2022年 · 第42卷第02期

目的 以拥有不同抗菌药物耐药性的幽门螺杆菌(H.pylori)临床菌株为研究对象，基于全基因组测序探索H.pylori对克拉霉素和左氧氟沙星(LVX)耐药相关新基因。 方法 纳入2016年9月1日至2019年8月31日在香港大学深圳医院消化及肝脏科因上消化道相关症状就诊且13C尿素呼气试验阳性的1 749例患者，在行胃黏膜活体组织检查后进行胃黏膜组织H.pylori分离培养，成功保存H.pylori菌株90株。依据体外药敏试验结果，分别筛选克拉霉素单耐药(克拉霉素组)10株，LVX单耐药(LVX组)10株，克拉霉素和LVX双重耐药(双重耐药组)10株，克拉霉素、LVX、阿莫西林、呋喃唑酮、四环素、甲硝唑全敏感(全敏感组)10株，总计40株H.pylori菌株。通过全基因组测序，与综合抗性基因数据库(CARD)进行比对，分析单核苷酸变异(SNV)和插入缺失突变情况，筛选H.pylori对克拉霉素和LVX耐药相关基因并分析耐药相关新基因在4组间的表达差异。统计学方法采用独立样本t检验、单因素方差分析、最小显著差数法和卡方检验。 结果 克拉霉素组、LVX组、双重耐药组、全敏感组SNV位点数[(74 952.00±8 755.21)、(77 128.10±3 191.35)、(78 639.90±601.23)、(77 474.60±2 421.05)个]和插入缺失突变数[(2 582.20±265.45)、(2 653.60±108.37)、(2 667.10±43.82)、(2 641.10±80.25)个]比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。与CARD进行比对，共检出223个耐药相关基因，其中克拉霉素组克拉霉素单耐药相关基因19个，LVX组LVX单耐药相关基因24个，双重耐药组中有克拉霉素单耐药相关基因16个，LVX单耐药相关基因14个，双重耐药相关基因12个；全敏感组中有克拉霉素单耐药相关基因11个，LVX单耐药相关基因17个，双重耐药相关基因13个。克拉霉素单耐药相关基因中，红霉素酯酶基因(ere)B在克拉霉素组、LVX组、双重耐药组、全敏感组的检出率(0/10、0/10、3/10、0/10)比较差异有统计学意义(χ2＝5.79，P＝0.049)；红霉素核糖体甲基化酶基因(erm)家族在克拉霉素组和双重耐药组中的检出率高于LVX组和全敏感组[45.0%(9/20)比10.0%(2/20)]，差异有统计学意义(χ2＝6.14，P＝0.013)，游离甲硫氨酸-(R)-亚砜还原酶基因(msrC)在克拉霉素组、LVX组、双重耐药组、全敏感组检出率(10/10、7/10、6/10、4/10)比较差异有统计学意义(χ2＝8.97，P＝0.030)。LVX单耐药相关基因中，喹诺酮抗性五肽重复蛋白基因(qnr)家族在LVX组和双重耐药组的检出率高于克拉霉素组和全敏感组[60.0%(12/20)比25.0%(5/20)]，差异有统计学意义(χ2＝5.01，P＝0.025)；qnrB4在克拉霉素组、LVX组、双重耐药组、全敏感组检出率(1/10、3/10、7/10、1/10)比较差异有统计学意义(χ2＝10.17，P＝0.010)。4组中克拉霉素单耐药相关外排转运的基因个数少于LVX单耐药和双重耐药相关基因个数(11个比29个，11个比23个)，差异有统计学意义(χ2＝11.87、5.80，P＝0.001、0.016)。LVX相关外排转运基因在克拉霉素、LVX组、双重耐药组、全敏感组检出个数(28、40、24、27个)比较差异有统计学意义(χ2＝10.26，P＝0.016)。 结论 erm家族和msrC可能是介导H.pylori对克拉霉素耐药的重要基因，qnr家族与介导H.pylori对LVX耐药相关。外排转运基因可能在药物外排过程中有协同作用，其更倾向介导H.pylori对LVX耐药。

