多碳青霉烯酶肠杆菌目细菌流行趋势与耐药机制研究王柯 王启 杨硕 王瑞琦 蔡旭君 侯钧 邹红 金炎 李梅 郭辉 等
中华检验医学杂志2025年 48卷 09期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20250519-00297
目的
分析中国多中心碳青霉烯耐药肠杆菌目细菌(CRE)中携带多个碳青霉烯酶菌株的流行病学特征、耐药谱及分子机制,为临床防控和抗菌药物选择提供依据。
方法
收集2016—2023年全国18个省市41家医疗机构分离的115株携带多个碳青霉烯酶CRE菌株,通过质谱鉴定、药敏试验及全基因组测序复核,使用Kleborate进行多位点序列分型和血清型鉴定,PlasmidFinder确定菌株的质粒复制子类型,基于细菌核心基因组构建系统发育进化树。
结果
多中心回顾性分析显示,携带多个碳青霉烯酶基因的肠杆菌目细菌以克雷伯菌属为主(80.0%,92/115),其次是阴沟肠杆菌(8.7%,10/115)和大肠埃希菌(6.1%,7/115)。菌株主要来自河北省、北京市、山东省、湖南省(60.9%,70/115),痰液是主要的标本来源(43.5%,50/115)。基因组分析显示blaKPC+blaNDM基因最常见(73.0%,84/115),其中克雷伯菌属占79.8%(67/84),其次为blaNDM+blaIMP基因(15.7%,18/115)。分离株质粒类型以IncFII(77.5%,86/111)、IncFIB(68.5%,76/111)、IncR(51.4%,57/111)和IncX3(20.7%,23/111)为主,其中88.6%(31/35)的ST11-KL64型肺炎克雷伯菌同时携带IncFII、IncFIB和IncR质粒。在克雷伯菌属中,2016—2022年blaKPC-2+blaNDM-1基因是主要流行亚型(56.2%,36/64)。blaKPC-2+blaNDM-13基因亚型(29.5%,19/64)于2023年检出,在河北、北京及吉林呈克隆传播特征(SNP距离2~74 bp)。药敏结果显示,菌株对β内酰胺类抗菌药物普遍耐药(耐药率90.2%~100%),仅氨曲南-阿维巴坦、替加环素和黏菌素保持良好的抗菌活性(敏感率90.16%~98.36%)。
结论
我国临床来源的肠杆菌目细菌中,携带多个碳青霉烯酶的菌株以产KPC酶和NDM酶的克雷伯菌属为主,其传播兼具ST11-KL64克隆扩张和IncFII、IncFIB、IncR质粒的水平转移,且出现了blaKPC-2+blaNDM-13基因亚型的区域性流行趋势,需加强对携带多个碳青霉烯酶基因肠杆菌目细菌的持续监测与防控。
肝移植后血流感染危险因素分析及病原学类型预测吕琳婷 黄芊 李敏 马硝惟
中华检验医学杂志2025年 48卷 09期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20250531-00318
目的
探讨影响肝移植术后30 d内发生血流感染的关键危险因素,并基于这些因素建立肝移植术后血流感染的病原学预测模型。
方法
选取2021年7月至2025年3月在上海交通大学医学院附属仁济医院接受肝移植手术治疗后送检血培养的122例患者,根据患者的血流感染状态和病原学种类进行回顾性分析,将其分为血培养阳性组87例和血培养阴性组35例,血培养阳性组含非发酵菌(假单胞菌属和不动杆菌属等)8例,真菌8例,葡萄球菌属27例,肠杆菌目30例,肠球菌属14例。通过对基础信息、入院后24 h内及术后实验室指标进行单因素及多因素分析筛选出感染的关键危险因素和特征性信息,并基于这些因素构建机器学习的病原学预测模型。
结果
