1997年 · 第35卷第12期

为了解软骨发育不全基因突变类型，采用聚合酶链反应-限制性酶切分析的方法，对12例软骨发育不全患者、2例散发患者的父母和4例健康正常人的成纤维细胞生长因子受体3（FGFR3）基因位点的点突变进行检测。结果显示，12例患者11例为FGFR3基因跨膜区1138位核苷酸G→A的转换，1例为G→C的颠换，均导致380位密码子的错义突变，即由精氨酸替代了甘氨酸。2例散发患者的父母和4例健康正常人未发现突变。结论：软骨发育不全患者出现FGFR3基因跨膜区的点突变，380位密码子是软骨发育不全患者突变的热点。

为探讨Alport综合征时Ⅳ型胶原a链的分布改变，应用间接免疫荧光和免疫电镜的方法，观察了Ⅳ型胶原al~a6( Ⅳ ）和I、Ⅲ、V和VI型胶原在肾（103例）和皮肤（40例）组织中的分布。结果：63%的病例存在a3~a6（Ⅳ）的分布异常；两种异常类型直接与遗传方式有关：在X染色体连锁显性遗传时，男性肾和皮肤组织中a3~a6 （Ⅳ）均消失，女性则呈不连续的节段性分布；在常染色体隐性遗传时，肾小球基底膜（GBM）中a3~a5（Ⅳ）均消失，而GBM外肾组织基膜中a3~a4（Ⅳ）消失，a5~a6（Ⅳ）的分布完全正常。提示，Ⅳ型胶原a链分布异常是Alport综合征的一个诊断标志;皮肤活检观察a5~a6（Ⅳ）的分布有助于X染色体连锁显性遗传患者及携带者的诊断。

为建立脊肌萎缩症（SMA）产前诊断方法，应用3个与SMA基因紧密连锁的CA重复序列位点JK53CA1/2、5DS637、CATT1，对18个SMA家系进行了连锁分析；应用聚合酶链反应-单链构型多态性（PCR-SSCP）分析，对37例SMA患儿作了SMA基因缺失的检测；并作2例SMA产前诊断。结果：18个家系通过JK53CA1/2位点诊断12个（可诊断率66.7%），通过5DS637位点诊断14个(7.8%),10个SMA家系通过CATT1位点诊断9.5个（95.0%)；37例患儿中32例（86.5%）有端粒侧exon7的纯合性缺失;2例接受产前诊断者，1例胎儿患病，1例胎儿为正常。结论：应用SMA基因旁侧CA重复序列联合PCR-SSCP检测进行SMA基因诊断和产前诊断简便、准确、可应用于临床。

为探讨基因重组人表皮生长因子（hEGF）对胃粘膜的保护作用，作者将54只SD大鼠，随机分6组给药，禁食，灌无水乙醇。结果：西咪替丁组和对照组均见急性胃扩张，对照组胃液呈血性改变，各组胃溃疡指数分别是：对照组最高为58，hEGF I组53，hEGF I组46(P<0.05),hEGF Ⅲ组11（P<0.01），hEGF Ⅳ组19（P<0.01），西咪替丁组39(P<0.05)。鼠血EGF水平与胃粘膜抗损伤作用相关；同一剂量的hEGF、皮下注射效果优于口服。结论：基因重组的hEGF有明显的抗乙醇损伤的胃粘膜保护作用，其效果在60~120 µg•kg-1 • d-1范围内呈量效关系，重组hEGF很有希望成为治疗人消化性溃疡的一种内源性药物。

为探讨小儿幽门螺杆菌（HP）感染诊断的最佳手段，对98例不同群体小儿用胃粘膜活检标本尿素酶快速诊断法、血清HP-IgG测定法、胃液HP-聚合酶链反应（PCR）法进行了HP感染的对比性研究。结果：三种方法在上消化道疾病组胃粘膜活检标本中HP感染阳性率分别为42%、54、48%，与非消化道疾病及健康小儿对照组差异有显著性意义（P<0.005）。结果表明：三种方法在检测HP的阳性率方面无明显差别，而胃液HP-PCR法方法简单实用、敏感性和特异性均较好，可作为诊断HP感染的最佳方法之一。