目的 探究血清吡咯蛋白加合物(PPA)对吡咯生物碱相关肝窦阻塞综合征(PA-HSOS)的严重度评估和对抗凝疗效的预测价值。 方法 收集南京大学医学院附属鼓楼医院2018年4月至2019年12月收治的48例PA-HSOS确诊患者资料，包括PPA浓度、门静脉流速、腹水分级、PA-HSOS严重度分级(参考欧洲血液和骨髓移植协作组成人可疑肝窦阻塞综合征新严重度分级标准并进行调整)和抗凝结局。以急性起病(食用含吡咯生物碱植物1个月内出现症状)患者为研究对象，经logistic回归分别拟合PPA联合门静脉流速、腹水分级的PA-HSOS严重度评估模型，计算2种联合模型的logit值，公式分别为logit1＝0.034×PPA(nmol/L)+0.055×门静脉流速(cm/s)-3.287，logit2＝0.039×PPA(nmol/L)-2.712×2级腹水(有＝1，无＝0)-0.388×3级腹水(有＝1，无＝0)-0.899。以在南京大学医学院附属鼓楼医院行初次抗凝治疗的患者为研究对象，经logistic回归拟合PPA联合血清肌酐和肝静脉压力梯度(HVPG)的抗凝疗效预测模型，计算logit值，公式为logit3＝0.013×PPA(nmol/L)+0.064×血清肌酐(mol/L)+0.542×HVPG(mmHg，1 mmHg＝0.133 kPa)-16.005。评价PPA对PA-HSOS严重度评估效能和对抗凝疗效的预测价值。统计学方法采用受试者操作特征曲线分析。 结果 48例患者的血清PPA水平为10.81 nmol/L(3.91 nmol/L，32.04 nmol/L)，其中PA-HSOS轻度患者33例(68.8%)，中度患者3例(6.2%)，重度患者0例，极重度患者12例(25.0%)。23例在南京大学医学院附属鼓楼医院行初次抗凝治疗且有完整数据的患者中，8例应答且存活，15例无应答(5例死亡，1例继续行抗凝治疗后缓解，9例转行抗凝-经颈静脉肝内门体静脉分流术治疗后均存活)；1例最初未行抗凝治疗的患者，最终因病情进展行抗凝-经颈静脉肝内门体静脉分流术治疗后存活。PPA评估急性起病患者PA-HSOS严重度的曲线下面积(AUC)为0.75，95%置信区间(CI) 0.52~0.98(P＝0.047)；当PPA≥45.519 nmol/L，评估重度以上PA-HSOS的特异度为100.0%，灵敏度为57.1%。PPA与门静脉流速联合评估PA-HSOS严重度的AUC为0.77，95%CI 0.55~1.00(P＝0.032)；当联合模型的logit值≥0.180时，评估重度及以上PA-HSOS的特异度为71.4%，灵敏度为81.8%。PPA联合腹水分级(1或2级与3级)评估PA-HSOS严重度的AUC为0.85，95%CI 0.63~1.00(P＝0.005)；当联合模型的logit值≥0.347时，评估重度及以上PA-HSOS的特异度为85.7%，灵敏度为92.0%。PPA与血清肌酐和HVPG联合模型预测抗凝疗效的AUC为0.85，95%CI 0.69~1.00(P＝0.009)；当logit值≥0.393时，预测抗凝效果的特异度为62.5%，灵敏度为91.7%。 结论 PPA可用于评估急性起病的PA-HSOS患者的严重度，结合腹水分级可显著提高其效能；PPA结合血清肌酐、HVPG能较好地预测抗凝疗效。