血培养阳性组中肠杆菌目(30/87,34.48%)和葡萄球菌属(27/87,31.03%)为主要病原菌,表皮葡萄球菌和肺炎克雷伯菌分别为两类病原体的主要致病菌种。自身免疫性肝病血培养阳性组占比高于血培养阴性组(χ2=4.05,P=0.044)。肝移植术后血流感染病原菌的分布有一定的临床特征,非发酵菌亚组以肿瘤患者为主(6/8),肠球菌与肠杆菌亚组病毒性肝炎[分别为5/14和26.7%(8/30)]和自身免疫性肝炎[分别为2/14和20.0%(6/30)]基础病多见等。LightGBM、支持向量机、神经网络3种模型的曲线下面积值均>0.90,这3种模型对肝移植术后血流感染的病原菌类型均具有较高的预测价值。
结论
肝移植术后血流感染病原菌分布具有明显的临床特征,LightGBM、支持向量机、神经网络3种模型可有效整合多维度数据,预测病原类型,为临床感染防控提供依据。
基于全基因组测序的ST11-KL64型CRKP菌株blaKPC基因亚型变异检测及临床特征分析马成成 汪娜 段元丽 严荣荣 闫涛 王秋妍 滕宣 余可雪 刘周
中华检验医学杂志2025年 48卷 09期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20241130-00654
目的
分析11株携带blaKPC基因的ST11-KL64型耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)对头孢他啶/阿维巴坦(CZA)耐药表型演变过程及患者相关临床特征。
方法
回顾性研究安徽医科大学第二附属医院2024年6—9月1例肝移植感染患者分离出的11株CRKP,将其命名为K01~K11。采用肉汤微量稀释法、全基因组测序(WGS)和质粒接合试验研究11株CRKP的抗菌药物敏感性、耐药机制和遗传结构特征。同时收集并整理临床资料,分析blaKPC基因突变与临床抗菌药物治疗相关性。
结果
11株CRKP均呈现多重耐药表型,其中K01~K09及K11对CZA敏感、对碳青霉烯类耐药,而K10对CZA耐药,对碳青霉烯类呈现敏感或中介表型。WGS分析显示,11株CRKP属于ST11-KL64型。其中,K01~K09,K11菌株携带blaKPC-2基因,K10菌株携带blaKPC-33基因。blaKPC-2基因的单碱基突变(G532T)导致Ambler氨基酸位置179的酪氨酸被天冬氨酸取代(D179Y),该突变导致CRKP对CZA具有抗性,同时降低了对亚胺培南和美罗培南的敏感性。成功构建接合子,与亲代相比,其对CZA的最低抑菌浓度增加32倍。临床资料显示患者在接受CZA治疗51 d后才出现blaKPC-33基因突变。
结论
接受CZA抗CRKP感染治疗后出现blaKPC-33基因突变有较长的滞后性,应动态监测CRKP的耐药性演变,确保在出现blaKPC-33基因等突变时能够迅速调整治疗策略。
基于MALDI-TOF MS检测AAC(6′)-Ⅰb-cr酶活性的应用梁世周 陈孟权 蔡文品 曾云祥 孔万仲
中华检验医学杂志2025年 48卷 09期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20241121-00639
目的
探索基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)快速检测产AAC(6′)-Ⅰb-cr酶肠杆菌目细菌的可行性。
方法
收集2022年1—7月温州市中医院检验科分离的肠杆菌目细菌55株,以环丙沙星和诺氟沙星溶液为反应底物,同测试菌株孵育1 h后离心,取上清液进行MALDI-TOF MS检测。另前瞻性收集2023年3—5月本院检验科分离的128株临床菌株用于该方法的验证研究。
结果
环丙沙星和诺氟沙星被AAC(6′)-Ⅰb-cr酶乙酰化后发生了相对分子质量42 的质量转移,增加了3处代表乙酰化药物的质谱峰。非产酶株则未出现这3处质谱峰。此外,用于验证试验的128例菌株质谱结果与基因测序结果比对,特异度和敏感度均为100%。
结论
MALDI-TOF MS可以快速、准确地检测产AAC(6′)-Ⅰb-cr酶肠杆菌目细菌。
2016—2024年河南省某医院甲型流感病毒临床实验室检测及分子流行病学特征分析汪海霞 吴岳 蔡晶晶 赵莹莹 冯扬帆 陈晴 杜锴 张舒林 张学东
