骶韧带、深层的膀胱宫颈韧带及阴道旁组织时,保留盆腔内脏神经、腹下神经、下腹下神经丛及其膀胱支;对照组22例患者接受经典的广泛性子宫切除手术(即Piver Ⅲ类子宫切除术).对比两组患者的术中及术后并发症发生情况.结果 研究组术中出血量为(550±241)ml,对照组为(475±284)ml,两组比较,差异无统计学意义(P>0.05);研究组手术时间为(329±43)min,对照组为(272±56)min,两组比较,差异有统计学意义(P<0.01).术后第8天,研究组及对照组中残余尿量<100 ml的患者比例分别为68%及18%,两组比较,差异有统计学意义(P<0.01);研究组留置尿管时间(8～23 d,中位时间8 d)与对照组(8～32 d,中位时间20 d)比较,差异有统计学意义(P<0.01).两组患者均无严重的手术相关性损伤及病理切缘不净的情况发生.结论 NSRH治疗早期子宫颈癌安全、可行,且能明显改善患者术后的膀胱功能。

目的 构建雌激素受体α(Erα)的转录激活系统.方法 采用PCR技术构建Erα及其不同功能区(AF1、AF2和DBD)重组质粒并进行鉴定.将培养好的293T细胞分为pGAL-Erα组(转染pGAL-Erα重组质粒)、pGAL-ERαAF1组(转染pGAL-ERαAF1重组质粒)、pGAL-ERαAF2组(转染pGAL-ERαAF2重组质粒)、pGAL-ERαDBD(转染pGAL-ERαDBD重组质粒)及空白对照组(转染空载体)5组,各组同时转染0.2 μg雌激素受体作用元件荧光素酶报告基因(ERE-LUC)和0.1 μg表达β-半乳糖苷酶的质粒,作用4 h后将各组细胞分为两部分,一部分加入雌二醇(终浓度10 nmol/L)诱导,另一部分继续培养,24 h后分别测定各组加入雌二醇诱导及未加雌二醇诱导的细胞的转录激活活性,并计算各组细胞与空白对照组细胞转录激活活性的比值.蛋白印迹法测定各重组质粒蛋白在293T细胞中的表达.结果 加入雌二醇诱导后,pGAL-Erα组、pGAL-ERαAF1组、pGAL-ERαAF2组、pGAL-ERαDBD组细胞与空白对照组细胞的转录激活活性比值分别为20.44±1.01、2.09±0.11、8.09±0.30和1.05±0.09.构建的Erα及其不同功能区重组质粒蛋白在293T细胞中均有表达.结论 成功构建了Erα的转录激活系统。

目的 研究子宫内膜癌Ishikawa细胞中17β雌二醇通过细胞膜受体对丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路的快速激活效应.方法 17β雌二醇偶联牛血清白蛋白(E2-BSA)在不同的时间作用于Ishikawa细胞后,采用蛋白印迹法检测磷酸化细胞外信号调节激酶(ERK)1和ERK2(ERK1/2)的表达情况,并利用激光扫描共焦显微镜(激光共聚焦)技术观察雌激素是否可以与细胞膜受体结合,不穿过细胞膜而快速磷酸化ERK1/2.结果 蛋白印迹法检测发现,ERK1/2在1×10-7mol/L的E2-BSA作用5 min后被快速磷酸化,磷酸化ERK1/2蛋白的表达水平为0.52,60 min时达到高峰(表达水平为0.98),120 min时回落(表达水平为0.09).激光共聚焦技术显示,E2-BSA在作用5 min时与细胞膜上相应受体结合,未穿过细胞膜即增高磷酸化ERK1/2的表达.结论 雌激素可以通过细胞膜受体快速激活子宫内膜癌细胞的MAPK通路。

