2002年 · 第40卷第08期

目的 了解当前我国儿科呼吸道感染常见病原肺炎链球菌和流感嗜血杆菌对常用抗生素的敏感性，以便有效指导临床合理用药和预防。 方法 连续两年对北京、上海、广州三家儿童医院和西安西京医院儿科(仅2001年)就诊的上呼吸道感染儿童鼻咽分泌物进行培养、分离肺炎链球菌和流感嗜血杆菌；采用纸片扩散法及E-test方法对分离株进行常用抗生素敏感性检测。 结果 四地2年从呼吸道感染儿童鼻咽部分离肺炎链球菌共654株，流感嗜血杆菌669株。肺炎链球菌对青霉素不敏感(PRSP)率范围在14%~60%，2001年各地区发生率依次为上海55.0%、广州50.0%、西安45.0%、北京42.3%；与2000年相比，2001年部分地区如北京、上海青霉素中度敏感株明显增多。PRSP对β-内酰胺类、红霉素、复方磺胺甲基异唑耐药率明显高于青霉素敏感株(PSSP)，且多重耐药率高达90%以上。北京、上海、西安地区分离株对阿莫西林/克拉维酸、头孢曲松仍具有很好的敏感性(96.6%~98.9%)，而对头孢呋辛敏感性有不同程度下降，广州地区敏感率仅为59%，上海71%，而北京地区为92.3%，明显高于广州地区。2001年四地区分离株对头孢克洛总耐药率：广州地区耐药率最高(56%)，上海、西安次之(15%、13%)，北京最低(4.8%)。四地分离株对红霉素耐药率高达75%~96%，其中以高度耐药(≥256 mg/L)为主，占80%~99%；2001年北京地区分离株红霉素耐药率87.9%，高于上海(80%)、广州(78%)。肺炎链球菌四环素耐药情况与红霉素相近(60%~96%)；复方磺胺甲基异唑耐药也很突出(68%~88%)；而对氯霉素仍保持较低水平耐药(20%~30%)。各地区流感嗜血杆菌对氨苄青霉素、氯霉素耐药保持较低水平(5%~16%)，多数地区对其他β-内酰胺类抗生素有较好的敏感性(96%~100%) ，但2001年北京和广州对头孢克洛耐药已达12.7%和20% 。对四环素、复方磺胺甲基异唑耐药率范围分别为11.3%~26.5%、37.5%~77.1%，各地区间耐药率略有差异。 结论 四地区儿童上呼吸道感染肺炎链球菌和流感嗜血杆菌耐药形势严峻，PRSP已达中等水平，有逐年上升的趋势，并以红霉素、四环素、复方磺胺甲基异唑等多重耐药为主要特点。

目的 了解1996~2001年重庆医科大学儿童医院抗生素使用情况。 方法 收集3~5年间药品收入占全院业务收入比例、抗生素收入占药品收入比例、前13位畅销药等数据；另抽1 d调查门诊抗生素使用数量及途径、细菌学检查比例等情况。 结果 药品收入在全院总收入中所占份额持续维持在高水平，2001年有所下降；抗生素仍为医院使用最多的药物：门诊处方中约62.3%含有抗生素，诊断为普通感冒的患儿62.0%左右接受抗生素治疗，几乎所有使用抗生素者均未进行细菌学检查。 结论 医院药品使用总体上虽有下降趋势，但抗生素滥用现象仍十分严重，从管理、宣传、学术等多方面着手遏制抗生素滥用势在必行。

目的 比较不同地区B族链球菌(GBS)对红霉素耐药性的差异及耐药基因谱特点。 方法 用琼脂稀释法，测定红霉素、克林霉素对不同地区(北京，广州，俄罗斯圣彼得堡)的113株GBS的最低抑菌浓度(MIC)，同时用PCR和核酸杂交的方法，检测红霉素耐药基因mreA、mefA、ermA、ermB、ermC在该批菌株中的出现规律及其与红霉素耐药性的关系。 结果 (1)北京、广州两地GBS菌株总耐药率为46%，与克林霉素耐药性的一致率为93.8%；所有ermA基因均来自北京菌株，而广州菌株不含该基因。(2)含ermA和(或)ermB基因的GBS占所有菌株的30.09%，其耐药率高达97.06%，在已检测的GBS菌株中未发现ermC基因。(3)分别有53株和18株含mreA和mefA的GBS以及1株含ermA的菌株仍对红霉素敏感。2株GBS不含上述任何一种基因，但仍对红霉素耐药。 结论 (1)北京、广州两地GBS对红霉素普遍具有较高的耐药率，且与大环内酯-林可霉素-链阳性霉素B类抗生素之间存在较严重的交叉耐药，临床使用抗生素时应尽量避免重复选择此类抗生素；(2) ermA和ermB是决定我国北京、广州GBS对红霉素耐药的重要基因；(3)GBS的耐药性还有其他分子生物学机制参与。