中华检验医学杂志2025年 48卷 09期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20241216-00683
目的
探讨临床实验室检测甲型流感病毒(以下简称“甲流”)方法学差异、炎症标志物及病原学流行特征,为重症甲流患儿的诊断及甲流流行防治提供更多的诊断依据和流行病学数据。
方法
回顾性横断面研究,通过临床实验室检测信息系统,收集南阳市中心医院2016年1月至2024年10月96 731例疑似甲流患者,甲流确诊患者5 731例,年龄5.2(2.8,43.7)岁,分析甲流患者各年龄段及混合感染的分布,限制性立方样条(RCS)分析患者年龄与阳性检出率的关系,Kappa一致性检验和受试者工作特征(ROC)曲线分析甲流检测方法学差异,通过Logistic回归建立炎症标志物模型,以及建立预测模型和进化树分析甲流亚型H3N2病毒血凝素(HA)序列突变情况。
结果
RCS分析显示,甲流阳性检出率与患者各年龄段呈倒置“S”型非线性关系。混合感染中,甲流合并肺炎支原体感染占比1.43%(1 352/94 867)。临床实验室检测鼻咽拭子和肺泡灌洗液甲流的逆转录PCR法与血清学间接免疫荧光法(IFA法,欧蒙)的Kappa值分别为0.632和0.809,与磁微粒化学发光法分别为0.614和0.668,IFA法和RT-PCR法检测甲流的ROC曲线下面积分别为0.869和0.792。与轻型患儿比较,重症患儿炎症标志物多升高,通过二元Logistic回归模型分析,白细胞与淋巴细胞比值、D二聚体与纤维蛋白原比值、预后营养指数是重症甲流患儿的危险因素,淀粉样蛋白A与C反应蛋白比值是重症患儿的保护因素,OR值分别为1.760、7.076、1.045、0.719,P均<0.01。经贝叶斯判定准则,甲流流行的季节性自回归移动平均混合模型最优模型为ARIMA(1,1,1)(2,1,2)12,预测精度最高为98.63%。7株甲流H3N2都属于同一亚型,HA基因核苷酸相似性99.5%~99.9%,糖基化位点、受体结合位点以及氨基酸残基保守区域未发生改变,HA序列分析显示南阳地区流行株与各疫苗株相比已发生不同程度变异。
结论
临床实验室科学合理的检测及特征性炎症标志物对重症甲流患儿的诊断具有重要临床价值,同时应加强对甲流变异株的流行监测。
胚系多基因检测在子宫内膜癌患者中的临床应用研究姜惠琴 黄斐 陈馨宁 张春燕 潘柏申 王蓓丽 郭玮
中华检验医学杂志2025年 48卷 09期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20241114-00625
目的
分析子宫内膜癌患者的临床病理特征与错配修复(MMR)基因胚系变异的关系,评估胚系多基因检测的临床价值。
方法
本研究为单中心、回顾性病例系列研究,纳入2022年7月至2024年2月于复旦大学附属中山医院就诊的100例子宫内膜癌患者。收集患者的临床病理信息及肿瘤分子检测结果,采用靶向二代测序检测61个肿瘤易感基因,分析子宫内膜癌患者中胚系基因变异的检出率及其与临床病理特征的关系。
结果
在100例患者中,28%(28/100)检测到肿瘤易感基因致病变异,其中20例携带胚系MMR基因变异,其余8例携带其他肿瘤易感基因变异。20例确诊Lynch综合征的患者中,仅40%(8/20)符合中国人Lynch综合征家系标准。53例MMR蛋白表达完整的患者中,1例检出胚系MMR基因变异。明确微卫星状态的14例Lynch综合征患者中,5/14表现为低微卫星不稳定性或微卫星稳定。对所有子宫内膜癌患者进行胚系多基因检测,能够额外识别出1例Lynch综合征患者和8例非Lynch遗传性肿瘤患者。
结论
现有的临床筛查标准会漏检部分符合Lynch综合征的子宫内膜癌患者。相比常规筛查模式,胚系多基因检测不仅能提高子宫内膜癌患者中Lynch综合征的检出率,还可额外识别其他遗传性肿瘤患者。