目的 探索巨噬细胞在非酒精性脂肪性肝炎(NASH)中的作用、机制和治疗价值。 方法 通过给予8周龄雄性Alms突变(foz/foz)小鼠高脂饮食6、8和10周，给予8周龄雄性C57BL/6小鼠蛋氨酸胆碱缺乏(MCD)饮食7 d、3周和4周分别构建NASH小鼠模型，对照组小鼠分别给予普通饮食和MCD对照饮食。采用荧光定量聚合酶链反应方法检测NASH模型小鼠和对照组小鼠肝脏的F4/80 mRNA水平，采用免疫荧光染色观察对照组小鼠和NASH模型小鼠肝脏中的巨噬细胞。lysM-Cre/DTR转基因小鼠予MCD饮食5周后，分为转基因实验组(给予白喉毒素清除巨噬细胞)和转基因对照组(给予磷酸盐缓冲液注射)。检测转基因实验组和转基因对照组小鼠肝脏中的甘油三酯水平和脂质过氧化物水平，并对小鼠的肝脏组织进行炎症评分。通过细胞因子分析实验和蛋白质印迹法分析巨噬细胞调节NASH中炎症的作用机制。通过AML-12肝细胞和RAW264.7巨噬细胞条件培养基与细胞共培养观察肝细胞和巨噬细胞的相互作用。通过氯膦酸脂质体清除野生型和NASH模型小鼠中的巨噬细胞，证实其在NASH预防中的价值。统计学方法采用独立样本t检验。 结果 NASH模型foz/foz小鼠高脂饮食饲养6、8和10周时肝脏中的F4/80 mRNA水平均高于对照组小鼠(1.49±0.19、1.70±0.15、1.93±0.04比1.05±0.22)，差异均有统计学意义(t＝3.06、4.92、7.92，均P<0.05)；NASH模型小鼠MCD饮食饲养7 d和3周时肝脏中的F4/80 mRNA水平均高于对照组小鼠(2.70±0.99和3.08±1.71比1.00±0.83)，差异均有统计学意义(t＝3.43、3.54，均P<0.01)；免疫荧光染色结果显示，与对照组比较，NASH模型小鼠MCD饲养4周时肝脏中F4/80+诱导型一氧化氮合酶(iNOS)+的M1型巨噬细胞增多，F4/80+CD206+的M2型巨噬细胞明显减少。巨噬细胞清除后转基因实验组小鼠的炎症评分、肝脏甘油三酯和脂质过氧化物水平均低于转基因对照组[(0.69±0.32)分比(1.95±0.74)分、(43.97±13.24) g/mg比(63.09±14.85) g/mg、(24.84±6.21) nmol/mg比(37.91±8.91) nmol/mg]，差异均有统计学意义(t＝3.14、2.72、2.41，均P<0.05)。细胞因子分析实验结果显示，巨噬细胞清除可显著降低血液中白细胞介素(IL)-12和巨噬细胞炎症蛋白-1α的蛋白质水平(差异倍数分别为-3.98、-2.74，均P<0.05)。转基因实验组小鼠细胞核中CCAAT/增强子结合蛋白β蛋白质减少。体外研究发现RAW264.7巨噬细胞条件培养基可促进AML-12肝细胞中脂肪聚集；MCD培养基处理的AML-12肝细胞条件培养基可促进RAW264.7巨噬细胞向M1型极化。经氯膦酸脂质体处理后的野生型小鼠肝脏中的甘油三酯和脂质过氧化物的蛋白质表达水平均低于MCD诱导的NASH模型小鼠[(45.33±14.59) g/mg比(63.10±16.02) g/mg、(2.11±0.48) nmol/mg比(2.73±0.17) nmol/mg]，差异均有统计学意义(t＝2.84、2.73，均P<0.05)。蛋白质印迹法结果显示，经氯膦酸脂质体处理后的NASH模型小鼠肝脏中的磷酸化蛋白激酶R样内质网激酶、肌醇需求酶-1α、蛋白质二硫键异构酶、葡萄糖调节蛋白78、磷酸化真核起始因子2α的蛋白质相对表达量均低于未经氯膦酸脂质体处理的NASH模型小鼠(1.84±0.36比3.05±0.83、1.50±0.84比6.65±1.47、0.87±0.12比2.28±0.52、1.68±0.43比4.76±1.13、1.42±0.19比2.75±0.79)，差异均有统计学意义(t＝2.32、5.28、4.56、4.41、2.85，均P<0.05)。 结论 NASH中巨噬细胞发生M1型极化，并与肝细胞相互作用促进炎症因子分泌、脂肪合成因子上调、氧化应激和内质网应激，引起NASH进展。巨噬细胞清除剂氯膦酸脂质体是预防NASH潜在的新途径。