为了探讨小儿病毒性肝炎发病的细胞免疫机制，应用不标记抗体桥联酶标技术（APAAP法）检测了56例病毒性肝炎患儿的外周血T细胞亚群及膜性白细胞介素2受体（mIL-2R）表达率。应用酶联免疫吸附（ELISA）法分别检测了49例病毒性肝炎患儿单个核细胞培养上清液（PBMCs）中肿瘤坏死因子α（TNFα）、白细胞介素6和8（IL-6、IL-8）及α干扰素（IFN-a）浓度。结果显示：甲型肝炎（简称甲肝）急性期、慢性乙型肝炎（简称乙肝）及丙型肝炎（简称丙肝）组与正常对照比较，CD4细胞降低，CD8细胞升高。用植物血凝素（PHA）剌激前，甲肝急性期患儿mIL-2R表达率明显高于其他各组，用PHA刺激后，各组mIL-2R表达率均显著高于刺激前，但乙肝及丙肝组mIL-2R表达率与正常对照比较则明显降低。甲肝急性期、乙肝及丙肝患儿PBMCs TNFa、IL-6、IL-8均较正常对照组升高，而a干扰素（IFN-a）均较正常对照组降低。甲肝恢复期CD4、CD8和PHA刺激前PBMC上mIL-2R表达率以及上述各细胞因子水平均恢复正常。提示细胞免疫功能紊乱与小儿病毒性肝炎的发病及肝损害过程有关。

通过观察静脉注射免疫球蛋白（IVIG）对川崎病（KD）患儿淋巴细胞凋亡（APO）的影响，进一步探讨IVIG对免疫性疾病的作用机理。对26例川崎病患儿和20名健康儿童外周血单个核细胞（PBMC）经抗-CD3单克隆抗体刺激培养不同时间（0，12，24，48,72小时）APO百分率和DNA片断化分析，26例患儿随机分为两组，阿司匹林+ IVIG治疗组（n=16）和阿司匹林治疗组（n = 10），并对PBMC经植物血凝素（PHA）刺激淋巴细胞增殖反应进行了观察。结果：KD患儿APO百分率和DNA片断化较正常儿童明显降低（P<0.001）和延迟；IVIG治疗后，降低的APO百分率和延迟的DNA片断化被逆转，同时与单用阿司匹林组比较，临床症状明显改善。淋巴细胞增殖反应下调（P<0.001）。外周血淋巴细胞APO下调可能参与了KD的发病。IVIG治疗KD的机理可能部分归于对被抑制的淋巴细胞APO的逆转。IVIG对其它淋巴细胞凋亡不足的自身免疫性疾病治疗可能存在同样机理。

为了研究早产儿视网膜病（ROP）的发病率、高危因素及预后，对149例极低出生体重儿与ROP的关系进行了回顾性分析。结果：ROP 59例（40%）；其中ROP1期32例（54%），ROP2期16例（27%），ROP3期11例（19%)。所有ROP3期患儿均患有散光或散光+近视。通过对用氧时间，出生体重等20种高危因素与ROP严重程度的综合分析，发现长期使用氧气和出生低体重是造成ROP的重要原因。建议缺乏用氧指征的早产儿切勿用氧。

为观察窒息缺氧对新生儿止血状态的影响，选择了凝血、抗凝、纤溶系统12项指标对41例足月窒息新生儿进行前瞻性研究，并与21例正常足月新生儿比较。结果：窒息儿血小板计数、纤维蛋白原、抗凝血酶Ⅲ、纤溶酶原、纤溶酶、a2纤溶酶抑制物等指标均有不同程度降低，而血管性血友病因子（vWF）、组织纤溶酶原激活物（tPA）、纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)、D二聚体等均有明显升高，可溶性纤维蛋白单体复合物95%为阳性。血管内皮损伤标记物、vWF、tPA、PAI-l与窒息儿血pH值呈负相关（r=-0.47,P<0.01；r=一0.466,P<0.01；r=一0.314,P<0.05)，且与窒息严重度一致。提示：窒息新生儿存在以高凝为主的早期DIC，血管内皮损伤在窒息病理生理学中具重要作用。