2006年 · 第44卷第10期

目的 拟评估现有儿科心力衰竭(简称心衰)诊断标准及血浆脑利钠肽(BNP)、无生物活性的氨基末端BNP(NT－proBNP)对先天性心脏病(简称先心病)合并心衰的诊断价值，并通过多因素分析探讨最有价值的诊断指标。 方法 以先心病患儿118例为研究对象，分别应用改良Ross标准、青岛标准、NYU PHFI、Ross标准以及血浆BNP、NT－proBNP对上述病例进行诊断。以改良Ross评分≥3分作为参考标准，评估各标准及血浆BNP、NT－proBNP的诊断价值。应用logistic回归方法分析各因素对心衰的诊断价值。 结果 (1)各临床标准诊断心衰的价值：①青岛标准诊断的敏感度为47.9%，特异度为100%，准确率为57.6%。②Ross评分诊断心衰的ROC曲线下面积为0.985，敏感度为88%，特异度为100%。③NYU PHFI评分>2分作为诊断界点时敏感度高而特异度较低，敏感度为100%，特异度为4.5%。(2)血浆BNP及NT－proBNP与改良Ross呈正相关，随着心功能分级严重程度的增加而增加，BNP诊断心衰的ROC曲线下面积为0.880，按照ROC曲线选取的诊断界值为≥349 pg/ml。NT－proBNP诊断心衰的ROC曲线下面积为0.981，按照ROC曲线选取的诊断界值为≥499 fmol/ml。(3)多因素分析提示，NT－proBNP、呼吸急促、心率增快、呼吸增快、生长发育落后对于心衰的诊断有价值。(4)血浆NT－proBNP与临床标准并联或串联可提高准确率。 结论 现有临床标准对于先心病合并心衰均具有诊断价值，但青岛标准敏感度低，Ross标准适用范围窄，NYU PHFI>2分特异度低，存在一定的局限性。血浆BNP及NT－proBNP对于小儿先心病导致的心衰具有诊断价值，NT－proBNP是心衰诊断的独立预测因素。

目的 研究心力衰竭(heart failure，HF；简称心衰)幼鼠心肌结缔组织生长因子(connective tissue growth factor，CTGF)表达及苯那普利的调节作用。 方法 采用腹主动脉缩窄术建立幼鼠HF模型，术后6周经高频超声筛查将符合心衰标准的幼鼠随机分为HF组和苯那普利治疗组，另设假手术组。苯那普利治疗组灌胃给药4周，术后10周时行高频超声、心肌重量分析、免疫组化和逆转录－聚合酶链反应分别检测心肌功能、心室重构程度、心肌CTGF表达。 结果 10周时于3组中各随机抓取15只幼鼠进行检测。与假手术组比较，HF组左室舒张末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVESD)、室间隔舒张末期内径(IVSTd)、室间隔收缩末期内径(IVSTs)、左室后壁舒张末期厚度(LVPWTd)、左室后壁收缩末期厚度(LVPWTs)、左心室相对质量(LVRW)、右心室相对质量(RVRW)均升高(P<0.01)，而短轴缩短率(FS)、射血分数(EF)降低(P<0.01)，CTGF免疫阳性细胞增多，CTGF mRNA表达亦高[(0.609±0.065)vs(0.117±0.011)，P<0.01]。苯那普利组与HF组相比LVESD，IVSTd, IVSTs, LVPWTd, LVPWTs, LVRW, RVRW降低(P<0.01)，FS、EF升高(P<0.01)，CTGF免疫阳性细胞减少，CTGF mRNA表达下降[(0.441±0.053) vs (0.609±0.065), P<0.01]。 结论 HF幼鼠心肌CTGF表达明显上调，苯那普利可部分抑制HF心肌CTGF的表达，从而抑制HF时心室重构的发生，改善心脏功能。