目的 探讨槲皮素以及槲皮素联合顺铂对宫颈癌细胞黏附、迁移和侵袭的影响.方法 以不同浓度(20、40、80 μmol/L)槲皮素以及槲皮素联合顺铂(10 μmol/L)处理宫颈癌细胞株HeLa细胞,采用细胞黏附实验、划痕实验和穿膜小室侵袭实验分别检测处理前后HeLa细胞黏附率、迁移速度以及侵袭力(以穿膜细胞数表示)的变化.结果 不同浓度的槲皮素处理后,随着槲皮素浓度从20 μmol/L增加至80 μmol/L,细胞黏附率由(82.2±1.5)%降至(48.4±1.1)%;细胞迁移速度由(7.26±0.20)μm/h降至(3.78±0.64)μm/h;穿膜细胞数由(124.3±1.5)个降至(90.7±2.1)个,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05).顺铂联合槲皮素处理后,随着槲皮素浓度从20 μmol/L增加至80 μmol/L,细胞黏附率由(42.6±1.2)%降至(27.5±1.7)%;细胞迁移速度由(2.20±0.33) μm/h降至(0.72±0.19) μm/h;穿膜细胞数由(78.7±2.5)个降至(44.0±4.0)个,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05).槲皮素联合顺铂处理后对HeLa细胞黏附、迁移和侵袭的抑制作用明显强于单纯槲皮素处理者(P<0.05).结论 槲皮素以及槲皮素联合顺铂能抑制HeLa细胞黏附、迁移及侵袭,槲皮素能增强顺铂对HeLa细胞黏附、迁移及侵袭的抑制作用。

目的 应用RNA干扰技术,观察稳定转染Her2基因的短发夹状RNA(shRNA)对不同恶性程度的卵巢上皮性癌(卵巢癌)SKOV3和SKOV3.ipl细胞Her2基因表达及细胞生物学特性的影响.方法 将表达Her2的质粒pHer2 shRNA分别转染SKOV3和SKOV3.ipl细胞,经抗性筛选获得稳定转染的细胞系.RT-PCR技术、蛋白印迹法检测转染前后细胞Her2 mRNA和蛋白的表达,体外侵袭实验观察转染前后细胞侵袭能力的改变,裸鼠接种肿瘤细胞观察转染前后细胞成瘤能力的改变.结果 转染前后SKOV3.ipl、SKOV3细胞的Her2 mRNA表达量分别为(99.9±1.3)%和(42.4±2.5)%、(68.0±3.1)%和(40.8±2.0)%.Her2蛋白的表达量分别为(98.2±1.7)%和(40.7±2.1)%、(72.1±3.4)%和(36.4±1.5)%,稳定转染后,两种细胞的Her2基因表达均明显下降,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05).稳定转染pHer2 shRNA后,SKOV3.ipl细胞的穿膜细胞数由(36.2±9.7)个下降为(15.7±7.2)个,SKOV3的穿膜细胞数由(7.6±1.1)个下降为(1.8±0.8)个,细胞侵袭能力均显著下降,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05).稳定转染pHer2 shRNA后,SKOV3.ip1和SKOV3细胞的成瘤重量分别由(1.55±0.31)g下降为(0.69±0.20)g、(1.14±0.10)g下降为(0.38±0.03)g,两种细胞的成瘤能力均显著下降,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 (1)针对Her2基因的RNA干扰技术可以显著降低卵巢癌细胞Her2基因的表达水平.(2)经RNA干扰作用降低Her2基因表达后,卵巢癌细胞的生物学特性改变,恶性度降低。

妊娠合并风湿性心脏病是严重的产科合并症,对母儿威胁极大.文献报道,二尖瓣狭窄的孕产妇心功能Ⅰ～Ⅱ级者死亡率为0.4%,心功能Ⅲ～Ⅳ级者死亡率高达6.8%.临床上有些患者,因各种原因直至妊娠中晚期出现症状后才发现患有心脏病,给临床治疗带来了极大的困难.近年来,北京安贞医院收治了11例中晚期妊娠合并风湿性心脏病二尖瓣狭窄,心功能Ⅲ～Ⅳ级的患者,对其中5例施行经皮二尖瓣球囊扩张术,获得了满意的疗效,现报道如下。

一、临床资料 　　患者34岁,已婚,孕1产1.因月经量增多1年,发现宫颈肿瘤5 d,于2007年4月16日入院.患者入院前1年无明显诱因出现月经量增多,伴经期延长,淋漓不尽达10余天.当时患者未引起足够重视,入院前2个月上述症状进一步加重并出现下腹及腰骶部坠胀感.入院前5 d,患者至外院检查发现宫颈肿瘤,遂来我院就诊.患者既往史及家族史无特殊. 　　