基于深度学习的血小板图形复检新策略的研究与应用张恩铭 杨超 陈先春 林燕 安泰学 李海侠 何永建 刘志伟 冯丽梅 林宛颖 等
中华检验医学杂志2025年 48卷 09期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20250626-00377
目的
开发一种基于人工智能的血小板复检新策略,识别因血小板直方图异常进行复检,但复检结果与原始结果无明显差异的标本。
方法
本实验挑选2023年7月至2024年3月在南方医科大学南方医院及南方医科大学南方医院赣州医院就诊患者共计5 119份血常规。针对血小板图形异常进行荧光法血小板计数(PLT-F)通道复查,且复查前血小板水平>40×109/L的标本展开研究。以电阻抗法血小板计数(PLT-I)与PLT-F通道结果差值<PLT-F通道结果的±20%作为二者结果一致的标准。基于3 807例训练集标本,利用人工智能分析血小板与红细胞直方图数据,构建深度学习模型。通过对805例独立外部验证集数据进行受试者工作特征曲线分析,评估模型诊断效能。同时,分析标本复查数量和标本周转时间(TAT)的变化,探讨模型的临床应用价值。
结果
基于血小板、红细胞直方图的深度学习模型,在训练集中的受试者工作特征曲线下面积(AUC)为0.854。模型敏感度为0.954,特异度为0.358(截断值=0.1)。模型可减少16.80%(190/1 131)的复查标本。在验证集中,AUC为0.805,敏感度为0.955,特异度为0.307,复查标本可减少17.41%(47/270)。
结论
基于深度学习的血小板复查预测模型能有效识别复查前后结果一致的标本,减少不必要的复查,缩短标本检测时间,从而提高血小板检测效率。
抗寄生虫药物替利喹诺对粪肠球菌的体外和体内抗菌作用肖丹 佘鹏飞 郭绍伟 黄冠清 伍勇
中华检验医学杂志2025年 48卷 09期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20241213-00676
目的
研究抗寄生虫药物替利喹诺对粪肠球菌的抗菌活性。
方法
2023—2024年在中南大学湘雅医学院附属长沙医院检验科选择粪肠球菌标准菌株ATCC 29212以及6株临床分离株作为研究对象;通过微量肉汤稀释试验、时间—杀菌曲线和纸片扩散法检测粪肠球菌对替利喹诺的敏感性;通过连续诱导耐药和一步耐药试验检测替利喹诺的耐药诱导能力;通过构建生物膜结合激光共聚焦显微镜检测替利喹诺对粪肠球菌生物被膜的抗菌活性;通过构建皮肤脓肿模型检测替利喹诺对粪肠球菌的体内抗菌活性。采用配对t检验和方差分析进行两组间和多组间比较。
结果
替利喹诺对粪肠球菌ATCC 29212的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度均为2 mg/L。纸片扩散法显示替利喹诺对粪肠球菌具有明显的抑菌作用。通过时间—杀菌曲线发现亚抑菌浓度的替利喹诺即可有效抑制细菌的增殖。替利喹诺连续处理粪肠球菌15 d也未见耐药突变的形成;8×MIC的替利喹诺处理ATCC 29212持留菌4 h可使其活菌计数从(12.01±1.14)lg CFU/ml降低到(7.72±0.94)lg CFU/ml(t=3.64,P<0.05),2×MIC的替利喹诺可抑制ATCC 29212生物被膜的形成,使生物膜的形成量从(1.73±0.27)减少到(0.18±0.14)(t=8.77,P<0.05);4×MIC的替利喹诺还能清除已形成的生物被膜,使其生物膜中的细胞活力从(0.52±0.03)减少到(0.40±0.06)(t=3.07,P<0.05);通过构建皮肤脓肿模型发现替利喹诺有的体内抗菌活性,30 mg/kg替利喹诺治疗组中小鼠活菌数与对照组相比减少超过1 lg CFU/ml(t=4.10,P<0.05)。
结论
替利喹诺对粪肠球菌具有体外和体内抗菌作用。