目的 评估本课题组发明的新型双盘状消化道瘘封堵器(以下简称封堵器)治疗难治性气管食管瘘(TEF)的安全性和临床疗效。 方法 收集2020年7月1日至2021年1月31日在南京医科大学第一附属医院消化内科接受封堵器治疗的10例难治性TEF患者。记录患者的临床资料如性别、年龄、体重指数、瘘口直径等，分析封堵器的手术成功率、术中和术后并发症、封堵时间、术后住院时间、瘘口封堵效果和术后恢复情况，比较患者术后1、3个月与术前的卡氏功能状态评分和体重指数以评估疗效。统计学方法采用配对t检验。 结果 10例TEF患者中，男7例，女3例，中位年龄(范围)为64.5岁(49.0~78.0岁)，体重指数为(18.0±2.5) kg/m2，瘘口直径为(1.2±0.6) cm。所有患者均成功进行封堵器置入术，封堵时间(范围)为(17.6±7.8) min(7.0~30.0 min)，术中有2例少量出血，术后无患者出血，术后住院时间(范围)为(5.9±4.0) d(1.0~12.0 d)。10例TEF患者中，5例瘘口完全封堵，4例部分封堵，1例无效封堵，封堵有效率为9/10。术后1个月随访显示，9例患者进食呛咳症状明显好转，1例患者经更换不同尺寸封堵器(腰部直径为12 mm更换为15 mm)后呛咳症状明显好转。术后3个月随访显示，8例患者封堵器在正确位置；1例患者出现封堵器移位，取出封堵器并予肠内营养支持治疗；1例患者因食管癌复发死亡。10例TEF患者术后3个月的卡氏功能状态评分和1、3个月的体重指数均高于术前[(70.0±34.0)分比(46.0±10.7)分，(19.32±2.59)、(19.73±2.92) kg/m2比(18.03±2.50) kg/m2]，差异均有统计学意义(t＝-3.09、-2.37、-2.82，均P<0.05)。 结论 临床应用封堵器治疗难治性TEF是安全、有效的。

目的 建立中国人群迈达水灌注高分辨率食管测压(HREM)系统(GAP-36A)静息期、水吞咽、黏胶吞咽和固体吞咽的正常值标准。 方法 2019年9月1日至2020年6月30日，在华中科技大学同济医学院附属协和医院、大连医科大学附属第一医院、河北医科大学第二医院、海军军医大学第二附属医院、中山大学附属第一医院、中国科学技术大学附属第一医院、中国医科大学航空总医院、南京大学医学院附属鼓楼医院、宜昌市第一人民医院9家医院招募91名健康志愿者，应用迈达水灌注HREM系统(GAP-36A)于静息期、水吞咽、黏胶吞咽和固体吞咽时进行食管测压。食管测压参数包括食管上括约肌(UES)和食管下括约肌(LES)上缘、下缘位置和长度，呼吸反转点(PIP)的位置，UES和LES静息压，以及吞咽相关参数如远端收缩积分(DCI)、4 s完整松弛压(IRP)、远端收缩延迟时间(DL)和UES残余压。统计学方法采用单因素方差分析、事后多重比较t检验和非参数秩和检验。 结果 最终纳入87名健康志愿者，男40名，女47名，年龄(范围)为(38.5±14.2)岁(19~65岁)。LES上缘、下缘位置分别为(42.7±2.8)、(45.6±2.8) cm，LES长度为(2.9±0.4) cm，PIP位置为(43.3±2.8) cm，UES上缘、下缘位置分别为(18.1±3.0)、(22.6±2.0) cm，UES长度为(4.8±1.0) cm。LES和UES静息压分别为(17.4±10.7)、(84.1±61.1) mmHg(1 mmHg＝0.133 kPa)。固体吞咽的DCI高于水吞咽和黏胶吞咽[(2 512.4±1 448.0) mmHg·s·cm比(2 183.2±1 441.2)、(2 150.8±1 244.8) mmHg·s·cm]，差异均有统计学意义(t＝-4.30、-3.74，均P<0.001)。黏胶吞咽和固体吞咽的4 s IRP均低于水吞咽[(4.6±4.1)、(4.9±3.9) mmHg比(5.4±3.9) mmHg]，差异均有统计学意义(t＝3.38、2.09，P＝0.001、0.037)。水吞咽的DL短于黏胶吞咽和固体吞咽[(8.5±1.8) s比(9.8±2.2)、(10.6±2.8) s]，黏胶吞咽的DL短于固体吞咽，差异均有统计学意义(t＝-10.21、-13.91、-4.68，均P<0.001)。水吞咽的UES残余压高于黏胶吞咽和固体吞咽[9.5 mmHg(6.5 mmHg，12.3 mmHg)比8.0 mmHg(4.5 mmHg，11.7 mmHg)、5.5 mmHg(2.0 mmHg，9.3 mmHg)]，黏胶吞咽的UES残余压高于固体吞咽，差异均有统计学意义(t＝3.48、10.30、6.35，均P<0.001)。 结论 中国人群迈达水灌注HREM(GAP-36A)系统在静息期、水吞咽、黏胶吞咽和固体吞咽的正常值标准可为国内接受迈达水灌注HREM食管测压检查患者的临床诊疗提供依据。

