2013年 · 第48卷第11期

目的通过对产前超声诊断的室间隔缺损 (室缺) 胎儿的临床资料进行分析,探讨胎儿不同类型室缺及合并其他畸形与染色体异常的相关性。方法收集2008年1月至2011年9月在中山大学附属第一医院行产前胎儿系统超声诊断的214例室缺胎儿的临床资料。根据缺损的部位分为膜周部 (包括流入道型及流出道型) 、肌部和混合型室缺 (缺损>5 mm累及肌部和膜部) ;根据超声检查是否合并其他心脏畸形及心外异常,分为单纯室缺组、心内异常组 (除外室缺的其他心脏畸形及大血管变异) 、心外异常组 (各系统脏器的结构畸形及超声软指标异常) 及心内外异常组。对各组胎儿行染色体核型G显带分析,若产前未行染色体检查者,追踪至出生后检查其临床表型,表型正常者归为染色体核型正常,并随访其结果。结果 (1) 室缺分类:膜周部室缺134例 (62.6%,134/214),其中流入道型室缺91例 (42.5%,91/214) ;流出道型室缺43例 (20.1%,43/214) 。肌部室缺35例 (16.4%,35/214) 。混合型室缺45例 (21.0%,45/214) 。 (2) 分组:214例室缺胎儿中,单纯室缺组46例 (21.5%) ;心内异常组34例 (15.9%) ;心外异常组87例 (40.6%) ;心内外异常组47例 (22.0%) 。各组胎儿室缺构成比分别比较,差异均有统计学意义 (P<0.01) 。 (3) 染色体核型分析:共126例胎儿进行了染色体核型分析或临床表型确认,其中染色体核型分析105例,临床表型确认21例。126例胎儿中46例 (36.5%) 染色体核型异常。 (4) 各类型室缺胎儿的染色体异常结果:55例流入道型室缺中染色体异常28例 (50.9%),27例流出道型室缺中染色体异常9例 (33.3%),25例肌部型室缺中染色体异常2例 (8.0%),19例混合型室缺中染色体异常7例 (7/19),各类型室缺合并染色体异常率分别比较,差异均有统计学意义 (P<0.01) 。 (5) 各组胎儿染色体异常率:单纯室缺组胎儿中29例进行了染色体核型分析,其中1例异常 (3.4%) ;心内异常组胎儿中14例进行了染色体核型分析,其中2例异常 (2/14) ;心外异常组胎儿中56例进行了染色体核型分析,其中30例异常 (53.6%) ;心内外异常组胎儿中27例进行了染色体核型分析,其中13例异常 (48.1%) 。单纯室缺组胎儿染色体异常率分别与心外异常组、心内外异常组比较,差异均有统计学意义 (P<0.01) 。结论室缺胎儿合并染色体异常的比例较高,尤其是流入道型室缺以及室缺合并其他心外异常时,高度提示合并染色体异常的可能。

目的探讨胎儿胼胝体发育不全 (ACC) 的影像学诊断及其与染色体异常的关系。方法 选择2007年3月至2012年11月在南方医科大学南方医院、广州军区总医院及深圳市妇幼保健院接受产前胎儿MRI检查、并诊断胎儿ACC的单胎孕妇40例。分析胎儿ACC与胎儿染色体异常的关系,观察ACC胎儿的超声影像学特点以及与MRI诊断的符合率。结果 (1) 40例ACC胎儿中,单纯孤立性ACC 15例 (38%,15/40),非孤立性ACC 25例 (63%,25/40) 。25例非孤立性ACC中合并中枢神经系统发育异常18例 (72%,18/25),其中包括小脑蚓部发育不良、Dandy-walker综合征、小脑囊肿、叶状全前脑等;合并中枢神经系统以外畸形16例,主要包括5例心脏发育异常 (20%,5/25) 、3例颜面部发育异常 (12%,3/25) 、2例泌尿系统发育异常 (8%,2/25) 、1例四肢发育异常 (4%,1/25) 、其他占20% (5/25) 。 (2) 40例ACC胎儿中发现染色体多态性3例,其中包括2例46,XX,1qh+和1例46,XY,13cenh+;染色体数目异常4例,其中包括18三体1例,21三体1例,13三体1例,47,XYY 1例。 (3) 40例ACC胎儿超声检查结果与MRI诊断结果完全一致36例,符合率为90% (36/40) ;4例结果不一致。37例终止妊娠孕妇中,接受胎儿尸检28例,尸检结果与MRI诊断结果一致;对3例新生儿行MRI检查,证实产前MRI诊断正确。 (4) 25例非孤立性ACC胎儿被终止妊娠,15例孤立型ACC胎儿中,12例选择终止妊娠,3例选择继续妊娠。3例继续妊娠孕妇中,足月分娩新生儿2例,早产1例。3例新生儿出生后均行MRI复查,证实产前MRI诊断正确,随访均未发现明显的生长发育及智能发育迟滞。结论MRI对胎儿ACC的诊断,特别是合并颅内发育异常的非孤立性ACC有很高的临床诊断价值;超声检查的正确诊断率仅有90%的优势,可作为补充技术以明确ACC分类及分型。与孤立性ACC相比,非孤立性ACC合并染色体异常的可能性较大。