宫颈癌是世界范围内威胁妇女生命健康的主要妇科恶性肿瘤,对于晚期和复发患者,化疗是主要的治疗方法,但其严重的副反应及肿瘤耐药是导致患者死亡的主要原因.因此,寻求高效、低毒的化疗药物用于宫颈癌的治疗,是急需探寻的课题.TRAIL蛋白是新近发现的肿瘤坏死因子(TNF)家族的成员,因其能够选择性地诱导多种肿瘤细胞凋亡而不影响正常细胞的生长,有望成为新型的化疗药物.本研究观察TRAIL蛋白以及顺铂调节TRAIL蛋白对宫颈癌细胞株HeLa和Caski细胞生长的影响,探讨TRAIL蛋白用于宫颈癌治疗的可行性,并为临床应用提供新的思路和科学依据。

患者33岁,因孕31周+4无诱因阴道出血36 h于2007年5月10日入院.身体检查:一般情况尚可,胎心率140次,阴道无活动性出血.B超示孕32周、中央性前置胎盘、胎盘植入不除外.血红蛋白95 g/L.实验室检查:凝血酶原时间(PT):12.9 s,凝血酶原活动度(PA):82.5%,活化部分凝血活酶时间(APTT):25.7 s,血浆纤维蛋白原(FBG):396.9 mg/ml.患者于2007年5月13日凌晨阴道出血150 ml,查血红蛋白74 g/L。

患者44岁,孕3产1.因B超检查发现盆腔包块6年、月经周期紊乱半年于2007年7月6日入院.妇科检查:子宫体稍大,形态规则,质地中等,左侧附件区扪及一直径约5 cm囊性包块,质地中等,边界不清,无压痛,活动差.阴道B超检查提示:左侧附件区可探及一直径约5 cm无回声区,界清,有包膜,考虑为卵巢子宫内膜异位囊肿;多发性子宫肌瘤。

患者73岁,因排尿困难4个月.B超发现盆腔包块10 d.于2007年6月12日入院.患者既往健康,孕9产7,人工流产2次,55岁绝经,发病以来无尿痛,大便无异常.身体检查:腹部稍膨隆,下腹部触及包块,上界达脐耻之间.三合诊:阴道、直肠黏膜光滑,包块位于直肠与阴道壁之间,下界距阴道口2 cm,上界达脐耻之间,两侧达盆壁;肿物为囊实性,边界清,无触痛。

胎母输血综合征是一种少见的产科疾病,即胎儿红细胞由胎盘绒毛间隙进入母体血液循环,引起胎儿不同程度的失血及母体溶血性输血反应的一组症候群,也是胎儿非免疫性水肿的主要病因之一.1954年由Chow首次报道,其后,相继有文献报道,但至今无大样本、多中心的研究成果.由于本病发病隐蔽,在多数情况下不易做出早期诊断,故一旦发生,围产儿死亡率较高.为进一步提高对本病的认识,降低该病引起的围产儿并发症发生率及死亡率,本文对胎母输血综合征的发病情况及临床表现等综述如下。

卵巢恶性肿瘤是严重威胁妇女健康的常见恶性肿瘤,但其病因不明.近年来,越来越多的研究显示,卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)与卵巢恶性肿瘤的发生、发展密切相关.妇女在绝经后2～3年后其血FSH和LH水平升高的同时卵巢恶性肿瘤的发生率也达到峰值.分娩、口服避孕药等可以通过垂体的甾体激素反馈途径降低FSH、LH水平。

由解放军总医院主办的第三届经阴道微创手术新进展学习班将于2008年10月9至12日在解放军总医院举行。学习班以手术现场演示为主，邀请北京协和医院郎景和、沈铿、朱兰教授、解放军总医院宋磊教授、佛山市妇幼保健院谢庆煌教授、北京大学人民医院崔恒教授、北京朝阳医院张震宇教授等进行手术演示及专题讲座，重点讨论经阴道子宫全切除术、子宫次全切除术、子宫肌瘤剔除术、广泛性子宫切除术、保留子宫的广泛性宫颈切除术、卵巢良性肿瘤切除术及盆底重建手术等。