目的 回顾性研究英夫利昔单抗(IFX)治疗过程中补充维生素D3对克罗恩病患者临床缓解的影响。 方法 通过检索温州医科大学附属第二医院临床资料数据库，筛选2014年1月至2020年1月于消化内科接受IFX治疗的73例初发型中重度克罗恩病患者，其中血清25羟维生素D[25(OH)D]水平<50 nmol/L即维生素D缺乏者50例。采用Harvey-Bradshaw指数(HBI)评估克罗恩病疾病活动度。所有患者均接受IFX(5 mg/kg)治疗至少54周，根据IFX治疗时是否补充维生素D3(125 U/d)分为补充组(37例)、未补充组(36例)。比较补充组患者IFX治疗第54周与IFX治疗前的25(OH)D水平，以及IFX治疗第54周时补充组与未补充组患者的临床缓解率和HBI下降幅度，分析克罗恩病患者临床缓解率的影响因素。统计学方法采用配对t检验、独立样本t检验、卡方检验、多元logistic回归分析。 结果 补充组患者IFX治疗第54周时血清25(OH)D水平高于IFX治疗前[(50.83±15.45) nmol/L比(37.68±16.75) nmol/L]，差异有统计学意义(t＝-4.55，P<0.001)；补充组患者IFX治疗第54周时，患者的临床缓解率高于未补充组[83.8%(31/37)比61.1%(22/36)]，HBI下降幅度大于未补充组[(7.41±3.00)分比(6.28±2.75)分]，差异均有统计学意义(χ2＝4.71，t＝2.41；P＝0.030、0.023)。多元logistic回归分析结果显示，补充维生素D3是克罗恩病患者(73例)和维生素D缺乏的克罗恩病患者(50例)临床缓解的独立影响因素(b＝-1.67、-1.92，P＝0.015、0.019)。 结论 在IFX治疗的克罗恩病患者中，补充维生素D3可显著提高临床缓解率，尤其是维生素D缺乏的克罗恩病患者。

为了解武汉地区综合性医院医务人员幽门螺杆菌(H.pylori)的现症感染情况和危险因素，本研究于2019年3月至12月从武汉市5家综合性医院消化内科和心血管内科随机抽取医务人员行13C尿素呼气试验并进行问卷调查。结果显示武汉地区综合性医院医务人员的H.pylori现症感染率为28.5%(88/309)，且医务人员H.pylori感染与工种、年龄、性别、工作年限、个人史无关。本研究表明武汉地区综合性医院医务人员的H.pylori现症感染率较低，高危因素较少。