免疫沉淀法-电感耦合等离子体质谱仪联用检测血清非铜蓝蛋白结合铜方法的建立及临床应用吴君霞 徐逸儒 卢强 方亚平 董健健 徐陈陈 何志超
中华检验医学杂志2025年 48卷 09期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20250625-00370
目的
建立一种基于免疫沉淀法-电感耦合等离子体质谱仪(IP-ICP-MS)联用检测血清非铜蓝蛋白结合铜(NCC)的方法,并进行临床应用评估。
方法
方法学评价。采用免疫沉淀法先分离出血清中铜蓝蛋白,应用ICP-MS检测血清NCC水平。复溶2个水平的质控血清,评价自建方法的检出限、定量限、正确度和精密度。收集2023年11月至2024年6月安徽中医药大学神经病学研究所附属医院体检健康者(健康组)131例与69例首次确诊为肝豆状核变性(WD)患者(WD组)血清,用自建方法检测血清NCC水平,建立健康参考区间,采用Mann-Whitney U检验比较两组间NCC水平,采用线性回归分析评价标准曲线。
结果
铜离子浓度在1.562~300.000 μg/L范围内线性相关系数良好(r=0.999,),自建血清NCC检测方法的检出限为0.99 μg/L,定量限为3.29 μg/L,准确度(加标回收率)为87.67%~106.27%,批内及批间不精密度的变异系数(CV)为2.8%~7.3%,健康参考区间为34.31~71.79 μg/L;WD组血清NCC水平为102.39(74.38,144.04)μg/L,高于健康组(51.45±10.34)μg/L(Z=‒7.967,P<0.01)。
结论
本研究建立的血清NCC IP-ICP-MS联用检测方法分析性能符合要求,操作简便、灵敏度高、结果准确可靠,可用于临床检测。
基于群组轨迹模型的健康成人血小板计数动态变化轨迹研究凌阅微 蒙强 张益铭 张天聪 刘阔甫 陈思 袁新雯 王双 杨铮 江虹 等
中华检验医学杂志2025年 48卷 09期
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20250626-00375
目的
探讨四川地区健康成人血小板计数在2010—2021年的动态变化规律,为区域性血小板参考值的制定提供依据。
方法
本研究是一项回顾性队列研究。纳入2010年1月至2021年12月期间在四川大学华西医院年度体检的7 808名常住成都且连续完成血常规检查的健康成人。运用群组轨迹模型(GBTM)构建血小板计数动态变化轨迹模型,并采用单因素分析比较不同轨迹组基线人口学特征(性别、年龄)的差异。
结果
7 808名健康成人中,男性4 589名(58.8%)、女性3 219名(41.2%)。基于GBTM识别出4种血小板动态变化轨迹:逐步上升组[27.4%(2 139/7 808)]、先升后缓组[44.1%(3 445/7 808)]、先降后升组[5.4%(422/7 808)]和逐步下降组[23.1%(1 802/7 808)];平均增长率分别为3.3%、1.6%、0.7%、‒0.6%。不同轨迹组在性别和年龄分布上的差异有统计学意义。在性别分布上,4个轨迹组的性别比例差异有统计学意义(χ²=73.3,P<0.001);4个轨迹组的男性比例分别为59.6%(1 275/2 139)、62.8%(2 165/3 445)、48.1%(203/422)、52.5%(946/1 802)。在年龄分布上,4个轨迹组的基线年龄分别为45(36,55)岁、43(35,53)岁、50(40,60)岁、47(39,58)岁(H=121.0,P<0.001)。
结论
四川地区健康成人血小板计数呈现4种不同的纵向动态轨迹:逐步上升、先升后缓、先降后升和逐步下降。在性别和年龄分布上,血小板呈上升趋势的两组(逐步上升组与先升后缓组)男性比例偏高且年龄中位数偏低,而先降后升组和逐步下降组则男性比例较低且年龄中位数较高。因此,在制定血小板参考值及健康管理策略时,应充分考虑人群的性别结构、年龄特点及其动态变化的差异。