目的探讨孕11~ 13周+ 6胎儿多个超声指标联合母血清学指标在筛查染色体异常胎儿中的临床效果。方法选择2010年1月1日至2011年12月31日天津市中心妇产科医院进行联合筛查的单胎孕妇5000例 (筛查孕周为11~ 13周+ 6) 。采用超声仪对胎儿颈项透明层 (NT) 厚度,鼻骨缺失与否,静脉导管a波血流反向及三尖瓣反流情况进行检测;同时检测孕妇血清妊娠相关蛋白A (PAPP-A) 和游离β绒毛膜促性腺激素 (β-hCG) 水平。将NT值和β-hCG及PAPP-A水平输入计算机,计算风险值 (≥1∶270) 。联合筛查的5000例孕妇中筛查出高风险204例,对这204例孕妇进行绒毛组织活检,检测胎儿染色体核型,对染色体异常胎儿的超声特征进行分析。结果 (1) 5000例单胎孕妇中,正常染色体核型胎儿4983例,活产儿4938例,62例胎儿因各种原因于孕中期引产,其中40例染色体核型正常但伴先天性心脏病,17例为染色体异常 (其中21三体9例、18三体2例、13三体1例、45X 4例),2例脊柱裂,2例消化道梗阻,1例巨膀胱。染色体核型异常胎儿中有1例联合筛查为低风险,年龄高风险 (孕妇年龄均≥40岁),后经产前诊断证实胎儿为21三体综合征。 (2) 9例21三体胎儿中有5例为鼻骨缺失 (5/9) 、5例有三尖瓣反流 (5/9) 、4例为静脉导管a波反向 (4/9) 、3例胎儿鼻骨缺失伴有三尖瓣反流及静脉导管a波血流反向 (3/9) 。2例18三体胎儿中有1例鼻骨缺失、2例均为三尖瓣反流及静脉导管a波血流反向。4例45X胎儿中有2例为静脉导管a波血流反向。4983例正常核型胎儿中有8例鼻骨缺失 (0.16%) 、48例三尖瓣反流 (0.96%) 以及44例静脉导管a波血流反向 (0.88%) 。40例先天性心脏病胎儿中有32例为三尖瓣反流 (80%),30例静脉导管a波血流反向 (75%) 。8例孕早期发现的鼻骨缺失的正常核型胎儿,于孕20周时超声检测均发现鼻骨。结论 孕11~ 13周+ 6胎儿联合筛查检出率高,假阳性率低;异常核型胎儿往往伴有三尖瓣反流、静脉导管的a波反向及鼻骨缺失,增加超声标记有提高异常胎儿检出率的作用;孕11~ 13周+ 6超声标记物异常可能与胎儿先天性心脏病有关。