通过分析透明质酸合酶1(HAS1)在胃癌组织中的表达及其与胃癌患者术后预后的关系，发现HAS1在胃癌组织中的表达水平高于正常胃黏膜组织。胃癌组织中HAS1表达水平与TNM分期有关，Kaplan-Meier生存分析显示HAS1高表达的患者预后更差。单因素和多因素分析显示，HAS1表达、TNM分期是影响胃癌患者预后的独立危险因素。HAS1关联蛋白质分析发现，HAS1与透明质酸酶1、透明质酸酶2、CD44、透明质酸酶4、精子黏附分子1、肌球蛋白重链10、细胞迁移诱导透明质酸酶1、胶质透明质酸结合蛋白、尿苷二磷酸-葡萄糖脱氢酶、KY蛋白存在相互作用，提示这些蛋白质可能在胃癌的进展中存在内在联系。在胃癌发生、发展中，HAS1可以作为胃癌患者预后的分子标志物和治疗的潜在靶点。

胰腺血管活性肠肽瘤(VIPoma)为罕见的胰腺功能性神经内分泌肿瘤，临床表现为大量水样泻、严重低钾血症、无胃酸或低胃酸。该患者为胰腺VIPoma伴全身多发转移，经外科手术切除、靶向药物等治疗后仍出现顽固性、周期性大量水样泻。经遵义医科大学附属医院神经内分泌肿瘤多学科诊疗团队诊治后，制订个体化诊疗方案，使用短效和长效生长抑素类似物(SSA)联同肝动脉栓塞术肝内减瘤控制功能性肿瘤激素分泌、抑制肿瘤生长的综合治疗后，患者显著获益，现报告其多学科诊治经过以供临床参考。

艰难梭菌感染是抗生素相关性腹泻和院内感染相关性腹泻的主要病原菌，其典型内镜下表现是伪膜性病变，但部分艰难梭菌感染患者内镜下表现不典型，可呈现非特异性肠炎表现。本文报告1例肝硬化食管曲张静脉套扎术后艰难梭菌感染病例，并对其可能发病原因和内镜下非伪膜性表现进行分析。

肠道菌群-肠-脑轴在神经、精神发育和胃肠道疾病的生物和生理学基础研究领域中越来越受关注。肠道菌群和大脑通过自主神经系统、免疫系统、代谢产物(如短链脂肪酸、胆汁酸和支链氨基酸)等多种途径相互交流。影响宿主菌群组成的因素众多，包括遗传、分娩方式、感染、抗生素的使用、营养状况、环境压力源、生活习惯和昼夜节律等。焦虑症、抑郁症、肠易激综合征、炎症性肠病、肥胖、孤独症等多种疾病涉及肠道菌群-肠-脑轴改变，动物模型、粪菌移植、脑成像和菌群基因组测定等研究方式的发展对了解肠道菌群-肠-脑轴起到了至关重要的作用。

含铋剂的四联治疗是目前国内外共识推荐根除幽门螺杆菌(H.pylori)感染的一线治疗方案，但其仍有用药品种多、不良反应率高、治疗成本高等局限性，因此，二联治疗又重新引起关注。标准剂量阿莫西林和质子泵抑制剂(PPI)二联治疗在早期的探索中未能取得令人满意的结果，但大剂量二联治疗的多项临床研究均取得了令人满意的根除率，其不良反应较含铋剂四联治疗少，患者依从性较高，且治疗成本更低。本文综述大剂量阿莫西林和PPI二联治疗方案对H.pylori的根除效果及其作用机制研究进展，并介绍含新型抑酸剂的二联治疗方案的应用现状。

溃疡性结肠炎是一种慢性非特异性肠道炎症性疾病，可能与遗传、环境、微生物和免疫等多种因素密切相关。随着生物技术的进步和多种新型生物制剂的问世，溃疡性结肠炎的治疗效果正在逐年改善，其治疗目标已经从临床缓解逐渐演变为内镜缓解甚至组织学缓解。本文主要介绍溃疡性结肠炎治疗目标的现状和挑战。