目的 最近10多年的研究表明，用乙肝疫苗主被动联合免疫能阻断母婴间乙肝病毒(HBV)传播，保护效果达到70%~90%，而宫内已感染HBV是生后免疫接种失败的主要原因，我们研究用乙肝免疫球蛋白(HBIG)多次产前注射，观察阻断HBV宫内传播的效果。 方法 980例携带HBsAg孕妇随机分成两组，一组孕妇产前3个月(妊娠28周起)每4周肌注HBIG 200 IU~400 IU，直至临产，称HBIG组；另一组不注射为对照，称对照组。所有对象和其所生孩子出生时即采外周血，检测HBsAg、HBeAg，部分测HBV DNA，所有新生儿随访1年。 结果 496例新生儿为对照组母亲所生，生后仅接种乙肝疫苗和HBIG；491例新生儿为HBIG组母亲所生，生后同样给予主被动联合免疫。结果显示对照组婴儿的宫内感染率为14.3%；而HBIG组婴儿的宫内感染率为5.7%(χ2＝20.11，P<0.001)，宫内感染HBV的高危因素是母亲呈HBsAg、HBeAg双阳性或HBV DNA阳性。 结论 研究提出产前多次肌注HBIG可有效减少HBV的宫内传播，未发现任何副作用。

目的 从外周血单个核细胞(PBMC)在特异性和非特异性刺激下1型和2型细胞因子的反应探讨宫内感染乙型肝炎病毒(HBV)导致免疫失败的机制。 方法 采用体外细胞培养和ELISA技术对29例宫内感染免疫失败儿童、9例宫内感染有效儿童及25名正常儿童PBMC在丝裂原(植物血凝素和细菌脂多糖)、酵母重组乙型肝炎表面抗原(HBsAg)及无刺激物时干扰素(IFN)-γ、白细胞介素(IL)-4和IL-12P70的分泌进行检测。 结果 丝裂原刺激时IFN-γ分泌和IFN-γ自发分泌在免疫失败组有增高趋势。和自发分泌比较，在HBsAg刺激时，对照组、有效组和免疫失败组均表现为分泌增加，但免疫失败组增加值显著性低于对照组。在各种刺激时IL-4和IL-12分泌低于可检测水平。丝裂原刺激时IFN-γ分泌和血清丙氨酸转氨酶水平正相关。 结论 特异性刺激时1型细胞因子分泌不足可能是宫内感染HBV导致乙肝疫苗免疫失败的原因之一，1型细胞因子非特异性反应增强可能与肝细胞损伤有关。

目的 研究FasL基因转染鼠骨髓单个核细胞(BMMNC)后，诱导同种异体反应性T淋巴细胞凋亡的效率。 方法 采用脂质体法将mFasL-cDNA转入Balb/C小鼠造血细胞，Western-Blot检测其是否表达，然后将转染mFasL-cDNA的BMMNC与BAC鼠(Balb/C×C57BL/6，H-2d×b，F1)脾单核细胞(SMNC)混合培养，通过混合淋巴细胞反应(MLR)及流式细胞仪(FCM)检测SMNC的凋亡效率。 结果 基因转移后Western-Blot分析Balb/C鼠BMNC显示明显抗FasL抗体识别的条带(约40 000)，未转基因的BMMNC无阳性条带发现；转基因组进行MLR其每分钟脉冲数(CPM)值为5 628±186，明显低于对照组(9 674±78)(t＝44.86, P<0.001)；FCM检测转基因组诱导SMNC凋亡率为(14.8±0.4)%，明显高于对照组[(1.8±0.4)%](t＝3.01，P<0.01)。 结论 采用脂质体法能将mFasL-cDNA转入鼠BMMNC，并能有效表达，转基因后的BMMNC有诱导同种异基因反应性T淋巴细胞凋亡的作用。