目的通过对超声检查出的颈项透明层 (NT) 增厚胎儿进行染色体核型分析,评价超声检查NT增厚在筛查胎儿染色体核型异常中的作用。方法2010年1月至2012年8月首都医科大学附属北京妇产医院于孕11~ 13周+ 6行超声胎儿NT检查的孕妇共14 881例,其中胎儿NT≥2.5 mm的118例纳入本研究,118例孕妇中单胎妊娠113例 (95.8%),双胎妊娠5例 (4.2%) 。其中的108例孕妇行介入性产前诊断,对胎儿行染色体核型分析。结果 (1) 染色体核型分析: 108例 (91.5%,108/118) 孕妇进行了胎儿染色体核型分析,其中88例染色体核型分析未见异常;20例染色体数目异常,染色体异常检出率为18.5% (20/108) 。 (2) NT≥2.5 mm筛查胎儿染色体异常的诊断值:其灵敏度为44%、特异度为99%、假阳性率为1%、假阴性率为56%、总符合率为99%,阳性预测值为19%、阴性预测值为100%。 (3) 88例染色体核型分析未见异常的胎儿中,其中72例 (82%) 系单纯NT增厚,无结构异常;余16例胎儿 (18%) 同时合并结构畸形或胎死宫内。 (4) 10例未行染色体核型分析的胎儿中,8例因超声检查发现畸形而终止妊娠,2例胎死宫内。 (5) 5例双胎妊娠均为双绒毛膜性,均为双胎之一出现NT增厚,染色体核型系1例双胎之一为21三体,余4例双胎胎儿染色体核型正常,其中3例双胎均活产;1例双胎之一胎儿孕中期超声诊断为腹裂、内脏外翻畸形,之后发生胎死宫内,另一胎儿足月活产分娩。 (6) 118例孕妇中35例 (29.7%) 进行了唐氏综合征筛查,其中1例孕妇结果显示高风险,胎儿染色体核型分析证实为21三体。余34例孕妇均为唐氏综合征筛查低风险,胎儿染色体核型均正常。结论孕11~ 13周+ 6超声检查胎儿NT增厚,提示胎儿有染色体异常的可能,同时提示胎儿可能存在其他结构畸形,因此胎儿NT增厚是一个有效的产前筛查指标。

目的探讨多重连接探针扩增 (MLPA) 技术应用于产前诊断22q11.2微缺失的临床应用价值。方法选择2011年5月至2012年12月在南京医科大学附属南京妇幼保健院经胎儿超声心动图检查诊断为先天性心脏畸形、常规G显带染色体核型分析正常的胎儿62例,采用MLPA技术检测胎儿是否存在22q11.2微缺失,对阳性样本进行父母溯源;并采用微阵列比较基因组杂交 (arrayCGH) 技术进行全基因组扫描分析,验证MLPA检测结果。结果MLPA检测结果显示,在62例心脏畸形胎儿中共检出5例22q11.2微缺失,阳性检出率为8% (5/62),其中4例是3M大小的典型微缺失,父母溯源为新发突变;1例是1.5M大小的微缺失,遗传于胎儿父亲。arrayCGH分析验证了22q11.2微缺失的存在及缺失的位置和大小。结论MLPA用于产前诊断先天性心脏畸形胎儿的22q11.2微缺失具有临床指导价值,可为遗传咨询、生育指导和出生后干预提供依据。

目的探讨经胸廓超声心动图 (TTE) 联合呼气末CO2分压 (PETCO2) 监测预防宫腔镜术中空气栓塞的价值。方法2010年8月至2012年8月,在河南省人民医院接受全身麻醉下宫腔镜手术的患者300例,在术中行TTE联合PETCO2监测,观察并详细记录右心房出现气栓的时间、空气栓塞分级 (0~ 4级) 、PETCO2、血氧饱和度、血压、液体负差值、术中出血量等。对空气栓塞分级≥3级,PETCO 2下降≥5 mm Hg (1 mm Hg=0.133 kPa) 的24例 (干预组) 患者给予立即停止手术、左侧卧位并抬高右肩、吸氧、地塞米松10 mg静脉滴注等;对空气栓塞分级≥3级,PETCO 2下降<5 mm Hg的5例 (对照组) 患者给予立即停止手术,严密观察病情变化。比较两组患者PETCO2继续下降例数、PETCO 2恢复时间。结果 (1) 空气栓塞发生情况:300例宫腔镜手术者中共有34例发生空气栓塞。发生空气栓塞的患者TTE均可在下腔静脉、右心房、右心室探及气栓信号,29例患者右心房有连续性的成群气栓通过,32例患者PETCO2下降>2 mm Hg,14例患者血氧饱和度<95%,4例患者血压下降≥20%。 (2) PETCO2下降程度与空气栓塞分级变化: PETCO2下降程度与空气栓塞分级呈正相关 (r=0.601,P<0.01),PETCO 2下降≥5 mm Hg时,右心房均有连续性成群气栓通过,PETCO2下降≥10 mm Hg的8例中,7例患者空气栓塞分级为4级。空气栓塞分级为3级与4级者,PETCO2下降程度[分别为 (7.5±2.4) mm Hg、 (11.1±4.1) mm Hg]、液体负差值[分别为 (688±150) ml、 (925±268) ml]、术中出血量[分别为 (71±36) ml、 (127±56) ml]比较,差异均有统计学意义 (P<0.05) 。 (3) PETCO2继续下降例数及恢复时间:干预组与对照组患者PETCO 2继续下降分别为2、4例,PETCO2恢复时间分别为 (4.8±1.6) 、 (8.3±1.9) min,两组比较,差异均有统计学意义 (P<0.05) 。结论TTE联合PETCO2监测能有效预测宫腔镜术中空气栓塞的发生;右心房有连续性的成群气栓信号且PETCO 2下降≥5 mm Hg,预示可能发生空气栓塞;液体负差值越大、术中出血量越多,空气进入机体的量越多;对空气栓塞分级≥3级、PETCO2下降≥5 mm Hg者,及时干预能有效阻止空气栓塞的发展。