目的 探讨组织多普勒成像(TDI)技术定量评价儿童心室功能的应用价值，研究儿童体格及心脏的生长发育对TDI参数的影响。 方法 用TDI方法测量242例出生后3 d至17岁正常健康儿童二尖瓣环侧壁、间壁及三尖瓣环侧壁收缩期峰值速度(Sa)、舒张早期峰值速度(Ea)及舒张晚期峰值速度(Aa)，并与临床资料及常规超声心动图指标进行对比研究。 结果 (1)各取样点Sa、Ea均以<1个月组最低[二尖瓣环侧壁：Sa(4.8±0.7) cm/s, Ea (6.6±1.1) cm/s，间壁：Sa (4.1±0.6) cm/s, Ea (5.0±0.8) cm/s；三尖瓣环Sa (6.2±1.2) cm/s, Ea (6.4±1.0) cm/s]，并随年龄增长逐渐增长，1个月～组至1岁～组显著增长[1岁～组二尖瓣环侧壁：Sa (8.5±2.0) cm/s, Ea (16.3±2.6) cm/s，间壁：Sa (7.2±0.8) cm/s, Ea (12.2±1.6) cm/s；三尖瓣环：Sa (12.6±2.3) cm/s, Ea (14.7±2.6) cm/s]，1岁～组三尖瓣环Sa、Ea较二尖瓣环更接近年长儿相应测值。二尖瓣环E/Ea值<1个月至7个月～组较高(侧壁9.2±2.1，间壁12.10±2.89)，随年龄增长逐渐降低，1岁～组显著降低(侧壁5.9±1.2，间壁7.8±1.3)。(2)年龄、体表面积、心率及左心室舒张末期内径(LVEDD)对多数TDI参数有显著影响。LVEDD是影响二尖瓣环Sa、Ea的主要因素，是二尖瓣环E/Ea值的独立影响因子。 结论 正常儿童左、右心室收缩及舒张功能随年龄增长逐渐发育，这一发育过程以婴幼儿期最为快速，右心室功能的发育早于左心室，儿童体格及心脏的正常发育对心室收缩及舒张功能的发育有重要影响，LVEDD是左心室收缩及舒张功能的重要影响因素。

目的 分析不同类型地中海贫血(地贫)胎儿基因型与血象各指标特征的关系，探讨血象指标在筛查胎儿地贫中的价值。 方法 B超介导下脐带穿刺取妊娠18～38周的胎血检测地贫基因型及血象，并根据基因检测结果对地贫胎儿进行分组，分别将α－地贫1杂合子组(117例)、α－地贫1纯合子组(60例)、轻型β－地贫组(20例)、重型β－地贫组(9例)与正常对照组(366例)血象各指标进行比较。 结果 α－地贫血红蛋白浓度(Hb)、红细胞压积(HCT)、红细胞平均体积(MCV)、红细胞平均血红蛋白含量(MCH)、红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)均较对照组明显降低(P<0.001)，其中α－地贫1杂合子组红细胞(RBC)计数升高(P<0.001)，出现RBC和Hb分离现象；α－地贫1纯合子组RBC降低(P<0.001)，且Hb均低于100 g/L，而白细胞(WBC)计数、有核红细胞升高(P<0.001)。轻型β－地贫组仅MCHC的下降差异有统计学意义(P<0.05)，重型β－地贫组所有指标与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。 结论 α－地贫胎儿血象指标呈现明显变化，β－地贫在胎儿期血象表现隐匿，常规检测α－地贫杂合子夫妇所孕胎儿血象，对于患病胎儿的产前筛查及产前诊断有一定的补充意义。

目的 评价高危人群中进行胎儿超声心动图检查的诊断价值。 方法 2003年1月至2004年12月，在上海两家三级妇产科医院进行高危人群中胎儿先天性心脏病产前诊断前瞻性研究。运用二维和彩色/脉冲多普勒超声进行详细化胎儿超声心动图检查，随访并评价诊断灵敏度、特异度及患儿预后。 结果 研究期间共2063例胎儿接受检查，检查时平均孕周为26.5周(16～42周)。产前诊断胎儿先天性心脏病43例，诊断时平均孕周27.3周(16～40周)，异常病例检查指征中"产科超声检查发现胎儿心脏可疑异常"占67.4%。产前诊断灵敏度92.1%，特异度99.9%。准确性86.1%。随访病例中，52.1%终止妊娠，2.2%宫内死亡，13%新生儿或婴儿期死亡，28.3%存活。 结论 (1)目前临床实践中胎儿超声心动图检查是在高危人群中进行先天性心脏病产前诊断的有效方法。(2)产科超声筛查提示胎儿心脏畸形是检查的重要指征。(3)完整的分段诊断是提高诊断准确性的关键。(4)患有先天性心脏病的胎儿预后不佳，由产科与儿科医生参与的多学科合作可能有助于改善胎儿预后。