妇科肿瘤是目前育龄女性的常见疾病，严重危害女性的健康。为进一步推动本地区妇科肿瘤治疗的发展，推广肿瘤个体化和综合治疗的理念，江苏省医学会、复旦大学附属肿瘤医院、无锡市医院管理中心、无锡肿瘤医院共同主办的“2008年国际妇科肿瘤论坛（中国·无锡）”定于2008年10月31日--11月2日在无锡市举办。届时将邀请美国安德森癌症中心、新加坡妇产科医院、日本东京大学医学部附属病院及我国香港大学医学院等著名的妇科肿瘤专家和北京、上海等地多位著名专家讲演，

上海交通大学附属第一人民医院妇产科是我国著名妇产科专家林元英教授创建于50年代初期的我国最早的妇产科专业的临床、科研和教学培训基地之一，也是目前上海市综合性医院中规模最大的妇产科学科之一。上海交通大学重点学科、卫生部妇科内镜培训基地、上海市危重孕产妇抢救中心和上海市妊娠糖尿病诊疗中心均设在本学科。近5年来，妇产科博士后工作站承担国家自然科学基金、国家高技术研究发展计划（863项目）、上海市医学重大课题等20余项，总研究和建设经费400余万元。

由浙江省医学会、杭州医学会妇产科学分会主办、浙江省政府、杭州市政府资助的浙江省新世纪“151”人才工程项目——围产医学及胎儿宫内手术新进展高级研修班定于2008年10月23—26日在杭州举办。届时将邀请国内外著名围产医学专家、胎儿手术专家讲学，并结合我国情况，探讨胎儿宫内手术的前景及相关学术问题。

由首都医科大学附属复兴医院．北京国际宫腔镜培训中心和亚太地区妇科内镜协会联合举办的第16届北京·国际宫腹腔镜学术研讨会将于2008年10月11—13日在北京召开。届时将邀请国内外30余位专家就保留子宫器官和功能的微创诊治技术进行专题讲座和手术演示，会议研讨题目有：（1）手术中卵巢的大体肉眼病理形态变化的识别和卵巢的保护；（2）腹腔镜在妇科恶性肿瘤诊治中的应用评价；（3）简单、安全、有效、经济、实用的盆底重建术；（4）子宫内膜息肉的临床诊断和病理诊断问题；（5）子宫腺肌病治疗的选择；（6）宫腔镜子宫内膜切除术远期疗效的评价及复发性功血的治疗对策；

中山大学附属第三医院与广东省医学会围产医学分会、广东省优生优育协会联合主办的国家级继续教育项目——剖宫产术及其相关临床问题高级研修班定于2008年11月21-25日在广州举行。项目编号：2008-05-02-036。学习班将围绕剖宫产术现状与回顾、剖宫产时机选择、如何选择剖宫产术式、不同情况剖宫产术的注意事项、剖宫产术风险及防范、剖宫产术对母儿的近远期影响等临床热点问题进行讨论和专题讲座。

为提高广大作者的医学论文特别是英文医学论文的写作水平，中华医学会《中华医学杂志英文版》定于2008年10月31日-11月3日在北京举办第七期“全国医学论文写作研修班”。研修班邀请国内外知名专家讲授科研选题、科研设计和统计学相关知识，医学论文的撰写思路及各部分的写作技巧，论文写作中的伦理学问题，版权知识，一稿多投、重复发表、二次发表问题，向英文期刊投稿的注意事项，

8月2日10点45分,北京奥运会火炬手--国家科技奖获得者、全国十大医德楷模、本刊总编辑郎景和教授高举"祥云"火炬奔跑在天津友谊北路火炬传递途中,道路两旁"奥运加油! 182号加油!"的欢呼声和喝彩声此起彼伏……这是万众瞩目的北京奥运火炬接力的冲刺创段,再过6天,祥运火炬将传递到北京,最终在第29届奥运会主会场点燃!