目的比较多囊卵巢综合征 (PCOS) 不孕患者卵泡早期行促性腺激素释放激素激动剂 (GnRH-a) 降调节后,行未成熟卵体外培养 (IVM) 和体外受精 (IVF) 的治疗结局。方法对2010年7月至2012年12月,在温州医科大学附属第一医院生殖医学中心行辅助生殖治疗的72例PCOS不孕患者的临床资料进行回顾性分析。在卵泡早期使用GnRH-a降调节后,再根据治疗方法不同分为IVM组36例和IVF组36例,比较两组实验室指标及临床结局。结果 (1) 实验室指标:IVM组共获卵442个,IVF组共获卵560个。IVF组的卵母细胞成熟率为83.8% (469/560),优质胚胎率为70.9% (212/299),均高于IVM组的54.1% (239/442) 和50.7% (73/144),分别比较,差异均有统计学意义 (P<0.01) ;IVM组促性腺激素 (Gn) 使用时间为 (2.8±1.5) d,Gn用量为 (285±169) U;IVF组Gn使用时间为 (11.0±1.0) d,Gn用量为 (1499±165) U,分别比较,差异也有统计学意义 (P<0.01) ;IVM组的平均获卵数为 (12.8±2.5) 个、受精率为64.8% (155/239) 、种植率为31% (23/74),IVF组分别为 (15.6±3.1) 个、65.5% (307/469) 、31% (23/74),两组分别比较,差异均无统计学意义 (P>0.05) 。 (2) 临床结局:IVM组的临床妊娠率为44% (14/32),IVF组的临床妊娠率为55% (17/31),两组比较,差异无统计学意义 (P>0.05) 。IVF组的流产率为1/17,低于IVM组的1/14,但差异无统计学意义 (P>0.05) 。IVM组无一例卵巢过度刺激综合征 (OHSS) 发生,IVF组中重度OHSS发生率为31% (11/36) 。结论PCOS不孕患者卵泡早期GnRH-a降调节后行IVM和IVF治疗,均可获得比较满意的实验室和临床结局。IVM组的治疗周期短且可完全避免OHSS的发生,但流产率有升高趋势。IVF组的OHSS发生率较高,且促排卵药物用量增多。

目的探讨宫颈鳞癌组织中表皮生长因子 (EGFR) 的表达及其基因状态,并分析EGFR的表达与基因状态之间的相关性。方法构建含有72例宫颈鳞癌组织标本的组织芯片,应用免疫组化方法和荧光原位杂交 (FISH) 技术检测EGFR蛋白的表达、EGFR基因扩增、基因拷贝数的变化。结果72例宫颈鳞癌中,因2例组织点发生脱片、移位,1例定位有误 (未见癌细胞),剔除此3例,最终观察69例;EGFR蛋白表达的阳性率与肿瘤浸润深度、淋巴结转移及淋巴脉管间隙浸润有相关性 (P均<0.05) 。FISH技术分析结果显示,72例宫颈鳞癌中有效信号共64例,基因扩增者7例,二倍体25例,三倍体23例,多倍体9例;所有EGFR基因扩增患者EGFR蛋白表达均为强阳性;EGFR蛋白表达与基因拷贝数增加之间有相关性 (χ2=13.564,P<0.05) 。结论EGFR蛋白过表达及基因状态可能参与宫颈鳞癌的生长、侵袭和转移过程,EGFR蛋白过表达可能由基因扩增或基因拷贝数增加所致。EGFR基因状态有可能成为宫颈鳞癌靶向治疗的有效监测指标。