目的 分析影响儿童神经母细胞瘤(NB)的临床预后因素，期望通过综合性诊断治疗方案改善NB的预后。 方法 研究对象为1998年10月至2003年12月新诊断为NB患儿，根据年龄及分期分为高、中、低危3组，各组采用包括不同化疗强度的NB综合治疗方案。方案包括确切分期分组，Ⅲ、Ⅳ期患儿延迟或二次肿瘤根治术，不同强度的化疗方案和完成化疗后全顺维甲酸诱导分化治疗，高危组在化疗结束时接受自身造血干细胞移植(ASCT)。 结果 年龄6个月至11岁，共45例。Ⅰ期9例，Ⅱ期1例，Ⅲ期8例，Ⅳ期26例，Ⅳs期1例。6例在≤2个疗程后好转中放弃治疗；39例按计划治疗，11例接受了ASCT。获得完全缓解(CR)31例(80%)，获得部分缓解(PR)8例(20%)。中位随访期21个月(14个月至64个月)；末次随访时CR 24例(62%)，中位CR时间为22个月；带病生存病情稳定4例，总生存率(SR)72%。疾病进展、复发或已死亡11例(28%)。大于18个月、Ⅲ期及Ⅳ期明显影响预后，P分别为0.04、0.003。不同危险组预后不同，P为0.003。肿瘤原发于后腹膜，Ⅲ、Ⅳ期患儿手术未能完全切除肿瘤和未能接受ASCT者预后差，但未达统计学有效水平，P＝0.092、0.55和0.60。 结论 NB综合整体治疗方案较为合理。年龄大于18个月、Ⅲ期及Ⅳ期为预后不良因素。肿瘤原发于后腹膜、手术未能完全切除肿瘤和未能接受ASCT预后差，但P未达统计学有效水平。

目的 探讨胃窦组织中胃泌素(GAS)、生长抑素(SS)、增殖细胞核抗原(PCNA)、凋亡Fas基因配体(Fas－L)的免疫组化表达在小儿慢性胃炎、十二指肠溃疡发病机制中的意义。 方法 本组83例，根据病理诊断与胃镜下有无十二指肠溃疡将病例分为5组：A组，慢性浅表性胃炎，幽门螺杆菌阳性(Hp＋)；B组，慢性浅表性胃炎，Hp－；C组，十二指肠溃疡，Hp＋；D组，十二指肠溃疡，Hp－；E组，正常对照组，Hp－。应用免疫组化En Vision法，对每例进行GAS、SS、PCNA、Fas－L染色，比较各组阳性细胞数差异。 结果 GAS、SS的表达在A组、B组、C组、D组数值均高于E组，但差异无统计学意义；PCNA的表达在A组高于B组，差异有统计学意义(P<0.05)；Fas－L的表达在各组间差异无统计学意义。 结论 在小儿慢性胃炎及十二指肠溃疡中，GAS、SS表达均有升高，GAS和SS升高可能在小儿慢性胃炎及十二指肠溃疡病因、防御机制中起一定作用；Hp感染促进胃窦黏膜腺上皮细胞的增殖。

目的 研究人巨细胞病毒(HCMV)感染对人神经胶质瘤U251细胞p38MAPK表达水平、细胞凋亡及细胞周期的影响。 方法 以免疫印迹法(Western Blotting)分析HCMV感染人神经胶质瘤U251细胞后不同时间总p38MAPK、磷酸化p38MAPK蛋白表达水平；用流式细胞仪检测HCMV感染后人神经胶质瘤U251细胞凋亡百分率变化和细胞周期的分布。 结果 HCMV感染后不同时间U251细胞总p38蛋白的表达水平不变，但磷酸化p38于HCMV感染后6至10 h明显增高，6 h、10 h平均灰度值分别为186.33±7.51和188.00±7.02，与对照组比较差异有统计学意义，16 h后下降至基础水平。HCMV感染能诱导U251细胞凋亡，于感染后第5天凋亡率最高，达(10.18±1.24)%，与对照组比较差异有统计学意义。HCMV感染使G1期细胞明显减少，感染后2、5、7 d分别减少至(56.50±2.57)%、(62.33±2.64)%和(67.45±4.44)%，与对照组比较差异均有统计学意义，细胞周期阻滞于S期和G2期。 结论 HCMV感染U251细胞能够激活p38MAPK，并诱导U251细胞凋亡、细胞周期阻滞。