目的 研究神经母细胞瘤脂类提取物对健康儿童自然杀伤T(NKT)细胞增殖程度和对NKT细胞介导的对自身肿瘤细胞的细胞毒作用的影响。 方法 甲醇/氯仿法提取神经母细胞瘤脂类提取物作为刺激物，采集健康儿童外周血单核细胞，培养出成熟的树突细胞，采集并分离同一个体外周血T细胞与树突细胞共同培养，分别加入脂类提取物或(和)白细胞介素15(IL-15)和粒-单系细胞集落刺激因子(GM-CSF)。测定各组T细胞的增殖程度的变化，流式细胞仪测定NKT细胞占T细胞的比例(NKT/T)并分选出NKT细胞，测定各组NKT细胞对神经母细胞瘤细胞毒作用。 结果 肿瘤脂类提取物刺激组T细胞增殖程度、NKT/T比例、NKT细胞毒作用高于对照组(P＝0.043; P＝0.020；P＝0.032)。共刺激组(肿瘤脂类提取物＋IL-15＋GM-CSF)T细胞增殖程度、NKT/T比例、NKT细胞毒作用高于对照组(P＝0.001；P＝0.001；P＝0.020)，肿瘤脂类提取物刺激组(P＝0.004; P＝0.030; P＝0.010)和细胞因子刺激组(P＝0.044; P＝0.049; P＝0.048)。 结论 神经母细胞瘤脂类提取物可以有效激活NKT细胞，发挥对自身肿瘤细胞的细胞毒作用。细胞因子IL-15和GM-CSF可以增强脂类提取物的激活作用。

目的 对15例贵阳地区重症β-地中海贫血患儿及其双亲进行基因突变分析，以探讨其突变基因的类型和频率的特点，为诊断和预防重症胎儿的出生提供线索。 方法 采用一管法进行红细胞渗透休克实验测定红细胞渗透脆性、一分钟碱变性法测定抗碱血红蛋白(HbF)和醋酸纤维薄膜电泳洗脱比色法测定血红蛋白A2(HbA2)、氰化高铁血红蛋白法测定Hb等进行β-地中海贫血血液学检查。用常规法抽提外周血白细胞DNA，用聚合酶链反应-反向点杂交法(PCR-RDB)扩增目的基因片段和分析其基因类型。 结果 15例重症β-地中海贫血患儿及其双亲共45例标本中检出中国人常见的11种基因突变中的5种：CD41-42(-TTCT)、IVS Ⅱnt654(C→T)、CD17(A→T)、βE (G→A)和Nt-28(A→G)的基因突变类型，前3种占总数的89.99 %。 结论 采用PCR-RDB法进行基因诊断，具有操作简单、快速准确，仅需一次杂交就可确定样品中是否存在11种中国人常见的β-地中海贫血突变基因型，提高了基因诊断率，这对防止重症β-地中海贫血患儿的出生、提高人口素质具有重要意义。

目的 探讨噬血细胞综合征是否存在着克隆性即恶性肿瘤性增生。 方法 9例均为女性，年龄1.8~9岁，均符合噬血细胞综合征的诊断标准，利用莱昂原理每例患儿取骨髓2 ml，用贴壁方法和流式细胞仪提取巨噬细胞中的DNA，以人类雄激素受体基因(HUMARA基因)位点进行酶切及PCR扩增，然后进行限制性片段长度多态性分析。 结果 9例噬血细胞综合征患儿，2例显示出克隆性增生条带(单一条带)，且她们的自体阴性对照标本(口腔粘膜脱落上皮细胞中DNA)均出现两条扩增带。另7例患儿的骨髓标本与自体阴性对照标本均出现两条扩增带。阳性对照标本(1例单核细胞白血病患儿骨髓单核细胞DNA)出现一条扩增带。 结论 噬血细胞综合征一直被认为是一种反应性疾病，但临床上许多病例常呈恶性爆发性病程，有较高的病死率。研究的结果表明，该病中实际存在着克隆性(即恶性)增生，并非都是反应性，因而有相差悬殊的临床预后。