目的探讨切除修复交叉互补基因1 (ERCC1) 的单核苷酸多态性 (SNP) 与卵巢上皮性癌 (卵巢癌) 患者铂类药物化疗敏感性和预后的关系。方法通过Haploview软件 (Version 4.2; http://www.broadinstitute.org) 筛选出ERCC1基因的6个标签SNP (tagSNP) 位点,即rs11615、rs3212986、rs735482、rs3212955、rs12610134、rs3212958位点,采用单碱基延伸 (Snapshot) 法检测220例卵巢癌患者ERCC1基因6个tagSNP位点的基因型。比较铂类药物敏感 (147例) 和不敏感 (73例) 、复发 (135例) 和未复发 (85例) 、死亡 (92例) 和存活 (128例) 患者的ERCC1基因6个tagSNP位点的基因型频率;并对携带ERCC1基因6个tagSNP位点不同基因型的卵巢癌患者的预后进行比较,评价患者预后的指标包括疾病无进展生存时间 (PFS) 和总生存时间 (OS) 。结果ERCC1基因rs11615位点CC、CT、TT基因型频率,铂类药物敏感 (分别为53.1%、45.6%、1.4%) 与不敏感 (分别为52.0%、35.6%、12.3%) 、复发 (分别为54.8%、37.0%、8.2%) 与未复发 (分别为49.4%、50.6%、0) 、死亡 (分别为51.1%、39.1%、9.8%) 与存活 (分别为53.9%、44.5%、1.6%) 患者分别比较,差异均有统计学意义 (P<0.05) ;与携带CC基因型的卵巢癌患者相比,携带TT基因型患者的铂类药物化疗敏感性明显降低 (OR=6.22,95%CI为1.12~ 34.42) 。log-rank分析显示,ERCC1基因rs11615位点CC、CT、TT基因型频率与卵巢癌患者的PFS和OS均明显相关 (P<0.01) ;Cox比例风险回归模型分析表明,与携带CC基因型的卵巢癌患者相比,携带TT基因型患者的PFS (分别为21.1、8.6个月;HR=2.19,95%CI为1.14~ 4.22,P=0.009) 和OS (分别为28.5、19.3个月;HR=2.22,95%CI为1.06~ 4.64,P=0.021) 均明显缩短。而另外5个tagSNP (即rs3212986、rs735482、rs3212955、rs12610134、rs3212958) 位点的基因型分布与卵巢癌患者的化疗敏感性及预后均无关 (P>0.05) 。结论ERCC1基因rs11615位点的SNP可能成为预测卵巢癌患者铂类药物化疗敏感性及预后的分子标志物。

目的探讨控制性超促排卵 (COH) 对小鼠卵母细胞胞质内线粒体数目、分布、氧化磷酸化 (OXPHOS) 活性以及活性氧生成的影响,进而分析COH来源的卵母细胞高损失率的可能机制。方法将实验小鼠随机分为COH组 (20只) 和对照组 (40只),采用实时定量PCR技术、免疫荧光和荧光素-荧光素酶反应发光法分别检测两组小鼠卵母细胞线粒体DNA (mt DNA) 拷贝数、线粒体膜电位 (ΔΨm) 强度、三磷酸腺苷 (ATP) 含量、线粒体分布和胞质内活性氧水平。结果卵母细胞mt DNA平均拷贝数对照组为 (2.16±0.19) ×105,COH组 (1.15±0.10) ×105,两组比较,差异有统计学意义 (P<0.05) ;COH组卵母细胞的平均ΔΨm强度和ATP平均含量分别为0.34±0.03和 (241±20) fmol/枚,对照组分别为0.82±0.07和 (325±11) fmol/枚,两组分别比较,差异均有统计学意义 (P<0.05) 。两组间线粒体呈均匀分布的卵母细胞比率[COH组76.5% (78/102) 、对照组82.1% (69/84) ]比较,差异均无统计学意义 (P>0.05) 。卵母细胞胞质内活性氧水平COH组为1.07±0.07,对照组为0.93±0.08,两组比较,差异也无统计学意义 (P>0.05) 。结论非生理性的COH过程抑制了卵母细胞线粒体DNA复制和OXPHOS活性,继而可能影响卵母细胞细胞质的成熟进程,这可能是COH周期卵母细胞高损失率的发生机制。