目的 探讨三氧化二砷(arsenic trioxide, ATO)单用或联合沙利度胺(Thalidomide，THAL)体内诱导人骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndromes，MDS)荷瘤小鼠细胞凋亡的可能途径和机制。 方法 用人MDS荷瘤小鼠模型作为实验动物，将48只荷瘤小鼠随机分为治疗组32只(ATO单用或联合THAL)和对照组16只。采用免疫组织化学(immunohistochemistry, HIC)、Western－blot、逆转录－聚合酶链反应(RT－PCR)、电泳迁移率实验(electrophoretic mobility shift assay，EMSA)等多参数方法，检测各组荷瘤组织凋亡相关蛋白和基因的表达水平。 结果 治疗后2周，(1)IHC检测显示，与对照组比较，治疗组Bcl－2家族促凋亡蛋白Bax表达水平上调(F＝ 1080.150，P<0.01)；而抗凋亡蛋白Bcl－2表达水平下调(F＝2777.978，P<0.01)，Bax/ Bcl－2比值上升。提示ATO诱导细胞凋亡与Bcl－2家族凋亡相关蛋白表达及表达比有关。(2)Western－blot发现，治疗组线粒体促凋亡蛋白Smac/DIABLO和细胞色素C(IHC)的表达比对照组明显上调；半胱天冬酶(caspase)9、7、6、3及其下游底物聚ADP核糖聚合酶(PARP)蛋白全长被剪切，表达明显下调，可见caspase 9、7、6和PARP激活带表达。提示ATO能通过线粒体介导caspase依赖的途径诱导荷瘤细胞凋亡。(3)治疗组凋亡蛋白抑制因子cIAP蛋白(Western－blot)和Survivin mRNA(RT－PCR)的表达比对照组明显下调。(4)EMSA实验显示，与对照组比较，治疗组核因子kappaB(NF－κB)活性表达显著下调；而IκB－α(NF－κB抑制子)蛋白表达明显上调(Western－blot)，提示ATO诱导荷瘤细胞凋亡涉及NF－κB信号途径。 结论 ATO体内诱导人MDS荷瘤小鼠细胞凋亡至少通过两条重要的途径：一是线粒体介导－Caspase依赖途径；二是NF－κB信号途径，这两条途径相对独立，又在一定水平上相互关联。认为ATO体内诱导细胞凋亡过程复杂，是多条途径、多个水平、多个步骤和多种因子之间相互协调的网络效应，并非单一途径。实验为临床治疗MDS提供了新的思路。

目的 筛选骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells MSCs)移植改善心肌病大鼠心功能的相关基因，初步分析相关基因在MSCs改善心功能中的作用。 方法 用贴壁筛选法分离、扩增大鼠MSCs，并移植入经阿霉素腹腔注射构建的大鼠心肌病模型中。然后利用抑制性消减杂交技术(supression subtractive hybridization，SSH)筛选移植MSCs后大鼠心肌组织差异表达的相关基因，并进行分析。 结果 成功建立了心肌病大鼠模型，并进行了MSCs心肌移植，筛选出移植MSCs后心肌细胞表达上调的基因12条、表达下调的基因4条。经基因的序列检索分析显示，MSCs移植入大鼠心肌后与线粒体合成有关的基因和与心肌的收缩蛋白合成有关的基因表达上调；表达下调的基因分别为肌小节的线粒体肌氨酸激酶基因；核糖体的磷蛋白P2基因；α－晶状体蛋白基因；NADH－辅酶Q氧化还原酶Fe－S蛋白7基因。 结论 MSCs移植后可能通过刺激与能量合成相关和心肌收缩相关基因的表达，一方面促进心肌能量合成，另一方面MSCs可能分化为新的心肌细胞，增加心肌收缩力，从而改善心肌组织功能。